胃癌癌前病变相关分子的研究进展

胃癌癌前病变相关分子的研究进展胃癌癌前病变相关分子的研究进展通大附院消化科 毛振彪胃癌多基因改变多因素参与多阶段发生遗传环境不明确 ！胃癌的发生机制正常胃粘膜浅表性胃炎萎缩性胃炎肠上皮化生异型增生肠型胃癌胃癌的发生机制Correa学说学说Correa P. Cancer Res, 1992 萧树东、许国铭，中华胃肠病学， 2008胃癌的发生机制伴随分伴随分子学事件子学事件基因基因蛋白质蛋白质酶酶n 正常情况下， CDX2特异性表达于肠粘膜 , 正常胃粘膜不表达， CDX2可异位表达于肠化生上皮、胃腺癌和人胃腺癌细胞株。n CDX2在低级别上皮内瘤变、高级别上皮内瘤变和肠型胃癌中分别有 73.3%、 85.5%、 91.1%表达，在肠上皮化生的胃粘膜标本 89.7%为阳性，而在正常胃粘膜不表达，提示CDX2的表达是胃粘膜癌变过程中的早期事件。Kim HS, J Gastroenterol Hepatol, 2006. 1、尾型同源盒转录因子（ CDX2）肠型细胞表型蛋白转录调控蛋白 激活蛋白类n 分布于胃肠道、呼吸道、泌尿生殖道及乳腺等多种上皮组织中，对正常黏膜起保护作用。n 粘蛋白 13在胃粘膜癌中可出现异常表达，肠上化生中 90%、胃癌中（主要为肠型胃癌） 64.9%过表达（ P 0.001）、而正常胃粘膜则无异常，提示粘蛋白 13可作为肠上皮化生及早期胃癌的分子标志。蛋白类2 、粘蛋白 13Shimamura T, Cancer Sci, 2005n GP87正常胃、肠、胰、肝组织中均不表达。n 在慢性萎缩性胃炎和肠上皮化生组织超过 77.8%阳性，而在正常粘膜均为阴性，具有显著差异，因而认为 GP87可作为胃癌癌前病变的标志。蛋白类3、 glycoprotein 87（ GP87）Qiao SX, Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2003 n 应用微点阵技术从九个潜在指标中筛选出三个分子标志Claudin-4, MKK4和 14-3-3sigma （ stratifin）。从正常胃粘膜、肠上皮化生、异型增生到胃癌， Claudin-4阳性表达分别为 15%、 100%、 100%、 98.4%； MKK4分别为 8%、 89%、 100%、 94%； stratifin为 3%、 97%、 100%、 92%。作者认为三者联合应用对胃癌癌前病变的敏感性和特异性几乎达到 100%。蛋白类4 、 Claudin-4， MKK4和stratifin Cunningham SC, Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2006.n N-连接糖蛋白受体，跨膜蛋白，正常组织中仅存在于肠粘膜细胞，不在肠外组织中表达。n Park等检测发现胃腺癌组织、癌旁组织 GC-C mRNA的阳性率分别为 8/9和 6/7，而 3例正常胃粘膜不表达 GC-C mRNA。n Birbe等发现所有肠型胃癌和肠型异型增生均表达 GC-C蛋白，且 GC-C异位表达与 CDX2对其激活有关。 酶类1、鸟苷酸环化酶 C（ GC-C）Park J, Cancer Epidemiol Biomarkers Prev, 2002.Birbe R, Hum Pathol, 2005. 酶类在胃癌中表达率（分别为 20/30，19/30）显著高于远癌胃组织（ 0/30， 0/30）毛振彪，中华消化杂志， 2008朱惠君，中华医学杂志， 2008毛振彪，江苏医药， 20081、鸟苷酸环化酶 C（ GC-C）酶类GCC和 CDX2在肠型胃癌中的表达高于弥漫型，与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、淋巴结转移等因素无关毛振彪，中华消化杂志， 2008朱惠君，中华医学杂志， 2008毛振彪，江苏医药， 20081、鸟苷酸环化酶 C（ GC-C）酶类在肠上皮化生和胃癌中 GC-C与CDX2的表达呈正相关毛振彪，中华消化杂志， 2008朱惠君，中华医学杂志， 2008毛振彪，江苏医药， 20081、鸟苷酸环化酶 C（ GC-C）GC-C和 CDX2蛋白表达n 免疫荧光检测 ， GC-C阳性信号表达于膜上， CDX2阳性信号主要位于细胞核内n GC-C和 CDX2在远癌胃组织不表达，在肠上皮化生（分别为 39.1%、 39.1%）、异型增生（ 55.6%、 55.6%）及胃癌（ 56.7 %、 60.0 %）组织中表达的阳性率远与远癌正常胃黏膜组织之间有显著性差异（ P 0.01)，其它组间无统计学差异 n 胃癌组织 GC-C、 CDX2蛋白表达与组织学类型（ Lauren分型）有关，在肠型胃癌组织中表达阳性率显著高于弥漫型胃癌（ P值分别为 0.009和 0.024），与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、淋巴结转移等因素无关（ P 0.05）。免疫荧光方法检测 GC-C（ 400） A：远癌胃组织； B：肠上皮化生； C：异型增生； D：胃癌； E：肠癌； F：阴性对照免疫荧光方法检测 CDX2（ 400） A：远癌胃组织； B：肠上皮化生； C：异型增生； D：胃癌； E：肠癌； F：阴性对照GC-C和 CDX2的异常表达与胃黏膜癌变的发生有关，可能 参与人胃腺癌致癌过程的调节，检测 GC-C与 CDX2有助于早期胃癌和胃癌前病变诊断酶类毛振彪，中华消化杂志， 2008朱惠君，中华医学杂志， 2008毛振彪，江苏医药， 20081、鸟苷酸环化酶 C（ GC-C）n 正常组织中不表达，由炎症介质、细胞因子、致癌物质等诱导产生后通过产生前列腺素等影响有丝分裂、促进细胞增殖、抑制凋亡发生及降低免疫监视功能。