PCR考核

PCR考核Tag内容描述：<p>1、rt-pcr（rt - pcr） I. Experimental apparatus and materials: 1, transfer guns: 1ml, 200 L, 20 L, 10 L, 2 L 2, suction head: 1ml, 200 L, 20 L 3, homogenate tube: 5ml 4, suction head table: put 1ml suction。</p><p>2、聚合酶链链反应应（PCR） 聚合酶链（PCR）技术 PCR反应体系 PCR技术过程及原理 . 聚合酶链链反应应技术术 聚合酶链反应（PCR）技术是一个能在试管内模仿细胞内 核酸复制过程，也就是能在体外特异地扩增一段特定核酸 序列的技术 . PCR的反应体系 参与PCR反应的成分： 模板 引物 dNTP Taq DNA 聚合酶 Mg2+ 缓冲液 . 模板：即为要被复制的核酸片段 条件：需要较高的纯度 . 引物：化学合成的寡核苷酸 条件： 1.一般长度为20个核苷酸 2.两条引物的序列不能互补 3.两条引物之间的Tm值不能相差太多 . dNTP:4种核苷酸 条件：4种核苷酸的浓度需要一。</p><p>3、实时定量PCR(real-timequantitativePCR),报告人：杨霞时间：2012-5-11,目录,一、实验原理,二、实验优点,三、实验缺点,四、实验应用,五、实验简介,实时定量PCR(real-timequantitativePCR)是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要取出PCR产。</p><p>4、PCR和RT-PCR PCR和RT-PCR基础 PCR基础 聚合酶链式反应（PCR）过程利用模板变性，引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列。这是一个指数增长的过程，因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板，使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术。一般，经过20-30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到。反应包括几个成分（表1。</p><p>5、普通PCR、原位PCR、反向PCR和反转录PCR的基本原理和操作步骤基础兽医系 陈洪博 S2008467普通PCR1概述聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称PCR，是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段。可看作生物体外的特殊DNA复制。DNA聚合酶（DNA polymerase I）最早于1955年发现，而较具有实验价值及实用性的Klenow fragment of E. Coli 则是于70年代的初期由Dr. H. Klenow 所发现，但由于此酶不耐高温，高温能使之变性, 因此不符合使用高温变性的聚合酶链式反应。现今所使用的酶(简称Taq polymerase), 则是于1976年从温泉中的细菌。</p><p>6、发展简史 定义 应用 特点 技术原理 反应体系与反应条件 反应条件的选择 PCR反应分类 20世纪60年代末70年代初， 人们致力于研究基因的体外分离技术。Kho ran a 千1971年最早提出核酸体外扩增的设想。但是， 当时的基因序列分析方法尚未 成熟， 对热具有较强稳定性的DNA聚合酶还未发现。 1985年， 美国科学家Kary M ullis发明了。</p><p>7、PCR和RT PCR PCR和RT PCR基础 PCR基础 聚合酶链式反应 PCR 过程利用模板变性 引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列 这是一个指数增长的过程 因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板 使其成为检测核酸的一。</p><p>8、第一章 PCR和RT PCR基础 PCR基础 聚合酶链式反应 PCR 过程利用模板变性 引物退火和引物延长的多个循环来扩增DNA序列 这是一个指数增长的过程 因为上一轮的扩增产物又作为下一轮扩增的模板 使其成为检测核酸的一种非常灵敏的技术 一般 经过20 30个循环得到的扩增产物就足够在溴化乙锭染色的凝胶上观察到 反应包括几个成分 表1 模板可以为纯化的基因组或质粒DNA 由RNA转化得到的cDN。</p><p>9、普通PCR 原位PCR 反向PCR和反转录PCR的基本原理和操作步骤 基础兽医系 陈洪博 S2008467 普通PCR 1概述 聚合酶链式反应 Polymerase Chain Reaction 简称PCR 是一种分子生物学技术 用于放大特定的DNA片段 可看作生物体。</p><p>10、普通 PCR 原位 PCR 反向 PCR 和反转录 PCR 的 基本原理和操作步骤 普通 PCR 1 概述 聚合酶链式反应 Polymerase Chain Reaction 简称 PCR 是一种分子生物学技术 用亍放大特定癿 DNA 片殌 可看作生物体外癿特殊 DNA 复制 DNA 聚合酶 DNA polymerase I 最早亍 1955 年収现 而较具有实验价值及实用性癿 Klenow fr。</p><p>11、RT PCR简介 点击 2815作者 来源 时间 2007 03 07 本站论坛 主要内容 RT PCR原理 RT PCR步骤 常见问题分析 两步法RT PCR 一步法RT PCR 两步法与一步法RT PCR比较 RT PCR主要用途 分析基因的转录水平 获取目的基因 合。</p><p>12、ddRT-PCR(差示反转录 PCR,又 mRNA 差别显示技术) mRNA 差 别 显 示 技 术 也 称 为 差 示 反 转 录 PCR（Differential Display of reverse Transcriptional PCR）简称为 ddRT-PCR。它是将 mRNA 反转录技术与PCR 技术二者相互结合发展起来的一种 RNA 图谱技术。 目前已广泛应用于分离鉴定组织特异性表达。</p><p>13、PCR技术与PCR技术的应用 何谓PCR 简单的说 PCR就是利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内 In Vitro 的大量合成 基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制 目前常用的技术 可以将一段基因复制为原来的一百亿至一。</p><p>14、巢式PCR：是一种变异的聚合酶链反应(PCR)，使用两对（而非一对）PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通PCR相似。第二对引物称为巢式引物（因为他们在第一次PCR扩增片段的内部）结合在第一次PCR产物内部，使得第二次PCR扩增片段短于第一次扩增。巢式PCR的好处在于，如果第一次扩增产生了错误片断，则第二次能在错误片段上进行引物配对并扩增的概率极低。因此，巢式PCR的扩增非常特异。</p><p>15、PCR及原位及原位PCR 的原理和方法的原理和方法 PCR的基本原理的基本原理 聚合酶链反应聚合酶链反应 Polymerase Chain Reaction PCRPolymerase Chain Reaction PCR 又称又称体外基因扩增方法体外基因扩增方法 这种技。</p><p>16、聚合酶链反应 PCR 聚合酶链 PCR 技术 PCR反应体系 PCR技术过程及原理 1 聚合酶链反应技术 聚合酶链反应 PCR 技术是一个能在试管内模仿细胞内核酸复制过程 也就是能在体外特异地扩增一段特定核酸序列的技术 2 PCR的反。</p><p>17、PCR及分子标记 资料来源 丁香园 生命经纬 PCR PolymeraseChainReaction Threesteps denaturation primerannealing polymerization PeoplesChoiceReaction 生命经纬 ThePCRcycle 95 steptodenaturetheduplexDNA Anannealingstepofaround55。</p><p>18、PCR 原理原理 聚合酶链式反应聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)，简称，简称 PCR，是一种分子生物学技术，用于，是一种分子生物学技术，用于 放大特定的放大特定的 DNA 片段。可看作生物体外的特殊片段。可看作生物体外的特殊 DNA 复制。复制。PCR 这项技术，被广泛地运这项技术，被广泛地运 用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病用在医学和生物学的实验室，例如用于判断检体中是否会表现某遗传疾病的图谱、传染病 的诊断、基因复制以及亲子鉴定。的诊断、基因复制以及亲子鉴定。 DN。</p>