CgA、NSE及CD56在前列腺癌中的表达及意义

CgA、NSE及CD56在前列腺癌中的表达及意义摘要】目的探讨CgA、NSE及CD56在前列腺癌中的表达及意义，为临床前列腺癌诊断、预后判断及个体化治疗提供理论依据。方法选择有完整临床资料的74例PCa手术切除标本，应用免疫组织化学方法检测CgA、NSE以及CD56的表达情况，数据分析采用SPSS(Version13.0)统计软件包进行，探讨CgA、NSE以及CD56前列腺癌中的表达和意义。结果CgA、NSE、CD56在前列腺癌组织中的阳性表达率分别为21.62%、25.68%、41.89%，三者阳性表达与病理分级均成正相关(PV0.05)。结论NED对前列腺癌的预后判断有实际价值，免疫组化方法联合检测CgA、CD56是判断前列腺癌是否伴有NED较可靠的指标，二者均阳性可能提示前列腺癌患者的预后较差。【关键词】前列腺癌CgANSECD56预后ExpressionandsignificanceofCgA,NSE,CD56andARinprostaticcarcinoma［Abstract］Objective:ToinvestigatetheexpressionandsignificanceofchromograninA(CgA)，Neuronspecificenolase(NSE)andCD56inprostaticcarcinoma(PCa)，andprovideusefulinformationindignosisandprognosisofPCa.Methods:UsingimmunohistochemistrytodetecttheexpressionofCgA,NSEandCD56of74patientswithPCa.AlldatawereprocessedbySPSSversion13.0analysissoftware，analyzedtheexpressionandsignificanceofCgA,NSEandCD56inPCa.Results:TheCgA,NSE,CD56positiveratewere21.62%、25.68%、41.89%,theexpressionofthesethreemarkersinprostaticcarcinomawasallcorrelatedwiththepathologicalgrade(PV0.05)).Conclusion:PresenceofNEDisanimportantfactortoaffectthesurvivalofpatientswith.TheresultsindicatethatcombinationdetectionofCgAandCD56ofNEDmarkersmightbethespecificmarkersinprognosisofPCa,itissuggestedthatthepositiveexpressionoftheCgAandCD56mightpoorprognosis.［Keywords］ProstaticcarcinomachromograninANeuronspecificenolaseCD56prognosis前列腺癌(prostaticcarcinoma，PCa)正成为严重影响我国男性健康的泌尿系恶性肿瘤［1］。由于症状隐蔽，至少50%的患者在确诊时已为局部晚期癌，其中30%发生远处转移［2］。近年来的研究表明，前列腺癌的神经内分泌分化(NeuroendocrineDifferentiation，NED)在肿瘤细胞的生物学行为中起重要作用［3］。我们收集2004-2012年间山西医科大学第一临床医院诊断为前列腺癌的74例病例，通过免疫组织化学方法检测神经内分泌分化标记物CgA、NSE、CD56的表达，探讨三个指标在前列腺癌的意义。1材料与方法1.1材料收集2004年-2012年间由山西医科大学第一医院收治的74例前列腺癌手术切除标本，其中48例行经尿道前列腺电切术，8例经前列腺穿刺活检,18例行经尿道前列腺电切术+双侧睾丸切除术。所有入选病例已除外心肝肺肾等疾病，且未用激素，化疗和放疗等治疗。标本均经常规方法制片，HE染色，由2位病理医师共同阅片且均经病理学和免疫组织化学(P504s阳性、34阡-12阴性)证实为前列腺癌。参照Gleason2004年修订的分级和评分标准对PCa进行病理分级：5例为高分化(Gleason积分2-4分)；31例为中分化(Gleason积分5-7分)；38例为高分化(Gleason积分8-10分)。1.2方法免疫组织化学采用Envision法，一抗包括神经特异性烯醇化酶(neuronespecificenolase,NSE)、嗜铬粒蛋白A(chromograninA,CgA)、CD56单克隆抗体，均购自北京中杉金桥生物技术开发有限公司，且均为工作液。1.3结果判断：PCa组织中CgA、NSE、CD56均以细胞质中出现棕黄色颗粒为阳性表达，每张切片于400倍光镜下随机选取5个视野，计数200个细胞/视野，共计1000个细胞。阳性细胞数小于10%为阴性，大于10%为阳性。设阴性对照和阳性对照。阴性对照将一抗用PBS液替代，以已知阳性肺小细胞癌作为阳性对照。1.4统计学分析采用SPSS13.0统计软件，患者生存率的分析采用Kaplan-Meier法，P<0.05为差异有统计学意义。2结果2.1CgA、NSE、CD56在前列腺癌中的表达情况CgA、NSE、CD56均表达于细胞质，CgA表达多数分布为局灶性，NSE、CD56表达为弥漫性分布，如图1。74例患者中CgA、NSE、CD56阳性表达数分别为16、19、31例，阳性表达率分别为21.62%、25.68%、41.89%。不同病理分级74例前列腺癌患者CgA、NSE、CD56表达情况如表1所示，三者阳性表达与病理分级均成正相关(PV0.05)，且随着病理分级的增加，出现表达增多。