磺丁基β-环糊精研究综述

磺丁基磺丁基 -环糊精研究综述环糊精研究综述 一、一、产品基本信息产品基本信息 1 1、历史背景：、历史背景：SBE-CD（商品名 Captisol）是美国 20 世纪 90 年代由美国 Cydex 公司开发成功的阴离子、高水溶性的 -CD 衍生物，能很好地与药物分 子包合形成非共价复合物，从而提高药物的稳定性、水溶性、安全性，降低肾 毒性、缓和药物溶血性，控制药物释放速率，掩盖不良气味等。与 -CD 相比， 其具有更好的水溶性，且溶血作用小、肾毒性低，是一种应用前景非常广阔的 新型药用辅料。 2 2、结构特点：、结构特点：磺丁基-环糊精 SBE-CD 是 -环糊精与 1，4-丁烷磺内酯 发生取代的产物，取代反应可发生在 -CD 葡萄糖单元 2，3，6 碳羟基位置上， 由于 -CD 是由 7 个吡喃葡萄糖通过 -（1、4）糖苷键连接而成，有 21 个可 能发生取代反应的位点，理论上可以到的取代度为 21 的 -环糊精衍生物（7 个伯羟基，6-OH，14 个仲羟基 2，3-OH） ，但由于立体位阻既反应条件的限制， 取代度一般不超过 10%，因此通过该反应所得到的产物是非常复杂的混合物。 SBE-CD 相对分子量和取代度关系为：MW=1135.01+CDs*157.09,其中 CDs 为 取代度。常见 SBE-CD 取代度及分子量如下： 代号 SBE4-CDSBE7-CD 取代度 47 分子量 170422411347 CAS.NO.25167-62-8194615-04-8182410-00-0182410-00-0 3 3、产品基本信息、产品基本信息 通用名磺丁基醚-环糊精 CDESulfobutylether-Cyclodextrin 中文同义词: 磺丁基-环糊精 SBE-B-CD 环糊精， 磺丁基醚-环糊精， 磺丁基醚倍他环糊精， 硫代丁基醚-环糊精钠， 硫代丁基醚倍他环糊精钠， 廿二碳六烯酸 磺丁基-环糊精钠盐 USP 药典 英文名称 Betadex Sulfobutyl Ether Sodium 英文同义词:Docosahexaenoic Acids，Docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid CAS 号:25167-62-8，182410-00-0(钠盐) ,194615-04-8 分子式C42H70-nO35（C4H8SO3Na）n 2-O-磺丁基 -环糊精 6-O-磺丁基 -环糊精 2,3,6-三 -O-磺丁基 -环糊精 n=4n=6.5n=7 C44H79O33SC44H79O33SC56H97O33S3 分子量 121712171393170421632241 结构式 1 结构式 2 O O O O O O O O O OO O RO OR OR RO RO RO RO OR RO RO OR OR OR OR OR RO OR OR R _H OR S O- O O Na+ 功能与应用 作为赋形剂，主要用于含氮类药物中； 对于含氮类药物具有特殊的亲和力和包合性。 给药途径 注射药、口服药、鼻部用药、眼部用药，对于含氮类药物具有特殊的亲和 力和包合性。 配伍禁忌水溶液中，环糊精的存在可能导致有些抗菌防腐剂的活性降低。 常用量 及最用量 最大用量为 66.67kg/d。 放射性和口服、静脉注射的最大维持剂量为 320mg/kg/d 二、二、理化性质理化性质 本品为白色或类白色无固定型粉末，无臭，微甜。 100ml 水中溶解度大于 50，30%水溶液 PH 值为 5.46.8。