生化习题及答案17612

【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流精品文档生化习题及答案17612第一章：蛋白质的结构与功能一、名词解释1.构象2．构型3．氨基酸的等电点4．二面角5．肽单位6．蛋白质一级结构7．蛋白质二级结构8．蛋白质三级结构9．蛋白质四级结构10．超二级结构11．结构域12．蛋白质的等电点13．盐溶14．蛋白质的变性作用15．蛋白质的复性16．盐析17．蛋白质的变构效应18．沉降系数19．电泳20.偶极离子二、填空题1.肽链的N末端可以用（）法、（）法、（）法和（）法测定，而（）法和（）法则是测定C末端氨基酸最常用的方法。2.已知蛋白质的超二级结构的基本组成方式有（）、（）和（）。3.确定蛋白质中二硫键的位置，一般先采用（），然后用（）技术分离水解后的混合肽段。4.因为（），（）和（）等三种氨基酸残基的侧链基团在紫外区具有光吸收能力，所以在（）nm波长的紫外光吸收常被用来定性或定量检测蛋白质5.带电氨基酸有（）氨基酸与（）氨基酸两类，其中前者包括（）、（）后者包括（）、（）、（）。6.在蛋白质元素组成中，氮的含量相当恒定，平均为（）%。7.当氨基酸溶液的pH=pI时，氨基酸以（）离子形成存在；当pH＞pI时，氨基酸以（）离子形式存在。8.氨基酸具有两性解离特性，因此它既可被（）滴定，又可被（）滴定。丙氨酸的PKα-COOH=2.34，PKα-NH3+=9.69，其pI=（），在pH=7时，在电场中向（）极方向移动。9．有两种蛋白质,一种经末端分析得知含两个N-末端，用SDS电泳显示两条带，说明此蛋白质含有（）个（）亚基；另一蛋白质用巯基乙醇处理后，SDS电泳显示一条带，则该蛋白质的结构特点是（）。10.我国科学家于1965年首次用（）方法人工合成了（）蛋白质。11.蛋白质中存在（）种氨基酸，除了（）氨基酸外，其余氨基酸的α-碳原子上都有一个自由的（）基及一个自由的（）基。12.α-螺旋中相邻螺圈之间形成链内氢键，氢键取向几乎与（）平行。氢键是由每个氨基酸的（）与前面隔三个氨基酸的（）形成的，它允许所有的（）都能参与氢键的形成。13．能形成二硫键的氨基酸是（），分子量最小的氨基酸是（）。14．稳定蛋白质胶体状态的因素是蛋白质分子上的（）及（）。15．蛋白质根据分子形状可分为（）和（）两种。16.用胰蛋白酶水解蛋白或多肽时，由（）和（）的羧基所形成的肽键最易被水解。17．丝氨酸、苏氨酸及酪氨酸的极性是由侧链基团的（）基提供的，天冬酰胺和氨酰胺的极性是由其（）引起的，而半胱氨酸的极性则是因为含（）的缘故。18．已知下列肽段：（1）-Ala-Phe-Tyr-Ala-Arg-Ser-Glu-（2）-Lys-Glu-Arg-Gln-His-Ala-Ala-（3）-Gln-Cys-Leu-Ala-Ser-Cys-Ala-（4）-Gly-Leu-Ser-Pro-Ala-Phe-Val-其中在pH=7条件下向负极移动快的多肽是（）；在280nm有最大吸收的是（）；可能形成二硫键桥的是（）；α-螺旋中断的是（）。19.Pauling等人提出的蛋白质α-螺旋模型中，每圈螺旋包含（）个氨基酸残基，高度为（）。每个氨基酸残基沿轴上升（）并旋转100°。20．血红蛋白与氧的结合过程呈现（）效应，这是通过血红蛋白的（）作用来实现的。21.天然蛋白质分子中的α-螺旋都属于（）手螺旋。22.维持蛋白质一级结构的化学键有（）和（）。维持二级结构主要靠（），维持三级结构的作用力除了以上几种外还需（）、（）和（）。23.氨基酸顺序自动分析仪是根据（）反应原理设计的，多肽链的氨基末端与（）试剂反应生成（）然后在无水的酸中经环化裂解成（）。24.蛋白质主链构象的结构单元包括（）、（）、（）、（）。25.维系蛋白质四级结构的最主要作用力是（）。26.常用的测定蛋白质分子量的方法有（）、（）和（）等。27.GSH表示（），它由（）、（）和（）通过（）键连接而成，活性基团是（）。28.（）花费10年时间，利用（）反应首先弄清、（）的一级结构。它由（）条多肽链组成，各条多肽链分别包括（）和（）个氨基酸残基，链内和链间有（）个（）键。29.α-螺旋和β-折叠结构属于蛋白质的（）级结构，稳定其结构的作用力是（）。若某肽链的分子量为22000，（氨基酸的平均分子量为110），则全为α-螺旋时肽链的长度为（）nm，全为β-折叠时肽链的长度（不考虑β-折叠的双链）为（）nm。30.盐析法是分离提纯蛋白质过程中常用的方法之一，常用的主要盐析试剂是（）、（）和（）。三、选择题1．

胰蛋白酶的作用点是:（）A．精氨酰-XB．苯丙氨酰-XC.天冬氨酰-XD.X-精氨酸（X代表氨基酸残基）2.

胶原蛋白组成中出现的不寻常氨基酸是:（）A.乙酰赖氨酸B.羟基赖氨酸C.甲基赖氨酸D.D赖氨酸3.

