四大基本组织的观察

解剖与生理学实验内容及学时安排序号 实验内容 学时 任课老师1 绪论及四大基本组织的观察 2 冯 哲2 人体骨与骨连结的观察 2 冯 哲3 心脏的形态结构观察 3 冯 哲4 刺激频率对骨骼肌收缩的影响 4 陈祖建5 离体蛙心灌流实验 4 陈祖建6 1、心血管活动的影响因素实验2、呼吸运动调节实验 5 陈祖建7 影响尿生成的因素实验 4 陈祖建8 1、大脑皮层运动机能定位及去大脑僵直实验2、小白鼠脊髓半横切实验 4 陈祖建考核方法1、考勤（ 10%）2、课前预习（ 10%）3、课堂表现：规范操作 +随堂抽查（ 40%）4、实验报告：书写工整、画图及文字说明清楚、分析准确（ 30%）5、实验室清洁及实验设施的维护 （ 10%） 实验一、四大基本组织的观察目的要求 联系功能观察了解四种基本组织的结构特点及分布。 学习体腔膜或肠系膜平铺片的制作方法。 学习疏松结缔组织新鲜平铺片的制作方法及活体染色方法。材料与器械 蛙，小鼠，解剖器械一套（手术剪、解剖针、眼科镊），注射器及针头，滴管，盖玻片，显微镜， 1%硝酸银水溶液， 1%台盼蓝生理盐水溶液，甘油，蒸馏水，组织切片实验步骤细胞 cell + 间质 cytoplasm基本组织 tissue（上皮组织、结缔组织、肌肉组织、神经组织）器官 organ系统 system上皮组织单层扁平上皮1、蛙体腔膜或肠系膜平铺片的制作和观察： 将蛙双毁髓处死，取体腔膜或肠系膜放于载玻片上，以解剖针 将其挑开展平，稍晾干； 加 1%硝酸银水溶液数滴于标本上，将标本浸盖； 立即放在日光下晒 35min（或在日光灯下 1015min）； 至标本变为浅褐色时，倾去载玻片上的溶液，用蒸馏水洗净，加上 12滴甘油，盖上盖玻片，即可用于显微镜观察。2、单层扁平上皮组织切片（镀银染色）的观察表面观：细胞呈多边形，胞核扁圆形，位于细胞中央垂直观：细胞扁平，中央有核处较厚，其余部分胞质很薄图 1、单层扁平上皮 3.540 蟾蜍肠系膜涂片 镀银染色单层立方上皮取甲状腺切片（ HE染色）观察：表面观：细胞呈六角形垂直观：细胞立方形，核圆居于细胞中央图 2、甲状腺 H-E染色 3.540 滤泡 滤泡旁细胞 滤泡上皮细胞 单层柱状上皮取小肠上皮切片观察：表面观：细胞呈六角形垂直观：细胞呈柱状，核长圆形，靠近基底部图 3 单层柱状上皮 人小肠 H-E染色 3.540 杯状细胞 纹状缘假复层纤毛柱状上皮由柱状细胞、梭形细胞、锥体形细胞和杯状细胞构成游离面常见有纤毛 基细胞 一种腺细胞图 4、假复层纤毛柱状上皮 人气管 H-E染色 3.540 纤毛 杯状细胞 基膜复层扁平上皮复层扁平上皮 (stratified squamous epithelium)由基底面向游离面依次是：基底细胞 多边形细胞 扁平细胞皮肤的表皮 口腔、食管、阴道角化 未角化图 5 复层扁平上皮 H-E染色 3.540 A 未角化型 人食管 表皮细胞B 角化型 人手指表皮 真皮乳头变移上皮取膀胱切片（ HE染色）观察：特点：上皮的层次和细胞形态随所在器官的收缩或舒张而改变由基底面向游离面依次是：基底细胞 中间层细胞 表面细胞（盖细胞）图 6 变移上皮 人膀胱 H-E染色 3.540 盖细胞结缔组织疏松结缔组织1、疏松结缔组织活体染色标本的制作与观察： 取小鼠一只，皮下注射 1%台盼蓝生理盐水溶液少许，3060min后，颈椎脱臼法处死； 剪开皮肤，在注射处附近剪取一小块皮下结缔组织，置于载玻片上； 双手各持一解剖针将组织平铺于载玻片上； 待标本稍干后，加 12滴甘油，盖上盖玻片即可观察。