其他溶剂中溶 解度信息如下： 溶剂 SBE-CD 加入量（g） 溶剂体积 （ml） 溶解结果结果判定 水 0.10.1DVery soluble pH6.8 的磷酸缓冲液 0.10.1DVery soluble pH7.4 的磷酸缓冲液 0.10.1DVery soluble 0.1mol/L HCl0.10.1DVery soluble 0.1mol/L NaOH0.10.1DVery soluble 10NVery lightly 甲醇 0.01 99.9Dsoluble 乙腈 0.01100NScarcely soluble 丙酮 0.01100NScarcely soluble 三、三、制备工艺制备工艺 （一）工艺路线（一）工艺路线 1 1 1 1、工艺原理、工艺原理 2 2、工艺说明：、工艺说明：以 -环糊精和 1,4-磺丁内酯为原料，通过向碱性水溶液中引入 适量有机溶剂，增加了 1,4-磺丁内酯的溶解度，提高了磺丁基醚-环糊精的 合成收率;所得产品溶液经过超声透析，活性炭脱色，冷冻干燥等操作得到磺丁 基醚-环糊精粉末产品。 （二）工艺路线（二）工艺路线 2-2-磺丁内酯的制备磺丁内酯的制备 1 1、工艺原理、工艺原理 2 2、工艺说明、工艺说明 将 76mL 干燥处理的四氢呋喃(THF)置于 250mL 烧瓶中，加入 50mgZnCl2,搅 拌均匀后，将 65g 重蒸处理的乙酰氯慢慢加入,加热回流反应 1.5h 后，减压蒸 馏(5.36.0 kPa)，收取沸点 98112的馏分，得到乙酸 -氯丁酯 103.6g；(2 量取 60mL(65g,=1.0805g/cm3)乙酸 -氯丁酯置于 500mL 的三颈瓶中，加入 300mLH2O，再加入 100g 的 Na2SO3，搅拌回流 10 h，然后将大部分的 H2O 减压蒸 除,剩余部分加入 270mL 甲醇，搅拌回流，并通入过量的 HCl 气体，反应持续 8 h 后，使反应液冷却至室温,经过滤浓缩后减压蒸馏(2.73.3kPa)，收集 152165的馏分，得到 43g 暗红色产物磺丁内酯，产率 73%。 （三）工艺路线（三）工艺路线 3-3-多取代磺丁基多取代磺丁基-环糊精环糊精(SBE(4)-CD)(SBE(4)-CD)的合成的合成 称取 5g-CD(4.4mmol)置于 50mL 烧瓶中，加入 10mL200g/LNaOH 溶液，搅 拌加热至溶解，量取 2.3mL(3.1g，=1.331g/cm3，22.5mmol)磺丁内酯，慢慢 加到反应液中，同时激烈搅拌,数小时后，反应物成均相，停止反应，冷却至室 温，加入 20 mL H2O 稀释，用 HCl 中和，除水，真空干燥，得微黄色物质，加少 量水溶解，过葡聚糖凝胶柱(G-25)除盐纯化，得到 4.3g 微黄色产物。比旋度 D20=+325(2g/L 水溶液)。元素分析:实测值 wC32.80%，wH8.68%,wS5.77%，wC/wS=5.68，计算值(取代度为 3.8)， wC/wS=5.64。 （四）工艺路线（四）工艺路线 4-4-单取代磺丁基单取代磺丁基-环糊精环糊精(SBE(1)-CD)(SBE(1)-CD)的合成的合成 合成步骤同上，10g-CD(8.8mmol)，25mL250g/LNaOH 溶液加热搅拌至溶 解，慢慢加入 1.8mL(2.4g，=1.331g/cm3，17.6mmol)磺丁内酯，同时激烈搅 拌，数小时后,反应物呈均相，停止反应，冷却至室温，加 20mLH2O 稀释，用 HCl 中和，过滤除去未反应的 -CD，滤液浓缩，过葡聚糖凝胶柱(G-25)除盐纯 化，得 0.9g 微黄色产物。D20=+580(2g/L 水溶液)。元素分析:实测值 wC36.71%，wH6.22%，wS2.77%，wC/wS=13.25，计算值(取代度为 1.3) wC/wS=13.62 四、质量研究及质量标准四、质量研究及质量标准 ( (一一) )质量控制方法研究质量控制方法研究 第一部分第一部分 SBE-7-CDSBE-7-CD 单一取代组分的分离和制备单一取代组分的分离和制备 目的：目的：分离、纯化和制备 SB-7-CD 单一取代组分，确证其取代度。 