电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值研究

电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值研究电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值研究 【摘要】目的：目的：探讨电镜在肾小球疾病病理诊断中的应用价值。方法：方法：选取我院在 2013 年 3 月2014 年 3 月接诊的 82 例肾小球疾病患者作为研究对象，所有患者都应用光镜+免 疫荧光法、电镜分别进行肾组织活检，比较两种检查方法对肾小球疾病的诊断结果。结果：结果： 最终病理诊断显示 IgA 肾病所占比例最高，为 19.51%，其次为肾小球微小病变，占 9.76%，薄基底膜肾病、膜性肾病、狼疮性肾炎所占比例也较高，均为 7.32%。电镜对最终 病例诊断结果起完全修正作用的有 19 例（23.17%） ，起补充修正作用的有 19 例（23.17%） 。 光镜+免疫荧光检验有 44 例对肾活检最终病理诊断结果产生影响，占 53.66%，电镜检验有 38 例对肾活检最终病理诊断结果产生影响，占 46.34%，二者比较，差异具有统计学意义 （P0.05） 。结论：结论：在肾小球疾病病理诊断中，电镜检查可为临床诊断、疾病分型、病理分 期提供重要的参考信息，电镜联合光镜检查可进一步降低肾小球疾病误诊率，值得推广应 用。 【关键词】肾小球疾病；肾活检；电子显微镜；光学显微镜 目前，临床诊断肾脏疾病最基本的手段仍为肾活组织病理检查，肾活检对明确肾脏疾 病类型、发病机制、判断预后及评估病情进展都具有重要作用。在肾活检病理诊断中，电 镜、免疫荧光/免疫组化、光镜是不可或缺的三大组成部分1。近年来，随着电镜技术的发 展与普及，其在肾活检病理诊断中的应用优势也越来越明显，其能反映肾小球超微结构改 变，对肾小球疾病的免疫荧光和光镜病理诊断进行验证和修正2。为进一步明确电镜在肾 小球疾病病理诊断中的应用价值，本文选取了 82 例行电镜、免疫荧光、光镜肾活检的肾小 球疾病患者进行研究，现报道如下。 1 1 一般资料与方法一般资料与方法 1.1 一般资料 选取我院泌尿内科在 2013 年 3 月2014 年 3 月接诊的 82 例肾小球疾病患者作为研究 对象，本组患者均接受肾组织活检，其临床检查及实验室检查资料均完整。男 45 例，女 37 例，年龄 875 岁，平均（36.518.8）岁。临床表现：肾病综合征 10 例，血尿 32 例， 肾炎综合征 11 例，蛋白尿 2 例，肾功能衰竭 1 例，溶血尿毒综合征 1 例。 1.2 方法 所有患者均在 B 超引导下行肾穿刺活检术，取肾活检标本，并将其分为 3 份，分别用 于免疫荧光、光镜、电镜检查。 （1）第一份肾活检标本进行石蜡包埋，切片（厚度 2m） ，常规进行 Masson（马森） 、 PASM（嗜银） 、PAS（糖原） 、HE（苏木精-伊红）染色，然后进行光镜检查；（2）第二份肾 活检标本冰冻后切片（厚度 4m） ，用以免疫荧光检测。采用直接法检测 FRA（纤维蛋白原） 、C1q、C3、IgA、IgM、IgC，采用间接法进行乙肝病毒抗原检测，检测项目包括 HbeAg、HbcAg、HbsAg；（3）第三份肾活检标本进行电镜检查。分别使用戊二醛（2.5%） 、 锇酸（1%）对活检标本进行前固定、后固定，再使用丙酮脱水，使用 Epon812 环氧树脂对 肾组织进行常规包埋处理，使用甲苯胺蓝染色定位后切片（厚度 50nm） ，铀、铅双重电子 染色后，在 H-600 型电子显微镜下观察肾小球基底膜厚度、基底膜内沉积物情况、系膜细 胞或基质增生情况、系膜内沉积物情况、内皮细胞及上皮细胞增生及结构变化情况、系膜 与基底膜关系、足突融合程度、足细胞变性、假微绒毛形成情况等。部分疑难病例，还需 进行型胶原 35 染色和 轻链染色/刚果红染色。 1.3 观察指标 参考 WHO 制定的肾小球疾病分类方法、肾活检病理诊断标准，对免疫荧光和光镜检查 结果进行初步病理诊断，再结合电镜检查结果做出最终病理诊断，个别疑难病例，还需结 合型胶原 35 染色和 轻链染色/刚果红染色结果做出最终病例诊断。 1.4 统计学方法 本次研究数据应用统计学软件 SPSS19.0 进行处理，计数资料比较采用卡方检验， P0.05 为差异有统计学意义。 2 2 结果结果 2.1 最终病理诊断 82 例患者的最终病理诊断结果见表 1。从表 1 可知，IgA 肾病所占比例最高，为 19.51%， 其次为肾小球微小病变，占 9.76%，薄基底膜肾病、膜性肾病、狼疮性肾炎所占比例也较 高，均为 7.32%。 