药物分析03药物的杂质检查ppt课件

LOGO 药物分析 第三章 药物的杂质检查 Company L Contents 一般杂质的检查3 药物杂质与限量1 杂质检查方法2 特殊杂质的检查4 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 一、药物的杂质与纯度 1.纯度（ Purities） 药物的纯净程度 2.杂质 (Impurities) 药物中存在的 无治疗作用 或 影响 药物的 稳定性 和 疗效 ， 甚至对人体健康 有害 的物质。 简言之 :任何影响药品纯度的物质。 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 一、药物的杂质与纯度 药物的纯度需综合考虑药物的 外观性状、 理化常数、杂质检查 和 含量测定 ,综合评定 。 Company L 3.药物纯度与试剂纯度 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 共同点 均规定所含杂质 的 种类 和 限量 . 不同点 药物纯度从用药 安全 、 有效 和对药物 稳定性 等方面考虑 ,只有合 格品和不合格品 . 试剂纯度是从杂质可能引起的化学变化对使用的影响以及试剂 的使用范围和使用目的加以规定 ,它不考虑杂质对生物体的 生理作 用 及 毒副作用 . 化学试剂 一般分为 4个等级 基准试剂 、 优级纯或特种试 剂 (光谱纯、色谱纯、农药残留检测级 )、 分析纯 和 化学纯 化学试剂不 能代替药品 ！ Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 二、杂质的来源与种类 杂质的来源 生产 过程 储藏 过程 合成过程中，原料不纯或反应不完全，中间体、 副产物在精制中未除尽 制剂过程 试剂、溶剂、还原剂残留 异构体、多晶体 使用的金属器皿、装置、工具引入的金属杂质 在温度、湿度、日光、空气等外界条件影响下，或 因微生物的作用，引起药物发生水解、氧化、分解 、异构化、晶型转变、聚合、潮解和发霉等变化 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 v生产过程中引入杂质例子 : 双氯非那胺 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 v贮藏过程中引入的杂质例子 : v抗甲状腺药卡比马唑 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 自然界分布广泛，在多 种药物的生产和贮藏过 程中容易引入的杂质， 它们含量的高低与生产 工艺水平密切相关。所 以也常称为信号杂质。 是指在特定的药物生产和贮 藏过程中引入的杂质，也称 有关物质。这类杂质随药物 不同则不同。 Company L 三、杂质的限量 (Limit Test) 药物中所含杂质的 最大允许量 。 通常用百分之几或百万分之几 (parts per million, ppm ) 杂 质 限 量 控 制 限量检查 对照法 灵敏度法 比较法 定量测定杂质含量 注意平行原则 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 v对照法： 取一定量的被检测杂质标准液和一定量 供试品溶液，在相同条件下处理，比较反应结果 ，以确定杂质含量是否超过限量。 v该法应该注意 平行原则 ，即供试溶液和对照溶液 应在完全相同的条件下反应。如加入的试剂、反 应的温度、放置的时间均应相等，这样的结果才 有可比性。 Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 v灵敏度法：在供试品溶液中加入一定量试剂，在 一定条件下反应，不得有正反应出现。 v比较法：取供试品一定量依法检查，测定特定的 杂质参数，与规定的限量相比，不得更大。 v杂质限量计算法如下： Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 注意单位统一！ Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 示例一 茶苯拉明中氯化物检查 取本品 0.30g 置 200 ml量瓶中，加水 50ml、氨试液 3ml和 10%硝酸 铵溶液 6ml，置水浴上加热 5min，加硝酸银试液 25ml，摇匀，再置 水浴上加热 15min，并时时振摇，放冷，加水稀释至刻度，摇匀， 放置 15min，滤过，取续滤液 25ml置 50ml纳氏比色管中，加稀硝酸 10ml，加水稀释至 50ml，摇匀，在暗处放置 5min，与标准氯化钠 溶液 (10g Cl-/ml)1.5 ml制成的对照液比较，求氯化物的限量 。 C=10 g/ml V=1.5 ml S=? Company L 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 v示例二 v 谷氨酸钠中重金属的检查：取本品 1.0g，加水 23ml溶解后， 加醋酸盐缓冲溶液（ pH3.5)2ml，依法检查，与标准铅溶液 （ 10gPb/ml）所呈的颜色相比不得更深，已知重金属的限量 为百万分之十，求算应取标准铅溶液（ V）多少毫升？ Company L 示例三 肾上腺素上酮体的检查 取本品 0.2g,置 100ml量瓶中，加盐酸溶液 (9-2000)溶解并稀释 至刻度，摇匀，在 310nm处测定吸光度不得超过 0.05，酮体的 百分吸收系数为 435，求酮体的限量 V样品 =100 ml C酮体 =? S样品 =0.2 g 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 Company L 习题一 磷酸可待因中吗啡的检查 取本品 0.10 g,加盐酸溶液 (9-1000)使溶解成 5ml，加亚硝酸钠试 液 2ml，放置 15min，加氨试液 3ml，所显颜色与吗啡试液 取无 水吗啡 2.0mg，加盐酸溶液 (9-1000)使溶解成 100ml 5.0ml用同 一方法制成的对照液比较，不得更深。