方法：方法：采用 DEAE SephadexA-25 葡聚糖凝胶为填料，玻璃砂芯色谱柱（29cm4 cm）为填装柱，自制分离柱，通过硫酸钠浓度梯度（01.4mol/L）洗脱对 SBE- 7-CD 进行分离，得到单一取代组分。采用 SephadexG-25 葡聚糖凝胶为填料 ，玻璃砂芯色谱柱（40cm18mm）为填装柱，自制脱盐柱，通过去离子水的洗 脱将各单一取代组分脱盐纯化。分别采用核磁共振波谱法和质谱法对得到的各 单一取代组分进行取代度的测定。 结果：结果：共得到 6 种 SBE_7-CD 单一取代组分，其取代度分别为 3、4、5、6、 7、8。核磁共振波谱法和质谱法取代度检测结果一致。 结论：结论：本实验成功分离、纯化和制备了 6 种 SBE-7-CD 单一取代组分，为 SB E_7-CD 的组分分析和平均取代度的测定奠定了物质基础。 第二部分第二部分 SBE7-CDSBE7-CD 的高效毛细管电泳的高效毛细管电泳- -间接紫外法间接紫外法组分分析和平均取代度测组分分析和平均取代度测 定定 目的：目的：建立 SBE-7-CD 的组分分析和平均取代度测定方法。 方法：方法：采用高效毛细管电泳-间接紫外检测分析方法。未涂层熔融石英毛细管柱 （60.2cm50m50cm） ；运行缓冲液 30mmol/L 苯甲酸-Tris 缓冲液（pH7.5） ；温度 25；压力进样 6s（0.5psi） ；分离电压 30kV；检测波长 214nm，间接 检测模式。 平均取代度的计算： 通过比较校正峰面积百分比对各单取代组分进行组分分析。采用所建立的 方法对 11 批供试品进行了测定，并与美国药典论坛（PharmacopoeiaForum，PF ）规定的标准进行比较。 结果：结果：SBE-7-CD 中各组分的分离度符合要求，峰形和基线良好；该方法精 密度和重复性良好，供试品溶液在 8h 内基本稳定；SB-7-CD 中检测到取代 度分别为 211 的 10 种单取代组分，11 批 SBE-7-CD 供试品的平均取代度为 6.76.9，符合 PF 中的规定，但其组分分析结果与 PF 的标准规定有一定的差异 。 结论：结论：该方法准确、快速、分析成本低，能够评价不同批次供试品的差异，为 SBE-7-CD 合成工艺的改进提供了帮助。 第三部分第三部分 毛细管气相色谱法测定毛细管气相色谱法测定 SBE-7-CDSBE-7-CD 中杂质中杂质 1,4-1,4-丁烷磺内酯丁烷磺内酯 目的：目的：建立 SBE-7-CD 中的杂质 1,4-BS 的测定方法。 方法：方法：采用气相色谱法。色谱柱：DB1701（30m0.32mm0.25m，Agilent T echnologies） ；氢火焰离子化检测器；载气为氮气（纯度 99.999%） ，燃气为氢 气，助燃气为空气；载气流速 30ml/min；进样口温度为 200；柱温为程序升 温：初始温度 100，以 10/min 的升温速率升到 200，恒温 0min，再以 30 /min 的升温速率升到 260，恒温 3min；检测器温度为 270；柱前压为 9. 9psi；分流比为 10:1；进样 1l。采用二乙砜作为内标。供试品处理：取 SBE _7-CD 供试品约 0.2g，精密称定，置 10ml 离心管中，精密加入水 1ml，涡 旋溶解，再精密加入二氯甲烷 1ml，涡旋 1min，静置分层，取有机相，进样分 析，以标准曲线法计算含量。 