实验五DNA的
实验五质粒DNA的制备实验目的1了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用2掌握质粒DNA分离和纯化的原理3学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法实验原理质粒是细菌内的共生型遗传因子它能在细菌中垂直...实验五DNA的粗提取与鉴定一、目的要求。掌握碱法提取质粒的方法。
实验五DNA的Tag内容描述:<p>1、实验五 质粒DNA的制备 实验目的 1 了解质粒的特性及其在分子生物学研究中的作用 2 掌握质粒DNA分离和纯化的原理 3 学习碱裂解法和煮沸法分离质粒DNA的方法 实验原理 质粒是细菌内的共生型遗传因子 它能在细菌中垂直。</p><p>2、实验五DNA的粗提取与鉴定,一、目的要求:,1.了解实验原理。2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法,观察提取出来的DNA物质。3通过本实验培养实验操作能力和观察能力。,二、实验原理,1.DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质当量浓度为0.14molL时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2.DNA不溶于酒精溶液。</p><p>3、实验五 小牛胸腺DNA的制备 一 实验目的 1 了解DNA的存在状态 增加感性认识 2 掌握DNA的制备方法以及细胞分级 细胞核制备 细胞膜裂解和解离DNA 蛋白复合体 DNP 的技术 3 学习用紫外分光光度计测定DNA含量的方法 二。</p><p>4、质粒 DNA 的提取 一、原理 采用碱变性发抽提取质粒 DNA。该法是基于染色体 DNA 与质粒 DNA 的变性预复性的 差异而达到分离目的的。在 PH 大于 12 的碱性条件下,染色体 DNA 的氢键断裂,双螺旋结 构解开变性。质粒 DNA 的大部分氢键也断裂,但超螺旋共价闭合环状结构的两条互补链不 会完全分离,当以 pH5.2 的乙酸钠高盐缓冲液调节其 pH 至中性时,变性的质粒 DNA 又恢。</p><p>5、实验五实验五植物总植物总 DNA的提取的提取植物基因组 DNA的提取琼脂糖凝胶电泳检测n 脱氧核糖核酸 (DNA)、核糖核酸 (RNA) n 与蛋白质结合在一起以核蛋白( DNP)的形式存在。在制备核酸时通常破坏细胞壁及细胞膜来使核蛋白释放出来。n 植物总 DNA包括细胞核 DNA和细胞核外 DNA,前者存在于细胞核内,后者存在于细胞质中有半自主性复制活性的细胞器内,例如线粒体 DNA(mtDNA)和叶绿体DNA(ctDNA)。核酸的存在形式nDNA为白色类似石棉样的 纤维状物 , RNA的纯品呈白色粉末或结晶 。核酸和核苷酸大都呈酸味。 nDNA、 RNA和核苷酸都是 极性化合。</p><p>6、实验二 质粒DNA的分离提取 实验目的 了解碱法提取质粒的原理; 掌握碱法提取质粒的方法。 实验原理 1946年,美国科学家Lederburg 首先 研究了细菌的性因子,并于1952年由 Lederburg正式命名为质粒。 质粒是一种细菌染色体外的、具有自主 复制能力的、双链DNA分子,大小可 为1kb到200kb,它随寄主细胞稳定遗 传。 质粒类型 质粒按复制方式分为两种类型: 严紧型质粒和松弛型质粒 严紧型质粒 复制要在蛋白质合成时和DNA聚合酶 的存在,只随染色体的复制而复制,拷 贝数少,每个细胞只有110个。 松弛型质粒 松弛型质粒的复制需要DNA聚合酶 ,。</p><p>7、1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 物证实验室认可 刑事技术2007年第3期 法医DNA实验室的DNA污染和防范 陈 松 (公安部物证鉴定中心,北京100038) 摘要: DNA污。</p><p>8、拟南芥T-DNA插入突变体的鉴定,实验目的,1熟练掌握植物基因组DNA快速提取的方法;2掌握利用PCR方法鉴定拟南芥T-DNA插入突变体的方法。,T-DNA插入鉴定的原理,突变体鉴定的步骤,T-DNA插入基因的基因组序列;T-DNA插入方向的确定;T-DNA插入位置的确定;引物设计;PCR扩增;电泳检测。