问限量是多少？ 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 Company L 习题二 苯巴比妥钠中重金属的检查 取本品 2.0g,加水 32ml，溶解后缓缓加入 1mol/L盐酸溶液 8ml， 充分振摇，静置数分钟，滤过，取滤液 20ml，加酚酞指示液 1滴 与氨试液恰显粉红色，加醋酸盐缓冲液 (pH3.5)2ml与水适量成 25ml，依法检查，含重金属不得超过 10ppm。试计算应取得标 准铅溶液 (每 1ml相当于 10g Pb)的体积。 第一节第一节 药物的杂质与限量药物的杂质与限量 Company L 第二节 杂质的检查方法 v一般有化学方法、色谱方法、光谱方法、物理方法 化学方法： 显色 Company L 显色反应 Company L 沉淀反应 v盐酸肼屈嗪中游离肼的检查 : 生成沉淀 Company L 其它 :生成气体或者滴定法 v生成气体 :NH3 v滴定法 :如 v 硫酸亚铁中的 高铁盐 检查 书上反应式 有误，你们 发现了吗？ 碘的显色 Company L 第二节 杂质的检查方法 二 :色谱法是杂质检查的首选方法 1TLC法： (1)杂质对照法 :取供试品溶液和一定浓度杂质对照 品溶液，分别点样于同一薄层板上展开，进行斑 点定位。将杂质斑点进行对应比较判断。 (2)供试品溶液自身稀释法 :将一定浓度供试品溶液 进行稀释并作为对照溶液，然后与供试品溶液在 同一板上展开比较。 (3)杂质对照品与供试品溶液自身稀释对照并用法 。 (4)对照药物法 :采用与供试品相同药物作为对照， 比较斑点、颜色。 并进行对比控制。 以后常用术语，要 知道操作方法 Company L 第二节 杂质的检查方法 HPLC色谱法，注意计算方法，外 标法，加校正因子的计算方法。 s：已知药物对照品； R：已知杂质对照品； X：未知杂质 S：另一已知药物 Company L 气相色谱法 v气相色谱法：挥发性杂质的检测 v计算方法：标准溶液加入法 光谱法 :看书 Company L 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 (四 )热分析法（ Thermal analysis） 测定物质的物理化学性质与温度关系的仪器分析方法。 热重分析法 (Thermogravimetric Analysis,TGA) 差热分析法 (Differential Thermal Analysis,DTA) 差示扫描量热法 (Differential Scanning Calorimetry,DSC) Company L 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 1.热重分析法 (TGA) 供试品 TGA热重曲线 W W 结晶水 失重台阶 应用热天平在程序控温的条件下测量物质的质量 随温度变化的热分析技术 ,可计算出样品在相应温 度范围内减失质量的百分率 . Company L 特 点 分析样品用量少 , 适用于贵重药材或在空气中容 易氧化药物干燥失重测定 . 灵敏度高 ,可达 1 g以下 测定速度快 可用于判断结晶水或吸附水 ,并推断结晶水含量 . Company L 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 2.差热分析法 (DTA) 在程序控制温度 下，测量供试品 和惰性参比物 (常 用石英砂、煅制 MgO)之间的 温度 差 与 温度 (或时间 ) 关系的热分析 技术 T T 供试品发生吸热反应温度 低于参比物质从而产生吸 热峰 参比物质 供试品发生放热反应温度高 于参比物质从而产生放热峰 Company L DTA用途 (1) 熔点测定 熔程 T T=0 Company L (2) 定性和纯度检定 根据峰的数目、形状 、位置对供试品进行纯度判别 T 供试品 对照品 Company L G1 G2 G3 10008006004002000 W T1 T2 T3 398 838 635 478 134 226 T( ) 草酸钙 (CaC2O4H2O)的热重曲线 在温度 T1时 CaC2O4H2O CaC2O4+H2O 在温度 T2时 CaC2O4 CaCO3+CO 在温度 T3时 CaCO3 CaO+CO2 Company L 100 90 80 70 60 DTA T( /min) 196 233 盐酸多巴酚丁胺的 DTA-TGA曲线 Company L 3.差示扫描量热法 (DSC) 第二节第二节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 测量保持供试品和 惰性参比物的温度相同 , 系统所需输给供试品 或参比物的能量差随温 度 (或时间 )变化的热分 析技术 . 样品 参比 加热炉 至信号放大器 加热器 导线 炉温 控制器 Company L 用于待测物质的 鉴别 、 晶型鉴别 、 纯度检查 以及 熔点 和 水分 等的测定，更适合于测量物质在物理变化或化学变 化中 焓 的变化。 不纯物质的 DSC图 t(min ) T Company L 不同纯度苯甲酸的 DSC曲线 温度 97.2% 98.6% 标准品 低共熔杂质 Company L 应用热分析法检查药物纯度的条件 样品纯度在 98.0%以上 杂质不与主成分反应 杂质不与主成分形成共晶或固熔体 杂质与熔融试样有化学相似性 药物在熔融过程中化学性质稳定 药物如存在多晶现象则必须全部转变成某一晶型 Company L 甲磺酸二氢麦角毒碱的 DSC-TGA曲线 50 100 150 200 DSC TGA失溶剂 失水 分解 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 一、氯化物检查法 供 试 品 稀 HNO310ml H2O AgNO31ml 标 准 溶 液 稀 HNO310ml H2O AgNO31ml 暗处放置 5min (避免 AgCl分解 ) Company L 二、硫酸盐检查法 第第 三三 节节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 三、铁盐检查法 1.