结果：结果：二乙砜与 1,4-BS 的保留时间分别为 6.131min 和 8.615min，分离度远大 于 1.5；1,4-BS 的检测限为 0.1126ng，定量限为 0.2599ng；1,4-BS 在 2.984 g/ml8.952g/ml 范围内线性关系良好（r=0.9989） ；仪器精密度（n=9）的 RS D 为 4.7%；高、中、低三种浓度的加样回收率分别为 101.5%、99.3%、100.3% ，精密度分别为 1.6%、1.2%、1.2%；1,4-BS 高、中、低三种浓度的平均萃取率 分别为 68.7%、68.4%、70.0%，RSD 分别为 15.2%、23.5%、17.4%；二乙砜高、 中、低三种浓度的平均萃取率分别为 56.1%、57.7%、52.8%，RSD 分别为 18.8% 、24.8%、13.9%。 结论：结论：本实验所建立的方法简单、快速、准确，灵敏度可满足检测要求，避免 了 PF 规定的标准加入法的繁琐计算，可作为 SBE-7-CD 中的杂质 1,4-BS 的 有效检测方法。 第四部分第四部分 高效液相离子对色谱高效液相离子对色谱- -液质联用同时测定液质联用同时测定 SBE-7-CDSBE-7-CD 中中杂质杂质 4-4-羟基羟基 丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠 目的：目的：建立 SBE-7-CD 中的杂质 4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠的测定方 法。 方法：方法：采用高效液相离子对色谱-液质联用法。 色谱柱：ODS-SPC18(4.6250mm，5m，GL Sciences Inc. Inertsil)，柱温 为 30； 流动相：甲醇-10mmol/L 正戊胺水溶液（pH5.45） （30:70） ；流速 1.0ml/min， 进样量 10l。离子源：电喷雾离子（ESI）源；检测方式：多反应监测（MRM ）模式；负离子监测模式。4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠的监测离子对分 别为 m/z153.0/79.8 和 m/z289.0/152.9。 结果：结果：4-羟基丁磺酸钠与二磺烷基化醚钠的保留时间分别为 3.41min 和 4.24mi n，能够完全分离；4-羟基丁磺酸钠的检测限为 0.005294ng，定量限为 0.01018 ng，定量限的回收率在 101.9%108.8%之间，RSD 为 3.4%；二磺烷基化醚钠的 检测限为 0.02054ng，定量限为 0.03950ng，定量限的回收率在 97.3%107.8% 之间，RSD 为 4.0%；4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化醚钠分别在 1.018ng/ml3.5 83ng/ml 和 3.950ng/ml13.90ng/ml 范围内线性关系良好，r 分别为 0.9997 和 0.9996；方法精密度（n=6）的 RSD 不大于 3.8%；加样回收率（n=6）为 95.4% 96.2%，RSD 不大于 4.2%；仪器精密度（n=6）的 RSD 不大于 3.5%。 结论：结论：该方法专属性强、灵敏度高，是一种新的 4-羟基丁磺酸钠和二磺烷基化 醚钠的检测方法，同时也为其他烷基磺酸钠盐化合物的分析提供了参考。 第五部分第五部分 高效液相凝胶色谱高效液相凝胶色谱- -示差折光检测法测定示差折光检测法测定 SBE-7-CDSBE-7-CD 的含量的含量 目的：目的：建立 SBE-7-CD 的含量测定方法。 方法：方法：采用高效液相色谱法。Phenomenex PolySep-GFC-P3000 凝胶柱，柱温 35 ；示差折光检测器，检测温度 35；流动相：乙腈-0.1mol/L 硝酸钾水溶液 （35:65） ，流速 1.0ml/min；进样量 10l。 