表 1 82 例患者的最终病理诊断结果 疾病类型例数 构成比 （%） 疾病类型例数 构成比 （%） IgA 肾病 1619.51 膜增生肾炎 33.66 肾小球微小病变 89.76 内皮细胞病 33.66 薄基底膜肾病 67.32 乙型肝炎病毒性肾炎 33.66 膜性肾病 67.32 小管间质性疾病 33.66 狼疮性肾炎 67.32 IgM 肾病 22.44 糖尿病肾病 56.10 Alpot 综合征 22.44 局灶节段肾小球硬化 56.10 毛细血管内增生肾炎 22.44 紫癜性肾炎 56.10 肾淀粉样变 11.22 系膜增生性肾炎 56.10 高血压性肾损害 11.22 肾小球轻微病变 44.88 硬化性肾炎 11.22 2.2 电镜的完全修正、补充修正结果 电镜对最终病理诊断结果的完全修正、补充修正结果见表 2。从表 2 可知，电镜对最 终病例诊断结果起完全修正作用的有 19 例，占 23.17%，完全修正的疾病类型包括肾小球 微小病变、薄基底膜肾病、膜性肾病、糖尿病肾病、Alpot 综合征、肾淀粉样变；起补充 修正作用的有 19 例，占 23.17%，补充修正的疾病类型包括 IgA 肾病、膜性肾病、狼疮性 肾病、糖尿病肾病、局灶节段肾小球硬化、乙型肝炎病毒性肾病、膜增生肾炎。 表 2 电镜的完全修正、补充修正结果n 疾病类型完全修正补充修正验证诊断合计 IgA 肾病 011516 肾小球微小病变 8008 薄基底膜肾病 6006 膜性肾病 1326 狼疮性肾炎 0516 糖尿病肾病 1405 局灶节段肾小球硬化 0145 紫癜性肾炎 0055 系膜增生性肾炎 0055 肾小球轻微病变 0044 膜增生肾炎 0123 内皮细胞病 0123 乙型肝炎病毒性肾炎 0303 小管间质性疾病 0033 IgM 肾病 0022 Alpot 综合征 2002 毛细血管内增生肾炎 0012 肾淀粉样变 1001 高血压性肾损害 0011 硬化性肾炎 0011 合计 19194482 构成比/% 23.1723.1753.66100.0 2.3 光镜+免疫荧光检验与电镜的病理诊断影响程度 光镜+免疫荧光检验有 44 例对肾活检最终病理诊断结果产生影响，占 53.66%；电镜检 验有 38 例对肾活检最终病理诊断结果产生影响，占 46.34%，二者比较，差异具有统计学 意义（P0.05） 。见表 3。 表 3 光镜+免疫荧光检验与电镜的病理诊断影响程度比较n 检测方法 对最终病理诊断 无影响 对最终病理诊断 有影响 影响率（%） 电镜 443846.34 光镜+免疫荧光 384453.66 3 3 讨论讨论 电镜可将标本放大数十万倍，在电镜下，可清晰地观察到肾小球基底膜结构及厚度变 化，肾小球足细胞足突形态，以及其他细胞的细胞器变化，同时还能观察到致密物及致密 物沉淀部位、病毒样颗粒、特殊纤维样物质，而肾活检标本的这些情况在光镜下，或通过 免疫病理检查是无法完成的3。电镜的问世及应用，也发现了纤维性肾小球病等多种新的 肾小球疾病，极大地丰富了人们对肾脏疾病尤其是肾小球疾病的认识，其已经成为了目前 肾脏病理诊断的重要组成部分之一4。 本组患者的最终病理诊断结果显示，所有肾脏疾病中，肾小球疾病所占比例最高，达 到了 96.8%。提示电镜检查对肾小球疾病诊断的敏感性较高，这可能与电镜能显示肾小球 基底膜超微结构、电子致密物分布情况，从而能更好地进行肾小球病理诊断有关5。本次 研究显示，在最终病理诊断结果中，23.17%是由电镜检查起决定性作用，疾病类型包括肾 小球微小病变、薄基底膜肾病、膜性肾病、糖尿病肾病、Alpot 综合征、肾淀粉样变。这 一结果与国内相关文献报道相符6。这也提示光镜诊断为肾小球轻微病变和免疫荧光结果 呈阴性的病例，还应做电镜检查，以免发生漏诊7。最终病理诊断结果中电镜检查起修正 诊断作用的占 23.17%，疾病类型以免疫复合物性肾炎居多，这可能与电镜能够精确定位电 子致密物沉积部位，显示沉积物特点、结构等有关。 虽然电镜检查的应用优势显著，但其观察范围较为局限，对弥漫性肾炎、局灶节段性 肾小球病变的诊断较为有限，其对最终病理诊断结果无影响，免疫荧光+光镜检查即可独立 诊8。然而，由于电镜具有显示电子致密物、超微结构改变的作用，故可为病理诊断提供 相关佐证，用以验证免疫荧光+光镜诊断结果。 综上所述，在肾小球疾病病理诊断中，电镜检查可为临床诊断、疾病分型、病理分期 提供重要的参考信息，电镜联合光镜检查可进一步降低肾小球疾病误诊率，值得推广应用。 【参考文献】 1 唐炯.68 例肾脏疾病病理分析J.医学信息,2014,(9):437-437. 2 董航,李艳茹,崔新明等.应用透射电镜在小儿肾小球疾病诊断中的利弊J.中国实验诊 断学,2012,16(6):1103-1105. 3 肖长长,骆九源,姚月成等.59 例肾活检病例临床与病理分析J.中国处方药,2014,(5): 102-103. 4 畅飞,张莉,孟梅霞等.158 例肾活检病理及临床分析J.海南医学,2012,23(18):122- 124. 5 王锐艳,孙婷丽.78 例肾小球疾病临床与病理J.中国实用医药,2013,8(24):38-39. 6 Satirapoj,B.,Nast,C.C.,Adler,S.G. et al.Novel Insights into the Relationship Between Glom