破坏α螺旋结构的氨基酸残基之一是:（）A.亮氨酸B.丙氨酸C.脯氨酸D.谷氨酸4．茚三酮与脯氨酸反应时，在滤纸层析谱上呈现:（）色斑点A.蓝紫B.红C.黄D.绿5．用Sepharose4B柱层析来分离蛋白质，这是一种:（）A.离子交换柱层析B.吸附柱层析C.分子筛（凝胶过滤）柱层析D.配柱层析6.有个天然肽的氨基酸顺序为：Pro-Ala-Phe-Arg-Ser，你要证实N端第二位Ala的存在，最好的试剂选择是:（）A.FDNBB.PITCC.无水肼D.羧肽酶7.双缩脲反应主要用来测定:（）A.DNAB.RNAC.胍基D.肽8．在天然蛋白质组成中常见的一个氨基酸，它的侧链在pH7.2和pH13都带电荷，这个氨基酸是:（）A.谷氨酸B.组氨酸C.酪氨酸D.精氨酸9．牛胰岛素由A、B两条链组成，其中B链是:（）A.30肽B.31肽C.20肽D.21肽10．胶原蛋白中最多的氨基酸残基是:（）A.脯氨酸B.甘氨酸C.丙氨酸D.组氨酸11．在混合氨基酸中，酪氨酸可借下列哪一种试剂来检定：（）A.水合茚三酮反应B.桑格反应C.米伦反应D.阪口反应12.与茚三酮反应不呈兰紫色的氨基酸是：（）A.PheB.ProC.GluD.Met13．下列有关蛋白质叙述哪项是正确的：（）A.通常蛋白质的溶解度在等电点时最大B．大多数蛋白质在饱和硫酸铵中溶解度增大C．蛋白质分子的净电荷为零时的pH是它的等电点D．以上各项全不正确14．盐析法沉淀蛋白质的原理是：（）A.降低蛋白质溶液的介电常数B．中和电荷，破坏水膜C．与蛋白质结合成不溶性蛋白D．调节蛋白质溶液pH到等电点15．凝胶过滤法分离蛋白质时，从层析柱上先被洗脱下来的蛋白质是：（）A．分子量大的B．分子量小的C.带电荷多的D.带电荷少的16．SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳技术最常用的指示剂为：（）A.亚甲基兰B.石蕊C.碘乙醇D.溴酚兰17．蛋白质的基本组成单位是：（）A.肽键平面B核苷酸C肽D.氨基酸18．含有两个羧基的氨基酸是：（）A.LysB.AsnC.GlnD.Glu19．下列哪种氨基酸为环状亚氨基酸：（）A.GlyB.ProC.TrpD.Try20．下列氨基酸中，哪种是天然氨基酸：（）Ａ.Orn（鸟氨酸）Ｂ.Cit（瓜氨酸）Ｃ.Pro(脯氨酸)Ｄ.HyPro（羟脯氨酸）21．氨基酸在等电点时，应具有的特点是：（）Ａ.不具正电荷Ｂ.不具负电荷Ｃ.a+bＤ.在电场中不泳动22．氨基酸不具有的化学反应是：（）Ａ.双缩脲反应Ｂ.茚三酮反应Ｃ.DNFB反应Ｄ.PITC反应23．蛋白质的一级结构指的是：（）Ａ.蛋白质的α-螺旋结构Ｂ.蛋白质分子的无规则卷曲Ｃ.蛋白质分子内氨基酸以肽键相连接Ｄ.蛋白质分子内氨基酸的排列顺序24．维持蛋白质二级结构的主要化学键是：（）Ａ.氢键Ｂ.二硫键Ｃ.疏水键Ｄ.离子键25．在一个肽平面中含有的原子数为：（）Ａ.3Ｂ.4Ｃ.5Ｄ.626．关于蛋白质中β-折叠的叙述，下列哪项是正确的：（）Ａ.β-折叠中氢键与肽链的长轴平行Ｂ.氢键只在不同肽链之间形成Ｃ.β-折叠中多肽链几乎完全伸展Ｄ.β-折叠又称β-转角27．可使二硫键氧化断裂的试剂是：（）Ａ.尿素Ｂ.巯基乙醇Ｃ.溴化氰Ｄ.过甲酸28．典型的α-螺旋是：（）Ａ.2.610Ｂ.3.613Ｃ.4.015Ｄ.4.41629．下列哪一种说法对蛋白质结构的描述是错误的：（）Ａ.都有一级结构Ｂ.都有二级结构Ｃ.都有三级结构Ｄ.都有四级结构30．具有四级结构的蛋白质特征是：（）Ａ.分子中必定含有辅基Ｂ.含有两条或两条以上的多肽链Ｃ.每条多肽链都具有独立的生物学活性Ｄ.依赖肽键维系蛋白质分子的稳定31．关于蛋白质亚基的下列描述，哪条是正确的：（）Ａ.一条多肽链卷曲成螺旋结构Ｂ.两条以上多肽链卷曲成二级结构Ｃ.两条以上多肽链与辅基结合成蛋白质Ｄ.每个亚基都有各自的三级结构32.的α亚基与O2结合后产生变构效应，从而：（）Ａ.促进其它亚基与CO2结合Ｂ.促进其它亚基与O2结合Ｃ.促进α亚基与O2结合，抑制β亚基与O2结合Ｄ.抑制α亚基与O2结合，促进β亚基与O2结合33．血红蛋白的氧合曲线形状为：（）Ａ.双曲线Ｂ.抛物线Ｃ.S-形曲线Ｄ.直线34．下列哪条对蛋白质变性的描述是正确的：（）Ａ.蛋白质变性后溶解度增加Ｂ.蛋白质变性后不易被蛋白酶水解Ｃ.蛋白质变性后理化性质不变Ｄ.蛋白质变性后丧失原有的生物活性35．加入哪种试剂不会导致蛋白质的变性：（）Ａ.尿素Ｂ.盐酸胍Ｃ.SDSＤ.硫酸铵36．下列哪一项因素不影响蛋白质α-螺旋的形成：（）Ａ.碱性氨基酸相近排列Ｂ.酸性氨基酸相近排列Ｃ.脯氨酸的存在Ｄ.丙氨酸的存在37．在凝胶过滤（分离范围是5000～400000）中，下列哪种蛋白质最先被洗脱下来：（）Ａ.细胞色素C（13370）Ｂ.肌球蛋白（400000）Ｃ.过氧化氢酶（247500）Ｄ.血清清蛋白（68500）四、是非题1.分子病都是遗传病。2.一个蛋白质样品，在某一条件下用电泳检查，显示一条带，因此说明，该样品是纯的。3.蛋白质的SDS聚丙烯酰氨凝胶电泳和圆盘电泳是两种完全不同的技术。4.等电点不是蛋白质的特征参数。5.在蛋白质和多肽分子中，连接氨基酸残基的共价键除肽键外，还有就是二硫键。6.蛋白质在小于等电点的pH溶液中，向阳极移动，而在大于等电点的pH溶液中，将向阴极移动。7.电泳和等电聚焦都是根据蛋白质的电荷不同，即酸碱性质不同的两种分离蛋白质混合物的方法。8.天然存在的氨基酸就是天然氨基酸。9.用纸电泳法分离氨基酸主要是根据氨基酸的极性不同。10.在天然氨基酸中只限于α-NH2能与亚硝酸反应，定量放出氮气。11.由于静电作用，在等电点时氨基酸溶解度最小。12.氨基酸在水溶液中或在晶体状态时都以两性离子形式存在。13.两性离子氨基酸在溶液中，其正负离子的解离度与溶液pH无关。14.氨基酸的等电点可以由其分子上解离基团的解离常数来确定。15.溶液的pH可以影响氨基酸的pI值。16.天然蛋白质α-螺旋为右手螺旋。17.多肽链能否形成α-螺旋及螺旋是否稳定与其氨基酸组成和排列顺序直接有关。18.具有四级结构的蛋白质，当它的每个亚基单独存在时仍能保持蛋白质原有的生物活性。19.渗透压法、超离心法、凝胶过滤法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法都是利用蛋白质的物理化学性质来测定蛋白质分子量的。20.蛋白质的变性是蛋白质分子立体结构被破坏，因此常涉及肽键的断裂。21.当某一蛋白质分子的酸性氨基酸残基数目等于其碱性氨基酸残基数目时，此蛋白质的等电点为7.0。22.一般说来，蛋白质在水溶液中，非极性氨基酸残基倾向于埋在分子的内部而不是表面。23.蛋白质中一个氨基酸残基的改变，必定引起蛋白质结构的显著变化。24.在每一种蛋白质多肽链中，氨基酸残基排列顺序都是一定的，而不是随机的。25.蛋白质变性后溶解度降低，主要是因为电荷被中和及水膜被去除所引起的。26.蛋白质变性后，其分子量变小。27.蛋白质的氨基酸顺序（一级结构）在很大程度上决定它的三维构象。28.蛋白质的亚基（或称亚单位）和肽链是同义词。29.氨基酸的等电点是算出来的，同样蛋白质的等电点也可以算出来。30.所有蛋白质都具有一级、二级、三级、四级结构。31.蛋白质构象是蛋白质分子中的原子绕单键旋转而产生的蛋白质分子中的各原子的空间排布。因此，构象并不是一种可以分离的单一立体结构形式。32.蛋白质中的稀有氨基酸在遗传上是特殊的，因为它们没有三联体密码，所有已知稀有氨基酸都是从其前体经化学修饰产生的。33.当氨基酸处于等电点状态时，由于静电引力的作用，氨基酸的溶解度最小，容易发生沉淀。34.一氨基一羧基氨基酸pI为中性，因为-COOH和-NH2解离度相同。35.蛋白质分子酰胺平面中除-C=O外，其余的单键都能自由旋转。36.用强酸强碱变性后的蛋白质不沉淀。五、问答题1.简述血红蛋白的结构?其结构与功能有什么关系？血红蛋白和氧的结合受那些因素的影响？2.有一个肽段，经酸水解测定，由四个氨基酸组成。用胰蛋白酶水解成为二个片段，其中一个片段在280纳米（nm）有强的光吸收，并且Pauly反应和坂口反应都是阳性。另一个片段用CNBr作用释放出一个氨基酸与茚三酮反应呈黄色，试写出这个肽的氨基酸组成及排列顺序。3.有人纯化了一个未知肽，其氨基酸组成为：Asp1，Ser1，Gly1，Ala1，Met1，Phe1和lys2，又做了一系列分析，结果如下：⑴FDNB与之反应再酸水解后得DNP-Ala⑵胰凝乳蛋白酶（CT）消化后，从产物中分出一个纯四肽，其组成为：Asp1，Gly1，Lys1，Met1，此四肽的FDNB反应降解产物为DNP-Gly⑶胰蛋白酶（T）消化八肽后又可得到组成分别为Lys1，Ala1，Ser1及Phe1，Lys1，Gly1的两个三肽及一个二肽。此二肽被CNBr处理后游离出自由天冬氨酸。请列出八肽全顺序并简示你推知的过程。4.某天然九肽其组成为：Gly2，Phe2，Tyr1，Met1，Asp1，Arg1和Pro1，经胰凝乳蛋白酶（CT）水解后可分得一个五肽和一个四肽，四肽的组成为：Phe1，Tyr1，Gly1和Pro1。此九肽的CNBr处理产物再经阳离子交换树脂层析并洗脱得一个组成为Arg1，Phe1和Gly1的三肽，此九肽如经胰蛋白酶（T）水解可得Phe，如用FDNB反应后再水解测得DNP-Tyr。请写出这九肽的全顺序解析过程。5.已知一个九肽的氨基酸顺序是：Ala-Pro-lys-Arg-Val-Tyr-Glu-Pro-Gly，在实验室只有氨基酸分析仪，而没有氨基酸顺序测定仪的情况下，如何使用（1）羧肽酶A或B；（2）氨肽酶；（3）2，4二硝基氟苯（FDNB）；（4）胰蛋白酶；（5）胰凝乳蛋白酶，来验证上述肽段的氨基酸顺序。6.比较肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线，并加以简单的说明。7.大肠杆菌含有2000种以上的蛋白质，为了分离它所表达的一个外源基因的产物并保持它的活性，常有很大困难。但为了某种目的，请根据下列要求写出具体的方法。⑴利用溶解度差别进行分离。⑵利用蛋白质分子大小进行分离。⑶根据不同电荷进行分离。⑷以制备有该产物的抗体进行分离。⑸产物的浓缩。⑹纯度的鉴定。8.蛋白质变性过程中，有那些现象出现？并举出三种能引起蛋白质变性的试剂。9.举一个例子来说明蛋白质三级结构决定于它的氨基酸顺序？10．用什么试剂可将胰岛素链间的二硫键打开与还原？如果要打开牛胰岛素核酸酶链内的二硫键，则在反应体系中还必须加入什么试剂？蛋白质变性时，为防止生成的-SH基重新被氧化，可加入什么试剂来保护？11.要测定蛋白质的二硫键位置，需用什么方法？请简述之。12.简述White和Anfinsen进行的牛胰核糖核酸酶（Rnase）变性和复性的经典实验。这个实验说明了什么问题？13.有一条多肽链-Ｐro-Ｐhe-Ｃys-Ｌys-Ｔyr-Ｖal-Ａla-Ｓer-Ｈis-，如用胰蛋白酶水解可得几条肽段？用胰凝乳蛋白酶水解呢？14.简述胰岛素原的激活过程？15.一个五肽，经完全水解后得到等摩尔数的Ala、Cys、Lys、Ser、Phe，用苯异硫氰酸（异硫氰酸苯酯）处理后得到PTH-Ser，用胰蛋白酶水解得一个N-末端为Cys的三肽和一个二肽，用胰凝乳蛋白酶水解此三肽得一个Ala及一个二肽，问：⑴胰蛋白酶水解后得到的三肽的氨基酸组成及顺序？