n 研究显示 COX-2表达强度与肠上皮化生有肯定的相关性（ P 0.001）。在慢性浅表性胃炎、肠上皮化生、不典型增生及胃癌中的表达呈递增趋势分别为 10%、 37.8%、 41.7%、 69.5%，提示 COX-2是胃粘膜癌变过程中相对早期事件。 酶类2、环氧合酶 -2 （ COX-2）Sheu BS, Clinical Cancer Res, 2003.Sun WH, World J Gastroenterol, 2004.n 胃蛋白酶原是胃蛋白酶的前体。n 有报道，正常胃粘膜、浅表性胃炎、溃疡、伴肠上皮化生的胃萎缩性胃炎、异型增生、胃癌等各组阳性率分别为 100%、 100%、 89.2%、 14.3%、 15.2%、 2.4%，在正常、癌前病变和胃癌之间具有显著差异（ P 0.05）。 酶类3、 胃蛋白酶原Ning PF, World J Gastroenterol, 2005.n 天冬氨酸特异的半胱氨酸蛋白酶，直接参与切割细胞多种蛋白导致细胞凋亡，又称死亡蛋白酶。n 在萎缩性胃炎、肠上皮化生、轻中度不典型增生粘膜中表达上调，而在重度不典型增生及胃癌组织中表达下调，两者具有显著性差异。 酶类4、 Caspase-3杨琳 , 中华肿瘤杂志， 2006n 是一种核酸蛋白酶，通过合成端粒中重复 DNA序列而维持端粒的长度。n 端粒酶 mRNA在正常胃粘膜、肠化、异型增生和胃癌中的阳性率分别为 0、 39.13%、 66.67%和 85.37%，而其蛋白分别为0、 30.43%、 60.00%和 78.05%，其变化与胃粘膜癌变发展方向一致。 酶类5、端粒酶（ telomerase）Wang W, World J Gastroenterol, 2004n 在多种肿瘤细胞中表达，并且促进肿瘤细胞增殖。n 在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中增殖诱导配体表达水平显著高于正常胃粘膜和慢性胃炎，提示其在胃癌病变演进过程中呈累积和渐进趋势。 基因类1 、增殖诱导配体（ APRIL）Hahne M, J Exp Med, 1998.毛振彪 , 中华消化杂志， 2005.基因类1 、增殖诱导配体（ APRIL）* # P 0.01胃癌 vs癌旁正常组织； P 0.05 肠型胃癌 vs.癌旁正常组织 胃癌组织 APRILmRNA表达水平明显高于癌旁正常组织；肠型胃癌中的表达高于弥漫型毛振彪，第二军医大学学报， 2008毛振彪，中华消化杂志， 2008（二审）基因类1 、增殖诱导配体（ APRIL）APRIL在肠型胃癌中的表达高于弥漫型（在肠型胃癌中的表达高于弥漫型（ P 0.05），与年龄、性别、病灶大小、临床），与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转病理分期、分化程度、浸润深度、淋巴结转移等因素无关。移等因素无关。 毛振彪，第二军医大学学报， 2008毛振彪，中华消化杂志， 2008（二审）APRIL蛋白表达 n 胃癌组织中 APRIL蛋白阳性表达呈绿色荧光，位于胞膜或胞质（图 1: A1），APRIL和 TACI双标时当两者表达同一部位时呈黄色（图 1: D2）。 APRIL蛋白表达阳性率为 86.7 % （ 26/30）n 30例远癌正常组织全部阴性（ 0/10）（图1: A2） 胃中分化腺癌 远癌正常组织 n 胃癌组织中 APRIL 蛋白表达在不同的肿瘤大小（直径 5cm和 5cm）、分化程度（高、中和低分化）、侵润深度（是否侵及浆膜层）、淋巴结转移（有和无）和TNM分期（ + 和 + ）之间无显著差异 基因类1 、增殖诱导配体（ APRIL）APRIL异常高表达与胃黏膜癌变的发生发展有关，检测其表达水平可能有助于早期胃癌和胃癌前病变诊断。 毛振彪，第二军医大学学报， 2008毛振彪，中华消化杂志， 2008（二审）n DNA甲基化包括总基因组 DNA甲基化水平降低、癌基因的低甲基化、抑癌基因的高甲基化等。n 研究发现， p16、配修复基因 hMLH1在慢性胃炎、肠上皮化生、胃腺瘤和胃癌甲基化逐渐频繁；从慢性胃炎、肠上皮化生、胃腺瘤到胃癌平均甲基化基因数具有显著的差异。n p16基因甲基化与胃粘膜异型增生的癌变密切相关，可能成为预测异型增生癌变的良好分子标记物。 基因类2 、 DNA甲基化异常Kang GH, Cancer Res, 2001.Sun Y, Clin Cancer Res, 2004.DNA甲基化能引起染色质结构、 DNA构象、 DNA稳定性及 DNA与蛋白质相互作用方式的改变，从而控制基因表达 n 人类基因组多样性中约 90%是单核苷酸多态性（ SNP-单个碱基的转换或颠换所引起 ）， SNP被称为第三代遗传标记。近年报道显示肠上皮化生与 SNP密切相关。n Pereira等检测 320名葡萄牙人 COX-2基因，结果 -765C等位基因频率在健康人、萎缩性胃炎或肠上皮化生、胃腺癌三组人群中分别占 38%、27%、 51%，多因素回归分析显示在伴有萎缩性胃炎或肠