,T-DNA插入基因的基因组序列,http:/www.arabidopsis.org,点击基因编号进入网页,http:/www.arabidopsis.org,点击sequence viewer进入,http:/www.arabidopsis.org,点击nucleotide view进入,http:/www.arabidopsis.org,点击突变体编号后进入的网页,http:/www.ara。</p><p>9、实验一 质粒DNA的提取,实验目的 实验原理 实验仪器、材料与试剂 实验步骤 实验结果及讨论,实验目的,了解碱法提取质粒的原理; 掌握碱法提取质粒的方法; 掌握DNA琼脂糖电泳的原理和方法。,实验原理,质粒是一种细菌染。</p><p>10、实验步骤 以洋葱为实验材料 1 称取30克已切碎的洋葱 放入研钵中 加入少量石英砂助研 倒入10mL 2mol L的氯化钠溶液 充分研磨 洋葱含有挥发性刺激物 有效减少刺激 才能使实验顺利进行 上课前 教师可先将洋葱放入冰箱。</p><p>11、精选文库 实验 DNA的粗提取与鉴定 目的要求 1 了解实验原理 2 学会DNA的粗提取和鉴定的方法 观察提取出来的DNA物质 3 通过本实验培养实验操作能力和观察能力 实验原理 1 DNA在NaCl溶液中的溶解度 是随着NaCl的浓度的变化而改变的 当NaCl的物质的量浓度为0 14mOl L时 DNA的溶解度最低 利用这一原理 可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出 2 DNA不溶于酒精溶液。</p><p>12、实验四 植物DNA的提取 一 实验目的 掌握CTAB法从植物叶片提取DNA的原理和方法 采用CTAB法从植物叶片中提取基因组DNA 并进行纯度分析 二 实验原理 1 核酸提取的基本原理 核酸是生物有机体中的重要成分 在生物体中核。</p><p>13、生物选修三 学案 编审教师:邢秀芝 班级: 姓名: 序号: 实验 DNA的粗提取与鉴定教学目的1 初步掌握DNA粗提取和鉴定的方法。2 观察提取出来的DNA物质。实验原理1 DNA在NaCl溶液中的溶解度是随NaCl的浓度变化而改变的。DNA在014mol/L的NaCl溶液中的溶解。</p><p>14、DNA的粗提取与鉴定,一、实验目的学习和掌握用高盐法从植物材料中提取DNA的原理和方法。,二、实验原理1.DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。2.DNA不溶于酒精,但某些蛋白质则溶于酒精。3.DNA与二苯胺反应呈现蓝色。,三、实验用品及仪器,实验材料:菜花、洋葱实验器材:研钵、烧杯、量筒、玻璃棒、滤纸、漏斗实验试剂:盐、蒸馏水、洗洁精、冷酒精、二苯胺,30g菜花,DNA的粗提取与鉴定,研。</p><p>15、实验四、质粒DNA的转化,一 实验目的,二 实验原理,三 材料仪器,四 实验步骤,五 实验结果图,六 结果讨论,七 思考题,一、实验目的,学习将外源质粒 DNA 转入受体菌细胞并筛选转化体的方法。,转化(transformation):把外源DNA分子导入到某一宿主细菌细胞的过程称为转化。当细菌处于容易吸收外源DNA的状态即感受态时,转化最易发生。 当受体菌处于感受态时,转化混合物中的DNA形成抗DNase的羧基钙磷酸复合物粘附于细胞表面,经42短时间热冲击处理,促进细胞吸收外源DNA。在培养基上生长数小时后,球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中,载体。</p><p>16、第 1 页 选修 3 补充材料 共 4 页 第 2 页 选修 3 补充材料 共 4 页 实验 DNA 的粗提取与鉴定 一 实验原理 1 DNA 在 NaCl 溶液中的溶解度随 NaCl 浓度的不同而不同 当 NaCl 的浓度为 0 14mol L 时 DNA 的溶解度最 低 利用这一原理 可使溶解在 NaCl 溶液中的 DNA 析出 2 DNA 不溶于酒精溶液 但是细胞中的其他许多物质溶于酒精溶液。</p><p>17、6.1-2DNA的结构,DNA是噬菌体的遗传物质,绝大多数生物的遗传物质均是DNA,DNA的分子结构特点是什么?如何承担遗传物质的功能?,1953年美国的生物学家沃森和英国科学家克里克建立了DNA双螺旋结构,使生命科学研究进入分子水平。,任务:制作DNA分子模型!,1、DNA分子的基本单位,2、绘制DNA分子的平面图,阅读教材P40页,在任务单中选择正确的方案,补绘DNA分子平面图。,(1)脱氧核。</p>