⑵胰蛋白酶水解后得到的二肽的氨基酸组成？⑶此五肽的一级结构？16.试计算丙氨酸（PKα-COOH=2.34，PKα-NH3=9.69），谷氨酸（PKα-COOH=2.19，PKα-NH3=9.67，PKR-COOH=4.25）的等电点。17.把Ser、Ile、Glu、Ala的混合物在含有正丁醇、水和乙酸的溶剂系统中进行单向纸层析，请写出层析的快慢顺序。18.某蛋白质多肽链有一些区段为α-螺旋构象，另一些区段为β-折叠构象，该蛋白质分子量为240Kda，多肽外形总长为5.06×10-5cm，计算多肽链中α-螺旋构象占分子长度的百分之多少？19.球状蛋白质在pH7的水溶液中折叠成一定空间构象。这时通常非极性氨基酸残基侧链位于分子内部形成疏水核，极性氨基酸残基位于分子表面形成亲水面。问：⑴Val、Pro、Phe、Asp、Lys、Ile和His中哪些氨基酸侧链位于分子内部？哪些氨基酸侧链位于分子外部？⑵Ser、Thr、Asn和Gln虽然是极性氨基酸，但它们常常位于球状蛋白质的分子内部，为什么？20.多肽链片段是在疏水环境中还是在亲水环境中更利于α-螺旋的形成？为什么？第一章：蛋白质的结构与功能参考答案一、名词解释1.构象：在分子中由于共价单键的旋转所表现出的原子或基团的不同空间排布叫构象。构象的改变不涉及共价健的断裂和重新组成，也没有光学活性的变化，构象形式有无数种。2.构型：在立体异构体中原子或取代基团的空间排列关系叫构型。构型不同的分子在立体化学形式上能够区分。构型有两种，即D-型和L-型。构型的改变要有共价键的断裂和重新组成，从而导致光学活性的变化。3.氨基酸的等电点：当溶液在某一特定的pH时，氨基酸主要以两性离子形式存在，净电荷为零，在电场中不发生移动，此溶液的pH值称为该氨基酸的等电点。4.二面角：在多肽链里，Cα碳原子刚好位于互相连接的两个肽平面的交线上。Cα碳原子上的Cα-N和C-C都是单键。可以绕键轴旋转，其中以Cα—N旋转的角度称为Φ，而以C-C旋转的角度称为Ψ，这就是α-碳原子上的一对二面角。它决定了由α-碳原子连接的两个肽单位的相对位置。5.肽单位：肽链主链上的重复结构，如Cαα-CO-NH-Cαα，称为肽单位或肽单元，每个肽单位实际上就是一个肽平面。6.蛋白质一级结构：由氨基酸在多肽链中的数目、类型和顺序所描述的多肽链的基本结构。它排除了除氨基酸α-碳原子的的构型以外的原子空间排列，同样的也排除了二硫键，所以不等于分子的共价结构。7.蛋白质二级结构：指多肽链主链在一级结构的基础上进一步的盘旋或折叠，从而形成有规律的构象，如α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲等，这些结构又称为主链构象的结构单元。维系二级结构的力是氢键。二级结构不涉及氨基酸残基的侧链构象。8.蛋白质三级结构：指一条多肽链在二级结构（超二级结构及结构域）的基础上，进一步的盘绕、折叠，从而产生特定的空间结构或者说三级结构是指多肽链中所有原子的空间排布。维系三级结构的的力有疏水作用力、氢键、范德华力、盐键（静电作用力）。另外二硫键在某些蛋白质中也起非常重要的作用。9.蛋白质四级结构：有许多蛋白质是由两个或两个以上的具有独立三级结构的亚基通过一些非共价键结合成为多聚体，这些亚基的结构是可以相同的，也可以是不同的。四级结构指亚基的种类、数目及各个亚基在寡聚蛋白中的空间排布和亚基之间的相互作用。维系四级结构的力有疏水作用力、氢键、范德华力、盐键（静电作用力）。10.超二级结构：在球状蛋白质分子的一级结构顺序上，相邻的二级结构常常在三维折叠中相互靠近，彼此作用，在局部区域形成规则的二级结构的聚合体，就是超二级结构。常见的超二级结构有（αα）(βββ)(βαβ)等三种组合形式，另外还有（βαβαβ）和（βcβ）结构也可见到。在此基础上，多肽链可折叠成球状的三级结构。（βcβ）结构中的c代表无规卷曲。11.结构域：在较大的蛋白质分子里，多肽链的三维折叠常常形成两个或多个松散连接的近似球状的三维实体，这些实体就称为结构域，例如免疫球蛋白就含有12个结构域，重链上有四个结构域，氢链上有两个结构域。结构域是大球蛋白分子三级结构的折叠单位。12.蛋白质的等电点：当溶液在某个pH时，蛋白质分子所带正电荷数与负电荷数恰好相等，即净电荷为零，在直流电场中，既不向阳极移动，也不向阴极移动，此时溶液的pH就是该蛋白质的等电点。13.盐溶：在蛋白质水溶液中，加入少量的中性盐，如硫酸铵等，会增加蛋白质分子表面的电荷，增强蛋白质分子与水分子的作用，从而使蛋白质在水溶液中的溶解度增大，这种现象称为盐溶。14.蛋白质的变性作用:天然蛋白质分子受到某些物理、化学因素，如热、声、光、压、有机溶剂、酸、碱、脲、胍等的影响，生物活性丧失，溶解度下降，物理化学常数发生变化。这种过程称为蛋白质的变性作用，蛋白质变性作用的实质，就是蛋白质分子中次级键的破坏，而引起的天然构象被破坏，使有序的结构变成无序的分子形式。蛋白质的变性作用只是三维构象的改变，而不涉及一级结构的改变。15.蛋白质的复性:变性蛋白质在一定的条件下可以重建其天然构象，恢复其生物活性，这种现象称为蛋白质的复性。16.盐析:高浓度的中性盐类，如硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等，可以脱去蛋白质分子的水膜，同时，中和蛋白质分子的电荷，从而使蛋白质从溶液中沉淀下来，这种现象称为盐析。17.蛋白质的变构效应:在寡聚蛋白分子中，一个亚基，由于与配体的结合，而发生的构象变化，引起相邻其它亚基与配体结合的能力亦发生改变。这种效应称为蛋白质的变构效应。18.沉降系数:一种蛋白质分子在单位离心力场里的沉降速度为恒定值，被称为沉降常数或沉降系数，常用S表示。19.电泳:在直流电场中，带正电荷的蛋白质分子向阴极移动，带负电荷的蛋白质分子向阳极移动，这种移动现象，称为电泳。20.偶极离子:在同一个氨基酸分子上含有等量的正负两种电荷，由于正负电荷相互中和而呈电中性，这种形式称为偶极离子。二、填空题1.2，4二硝基氟苯/FDNB、丹磺酰氯/DNS-Cl、异硫氰酸苯酯/PITC、氨肽酶、肼解、羧肽酶2.αα、βαβ、βββ3.蛋白水解酶酶解、对角线电泳4.色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸、2805.酸性、碱性、Asp、Glu、Arg、Lys、His6.16%7.两性、负电8.酸、碱、6.02、阳9.二、不相同、均一亚基或一条肽链10.化学合成、牛胰岛素11.20、甘氨酸、氨基、羧基12.中心轴、N-H、C=O、肽平面上的H与O13.Cys、Gly14.电荷、水化膜15.球状、纤维状16.Lys、Arg17.羟基、羧基、巯基18.②、①、③、④19.20．协同、变构21．右22．肽键、二硫键、氢键、疏水作用力、离子键、范德华力23．Edman、PITC、PTC-aa、PTH-aa24．α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规则卷曲25．疏水作用力26．沉降速度法、凝胶过滤法、电泳法27．谷光甘肽、谷aa、半胱氨酸、甘氨酸、肽、巯基28．Sanger、Sanger、胰岛素、二、30、21、三、二硫29．二、氢键、30、7230．（NH4）2SO4、NaCl、Na2SO4三、选择题1.A2.B3.C4.C5.C6.B7.D8.A9.A10.B11.C12.B13.C14.B15.A16.D17.D18.D19.B20.C21.D22.A23.D24.A25.D26.C27.D28.B29.D30.B31.D32.B33.C34.D35.D36.D37.B四、是非题1.错2.错3.对4.对5.对6.错7.对8.错9.错10.对11.对12.对13.错14.对15.错16.对17.对18.错19.对20.错21.错22.对23.错24.对25.错26.错27.对28.错29.对30.错31.对32.对33.对34.错35.错36.错五、问答题1.血红蛋白含有2个α亚基和2个β亚基，每个亚基均有一个血红素。每个血红素都可以和一个氧分子结合。但是4个亚基和氧分子的结合能力有所不同。每一个亚基和氧分子结合后，这个亚基发生构象改变，使得其他亚基和氧分子结合更容易，呈现亚基间的协同效应。除了亚基间的协同效应可影响亚基和氧的结合，氢离子和二氧化碳可以促进和血红蛋白结合的氧分子的释放，即所谓‘波尔效应’。2，3-二羟基甘油磷酸和亚基结合后也可以抑制血红蛋白和氧的结合。2.此肽段的序列为：酪氨酰-精氨酰-甲硫氨酰-脯氨酸。确定脯氨酸残基存在的依据是与茚三酮反映呈黄色。3.由结果⑴可得知此肽的N端是Ala；由结果⑵可知C端四肽的序列是Gly-Lys-Met-Asp；由结果⑶可知N端的三肽序列为Ala-Ser-Lys，中间的肽段序列为Phe-Gly-Lys，二肽被CNBr处理后游离出自由天冬氨酸，这提示了这二肽的序列为Met-Asp，而且没有碱性残基，因此是整个肽链的C端二肽。完整的八肽序列为：Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Met-Asp。T↓CT↓T↓Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Met-AspDNP-AlaDNP-Gly4.该九肽序列为：Tyr-Pro-Gly-Phe-Asp-Met-Gly-Arg-PheCT↓CNBr↓T↓Tyr-Pro-Gly-Phe-Asp-Met-Gly-Arg-PheDNP-Tyr通常Pro的存在有可能影响蛋白水解酶对附近肽键的作用，因此，更可能的序列是Pro-Gly而不是Gly-Pro。5.用两种羧肽酶和氨肽酶作用此九肽，都不能释放出氨基酸，证明了第2位和第八位的残基均为脯氨酸；用FDNB可以测得该肽的N末端为Ala，用胰蛋白酶作用可得到Ala，Pro，Lys组成的三肽，这表明了第三位的残基为Lys；同时得到一段五肽和游离的Arg，这提示了Arg是第四位的残基。用胰凝乳蛋白酶作用后，可得到一段六肽和一段三肽，同时也确认了第六位残基是带芳香性侧链的Tyr。由六肽的氨基酸组成测得，确定其中含有Val，很自然的可认定这残基应是第五位的残基。用FDNB证明了酶解后所得三肽的N末端，即九肽的第七位残基，是Glu后，九肽的C末端也肯定是Gly。6.肌红蛋白和血红蛋白的氧合曲线的差别是：前者是双曲线形式，后者是S型曲线。原因是肌红蛋白是单个亚基的氧结合蛋白，不存在协同效应；而血红蛋白是含有4个亚基的氧结合蛋白，彼此间存在着协同效应。可参阅主要参考书（1）上册184-188页。7.首先要有一种或几种检测或鉴定外源基因表达产物的方法，然后，在每一次分离纯化后检测表达产物存在哪一个级分中。⑴用硫酸铵或酒精分级沉淀，可根据蛋白质的溶解度的差别进行分离。⑵SDS、凝胶过滤、超离心，以及超滤可对分子量不同的蛋白质进行分离。⑶对带电行为不同的蛋白质可以用离子交换层析、等电聚焦、圆盘电泳、毛细管电泳等方法进行分离；但是在使用这一类型的方法时选择溶液的pH值至关重要，因为蛋白质的带电行为和溶液的pH值密切相关。