硫氰酸铁法 (Ch.P 和 USP采用 ) 红色 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 供试品 显色，立即与 同 法制成 的对照溶 液比较 加水溶解 25ml 稀 HCl 4ml 过硫酸铵 50mg 加水稀释 35ml 30%硫氰酸铵溶液 3ml 加水定容 Company L 2.巯基醋酸法 (BP采用 ) 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 红色 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 四、重金属检查法 (Pb) Company L 1.第一法 硫代乙酰胺法 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 条件 ： 介质： 醋酸盐缓冲液 (pH 3.5) 2ml 试剂：硫代乙酰胺 (CH3CSNH2) 2ml 杂质对照液： PbNO3 (10g/ml) 灵敏度范围： 1020 g / 27ml 黄色至棕黑色混悬液 Company L 2.第二法 炽灼后的 硫代乙酰胺法 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 缓缓炽灼 放冷 H2SO4 0.5-1.0ml供试品 炭化 加热 HNO3 500-600H 2SO4 除尽 放冷 完全灰化 蒸干 HCl 2ml 水 15ml 中性 按 第一法 检查 蒸干 氨试液 注意： 做空白试验 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 3.第三法 硫化钠法 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 五、砷盐检查法 (一 )古蔡氏法 (Gutzeit) 黄色 棕色 黑色 溴化汞试纸 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 古 蔡 氏 法 检 砷 器 8cm 有孔玻 璃旋塞 导气管 AsH3发生瓶 溴化汞试纸 醋酸铅棉花 (60mg) HCl Zn 粒 碘化钾试液 酸性氯化亚锡试液 生成砷斑 吸收硫化氢气体 Company L 注意事项 砷斑不稳定，应干燥、避光、 立即比较 。 有机结合态的砷应 破坏 后检查（加酸或碱），但温度应低于 600C。 供试品若为铁盐，能消耗碘化钾和氯化亚锡，可加 酸性氯化亚 锡 ，使高铁离子还原后检查。 供试品（硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐）若在酸性条件下生 成硫化氢或二氧化硫，与溴化汞试纸作用生成黑色硫化汞和金属 汞，可先用硝酸处理，使其氧化为硫酸盐。 锑盐 含量较多时，可改用 白田道夫 （ Bettendorff）法检查砷 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 Company L (二 )二乙基二硫代氨基甲酸银法 Ag(DDC)法 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 红色胶态银 目视比色法 510nm 测定 A值 Company L 线性范围： 1 10 g/40ml 含锑药物不干扰测定 用于砷盐的限量检查和微量 砷盐的含量测定 书中没有 D 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 Company L （三）白田道夫法 2As3+ + 3SnCl2 + 6HCl 2As + 3SnCl4 + 6H+ 避免锑盐还原为锑化氢，产生灰色锑斑，干扰砷斑的检出 。 此法的反应灵敏度以 As2O3计为 20g。少量氯化汞的加入， 能提高反应灵敏度达 20 g /10ml。 Company L (四 )次磷酸法 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 棕色 1) 用于硫化物、亚硫酸盐以及含锑药物的砷盐检查， 不产生干扰。 2）灵敏度较古蔡法低。 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 六、干燥失重法 干燥失重： 药品在规定的条件下，经干燥后所减失的量。 用于检查药物中的 水分 及其他挥发性物质。 恒重： 供试品连续两次干燥或炽灼后称重的差异在 0.3mg以下。 （干燥至恒重的第二次及以后每次称重都应在规定的条件下继续干 燥 1h后进行） Company L 七、水分测定法 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 A 供试品消耗的 Fisher试液的体积 B 空白消耗的 Fisher试液的体积 F 每 1mlFisher试剂相当于水的重量 (mg) W 供试品的重量 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 催化剂 硫酸酐吡啶 ，不稳定 氢碘酸吡啶 甲基硫酸氢 吡啶，稳定 Company L 指示终点方法： Fisher试液颜色 淡黄色 红棕色 永停法 (以后讲） 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 催化剂 忘记加甲醇了 ，起稳定作用 Company L 八、炽灼残渣 (Residue on ignition) 系指有机药物经炭化或挥发性无机药物加热分解后 ，高温炽灼所产生的 非挥发性无机杂质 的硫酸盐。 0.1% 0.2% 1 2 mg 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法 Company L 第三节第三节 一般杂质的检查方法一般杂质的检查方法