《液相检测器》PPT课件.ppt

检测器 l l 紫外检测器紫外检测器 l l 示差折射检测器示差折射检测器 l l 荧光检测器荧光检测器 l l 电化学检测器电化学检测器 紫外检测器 l l 紫外吸收检测器紫外吸收检测器其检测原理和其检测原理和UV-VisUV-Vis方法一样。只是，此时所采方法一样。只是，此时所采 用的吸收池为微量吸收池，通常其光程为用的吸收池为微量吸收池，通常其光程为2-102-10mmmm, , 体积约为体积约为110 110 L L 。具有灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度不敏感等特点，具有灵敏度高，线性范围宽，对流速和温度不敏感等特点， 它是液相色谱最常用的检测器。它是液相色谱最常用的检测器。 HPLC HPLC分析中，约有分析中，约有80%80%的物质可的物质可 以用紫外吸收检测器检测。以用紫外吸收检测器检测。 。在实际工作，紫外检测的主要参数是选择检测波长，它应考虑溶在实际工作，紫外检测的主要参数是选择检测波长，它应考虑溶 质和流动相的吸收特性，质和流动相的吸收特性，在选择测量波长时注意：溶剂必须能让在选择测量波长时注意：溶剂必须能让 所选择的光透过，即所选波长不能小于溶剂的最低使用波长所选择的光透过，即所选波长不能小于溶剂的最低使用波长 l固定波长型 l可变波长型 l二极管阵列 固定波长型 l l 结构紧凑结构紧凑 l l 造价底造价底 l l 操作维修方便操作维修方便 l l 灵敏度高灵敏度高 l l 适用于梯度洗脱适用于梯度洗脱 可变波长型 l l 紫外可见分光紫外可见分光 l l 选择性大选择性大 二极管阵列 同时检测全波长的信号定量的同时也可光谱定性同时检测全波长的信号定量的同时也可光谱定性 波长 可的松 氟美松 皮质酮 快速扫描光电二极管阵列（PDA）检测所获得的三维色谱-光谱图 示差折射检测器 l l 示差折射检测器是通过连续监测参比池和示差折射检测器是通过连续监测参比池和 测量池中溶液的折射率之差来测定溶质浓测量池中溶液的折射率之差来测定溶质浓 度。由于折射率是物质的通用性质，示差度。由于折射率是物质的通用性质，示差 折射检测器是一种通用型的整体性质检测折射检测器是一种通用型的整体性质检测 器器 原理：利用两束相同角度的光照射溶剂相和样品+溶剂相，利用二者对光的折射率不 同，其中一束（通常是通过样品+溶剂相）光因为发生偏转造成两束光的强度差发生 变化，将此差示信号放大并记录，该信号代表样品的浓度。 为通用型检测器，灵敏度为10-7g/mL。但对温度变化敏感(0.00X ），且不适于 梯度淋洗。 光源 调零光学零参比 样品 平面镜 透镜 光电转换 记录仪 放大器 遮光板 荧光检测器 l l 荧光检测器是一种很灵敏的荧光检测器是一种很灵敏的, , 有选择性的有选择性的 检测器检测器, , 其灵敏度比其灵敏度比UV UV 高高101000倍倍, , 一一 般可测般可测ppbppb级的化合物。它用于检测物质本级的化合物。它用于检测物质本 身具有荧光或为了提高灵敏度将无荧光的身具有荧光或为了提高灵敏度将无荧光的 物质衍生成荧光体。可用荧光检测的物质物质衍生成荧光体。可用荧光检测的物质 ：如某些代谢物、食品、药物、氨基酸、：如某些代谢物、食品、药物、氨基酸、 多肽、胺类、维生素、石油高沸点馏分、多肽、胺类、维生素、石油高沸点馏分、 生物碱和甾族化合物等。生物碱和甾族化合物等。 电化学检测器 l l 对于具有电活性的物质对于具有电活性的物质, , 在液相色谱中可在液相色谱中可 采用电化学检测器检测。它包括电导库仑采用电化学检测器检测。它包括电导库仑 、安培、极谱、电位和光电导等形式、安培、极谱、电位和光电导等形式, , 其其 中中, , 用得最多和最成功的是安培检测器用得最多和最成功的是安培检测器 安培检测器 由恒电位仪和一薄层反应池（ 体积为15L）组成。如图。 该检测器是利用待测物流入反 应池时在工作电极表面发生氧化 或还原反应，两电极间就有电流 通过，此电流大小与待测物浓度 成正比。 采用安培检测器时，流动相必 须含有电解质，且呈化学隋性。 它最适于与反相色谱匹配。但此 检测器只能检测具有电活性的物 质。 液相色谱常用检测器的一般性质液相色谱常用检测器的一般性质 检测器检测器 选择性选择性 梯度梯度 洗脱洗脱 线性线性 范围范围 检测限检测限 ( (g/ml)g/ml) 敏感性敏感性 对流速对流速 对温度对温度 紫外紫外 紫外吸收紫外吸收 可以可以 1010 5 5 210210 1010 不敏感不敏感 低低 示差示差 通用型通用型不行不行1010 4 4 210210 7 7 不敏感不敏感 1010 4 4 荧光荧光 发荧光物质发荧光物质 可以可以 1010 3 3 1010 1111 不敏感不敏感 低低 电化学电化学 电活性电活性 不行不行1010 6 6 1010 1212 敏感敏感 1.5%1.5% 色谱数据处理和色谱工作站 l l 早期的色谱仪采用记录仪，通常是一种电子电位早期的色谱仪采用记录仪，通常是一种电子电位 差计来记录色谱图。由色谱图量取两个最重要的差计来记录色谱图。由色谱图量取两个最重要的 色谱参数：保留值和峰面积。色谱参数：保留值和峰面积。 由于色谱分析的特殊性和电子技术的迅速发展，由于色谱分析的特殊性和电子技术的迅速发展， 目前色谱分析普遍使用色谱数据处理机获得色谱目前色谱分析普遍使用色谱数据处理机获得色谱 信息。大多数色谱数据处理装置是由数字电子积信息。大多数色谱数据处理装置是由数字电子积 分仪和微处理机系统组成。通过分仪和微