⑷如果具备表达产物的抗体，则可以使用亲和层析或免疫沉淀的方法简洁的分离所需的表达产物。⑸使用吸附量较大的离子交换层析和亲和层析，以及对饱和硫酸铵或聚乙二醇反透析，还有冷冻干燥等方法都可以达到浓缩样品的目的，然而这些方法使用时，都存在着拖延或除去小分子化合物的问题。相比而言，选用合适截流分子量的超滤膜，进行超过滤，往往能同时达到浓缩样品和去盐（包括小分子）的目的。⑹在上述的（2）和（3）这两大类用于分离纯化产物的过程，实际上也有样品纯度鉴定的作用。此外，末端分析、质谱和反相的HPLC层析也都是有效的样品纯度鉴定的方法。但是应注意，样品的纯度是一个相对的概念。8．蛋白质的变性过程，通常总是伴随着有序的结构的破坏和生物活性的丧失。有序结构的破坏包括了亚基间的解离、二级和三级结构的改变，多数情况是肽链的松散，原来包埋在内部的残基（主要是疏水性残基）的暴露。活性丧失，除了和配体的结合能力丧失，还有抗原性的改变。极端的pH、尿素和盐酸胍等破坏氢键的试剂和不同类型的去垢剂都是能引起蛋白质变性的试剂。9．蛋白质的一级结构决定蛋白质的高级结构这一原则目前基本上仍是正确的。但是是有条件的。例如同样一条肽链，在存在变性剂的条件下是松散的。现在所说的蛋白质的三级结构取决于它的氨基酸序列是指在生理条件下，蛋白质的一级结构和其三级结构之间的特定的对应关系。典型的例子是牛胰核糖核酸酶的二硫键被还原，肽链松散后，经适当的条件，致使肽链中的二硫键的正确配对，此时肽链仍能呈现具有生物活性的天然构象。当前有相当多的蛋白质工程的例子可以说明，肽链中某些残基的突变可以引起突变蛋白的构象改变。10．最常用的打开二硫键的方法是使用巯基试剂，例如巯基乙醇，可使参与二硫键的2个半胱氨酸还原为带有游离巯基的半胱氨酸。为了使还原反应能顺利进行，通常加入一些变性剂，如高浓度的尿素等。加入过量的还原剂可以防止还原所得的巯基被重新氧化。如果不准备使肽链重氧化，而是进一步进行结构化学结构的研究，可以将巯基转化为其他的修饰形式，例如和羧甲基化等烷化剂反应。除了已介绍的还原羧甲基化，还有过甲酸氧化法和亚硫酸还原法。11．测定蛋白质中二硫键的经典方法是对角线电泳。简言之，先是用专一性适中的蛋白质水解酶，将蛋白质降解为若干片段。随后进行二维纸电泳，在第一相电泳用挥发性的还原剂处理，然后进行第二相电泳。经显色后，在多角线上的肽段均不含有二硫键，而偏离对角线的肽段是形成二硫键的肽段，测定有关肽段的氨基酸组成，即能确定蛋白质肽链中二硫键配对的情况。目前利用质谱技术也可以测定二硫键。12．螺旋中一个残基的C=O与其后第四个氨基酸残基的N-H之间形成氢键。形成的氢键C=O…H-N几乎成一直线。每个氢键的键能虽不强，但是大量的氢键足以维持α-螺旋的稳定性。一圈螺旋3.6个残基，氢键封闭13个原子。α-螺旋是α-系螺旋的一种，α-系螺旋可用下列通式表示：⑴圈内原子数为3n+4，当n=3时，即为α-螺旋。⑵由于α-螺旋内原子数为13，从而α-螺旋也写作：3.613。当n=2时，即为3.010螺旋。此螺旋构象不如3.613构象稳定。13.胰蛋白酶水解碱性氨基酸羧基端肽键可得2条肽段；胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸羧基端肽键可得3条肽链。14.胰岛素是在胰岛β-细胞内合成的一种多肽激素。最初合成的是一个比胰岛素分子大一倍多的单肽链，称为前胰岛素原，它是胰岛素原的前体，而胰岛素原又是胰岛素的前体。胰岛素原是前胰岛素原去掉N-末端的信号肽形成的，被运送到高尔基体储存。当机体需要活性胰岛素时，在特异的肽酶作用下，去掉C肽转变为具有活性的胰岛素，这就是胰岛素原被激活的过程。15.A：用酸解结果表明此五肽由Ala、Cys、Lys、Ser、Phe组成；B：苯异硫氰酸处理得到PTH-Ser，C：胰蛋白酶水解碱性氨基酸羧基端肽键；D：胰凝乳蛋白酶水解芳香族氨基酸羧基端肽键因此：⑴胰蛋白酶水解得三肽是Cys-Phe-Ala;⑵胰蛋白酶水解得二肽是Ser-Lys;⑶五肽一级结构Ser-Lys-Cys-Phe-Ala。16.pI=0.5（PK1+PK2）；AlapI=6.02；GlupI=3.2217．一般纸层析是根据物质的极性或亲水性的大小来进行分离的。这几种氨基酸的极性大小顺序为Glu>Ser>Ala>Ile，所以它们在纸层析中的快慢顺序为Glu>Ser>Ala>Ile。18．解：一般来讲氨基酸残基的平均分子量为120Da，此蛋白质的分子量为240000Da，所以氨基酸残基数为240000/120=2000个。设有X个氨基酸残基呈α-螺旋结构，则：X×0.15+(2000-X)×0.36=5.06×10-5×107nm=506nm计算后：X=1019；α-螺旋的长度为1019×0.15=152.9nm答：α-螺旋占蛋白质分子的百分比为：152.9/506=30.22%19．⑴Val、Pro、Phe和Ile是非极性氨基酸，它们的侧链一般位于分子的内部。Asp、Lys、His是极性氨基酸，它们的侧链一般位于分子的表面。⑵Ser、Thr、Asn和Gln在生理pH条件下有不带电荷的极性侧链，它们能参与内部氢键的形成，氢键中和了它们的极性，所以它们能位于球状蛋白质分子的内部。20．由于稳定α-螺旋的力是氢键，那么在疏水环境中很少有极性基团干扰氢键的形成，而在亲水环境中则存在较多的极性基团或极性分子，它们能够干扰α-螺旋中的氢键使之变得不稳定。所以多肽链片段在疏水环境中更利于α-螺旋的形成。21．胰岛素是在胰岛β-细胞内合成的一种多肽激素。最初合成的是一个比胰岛素分子大一倍多的单肽链，称为前胰岛素原，它是胰岛素原的前体，而胰岛素原又是胰岛素的前体。胰岛素原是前胰岛素原去掉N-末端的信号肽形成的，被运送到高尔基体储存。当机体需要活性胰岛素时，在特异的肽酶作用下，去掉C肽转变为具有活性的胰岛素，这就是胰岛素原被激活的过程。第二章：核酸的结构与功能一、名词解释1.不对称比率2.碱基互补3.发夹结构4.DNA的一级结构5.分子杂交6.增色效应7.减色效应8.核酸的变性9.核酸的复性10.DNA的熔解温度（Tm）11.假尿苷（Ψ）12.三叶草型结构13.snRNA14．回文序列15.拓扑异构体16.超螺旋结构17.H-DNA（tsDNA）18.单顺反子19.多顺反子二、填空题1.()和()提出DNA的双螺旋模型，从而为分子生物学的发展奠定了基础。2.DNA与RNA的结构差别：DNA为()链，RNA为()链，DNA中有()和()，而RNA代之为()和()。3．RNA分为()、()和()，其中以()含量为最多，分子量()为最小，()含稀有碱基最多。4.胸苷就是尿苷的()位碳原子甲基化。5.核酸按其所含糖不同而分为()和()两种，在真核生物中，前者主要分布在()中，后者主要分布在()中。6.在核酸分子中由()和()组成核苷，由()和()组成核苷酸。（）是组成核酸的基本单位。无论是DNA还是RNA都是有许许多多的（）通过（）键连接而成的。7.核苷中，嘌呤碱基与核糖是通过()位()原子和()位()原子相连，嘧啶碱基与核糖是通过()位()原子和()原子相连。8.一条单链（+）DNA的碱基组成为A21%，G9%，C29%，T21%，用DNA聚合酶复制出互补的（-）链，然后用得到的双链DNA做模板，用RNA聚合酶转录其中的（-）链，产物的碱基组成是()。9.常见的环化核苷酸是()和(),作用是()，它们是通过核糖上()位()位的羟基与磷酸环化形成酯键。10.生物体内有一些核苷酸衍生物可作为辅酶而起作用，如：()、()、()和()等。11.某双链DNA中含A为30％(按摩尔计)，则含C为()％，含T为()％。12.某双链DNA的一段链上，已知碱基(按摩尔计)组成A=30%，G=24%，则同一链中的T+C是()％，其互补链中的T是()％，C为()％，A+G是()％。13.DNA双螺旋B结构中，双螺旋的平均直径为()nm，螺距为()nm；沿中心轴每旋转一周包含()个碱基对，相邻碱基距离为()nm，相邻碱基之间旋转角度为()。14.真核细胞核内的DNA呈()形，原核细胞及真核细胞的线粒体内DNA呈()形。15.tRNA二级结构中，5’端磷酸化多为()，3’端碱基顺序是()，叫做()，常用作()的接受部位。另外还有三个环状部位，分别称()、()和()，用于tRNA分类标志的部位叫()。16.tRNA的二级结构呈()形，三级结构像个倒写的()字母。17.真核生物细胞中mRNA帽子结构主要组分是()，其尾部是由()组成。18.溶液中的核酸分子在离心力场中可以沉降，RNA分离多用()密度梯度超离心，DNA分离多用()密度梯度超离心。19.嘌呤碱和嘧啶碱具有()，使得核酸在()nm附近有最大吸收峰，可用紫外分光光度计测定。20.DNA变性后，紫外吸收能力()，粘度()，浮力、密度()，生物活性()。21.在沸水中的核酸样品缓慢冷却后，在260nm处的光吸收值会()。22.DNA分子中，(C十G)％含量越高，则()越高，分子越稳定。23.在提取DNA时，加入0.14MnaCl是为了()，加入SDS目的之一是使()和()分离，再加入1MnaCl是()，用氯仿／异戊醇是将()除去，最后加入95％乙醇的作用是()。24.核酸研究中，地衣酚法常用来测定()，二苯胺法常用来测定()。25.生理pH值下，体内核酸大分子中的碱基是以()式存在(酮式，烯醇式)。26.1944年Auery证明核酸是遗传物质的实验是()。27.核酸是两性电解质，因为分子中含()基和()基团。28.B-DNA为（）手螺旋DNA，而Z-DNA为（）手螺旋DNA。29.游离核糖可形成（）环状结构，有α、β两种构型，组成核酸的核糖为（）构型。30.把琼脂糖中的DNA转移到硝酸纤维素膜或尼龙膜上的技术是英国分子生物学家（）发明的，故被人们称为（）或DNA印记法。31.通常DNA的分子长度一般用（）对数（bp）或（）来表示。32.纯DNA样品的A260/A280约等于（），纯RNA样品的A260/A280约等于（）。33.核酸样品中含（）物质时A260/A280之比值（）。三、选择题1.稀有核苷酸主要是在什么中发现的：()A.mRNAB.tRNAC.rRNAD.线粒体内DNA2.下列关于双链DNA碱基的含量关系哪个是对的：()A.A=T、G=CB.A+T=C+GC.G+C>A+TD.G+C<A+T3.下列DNA双链中，Tm值最高的是：()A.(G+C)％=25％B.(A+T)％=25％C.(G+C)％=60％D.(A+T)％=55％4.G-C含量愈高Tm值愈高的原因是：（）A.G-C之间形成了离子键B.G-C之间形成了两个氢键C.G-C之间形成了一个共价键D.G-C之间形成了三个氢键5.假尿苷(ψ)中糖苷键的连接方式是：()A.C-N连接B.C-C连接C.N-N连接D.以上都不对6．真核生物mRNA帽子结构中m7G5’A.2’-5’B.3’-5’C.3’-3’7.下列因素中不能影响Tm值大小的是：()A.DNA的均一性B.C-G含量C.重金属盐D.介质中的离子强度8.关于tRNA下列表述哪项是错误的：()A.是RNA中含量最多的单链分子B.tRNA的二级结构是三叶草形C.是RNA中含稀有碱基最多的D.tRNA的3’端几乎都有CCA结构。9.下列关于DNA变性的表述哪项是正确的：()17.

