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文档简介

微生物SOP培训 庞聿婷 2014.3.10 一、血培养 v最有价值的标本,菌血症/血流感染和脓毒血症 的出现说明微生物在随血液散播全身。是感染的 最严重表现之一。 v用于菌血症、感染性心内膜炎、化脓性血栓性静 脉炎以及不明原因发热的诊断和鉴别诊断。 v一般来说,血中出现微生物是致病的。但个别情 况例外:拔牙、其他牙科、外科涉及到含粘膜的 操作、支气管镜检查、导尿术等操作,可引起一 过性菌血症。 一、血培养 采血指征 1.发热(38)或低温(36) 6.皮肤、黏膜出血 2.寒战 7.昏迷 3.白细胞增多 8.多器官衰竭 4.粒细胞减少 9.血压降低 5.血小板减少 10.呼吸加快 另有书籍:T38 一、血培养 标本要求 v血液、脑脊髓液、关节液、胸腹腔积液等无菌部 位的标本均可以注入血培养瓶进行培养。 v标本采集部位及消毒方法: va.成人可从肘静脉采血,新生儿可采脐带血或静 脉血。 vb.注意严格消毒,75%的酒精擦拭静脉穿刺部位 待30s以上,碘伏从穿刺点由内向外画圈进行消 毒,晾干1-2min,75%酒精脱碘,采血前不要再 触摸该点。 用75%的酒精消毒培养瓶口,晾干 1min,进行采血。 一、血培养 v一般情况下应在病人发热初期或发热高峰时 采集,最好在抗菌药物应用之前,对已用药 而因病情不允许停药的患者也应下次用药前 采集,并以在发冷或发热前半小时为宜。 v 成人采集量为8 ml左右,儿童为5ml左右, 如患者接受抗菌药物治疗达10-15天以上者, 采血量则要10ml 一、血培养 v尽量不要和其他检查同时抽血 v如果同时有其他检查,将血液最先注入血 培养瓶以免污染 v床边接种,立即送检或室温(18-22)/37 存放,不可冷藏,24小时内送检。 v采集完成后应在血培养瓶上正确填写患者 信息 一、血培养 v在24 h 内采集2 3次。 采集1 次,检出率约80%; 采集2 次,检出率约90%; 采集3 次,则检出率达99% 故推荐在2 4 h 内抽3 次血培养。仅抽1 次 血培养,除了检出率低(因菌血症常会暂时 消失) 外,还会使检验人员很难评估被视为 污染菌者是否与感染有关。如果抽血培养2 次或3 次,则能够得到肯定。 一、血培养 血培养的接收 v检查瓶子上的标签,与申请单上的标签及患者 信息是否一致 v血培养瓶内的血液量必须足够,也不能超量。 不合格血培养标本处理 v如培养瓶上标签与申请单上标签及患者信息不 一致,立即与临床相关人员联系,报告拒收理 由。 v如采血量不足,立即与临床人员联系,报告标 本不合格理由,建议重新采血。 一、血培养 注意: 很多患者标本由于采集血量不足,采集血培 养套数不够,采集时间不合适,特别是24小 时内只采集一瓶血进行血培养,采血前或采 血时正用抗生素治疗,可能降低血培养的阳 性率,不符合采血的基本规程。 二、脑脊液 送检指征: 成人:发热、头痛、恶心呕吐、颈强直 和反射增强等症状,怀疑为脑膜炎患 者。 儿童:儿童和新生儿的临床表现不明显 ,因此对于婴儿不明原因发热,应怀 疑为脑膜炎患者,采集脑脊液送检。 二、脑脊液 采集时间: v当怀疑患者脑膜炎时应立即采集脑 脊液,并且尽量在应用抗生素之前 采集。对已用抗微生物药物而不能 终止的患者,应在血药浓度最低时 或下次用药前采集。 二、脑脊液 采集方法及采集量: v脑脊液通常是经腰椎穿刺采集(注意 严格的无菌操作)标本量最好2ml, 不得少于1ml。 标本的运送: vCSF采集后,置于无菌小瓶中,在室 温下15分钟内送到实验室,绝不可冷 藏 二、脑脊液 标本的验收: v检查盛装脑脊液的容器标签与申请单是否相符,容 器是否有渗漏、破裂或者明显的污染检查标本的量 是否适量(不得少于1ml) 标本的不合格处理: v由于脑脊液的采集为侵入性操作获得的标本,不易 重复取材送检,应及时与医师协商,标本可按常规 处理,但报告单上须注明标本不合格,培养结果可 能受影响。 二、脑脊液 vCSF革兰氏染色可为细菌性脑膜炎做出快速 诊断,但敏感性仅为4060%。 vCSF培养是确诊细菌性脑膜炎的“金标准”,但 敏感性并不高,而在先期接受抗生素治疗者 中敏感性更是低于50%,故培养阴性者不能 排除诊断。 