结果：结果：SBE_7-CD 的保留时间为 6.8min，主峰与相邻杂质峰的分离度均不小 于 1.94；方法的检测限为 0.32g，定量限为 0.48g；SBE-7-CD 在 0.498 5mg/ml1.495mg/ml 范围内线性关系良好（r=0.9998） ；方法精密度（n=6）的 R SD 为 1.4%；平均回收率（n=6）的平均值为 98.0%，RSD 为 1.3%；6 批供试品的含量 均在 95.8%99.3%之间。 结论：结论：该方法准确度和重复性良好，适合 SBE-7-CD 的含量测定，为 SBE_7- -CD 质量标准的建立奠定了基础。 （二）（二）离子色谱法测离子色谱法测定磺丁基醚定磺丁基醚-环糊精中环糊精中 4-4-羟基丁磺酸羟基丁磺酸 目的目的: :建立磺丁基醚-环糊精中 4-羟基丁磺酸的离子色谱检测方法。 方法方法: :采用 IonPac AS23 阴离子型交换柱(250mm4mm)为分析柱，IonPac AG23( 50mm4mm)为保护柱，7mmol.L-1NaHCO3水溶液为淋洗液，流速为 1.0 mL.min- 1,以电导检测器检测。 结果结果: :在建立的色谱条件下，磺丁基醚-环糊精样品中 4-羟基丁磺酸与其他 杂质离子实现基线分离，4-羟基丁磺酸在 220mg.L-1 范围内线性良好(r=0.99 98),平均回收率为 100.2%(RSD=1.3%,n=9)，检测限与定量限分别为 2 和 5ng。 结论结论: :该方法操作简便,结果准确、可靠，适用于磺丁基醚-环糊精中 4-羟基 丁磺酸的限量检查。 ( (三三) ) 离子色谱法离子色谱法测定磺丁基倍他环糊精中测定磺丁基倍他环糊精中羟基丁烷磺酸钠羟基丁烷磺酸钠 采用离子色谱法，以阴离子分析柱为分离手段，采用电导检测器，洗脱液为碳 酸钠碳酸氢钠系统或者碳酸钠（钾）氢氧化钠（钾）系统，以此来解决磺 丁基倍他环糊精中羟基丁烷磺酸（钠）的限度检测问题。步骤配制适当 浓度的洗脱液，洗脱液是碳酸钠碳酸氢钠系统或者碳酸钠（钾）氢氧化钠 （钾）系统；配制适当浓度的磺丁基倍他环糊精样品溶液和羟基丁烷磺 酸（钠）对照品溶液；离子色谱采用阴离子色谱柱、电导检测器，样品溶液 和对照品溶液分别进样检测，样品溶液中羟基丁烷磺酸（钠）的峰面积低 于对照品峰面积为样品合格。本检测方法灵敏，样品用量少、重现性高、结果 可靠，可对磺丁基倍他环糊精进行质量控制和检验，从而提高产品的品质。 （四）（四）气相色谱法气相色谱法检测磺丁基倍他环糊精中检测磺丁基倍他环糊精中 1,4-1,4-丁烷基磺酸内酯丁烷基磺酸内酯 方法:.样品的前处理-1，将磺丁基倍他环糊精样品用水溶解，配制成样品的 水溶液；.样品的前处理-2，采用有机溶剂对样品水溶液进行液液萃取，合并 有机相萃取液，浓缩到适当体积，得到待测样品溶液；.对照品溶液的配制， 将 1，4-丁烷基磺酸内酯对照品用有机溶剂溶解，配制成对照品溶液，所用有 机溶剂与步骤的有机溶剂相同；.分别将待测样品溶液和对照品溶液注入气 相色谱仪，根据结果，计算得样品中 1，4-丁烷基磺酸内酯的含量。本检测方 法灵敏、重现性高、结果可靠，可对磺丁基倍他环糊精中的 1，4-丁烷基磺酸 内酯进行检验和质量控制，从而保证产品的质量。 （五）（五）高效液相色谱法高效液相色谱法测定磺丁基测定磺丁基-环糊精中的环糊精中的 -环糊精环糊精残留含量残留含量 方法:采用 Waters XTerraMs-C18(4.6 mm250 mm,5m)柱；流动相:甲醇-水( 892)；检测器:示差折光率检测器；流速:0.8 mLmin-1；柱温:25。 结果:在所选定的色谱条件下,磺丁基-环糊精与 -环糊精能分离完全；- 环糊精在 0.11.6 mgmL-1 内，峰面积与浓度线性关系良好，r=0.9999；最 低检测限为 2g。 结论:方法简便，准确，专属性强，可用于磺丁基-环糊精中的 -环糊精检 测及含量测定质量控制。 （六）质量指标（六）质量指标 序号检验项目方法限度 1 外 观白色粉末,无嗅,微甜 2 鉴别 AIR 符合规定 BHPLC 符合规定 C 取代度符合规定 D 钠盐符合规定 3 检查 3-1PH4.06.8 3-2 -环糊精离子色谱法或 HPLC 0.1% 3-3 1,4-丁烷基磺酸内酯GC 毛细管气相色谱法 0.5ppm 氯化钠离子色谱法 0.2% 羟基丁烷磺酸钠离子色谱法 0.09%3-4 二磺烷基化醚钠离子色谱法 0.05% 3-5 溶液澄清度符合规定 3-6 取代度 毛细管电泳法 高效毛细管电泳 -间接紫外法 6.26.9 3-7 干燥失重 10.0% 3-8 灼烧残渣 20% 3-9 重金属 5ppm 3-10 砷盐 4ppm 3-11 氯化物 0.02% 细菌总数（个/g） 1000 霉菌总数（个/g） 1003-12 致病菌不得检出 高效液相凝胶色谱 -示差折光检测法 高效液相离子对色谱 -液质联用 4 含量 高效毛细管电泳 -间接紫外法 95.0105% （七）美国药典（七）美国药典 USP35USP35 分析方法分析方法 BetadexBetadex SulfobutylSulfobutyl EtherEther SodiumSodium 磺丁基醚磺丁基醚-环糊精钠环糊精钠 O O O O O O O O O OO O O HO HO HO HO HO OH OH OH OH OH HO OH OH S O- O O Na+ S -O O O Na+ S O- O O Na+ S O- O O Na+ S O- OO Na+ O S O- O O Na+ O O O C42H70-nO35（C4H8SO3Na）n 分子量 2163，当 n=6.5 磺丁基醚 环糊精钠；磺丁基醚 环糊精硫酸钠182410-00-0。 定义定义 磺丁基醚 环糊精钠是由 环糊精和 1,4-丁烷磺内酯在碱性条件下制备而 成。 环糊精的取代度应不小于 6.2 和不高于 6.9。它包含磺丁基醚-环糊精 钠 C42H70-nO35（C4H8SO3Na）n 按无水物计算应不小于 95.0和不高于 105.0。 鉴别鉴别 A.红外吸收 B 在含量测定条件下，样品溶液的主峰的保留时间应与标准溶液一致。 C.它满足了测试平均取代度的要求。 D.鉴别试验，钠 含量测定含量测定 程序 流动相：乙腈和 0.1M 硝酸钾溶液（1：4） 标准溶液：10mg/ml 的 USP 磺丁基醚-环糊精钠 RS 样品溶液：10mg/ml 的磺丁基醚-环糊精钠 色谱系统 （见色谱，系统适用性。） 模式：LC 检测器：折射率 检测器温度：352 列：7.8mm30cm 的分析柱;填料 L37。 注-冲洗柱，用乙腈和水的溶液 （1：9）在完成运行的系列 流速：1.0ml/min 进样量：20l 系统适用性 示例：适用性要求标准的解决方案 相对标准偏差：不高于 2.0 分析 样本：标准溶液和样品溶液计算磺丁基醚-环糊精钠的比例，C42H70- nO35（C4H8SO3Na）n的百分比部分磺丁基醚-环糊精钠采取： 结果=（RU/ RS）（CS/ CU）100 RU=磺丁基醚-环糊精钠的样品溶液峰值响应 RS =标准溶液的磺丁基醚-环糊精钠峰值响应 CS=USP 对照品标准溶液中磺丁基醚-环糊精钠浓度 RS（mg/ml） CU=样品溶液中磺丁基醚-环糊精钠浓度（mg/ml） 验收标准：基于无水 95.0-105.0 杂质检查杂质检查 -重金属重金属：方法 II：不高于 5 PPM -环糊精（环糊精（BETADEXBETADEX） 溶液 A：25 mMol 的氢氧化钠 溶液 B：250mMol 的氢氧化钠和 1M 硝酸钾 流动相：见表 1。 时间 A(%)B(%) 01000 41000 50100 100100 111000 201000 标准溶液：USP -环糊精的 2g/mlRS 样品溶液：磺丁基醚-环糊精钠 2mg/ml 色谱系统 （见色谱，系统适用性和离子色谱。） 