随温度逐渐升高，紫外吸收值逐渐增大B.Tm值只与DNA分子的大小有关而与构成无关C.DNA变性从微观考虑是个瞬时过程D.溶液的构成对DNA分子的Tm值没有影响10．下列关于DNA的描述哪项是错误的：()17.

在二级结构基础上往往形成超螺旋B.维持二级结构的作用力是氢键C.线粒体中的DNA呈环状D.提出DNA双螺旋的主要依据是chargaff定则和X射线衍射图谱11.下列哪种碱基在mRNA找到在DNA中不存在：()A.腺嘌呤B.鸟嘌呤C.尿嘧啶D.胞嘧啶12．原核生物核糖体的30S小亚基中含有哪一种rRNA：()A.23SrRNAB.18SrRNAC.5SrRNAD.16SrRNA13.用电泳方法分析核酸时，常用的染料是：()A.溴酚兰B.溴乙锭C.考马斯亮兰D.地衣酚14．某DNA双螺旋的一条多核苷酸链碱基顺序为ACCTTAGA指出另一条链的碱基顺序：()A.TGGAATCTB.AGATTCCAC.TCTAAGGTD.ACCTTAGA15.热变性的DNA分子在适当条件下可以复性，条件之一是：（）A.骤然冷却B.缓慢冷却C.浓缩D.加入浓的无机盐16.在适宜条件下，核酸分子两条链通过杂交作用可自行形成双螺旋，取决于：（）A.DNA的Tm值B.序列的重复程度C.核酸链的长短D.碱基序列的互补17.核酸中核苷酸之间的连接方式是：（）A.2’，5’-磷酸二酯键B.氢键C.3’，5’-磷酸二酯键D.糖苷键18.tRNA的分子结构特征是：（）A.有反密码环和3’-端有-CCA序列B.有密码环C.有反密码环和5’-端有-CCA序列D.5’-端有-CCA序列19.下面关于Watson-CrickDNA双螺旋结构模型的叙述中哪一项是正确的：（）A.两条单链的走向是反平行的B.碱基A和G配对C.碱基之间共价结合D.磷酸戊糖主链位于双螺旋内侧20.具5’-CpGpGpTpAp-3’顺序的单链DNA能与下列哪种RNA杂交：（）A.5’-GpCpCpAp-3’B.5’-GpCpCpApUp-3’C.5’-UpApCpCpGp-3’D.5’-TpApCpCpGp-3’21.RNA和DNA彻底水解后的产物：（）A.核糖相同，部分碱基不同B.碱基相同，核糖不同C.部分碱基不同，核糖不同D.碱基不同，核糖相同22.下列关于mRNA描述哪项是错误的：（）17.

