传代培养

传代培养Tag内容描述：<p>1、传代培养步骤 准备 t 准备 t 熟悉步骤 t 洗手向老师 李 索要种子细胞 注意不要倾斜 倒置相差显微镜下观察细胞密度和大概形态 t 点燃酒精灯 t 手用酒精棉球消毒 t 打开D Hank s液瓶塞 打开前 后用酒精灯烤热玻璃瓶口。</p><p>2、细胞传代培养 消化法 具体操作 k 一 传代前准备 1 预热培养用液 把已经配制好的装有培养液 PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37 水浴锅内预热 v V f 5W 2 用75 酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手 I 3 正确摆放使用。</p><p>3、器械的清洗,2011.10.11,为何要进行清洗？,离体培养的细胞对任何有害物质都十分敏感，这些物质包括微生物、细胞残余物以及非营养成分的化学物质。 除一次性用品外，玻璃、塑料、橡胶和金属质地等其他培养用品，无论新。</p><p>4、细胞传代培养及细胞计数人癌细胞系传代培养 1. 观察： 培养细胞生长活跃，占瓶底 80%-90%，无污染； 2.弃废液： 倒掉瓶中培养液，尽量沥干液体； 3. 漂洗： 加 1ml 0.25%胰蛋白酶消化液漂洗 1次 ,弃去消化液； 4. 消化： 再加 1ml消化液漂洗 1次 ,倒掉大部分消化液 , 保留约 0.3ml,室温放置 3 5min； 5. 吹打： 镜下看到细胞收缩变园 , 加 1 2ml含血清培养液 , 用吸管按顺序轻轻吹打，避免出现泡沫； 6. 计数： 取样 ,计数 ,调整细胞浓度； 7. 接种及培养： 按 104 细胞 /ml接种 ,37 、 5%CO2 ，饱和湿度条件下培养。注意事项 细胞生长至。</p><p>5、Hela细胞传代培养 实验目的 掌握动物细胞培养的基本原理和方法 实验用具 离心管 2支 移液枪 每个台面一把 枪头 每个台面一盒 吸管 4根 培养皿 每组2个 实验药品 0 25 胰酶 D Hanks 1640培养基 培养板 常用玻璃器皿清洗浸泡 自来水 刷洗 洗衣粉 酸泡 24小时 流水冲洗 蒸溜水浸泡和冲洗 50 烘干 清洁液的配制 HeLa是HenriettaLacks的简称 Henrie。</p><p>6、Hela细胞传代培养实验目的：掌握动物细胞培养的基本原理和方法。实验用具：每组用具（移液枪一把，一盒枪头，长吸管一包（4-6根），培养瓶1个【48人为一组，看细胞数量来定，传代比例1；2最多1：3】。实验药品：0.25胰酶，DHanks，1640培养基实验原理：HeLa 是Henrietta Lacks的简称，Henrietta Lacks 是一位患有子宫颈癌的美国妇女的名字，在她死后，该细胞走被广泛散发到各研究机构，并无限次地繁殖分裂下去。实验前的准备:培养基的配置：RPMI-1640培养粉 1袋碳酸氢钠 2.0 g青、链霉素 各100单位毫升加三蒸水 至 1000ml, 过滤除菌。调节。</p><p>7、实验五 细胞的原代培养和传代培养 1. 实验目的 初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程。 2. 实验指导 细胞培养(cell culture)是从机体中将细胞取出后，在模拟生物体内生理条件下使其在体外生存。</p><p>8、HeLa细胞的传代培养 教学目标 1 理解细胞传代培养的概念和原理2 能按照操作规程进行细胞传代培养的操作 细胞传代培养的概念 概念 指细胞从一个培养瓶以1 2或其他比率转移 接种到另外的培养瓶中的培养 也叫做继代培养 HeLa细胞是一种贴壁生长的细胞 在进行传代时通常是采用胰蛋白酶消化 把细胞分散成单细胞再传代 培养细胞一代生长过程 实验前准备 1 材料 HeLa细胞2 试剂 0 25 胰蛋白酶。</p><p>9、细胞传代培养及细胞计数 人癌细胞系传代培养 1 观察 培养细胞生长活跃 占瓶底80 90 无污染 2 弃废液 倒掉瓶中培养液 尽量沥干液体 3 漂洗 加1ml0 25 胰蛋白酶消化液漂洗1次 弃去消化液 4 消化 再加1ml消化液漂洗1次。</p><p>10、动物细胞传代培养 一 实验目的 1 掌握消化法细胞传代培养的原理 2 了解细胞传代培养所需专用设备 试剂 3 学习细胞传代培养操作 二 实验原理 动物细胞原代培养成功 细胞生长增殖形成单层细胞后 会进一步扩展汇合 覆盖整个培养瓶底 细胞会因生存空间不足或密度过大 发生接触抑制 并引起营养物质枯竭和代谢产物积累 发生细胞中毒 影响正常生长 这时需要进行分离培养 细胞由原培养瓶按1 2或1 3稀释后传。</p><p>11、乳鼠肾细胞的原代培养 传代培养 目的要求 一 了解细胞原代培养 传代 继代 培养的基本方法和操作过程 二 初步掌握培养过程中的无菌技术 三 掌握在例置相差显微镜下观察培养细胞的形态和生长状况 用品 超净工作台 恒。</p><p>12、细胞传代培养 一 实验目的 初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程 为生物技术在医学上的应用打下基础 二 原理 从生物体中取出某种组织或细胞 模拟体内生理条件 在人工培养条件下使其生存 生长 繁。</p><p>13、细胞原代培养 传代培养 冻存和复苏 1实验原理 细胞培养可分为原代培养和传代培养 直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养 当原代培养的细胞增殖达到一定密度后 则需要做再培养 即将培养的细胞分散后 从一个。</p><p>14、Hela细胞传代培养 实验目的：掌握动物细胞培养的基本原理 和方法。 实验用具：离心管（2支），移液枪（每个 台面一把），枪头（每个台面一盒），吸 管（4根），培养皿（每组2个） 实验药品：0.25胰酶，DHanks，1640 培养基 培 养 板 常用玻璃器皿清洗 浸泡（自来水）、刷洗（洗衣粉）、酸泡（24小时） 、 流水冲洗、蒸溜水浸泡和冲洗、50烘干 清洁液的配制 HeLa 是Henrietta Lacks的简称，Henrietta Lacks 是一位患有子宫颈癌的美国妇女的名 字，在她死后，该细胞走被广泛散发到各 研究机构，并无限次地繁殖分裂下去。 细胞培养的甚本概念。</p><p>15、细胞传代培养 消化法 标准操作规程 一 原理 细胞在培养瓶长成致密单层后 已基本上饱和 为使细胞能继续生长 同时也将细胞数量扩大 就必须进行传代 再培养 传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法 同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程 悬浮型细胞直接分瓶就可以 而贴壁细胞需经消化后才能分瓶 二 材料和试剂 1 无菌磷酸生理缓冲液 PBS 2 胰酶 EDTA溶液 0 05 胰酶 0 53mM ED。</p>