vCSF中长出任何菌都是致病菌。做脑脊液培 养时,建议同时做血培养。 三、穿刺液 v穿刺液(胸水、腹水、关节液等)。需用药 之前或用药之后1-2 天采集标本。对已用抗微 生物药物而不能终止的患者,应在血药浓度 最低时或下次用药前采集。 v 标本应严格无菌穿刺,标本量为1-5ml,置 于无菌小瓶中常温下15min内送到实验室,以 提高检出率。若不能及时送检,室温保存不 能超过24小时。 三、穿刺液 标本的验收: v检查盛装的容器是否有渗漏、破裂或明显污 染 v检查盛装的容器标签与申请单是否相符 v检查标本量是否适量(不能少于1ml) v检查送检时间是否符合要求 三、穿刺液 标本的拒收及处理: v当送检标本有不合格项时,应拒收标本。并 且与临床医师沟通,要求重新取材送检并说 明拒收原因。如果不合格标本为不易重复取 材送检,应及时与医师协商,标本可按常规 处理,但报告单上须注明标本不合格,培养 结果可能受影响。 四、尿液 清洁中段尿液 1.时间:清晨第一次尿液为最佳。如医生或病人要求 留取随机尿液也可以。每天检查一次即可。 2.留取标本前用肥皂水清洗外阴及尿道口周围,再用 清水冲洗尿道口周围 3.留取中段尿10-20ml直接排入无菌杯中。无菌尿杯 的要求:一次性 干燥 不渗漏 不吸水 无防腐剂的 广口带盖的杯子。 4.标本应于1小时内送检。 5.一般连续送检3天,每天一次。 四、尿液 v在抗微生物药物应用前采集标本;对已用抗 微生物药物而不能终止的患者,应在血药浓 度最低时或下次用药前采集。 v女性须避开经期。 v标本采集量:成人最好采集10-15ml,婴幼儿 不得少于1ml。尿量不足,培养结果可能不可 靠。尿液尽量能在膀胱中保留6h以上留取。 四、尿液 v验收同穿刺液的验收方法 不合格标本处理: v对于标本有不合格项的,及时与临床医师或 者是患者本人及家属联系说明原因, v要求重新留取送检标本。 五、呼吸道标本 v自然咳痰:最好为清晨第一口痰,先用温开 水漱口或刷牙,用力咳出呼吸道深部痰,直 接吐在清洁、无菌、干燥、不渗漏、不吸水 的广口带盖容器内,标本量不少于1 ml。 v导痰:当患者无痰或者痰量较少时,可用超 声雾化吸入3-5的高渗盐水导痰。 v经鼻腔或口腔吸痰:对咳痰乏力或者昏迷病 人,可用吸痰管经鼻腔或口腔吸痰。 五、呼吸道标本 v经人工气道吸痰:对于气管切开或插管的病 人,可用吸痰管经人工气道吸痰。 v经支气管镜采样:用防污染支气管镜专用吸 痰管直接采集下呼吸道标本。 v咽拭子:用无菌棉拭子轻轻擦拭患者鼻咽部 粘膜,留取标本置无菌试管内送检。 五、呼吸道标本 v标本应于2小时内送检,不能及时 送检的标本可4冷藏保存,冷藏 时间不能超过24小时。建议尽快 送检,冷藏对结果有影响。一般连 续送检3天,每天一次 v抗酸染色(即找结核菌)标本也 建议留晨起痰或随机痰。 六、粪便 1.建议将粪便直接排泄在便盆、塑料巾上。不 能排泄在抽水马桶自来水中,因为这样留取 的标本会被尿液、消毒剂、自来水等污染 2.采集有脓、有血或是有粘液的部分。水样标 本可取絮状部分送检。外观无异样的标本( 黄色成形软便)不建议进行细菌学检查。 六、粪便 3.收集约10-20g(蚕豆大小),水样标本 1-2ml,置于清洁干燥容器 4.立即送检,或于1小时内保温送检。不 能及时送检的标本可4 冷藏保存,冷 藏时间不能超过24小时。建议立即送检 ,冷藏对结果有影响。 七、皮肤和软组织(伤口) v如不怀疑感染不建议做细菌培养 v送检感染的组织或者体液(尽量避免拭子) v采集前严格消毒,对于大多数开放性伤口应 该先前清创、皮肤消毒,注意严格无菌操作 。烧伤伤口清创后采集渗出液。 v若标本量少用拭子采集前应先沾取无菌生理 盐水 七、皮肤和软组织(伤口) 未破裂脓肿不能用拭子,消毒后用注射器将脓 肿内容物吸出然后切开脓肿引流,取部分脓 肿壁送检。如有需要也可将注射器中脓肿内 容物送检。 5.不要仅送检脓液,应在病灶及基底部边缘采 集标本,最好是组织标本 注:由于实验室条件有限,厌氧培养不能开展 八、标本接种 v临床标本对于培养基的选择 1.痰标本血培养基麦康凯/巧克力 2.尿标本血培养基(密涂)/麦康凯 3.便标本伊红美蓝/SS培养基 4.

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