原核细胞的mRNA在翻译开始前需加“PolyA”尾巴。B.原核细胞的mRNA在翻译开始前不需加“PolyA”尾巴。C.真核细胞mRNA在5’端有特殊的“帽子”结构D.真核细胞mRNA在3’端有特殊的“尾巴”结构23.在pH3.5的缓冲液中带正电荷最多的是：（）A.AMPB.GMPC.CMPD.UMP24.核酸变性后，可发生哪种效应：（）A.减色效应B.增色效应C.失去对紫外线的吸收能力D.最大吸收峰波长发生转移25.一个RNA片段UgmψICm6A，其中含多少个修饰碱基：（）A.2B.3C.4D.5四、是非题17.

DNA是生物的遗传物质，RNA不是。2.一种生物不同组织的体细胞的DNA碱基组成是相同的。3.DNA戊糖环的3’位上没有羟基，所以称为脱氧核糖核酸。4.真核生物mRNA的3’端有一个多聚A（polyA）的结构，随着mRNA在细胞中存在的时间延长，polyA的长度也随着增加长。5.在RNA分子中，单链RNA局部区域由于A-U，G-C配对，也象DNA一样，可以形成局部双螺旋而构成发夹式结构。6.rRNA就是核糖体。7.真核生物的mRNA多顺反子，原核生物mRNA单顺反子。8.到目前为止，发现所有的脱氧核糖核酸链形成的双螺旋结构均为右手螺旋。9.DNA碱基摩尔比规律仅适合于双链而不适合于单链。10.在绝大多数细胞中核酸不能作为能量物质。11.热变性的DNA复性时，温度必须缓慢降低。12.一个动物细胞内的DNA可以与该动物的所有RNA杂交。13.DNA的熔解温度随（A+T）/（G+C）比值的增加而减小。14.双链DNA中每条单链的（G+C）%含量与双链的（G+C）%含量相等。15.DNA的核蛋白易溶于高浓度的NaCl（1～2M）溶液中。16.某DNA提取液经紫外吸收测定OD260/OD280≥1.8，则该溶液中蛋白质杂质基本除去。17.病毒分子的核酸组成分为单纯DNA,单纯RNA，DNA和RNA同时存在三种类型。18.生物体内只有5’-核苷酸。19.自然界中的DNA全部为B型双螺旋结构。20.真核生物mRNA的帽子结构与蛋白质合成的起始有关，并能增加mRNA的稳定性，防止核酸酶降解。21.核酸中G-C含量可用测定Tm值的方法进行计算。22.杂交双链是指DNA双链分开后两股单链的重新结合。23.核酸探针是指带有标记的一段核酸单链。五、问答题17.

