自111王学良转基因技术演讲

转基因技术的发展自 111班王学良110924o 什么是转基因o 转基因技术的起源与发展o 转基因技术的方法与步骤o 转基因技术对社会的影响o 转基因技术的利弊概念转基因技术是将 人工分离 和 修饰过的基因 导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达 ，引起生物体的性状的可遗传的修饰，这一技术称之为转基因技术。起源与发展历史背景上世纪五十年代 科学家揭示了 DNA双螺旋结构 。1973年 ，发明了 DNA重组技术 。1978年 ，科学家把来源于人的胰岛素基因植入大肠杆菌，让大肠杆菌合成人胰岛素1980年 科学家 Gordon用显微注射法获得转基因小鼠 1982年 美国科学家 Palmiter 培育成 “超级小鼠 ”1982年 重组胰岛素为第一种获准上市的重组 DNA药物 。 1983年世界上第一例转基因植物 一种含有抗生素药类抗体的烟草在美国成功培植。1993年世界上第一种转基因食品 转基因晚熟西红柿正式投放美国市场。这种西红柿耐存储的特性使其货架寿命大大延长。1996年世界转基因作物种植总面积仅为 170万公顷2002年全球转基因农作物种植面积已扩大到 5870万公顷。迄今全世界已有近 50个国家和地区开展转基因作物种植实验，有 16个国家的近 600万农民以种植转基因作物为主。转基因植物 （ TRANSGENIC PLANT）o 是指将从动物、其他植物或微生物中分离出的目的基因，导入到植物的基因组中，并且可以稳定遗传给下一代的一类植物，可以是原有性状发生改变，如抗虫、抗病、抗逆、高产、优质等。 转基因啤酒德国一家公司研制的一种转基因酵母生产的啤酒，其口感和味道都优于常规啤酒。转基因香瓜与普通香瓜的比较左图为存放了 5天的普通香瓜；右图为存放了 15天后的香瓜常用的植物转基因方法o 花粉管通道法o 农杆菌转化法o 基因枪转化法o 细胞融合法等 幼胚 愈伤组织 发 芽 生 根 转基因苗脱分化 分化转基因小麦流程细胞分裂素和生长素的相对浓度控制着根和芽的分化。过早分化形成根，会抑制芽的分化，不利于再生成苗。基因枪转化抗性愈伤筛选授粉后授粉后 11-12天的天的小麦品种幼胚小麦品种幼胚诱导培养基3-7天PDS1000/He基因枪转化基因枪转化培养 3-7天筛选20天筛选培养基筛选培养基分化培养基分化培养基移栽至大田移栽至大田根长3生根培养基生根培养基1-2月炼苗1周质粒筛选标记p35SIH3载体的酶切位点与图谱 将籽粒 用 70%酒精漂洗 2-3 分钟 ，再用 0.1%的氯化汞消毒 15 分钟，无菌水洗涤 3-4 次，（ 2%次氯酸钠 ）在无菌条件下 用接种针 挑出幼胚，盾片朝上，接种于幼胚诱导培养基上 。 25 ，暗培养。注意：1、无菌操作。2、让幼胚与培养基充分接触，保证翻转皿时幼胚不掉下来。接种1）称取 60mg金粉 (BioRad, 1m 直径 )或钨粉 (M10)于1.5ml 离心管中；2）加入新鲜配制的 1ml 70%乙醇，用旋涡混合器或超声波充分震荡 3 5min 混合，静置 1min；3） 10000rpm 离心 5min，使金粉沉淀，去上清；4）重复以下步骤三次： 加入 1ml 消毒蒸馏水； 旋涡混合器震荡 1min，静置 1min； 10000rpm 离心 2min，使金粉沉淀，去上清液；5）加入灭菌的 50%的甘油，使金粉浓度达 60mg/ml；金粉处理1）旋涡振荡 5min，使在 50%的甘油中的 金粉沉淀成为悬浮液 ；2）去掉粗堆集，取 50l（ 3mg）悬浮混合液于 1.5ml 离心管中；3）同时振荡，顺序加入 5l 质粒 DNA(1g/l)、 50l 2.5M CaCl2 和 50l 0.1M 亚精胺 (现配 )；4）继续振荡 2 3min，静置 1min；5） 10000rpm 离心 2min，使金粉沉淀，去上清液；6）加入 140l 70%乙醇，不破坏沉淀块，弃去上清液；7）加入 140l 70%乙醇，不破坏沉淀块，弃去上清液；8）加入 60l 100%乙醇，指弹管壁几次，使之重新悬浮，然后低速旋涡 2sec；9）每次取 10l 放在载体膜中央，每次要尽量取出等量的（ 500g）微粒，并尽量做到均匀铺在载体膜（ 高温高压灭菌）中央 1cm 直径内，自然条件下干燥。子弹制备 注意无菌操作。1）打开稳压电源，真空泵及氦气瓶阀的开关，瞬时针转氦气调节阀，调整系统压力为 1300psi；2）按动真空键，抽真空至真空度为 27 28Hg 时，迅速按下 Hold 键，接着按住发射键，并保持不动，直到轰击为止，空放 2 3枪；3）按通气键待真空表回零后，打开样品室门，开始再一次操作；4）取包被 DNA 的金粉悬液 4l 均匀涂抹在无菌微弹载体膜的中央区域 ，于超净工作台上吹干备用；基因枪转化5） 将可裂膜放入可裂圆片的托座中，再将可裂圆片顺时针拧到气体加速上，用专用工具拧紧；6）将阻挡网先装入载体固定器的托座中，然后将涂有 DNA 的微弹药载体膜面朝下装入，旋紧固定盖，插入真空室的上层部位；7）将受体材料放入样品室，射程可选 60mm 或 90mm，关好门；8）抽真空，轰击，排气，取出样品，用封口膜将受体材料的培养皿封好；9）关机，把氦气瓶的总开关旋紧，打一次空枪，待氦压表（ 2个表的）指针回到零后，再逆时针旋转氦压表调节阀，接着关闭基因枪的总开关及变压器开关。注意事项：1、点膜时金粉 -DNA 悬浮液要充分悬匀；2、微弹载体上金粉 DNA 的分布直接影响转化效率；3、维持一定真空度的时间要尽量短。4、系统压力只需比可裂膜爆裂压力高出 50 200psi 即可。转基因动物o 转基因动物，是指染色体基因组中整合有 外源基因 并能遗传给后代的一类动物。含有荧光水母基因的小猪，左为荧光小猪，右为正常小猪。转基因技术的影响o 对现实生活的影响o 转基因作物的潜在生态风险对现实生活的影响o 2000年 3月，克隆小猪 “横空出世 ”。随之而来，欧美之间也为转基因食品吃与不吃的问题争论不休。 90年代初，市场上第一个转基因食品出现在美国，是一种保鲜番茄，这项研究成果本是在英国研究成功的，转基因食品一发不可收。 据统计，美国食品和药物管理局确定的转基因品种已有 43种。 美国是转基因食品最多的国家， 60%以上的加工食品含有转基因成分， 90%以上的大豆、 50%以上的玉米、小麦是转