图1NE标记物阳性细胞ACgA阳性细胞散在分布B弥漫分布CCD56阳性细胞弥漫分布Envision(x400)表1不同病理分级74例前列腺癌患者CgA、NSE、CD56表达情况例(%)病理分级nCgANSECD56高分化50(0)1(20)1(20)中分化316(19.35)7(22.58)8(25.81)低分化3810(26.32)11(28.95)22(57.89)合计7416(21.62)19(25.68)31(41.89)2.2随访及预后74例患者51例获得随访资料,,年龄55-90岁，随访时间5-85个月，其中12例骨转移、8例复发、14例死亡，存活时间7到60个月。生存曲线如图2。图251例获随访资料患者生存曲线CgA阳性患者16例，10例获随访资料，其中死亡3例，发生骨转移3例，复发3例；NSE阳性患者19例，获随访16例，其中死亡6例，发生骨转移2例，复发1例，19例NSE；CD56阳性患者31例，获随访22例，其中死亡8例，发生骨转移1例，复发1例。3讨论由于前列腺癌在早期症状、体征和辅助检查均易与良性前列腺增生混淆，不易诊断，因此多数患者在确诊时已属中晚期。尽管手术切除有一定治疗效果，但三年生存率仍然只有50%-60%［5］。近年来，对前列腺癌NED的研究逐渐深入，其在肿瘤生物学行为所起的作用也不断受到重视。大量的临床与实验研究已经证实前列腺癌NED在低分化、晚期肿瘤、抗雄激素治疗后，尤其是雄激素非依赖性PCa(androgenindependentprostatecancer，AIPC)中出现表达水平增高［6］。光学显微镜下，神经内分泌细胞与癌细胞无明显区别，但可通过电子显微镜或免疫组织化学技术对特异标志物CgA、NSE、CD56等进行区分。Strisberg等［9］研究78例胃肠道类癌经放疗后疗效，发现CgA在胃肠道类癌判断中特异性为92%；国内姚根有［10］等研究356例腺癌认为神经内分泌标记物CgA是目前显示NE细胞较理想的标志物。VashchenkoN⑻认为其在神经内分泌肿瘤诊断中是用来证实瘤细胞是否具有神经内分泌性质，不需要半定量评价阳性染色强度和阳性细胞数，据此本实验判断CgA胞浆有棕色颗粒者均为阳性表达。郭爱桃等⑷研究NSE、CD56、CK、SYN、CgA等标记物在16例泌尿道小细胞性神经内分泌癌的表达，认为NSE特异性很低，在小细胞癌的诊断中应摒弃，而CD56敏感性高，单独不能作为NED的诊断依据，但其阴性结果可以作为排除的指标。我们的实验结果显示CgA、NSE、CD56表达率分别为21.62%、25.68%、41.89%，CD56阳性者31例，31例几乎包括全部CgA和NSE为阳性的患者，此外比较发现NSE阳性者CD56也均为阳性表达，说明CD56在敏感性上要优于NSE与CgA，综上，我们认为在对是否伴有NED进行判断时，建议CgA与CD56联合应用，二者同时阳性表达判断NED结果较为可靠，不建议再做NSE免疫组化检测。Itot等［7］认为，去雄激素治疗在神经内分泌分化调节中起到了重要作用神经内分泌分化的表达及表达的程度都可作为评估较差预后肿瘤的因素。我们的研究发现在74例前列腺癌中，CgA、NSE、CD56三种阳性表达分别为16例、19例、31例，三者阳性表达与病理分级均成正相关(PV0.05)，且随着病理分级的增加，出现表达增多。提示NE分化与前列腺癌的进展有关，说明NED对前列腺癌预后判断有重要价值。我们实验的随访资料表明，CgA、CD56同时阳性的3位死亡患者中有2例伴骨转移，经内分泌治疗后1例复发，提示NED可能与内分泌治疗疗效亦有关，如果本身未伴有神经内分泌分化，而进行内分泌治疗，可能在后期会导致肿瘤出现神经内分泌分化而使病情恶化，治疗更加困难，因此我们建议前列腺癌在进行内分泌治疗前应该进行CgA、CD56等神经内分泌分化的检测，如果存在神经内分泌分化，则应结合临床情况进行综合考量。可见NED对前列腺癌的预后判断及疗效评判有实际价值，免疫组化方法联合检测CgA、CD56是判断前列腺癌是否伴有NED较可靠的指标，在发病早期或者行内分泌治疗前检测到二者阳性均可能提示前列腺癌患者的预后较差。参考文献韩苏军，张思维,陈万青，等.中国前列腺癌死亡现状及流行趋势分析[J]中华泌尿外科杂志,2012,33(11):836-839.周勇，杨长海，李黎明.神经内分泌分化与PCa关系的研究进展[J]医学综述，2012,18：846-848.樊松，梁朝朝.前列腺神经内分泌细胞结构功能特点及其病理生理意义[J]安徽医药，2012,16(10):1389-1392.FoleyEF，GaffeyW，FriersonHF.ThefrequencyandclinicalsignificanceofneuroendocrinecellswithinstageIVadenocarcinomasofthecolon[J].ArchPatholLabMed,1998，122(10)：912—914.靳秀平，梁建芳，郑绘霞，等.PCa神经内分泌分化及其与Ki-67的关系[J].山西医科大学学报，2008,39(12)：1086-1152.沈周俊，王先进.PCa神经内分泌分化的研究进展[J].上海医学，2012，35(5)：359-362.ItoT.YamamotoS,OhmoY,etal.Up-regulationofneuroendocrinedifferntiationinprostatecancerafterandrogerdeprivationtherapy,degreeandandrogenindependence[J].OncolRep20018(6):1221-1224.VashchenkoN,AbrahamssonPA.Neuroendocrinedifferentiationinprostatecancer:implicati