核酸的元素组成特点是什么?它的应用如何?2.DNA和RNA的结构和功能在化学组成，分子结构,细胞内分布和生理功能上的主要区别是什么？3.环化核苷酸是怎样形成的？它有什么重要的生理功能？4.核苷酸及其衍生物有哪些重要的生理功能？5.Chargaff原则的要点是什么?6.试述DNA双螺旋(B结构)的要点?稳定DNA双螺旋结构主要作用力是什么？它的生物学意义是什么？7.RNA分哪几类?各类RNA的结构特点和生物功能是什么?8.简述RNA和DNA分离提取的最基本原则?9.影响DNATm值大小的因素有哪些?10.试述tRNA二级结构的共同特征?11.什么是DNA的变性?DNA变性后理化性质有何改变？12.什么是DNA超螺旋结构?有几种形式?形成超螺旋结构的意义?13.大肠杆菌DNA的分子量为2.8x109，一个脱氧核苷酸对的平均分子量为670。计算：①该DNA长度?②占有的体积是多少?③形成多少圈螺旋?14.某基因片段的碱基分析结果如下，写出该基因片段的碱基排列顺序切割A得：32P-G，32P-GACTCTG，32p-GACTCTGAGC切割G得：32P-GACTCT，32P-GACTCTGA切割C得：32P-GA，32P-GACT，32P-GACTCTGAG切割T得：32P-GAC，32P-GACTC15.某DNA样品含腺嘌呤15.1%（按摩尔碱基计），计算其余碱基的百分含量。16.从两种不同细菌提取得DNA样品，其腺嘌呤核苷酸分别占其碱基总数的32%和17%，计算这两种不同来源DNA四种核苷酸的相对百分组成。两种细菌中哪一种是从温泉（64℃）中分离出来的？为什么？17.谈谈你所知道的核酸研究进展情况及其对生命科学发展的影响。第三章：酶一、名词解释1.底物

2.酶的专一性

3.全酶

4.酶的活性部位

5.必须基团

6.酶原及酶原的激活7.别构酶

8.酶的最适温度

9.酶作用的最适pH10.酶的激活剂11.抑制作用和失活作用12.酶的活力单位；13.酶的国际单位14.“催量”15.比活力16.米氏常数17.多酶体系18.共价调节酶

