GB 5009.83-2016 食品安全国家标准 食品中胡萝卜素的测定

016 前 010食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中003食品中胡萝卜素的测定和988果汁测定方法 010相比,主要变化如下:标准名称修改为“食品安全国家标准 食品中胡萝卜素的测定”;增加了普通食品的前处理方法;增加了需要区分修改了胡萝卜素的结果表达。0161 食品安全国家标准食品中胡萝卜素的测定1 范围本标准规定了食品中胡萝卜素的测定方法。本标准色谱条件一适用于食品中谱条件二适用于食品中 原理试样经皂化使胡萝卜素释放为游离态,用石油醚萃取二氯甲烷定容后,采用反相色谱法分离,外标法定量。3 试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为6682规定的一级水。活力 木瓜蛋白酶:酶活力5U/ 氢氧化钾(水硫酸钠(坏血酸(油醚:沸程3060。醇(色谱纯。腈(色谱纯。氯甲烷(色谱纯。基叔丁基醚:色谱纯。氯甲烷(色谱纯。水乙醇(优级纯。己烷(色谱纯。,615剂配制氢氧化钾溶液:称固体氢氧化钾500g,加入500用前配制。40488纯度95%,0162 准物质。40235纯度95%,或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。00g/准确称取二氯甲烷溶解,转移至100下避光储存,使用期限不超过3个月。标准储备液用前需进行标定,具体操作见附录A。00g/二氯甲烷定容至刻度。00g/准确称取二氯甲烷溶解,转移至100下避光储存,使用期限不超过3个月。标准储备液用前需进行标定,具体操作见附录A。注:储存过程中受到温度、氧化等因素的影响,会出现部分全反式9Z)33Z)55Z)果采用色谱条件一进行按照附录计算全反式 00g/二氯甲烷定容至刻度。谱条件一用):二氯甲烷定容至刻度, 谱条件二用):二氯甲烷定容至刻度,0g/ 浆机。速粉碎机。温振荡水浴箱:控温精度1。转蒸发器。吹仪。外效液相色谱仪(带紫外检测器。5 分析步骤注:整个实验操作过程应注意避光。0163 样制备谷物、豆类、坚果等试样需粉碎、研磨、过筛(蔬菜、水果、蛋、藻类等试样用匀质器混匀;固体粉末状试样和液体试样用前振摇或搅拌混匀。4冰箱可保存1周。处理蔬菜、水果、菌藻类、谷物、豆类、蛋类等普通食品试样准确称取混合均匀的试样1g5g(g(转至250入15601水浴振荡30果试样中蛋白质、淀粉含量较高(10%),先加入1550温水、上瓶塞混匀后,置551恒温水浴箱内振荡或超声处理30加入75601水浴振荡30化加入25上瓶塞。置于已预热至532恒温振荡水浴箱中,皂化30出,静置,冷却到室温。处理固体试样:准确称取1g5g(置于250入15050温水混匀。淀粉试样可以不加盖上瓶塞,置551恒温水浴箱内振荡或超声处理30体试样:准确称取5g10g(置于250入1化取预处理后试样,加入75匀,再加入25上瓶塞。置于已预热至532恒温振荡水浴箱中,皂化30出,静置,冷却到室温。注:如皂化不完全可适当延长皂化时间至1h。样萃取将皂化液转入500入100轻摇动,排气,盖好瓶塞,室温下振荡10水相转入另一分液漏斗中按上述方法进行第二次提取。合并有机相,用水洗至近中性。弃水相,有机相通过无水硫酸钠过滤脱水。滤液收入500旋转蒸发器上402减压浓缩,近干。用氮气吹干,上瓶塞,充分溶解提取物。出初始约1用。注:必要时可根据待测样液中胡萝卜素含量水平进行浓缩或稀释,使待测样液中0g/0164 谱条件一(适用于食品中考色谱条件参考色谱条件列出如下:a) 色谱柱:长150径5m,或等效柱;b) 流动相:醇乙腈水=;基叔丁基醚;表1 梯度程序时间/005920200100B%04180801000c) 流速:d)检测波长:450nm;e)柱温:301;f)进样体积:20L。制算全反式根据保留时间定性,测定浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。反式反式P,计算方法见附录B),按式(1)计算全反式F=P(1)式中:全反式位为峰面积毫升每微克(AUg);全反式位为峰面积(位为微克每毫升(g/全反式。样测定在相同色谱条件下,将待测液注入液相色谱仪中,以保留时间定性,根据峰面积采用外标法定量。 色谱条件二(适用食品中考色谱条件参考色谱条件列出如下:0165 a) 色谱柱:长250径5m,或等效柱;b)流动相:三氯甲烷乙腈甲醇=31285,c)流速:d)检测波长:450nm;e)柱温:351;f)进样体积:20L。准曲线的制作将以保留时间定性,测定峰面积。以标准系列工作液浓度为横坐标,峰面积为纵坐标绘制标准曲线,计算回归方程。样测定在相同色谱条件下,将待测试样液分别注入液相色谱仪中,进行保留时间定性,根据峰面积外标法定量,根据标准曲线回归方程计算待测液中:本色谱条件适用于于总胡萝卜素10%)的食品试样中 谱条件一试样中)计算:V100m(2)式中:试样中位为微克每百克(g/100g);从标准曲线得到的待测液中位为微克每毫升(g/V试样液定容体积,单位为毫升(100将结果表示为微克每百克(g/100g)的系数;m试样质量,单位为克(g)。试样中)计算:9Z+15ZV100RFm(3)式中:试样中位为微克每百克(g/100g);试样待测液中全反式位为峰面积(试样待测液中9位为峰面积(试样待测液中13位为峰面积(1315Z试样待测液中15位为峰面积(15试样待测液中其他顺式位为峰面积(V试样液定容体积,单位为毫升(100将结果表示为微克每百克(g/100g)的系数;全反式位为峰面积毫升每微克(AUg);0166 m试样质量,单位为克(g)。注1:由于附录D),所以在采用相对校正因子对结果进行校正。注2:如果试样中其他顺式不进行计算。试样中总胡萝卜素含量按式(4)计算:+(4)式中:试样中总胡萝卜素的含量,单位为微克每百克(g/100g);试样中位为微克每百克(g/100g);试样中位为微克每百克(g/100g)。注:必要时,行表示。计算结果保留三位有效数字。谱条件二试样中)计算:V100m(5)式中:试样中位为微克每百克(g/100g);从标准曲线得到的待测液中位为微克每毫升(g/V试样液定容体积,单位为毫升(100将结果表示为微克每百克(g/100g)的系数;m试样质量,单位为克(g)。注:结果中包含全反式35他顺式异构体;不排除可能有部分算结果保留三位有效数字。7 精密度在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。8 其他试样称样量为500g,00g。0167 附 录 度约为500g/0L,匀。比色杯厚度为1正己烷为空白,入射光波长为444定其吸光度值,平行测定3次,取均值。溶液浓度按式(算:X=1(中:X位为微克每毫升(g/A1测定过程中稀释倍数的换算系数。度约为500g/0L,匀。比色杯厚度为1正己烷为空白,入射光波长为450定其吸光度值,平行测定3次,取均值。溶液浓度按式(算:X=1(中:X位为微克每毫升(g/A1测定过程中稀释倍数的换算系数。0168 附 录 用色谱条件一进行要确定对剂碘溶液(。乙醇溶液():吸取5乙醇稀释至50匀。构化10入20匀后于日光下或距离40二氯甲烷稀释至5000g/异构化照色谱条件一注入据比及与全反式反式