2、疏松结缔组织切片的观察：图 7、 兔皮下组织铺片（ A）和腹膜铺片（ B） 520A 活体注射锥虫蓝 +醛复红染色 +偶氮洋红染色 紫蓝色细丝为弹性纤维，粉红色条带为胶原纤维 B 活体注射锂卡红 +铁苏木精染色 成纤维细胞 巨噬细胞致密结缔组织取跟踺纵切片（ HE染色）观察：图 8、致密结缔组织人肌腱 HE染色 520 腱细胞成行排列胶原纤维成束排列脂肪组织取小肠切片（ HE染色）观察：特点： HE染色标本中，脂滴被溶解，细胞呈空泡状，胞 核和胞质被挤向细胞的一侧（宝石戒指状）图 9、 脂肪细胞 H-E染色 3.540细胞核软骨组织蟾蜍胸骨剑实软骨细胞标本的制作与观察： 将蟾蜍处死，剪取胸骨剑突最薄的部分一小块，放入载玻片上的 1/3000中性红染液滴中，染色 510min； 用吸管吸去染液，滴加 Ringer液，盖上盖玻片进行观察； 在高倍镜下，可见软骨细胞为椭圆形，细胞核及核仁清楚易见，在细胞核的上方胞质中，有许多被染成玫瑰红色大小不一的泡状体，这一特定区域叫 “高尔基区 ”， 即液泡系。骨组织 取骨横磨片观察：特点：由于骨组织内的软组织（神经、血管、淋巴管、结缔组织）及细胞都已腐烂，仅剩下空腔和管道。长骨骨干部的横断面，在低镜下可见 34层外环骨板、 12层内环骨板、内外环骨板之间的骨单位和间骨板。骨单位是由中央管和其周围呈同心圆排列的多层骨板构成。高倍镜下观察可见骨板内或骨板间的卵圆形骨陷窝及骨陷窝向四周发出的骨小管。图 10、长骨磨片 540 黏合线 血液采血、涂片、染色制作血液涂片： 取末捎血一滴置于玻片的一端，左手持载玻片，右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴，使推片与载片夹角保持 3040度平稳地向前移动，载片上保留下一薄层血膜。 手持玻片在空气中挥动，使血膜迅速干燥，以免血细胞皱缩。 加瑞氏染液 23滴，覆盖整个血膜，固定 0.51.0min，滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水，与染料混匀染色 510min。 用清水冲去染液，待干燥后即可置于显微镜下进行观察。镜下观察血涂片。低倍镜下分辨白细胞和红细胞，高倍镜观察、辨别各种血细胞和血小板。图 11、人血液涂片 Wright染色 3.31001、红细胞质 2、中性粒细胞（杆状核） 3、中性粒细胞（分叶核） 4、嗜酸性粒细胞 5、嗜碱性粒细胞 6、单核细胞 7、淋巴细胞肌肉组织骨骼肌取骨骼肌纵、横切片（ HE染色）观察：观察肌纤维的形态、胞核的形状，纵切片上还可见明显的横纹，比较纵切和横切面上的细胞核的位置和结构差异。 图 12， 13、骨骼肌纵横切片 3.340 肌细胞核 肌原纤维心肌取心室肌纵、横切片（ HE染色）观察：镜下可见纵切片上，心肌纤维彼此分支吻合成网状，卵圆形胞核位于中央。缩小显微镜虹彩光圈可见心肌纤维的横纹，但不如骨骼肌纤维明显。在肌纤维及其分支上可见深蓝色的梯形闰盘。横切片上，心肌纤维为不规则的圆形，有或无胞核，注意细胞核的形态和位置。图 14， 15 、人心肌纤维纵切片 HE 染色 3.340 闰盘 脂褐素 平滑肌 取小肠纵、横切片（ HE染色）观察：观察平滑肌纤维的形态、胞核的形状，比较纵切和横切面上的结构差异 。图 15，