模式：IC 检测器：脉冲安培（金工作电极和银参考电极电化学电池） 柱 保护柱：4.0 毫米5 厘米的阴离子交换;包装 L61 分析柱：4.0 毫米25 厘米阴离子交换;包装 L61 柱温度：502 流量：1.0ml/分钟 注射量：20L 波形脉冲安培检测器：见表 2。 时间电压（V） 0.000.1 0.30 整合开始 0.500.1 0.5 整合结束 0.510.6 0.590.6 0.60-0.6 0.65-0.6 系统适用性 示例：标准溶液 适用性要求 相对标准偏差：不大于 5.0 分析 样本：标准溶液和样品溶液 计算的 -环糊精在磺丁基醚-环糊精钠中所占的百分比： 结果=（RU/ RS）（CS/ CU）F100 RU=测试环糊精的样品溶液峰值响应 RS =测试环糊精标准溶液峰值响应 CS=在标准溶液 USP -环糊精 RS 浓度（g/ml） CU=在样品溶液磺丁基醚-环糊精钠浓度（mg/ml） F =转换系数（10-3mg/g） 验收标准：不大于 0.1 -1,4-1,4-丁烷磺内酯丁烷磺内酯 内标溶液：0.25g/ml 二乙砜 标准储备溶液 A：0.5g/ml 的 1,4-丁烷磺内酯 标准储备溶液 B：1.0g/ml 的 1,4-丁烷磺内酯 标准储备溶液 C：2.0g/ml 的 1,4-丁烷磺内酯 样品原液：磺丁基醚-环糊精钠的内标溶液 250mg/ml 空白溶液和样品溶液 A，B，C，D 样品名称 溶液 1 添加 （ml） 溶液 2 添加 （ml） 加入二氯甲烷（ml） 空白溶液内标溶液，4.0水，1.0 1.0 样品溶液 A样品原液，4.0 标准储备液 A，1.0 1.0 样品溶液 B样品原液，4.0 标准储备液 B，1.0 1.0 样品溶液 C样品原液，4.0 标准储备液 C，1.0 1.0 样品溶液 D样品原液，4.0水，1.0 1.0 注：使用前立即准备。 色谱系统 （见色谱，系统适用性。） 模式：GC 检测器：氢火焰离子化 柱：0.32mm25m 熔融石英毛细管柱;的 0.5m 的 G46 相涂层 温度 检测器：270 注入口：200 柱：温度方案见表 4。 初始温度（）升温（/min）最终温度（）保持时间（min） 10010200- 200352705 载气：氦气，入口压力一般在 12psi 进样量：1.0L 进样方式：不分流注入 0.5min，然后以 50ml/min 分流。 注意-建议使用合适 的不分流进样衬管。 系统适用性 样品：样品溶液 B 注-二乙基砜和 1,4-丁烷磺内酯的相对保留时间分别为 0.7 和 1.0。 适用性要求 相对标准偏差：不大于 10.0 分析 样品：空白溶液，试样溶液 A、B、C 和 D 较正的 1,4-丁烷磺内酯的峰响应值与 样品溶液 A，B，C 或 D 中二乙基砜峰响应值的比值减去空白溶液中 1,4-丁烷磺 内酯与乙基砜比值。 以试样溶液 A，B，C 或 D 中 1,4-丁烷磺内酯校正峰响应值比二乙砜的比值，对 所添加的 1,4-丁烷磺内酯量（g）。绘制标准曲线，曲线和轴线的交点与原 点之间的距离代表 1,4-丁烷磺内酯的量，计算在样品母液 4ml 中含有多少 A(g)。计算 1,4-丁磺酸内酯中 环糊精磺丁基醚钠含量： 结果= A /（VEXTCUF） A =如上确定 VEXT=在提取步骤中使用样品储备溶液的体积，4.0ml CU=样品原料溶液中 环糊精磺丁基醚钠浓度（mg/ml） F =换算系数（10-3克/mg）验收标准：不大于 0.5.ppm -氯化钠，氯化钠，4-4-羟基羟基-1-1-磺酸，和双（磺酸，和双（4-4-磺丁基）醚二钠磺丁基）醚二钠 溶液 A：5mM 的氢氧化钠，在密闭容器中脱气 15 分钟 溶液 B：25mM 的氢氧化钠，在一个封闭容器脱气 15 分钟 流动相：见表 5。 