19.别(变)构效应

20.同工酶

21.固定化酶

22.诱导酶

23.正效应物24.负效应物

25.协同效应26.同促效应

27.异促效应

28.正协同效应

29.负协同效应30.转换数

31.抑制剂

32.可逆抑制作用

33.竞争性抑制作用

34.非竞争性抑制作用35.不可逆抑制作用二、填空题l.EC中的EC是（

）的简称，第一个数字2表示该酶属于（

）。2.由氧化还原酶类所催化的反应可用（

）（通式）。该类酶的辅酶或辅基一般为（

）3.谷丙转氨酶属于（

）酶类，它的系统名称是（

）。4.合成酶类催化是由（

）的反应，且必须有（

）参加。5.根据酶蛋白分子的组成可将酶分为（

）和（

）两大类。6.结合酶类由（

）和（

）两部分组成。7.自然界中酶的种类甚多，但辅酶或辅基的种类并不多，因（

）可以和（

）结合而构成不同的酶。8.辅酶或辅基和酶蛋白单独存在时，都（

），只有（

）才有活性。9.酶与其专一性底物的结合一般通过（

）、（

）等非共价键。10.酶活性中心有两个功能部位，一是（

）和（

）。11.在酶的活性中心以外使酶表现催化活性所必须的部分被称为（

），它的作用是（

）。12.表示底物浓度和反应速度之间的定量关系的方程为：（

）。13.天冬氨酸转氨甲酰酶的别构激活剂为（

）。14.酶的抑制作用主要有（

）和（

）两种类型。15.Km是酶的特征常数之一，只与酶的（

）有关，而与酶的（

）无关。16.共价调节类型主要有（

）和（

）两种。17.酶是生物催化剂，其化学本质属于（

）或（

）。18.多数别构酶是既具有（

），又具有（

）的变构酶。19.多数变构酶的活性既受（

）的调节，又受（

）的调节。20.解释别构酶作用机理的两个重要模型是（

）和（

）。21.（

）和（

）是酶表现催化活性所必需的两部分。22.在酶所催化的反应中，全酶中的酶蛋白部分决定反应的（

），而非蛋白部分则起

（

）。23.根据国际系统命名法命名原则，每一种酶都有一个（

）名称和一个（

）名称。24.一种酶只能作用于（

）物质，这种对底物的选择性称为（

）。25.多酶体系总的反应速度取决于其中（

）反应，该步反应一般称为反应(步骤)。26.脲酶具有（

）性，只能催化（

）的分解。27.胰凝乳蛋白酶刚分泌出来时以（

）形式存在，后者在（

）酶作用下转变为有活性的酶。28.酶原激活的过程实际上是酶的（

）过程，因此酶原的（

）将发生较大的变化。29.酶的高效催化是因为酶能（

），从而使（

）数目增加，反应速度加快。30.酶促反应的速度可用单位时间内（

）或（

）来表示。31.同一种酶的活力测定若采用的测定方法（

），活力单位也不（

）。32.对同一种酶来说，酶的比活力越（

），（

）越高。33.酶分子中具有催化功能的亲核基团主要有：组氨酸的（

）基，丝氨酸的（

）基及半胱氨酸的（

）基。34.胰凝乳蛋白酶的活性中心由（

）、（

）和（

）组成，它的电荷转接系统中（

）的共振是这个系统有效性的关键。35.降低酶促反应活化能，提高酶催化效率的重要因素是（

）、（

）、（

）、（

）、（

）。36.1／km可近似地表示酶与底物（）的大小，Km越大，表明（）。37.变构酶的特点是由（）组成，除结合底物的活性中心外，还有结合（）的（

）中心，动力学上不符合一般的（

），当以V对[S]作图时，它表现出（

）型曲线，而非（

）曲线，它是（

）酶。三、选择题1.下面关于米氏常数Km的论述哪一个是正确的：（

）A.与ES复合物形成及分解的速度常数都有关系B.在不同类型的抑制作用中，Km都改变C.用双倒数作图法不能得到Km值D.在酶促反应的初速度阶段不能得到Km2.测定酶促反应的初速度是为了：（

）A.使实验尽快完成以避免酶蛋白的变性B.防止逆反应对结果分析所造成的影响C.避免酶被底物饱和D.增加酶催化反应的效率3.下面关于酶的抑制作用的论述哪一个是正确的：（

）A.都为可逆的抑制作用B.增加底物的浓度可消除抑制剂对酶的影响C.根据抑制剂与酶结合的情况可区分不同类型的抑制作用D.抑制作用与抑制剂浓度无关4.下面关于反竞争性抑制剂的论述哪一个是正确的：（

）A.通过一个或多个共价键与酶结合B.当它存在时不改变K"C.当它存在时不改变最大反应速度D.只与ES复合物结合，干扰其分解为产物5.下面关于竞争性抑制剂的论述哪一个是正确的：（

）A.无论其存在与否，双倒数作图在纵坐标上的截距都是l/VmaxB.在它存在时不改变KmC.在它存在时不影响底物与酶的活性部位的结合D.如果抑制作用发生，需它与底物反应以消除它对酶促反应的影响6.下列关于非竞争性抑制剂的论述哪一个是正确的：（

）A.一般是底物的类似物B.与酶的活性部位结合而影响其催化能力C.只与酶结合D.使酶与底物的结合与催化作用受到影响7.下列关于底物浓度对反应速度影响作图的表述哪一个是正确的：（

）A.是一条直线B.当底物浓度高时，酶被底物饱和C.说明ES复合物形成的速度比分解的速度小D.是1/V对1/[S]作图8.下面关于用双倒数作图法求Km的表述哪一个是不正确的：（

）A.是一条直线B.不能测定最大反应速度C.是1/V对1/S作图D.双倒数方程由米氏方程转化而来9.下列关于别构酶特性的叙述哪一个是正确的：（

）A.不受抑制剂的影响B.不具协同性C.当配基与活性部位以外的部位结合时，引起酶构象的变化D.只有一个亚基组成10.在齐变模型中，对别构酶协同效应机制的论述哪一个是正确的：（

）A.在底物浓度高时，酶无活性B.底物的紧密结合导致无活性形式C.邻近亚基的构象相同D.邻近亚基的构象不同11.在序变模型中，对别构酶协同效应机制的论述哪一个是不正确的：（

）A.效应物与别构酶结合后，不是它的所有亚基同时转变为T态或R态，而是一个一个地顺序转变，因此存在RT杂交态B.底物或效应物与别构酶结合后，诱导T态转变为R态或相反C.效应物与别构酶结合后，导致其构象发生改变D.不存在RT杂交态12.当有别构抑制剂存在时，别构酶：（

）A.不再遭受构象的变化B.由于构象改变，催化反应的速度降低C.由于底物和抑制剂之间竞争酶的活性部位，使催化反应的速度降低D.由于变构抑制剂与酶的活性部位结合，使反应速度降低13.一种酶的纯竞争性抑制作用有下面的哪一种动力学性质：（

）A.Km增加而Umax不变

B.Km降低而Umax不变C.Km和Vmax均降低

D.Km和Vmax均增加14.当酶促反应达到恒态时，[ES]复合物的浓度如何?A.浓度为零

B.浓度增加

C.浓度减少

D.浓度不变15.在酶的反竞争性抑制作用中，抑制剂影响下列申的哪一个：（

）A.最大反应速度