时间（min）溶液 A（%）溶液 B（%） 0 1000 41000 107030 247030 251000 401000 柱洗涤液 A：50 mM 柠檬酸钠 柱洗涤液 B：150mM 的氢氧化钠 标准溶液：配制一个溶液含有 USP 氯化钠 RS 8g/ml，4-羟基丁烷-1-磺酸浓 度 4g/ml 的的，和 4g/ml 的双（4-磺丁基）醚二钠。 样品溶液：磺丁基醚-环糊精钠 4mg/ml 色谱系统 （见色谱，系统适用性和离子色谱。） 模式：IC 检测器：电导率 范围：30S 当前：100mA 柱：注-在每次运行结束，用柱洗涤液 A 以 1mL/分钟的流速冲洗 35 分钟，然 后使用柱洗涤液 B 以同样的流速清洗色谱柱 35 分钟。 保护柱：4.0mm5.0cm 阴离子交换;包装 L61 分析：4.0mm25cm 阴离子交换;包装 L61 柱温度：30 抑制器：微膜负离子自动抑制 1 或合适的化学灭火系统 抑制剂：自动抑制 流量：1.0ml/min 注射量：20L 系统适用性 样品：标准溶液 注，提供相对保留时间供参考。相对保留时间分别是 1.0，1.4 和 8.6 的为 4- 羟基丁烷-1-磺酸根离子，氯离子，和双（磺丁基）醚离子。 适用性要求 分辨率：不小于 2.0 相对标准偏差：不大于 10.0 分析 样本：标准溶液和样品溶液 计算氯化钠，4-羟基丁烷-1-磺酸，二（磺丁基） 环糊精醚百分比 钠含量 结果 = (rU/rS) (CS/CU) F 100 RU=氯化钠，4-羟基丁烷-1-磺酸，或样品溶液中双（磺丁基）醚二钠峰值响应 RS =氯化钠，4-羟基丁烷-1-磺酸，或标准溶液中双（磺）乙醚二钠峰值响应 CS =氯化钠，4-羟基丁烷-1-磺酸，或标准溶液中双（磺丁基）醚二钠浓度 （g/ml） CU=样品溶液中磺丁基醚-环糊精钠浓度（mg/ml） F =转换系数（10-3mg/微磺丁基醚-环糊精钠 g） 验收标准 氯化钠：不大于 0.2 4-羟基丁烷-1-磺酸：不大于 0.09 双（磺丁基）醚二钠：不大于 0.05 运行电解质： 用 100 mmol 三（羟甲基）氨基甲烷缓冲液调节 30mmol 苯甲酸至 pH 值适用该仪 器。由于不同毛细管之间的差别，没有指定一个单一的普遍适用的电解液的 pH 值。相反，每个毛细管相关的最佳 pH 值应根据仪器说明书确定。 标准溶液：10mg/ml 的 USP 磺丁基醚-环糊精钠 RS 样品溶液：10mg/ml 的磺丁基醚-环糊精钠 毛细管冲洗过程：使用单独的运行电解质的小瓶进行毛细管冲洗和样品分析。 每天进行分析前及每个分析之前的冲洗：用 0.1N 氢氧化钠冲洗毛细管 30 分钟， 并且用水冲洗不少于 2 h，并运行电解质不少于 1 小时。执行预喷射冲洗每次 进样之前。用 0.1N 氢氧化钠冲洗毛细管不少于 1 分钟，并且运行电解质不少于 3 分钟。如果正在使用新的毛细管中，除了上述的常规冲洗，新的毛细管，需 要在第一次使用之前漂洗。新毛细管用 1M 氢氧化钠冲洗 1 小时，接着用水冲洗 2 小时。 电泳系统（见毛细管电泳 1053。 ） 模式：高效毛细管电泳 检测器：反相紫外检测波长 200 nm，具有 20 nm 的带宽。【注-A 205 nm 检测 波长 10 nm 带宽，可以作为替代。 柱：50M50 厘米的熔融石英柱 柱温：25 电压：10 分钟电压从 0 线性升到 30 kV，然后在 30 kV 维持 20 分钟 注射量：等量在 0.5psi 压力差下维持 10 秒 系统适用性 示例：标准溶液 注：见表 6 中近似的相对迁移时间磺丁基醚-环糊精钠峰 IX（磺丁基醚 -环糊精钠峰 I，II，III，X，含有 -环糊精分子与 1，2，3，10 磺丁