血红蛋白与电泳技术ppt课件

血红蛋白与电泳技术血红蛋白与电泳技术 浦北县人民医院 谢正慧 2012.11 人体的血红蛋白是一个完整的四聚体。 每个血红蛋白分子有2条类肽链（、 ）和2条非肽链（、）严格按 1：1的比例组成。任何一类肽链合成减 少，均会造成肽链的不平衡，产生地中 海贫血。 血红蛋白血红蛋白 血红蛋白的演化血红蛋白的演化 1、妊娠3周卵黄囊造血，生成初级幼稚红细胞- 胚胎型血红蛋白： HbGower(22) HbGower(22) HbPortland(22) 这些Hb与氧的亲合力强，有利于从胎盘摄取O2供 胚胎需要。 血红蛋白的演化血红蛋白的演化 2、妊娠中期-肝脾造血期 -肽链合成停止，-肽链合成逐渐停止， 和合成增多-胎儿型血红蛋白： HbF(2 2) 还有少量的HbPortland(22) 血红蛋白的演化血红蛋白的演化 3、妊娠后期-骨髓造血为主。 这时血红蛋白的主要肽链为和，开始合成 少量的肽链，妊娠9个月后合成肽链 所以这时血红蛋白以HbF(2 2)为主，少量 的HbA(2 2),和微量的HbA2(2 2 ) 血红蛋白的演化血红蛋白的演化 4、出生后肽链合成迅速减少(出生后12-24 个月降至成人水平)，而合成迅速增多， 合成始终很少。 所以出生后血红蛋白以成人型血红蛋白 HbA(2 2)为主,少量的HbA2(2 2 ) 、 HbF(2 2) 珠蛋白肽链的演化与地贫珠蛋白肽链的演化与地贫 胎儿的中后期， 肽链不可替代的，如果是 地贫的纯合子，由于体内不能合成肽链 ，就会出现死胎、死产或出生后很快死亡 珠蛋白肽链的演化与地贫珠蛋白肽链的演化与地贫 2、而 -地贫，由于胎儿期肽链产量很少，所 以对胎儿发育影响较小。 。出生后头几个月肽链逐渐被肽链取代，所以临 床贫血表现往往在出生后几个月才出现。 但在1岁后肽链占非肽链的95%以上，所以重 型地贫患者贫血严重，如不定期输血，常在几 岁内死亡。 血红蛋白病的定义血红蛋白病的定义 血红蛋白病是由于血红蛋白在质和量上的 异常而发生的一类遗传性贫血病，分为两 大类： 1、异常血红蛋白病是由于血红蛋白发生了 结构上的异常而导致的贫血症。 2、地中海贫血：由于某类珠蛋白合成受抑 所引起的溶血性贫血，但不涉及血红蛋白 结构上的异常。 血红蛋白病的定义血红蛋白病的定义 如：珠蛋白合成受抑就称地贫； 珠蛋白合成受抑就称地贫； 珠蛋白合成受抑就称地贫 珠蛋白合成受抑就称地贫 。 主要异常血红蛋白病的分类主要异常血红蛋白病的分类 珠蛋白基因一级结构的变化导致异常血红 蛋白，这种变异可发生在珠蛋白肽链 。目前已鉴别出750多种变异体，但这并不 都导致血红蛋白的功能发生重大变化，严 重影响功能并导致严重贫血的占很少比例 。 临床上重要的临床上重要的HbHb病病 1、镰形细胞综合征 2、不稳定血红蛋白病(先天性Heinz小体 溶血性贫血) 3、具有不正常氧亲和力的血红蛋白病 高亲和力-家族性红细胞增多症 低亲和力家族性紫绀 临床上重要的临床上重要的HbHb病病 4、血红蛋白M-家族性紫绀 5、导致地贫表现型的结构变异体。 主要的地贫分类主要的地贫分类 一、-地贫:基因位于16号染色体短臂上， 每对染色体共4个基因(/) 1、静止型-地贫 基因表型：-/或T/ 2、标准型-地贫 基因表型：-/或-/- 主要的地贫分类主要的地贫分类 3、HbH病 地贫1与地贫2的双重杂合子(-/-) 地贫1与非缺失型地贫的双重杂合子( -/ T) 地贫1与HbConstant Spring的双重杂合子( -/CS) 地贫1与HbQ的双重杂合子(-/Q) 主要的地贫分类主要的地贫分类 总之，3个基因缺失或功能障碍- HbH 4、HbBart,s胎儿水肿病 地贫1的纯合子(-/-),即是4个基因 全部缺失 主要的地贫分类主要的地贫分类 二、-地贫：基因位于11号染色体短臂上 的一对等位基因，正常为(N/N), 0指突变导 致基因功能全失， +指突变导致基因功能 部分损失 1、静止型-地贫：无贫血症状，但可见红 细胞形态轻度改变，HbA2增高。常见于+- 地贫杂合子 2、轻型-地贫：有轻度贫血症状， HbA2 增高。常见于0-地贫杂合子 主要的地贫分类主要的地贫分类 3、重型-地贫：有严重的贫血症状，严 重的红细胞形态改变，HbF显著升高。常 见于0-地贫纯合子 4、中间型-地贫：贫血处于重度和轻 度之间的-地贫纯合子 一个或两个地贫等位基因为轻型 地贫与地贫共遗传(+-地贫与地贫-/ 或- / 或- /- ) 主要的地贫分类主要的地贫分类 (+-地贫与HbH) -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 1、静止型-地贫：缺失一个基因引起，最 常见的是-3.7缺失型(-3.7/) 表现：患者无任何症状，血象正常，Hb正 常，红细胞内无包涵体，出生时脐血 HbBart,s可达1-2%，但很快消失。要通过 PCR才能检测其基因型。 -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 2、标准型-地贫： 最常见的是-3.7缺失型的纯合子(-3.7/ -3.7) ，其次是缺失2个基因(-/),如主要是 东南亚缺失型(SEA型) 患者无明显临床症状，脐血HbBart,s含 量可达5-15%，成人Hb正常或轻度下 降，MCV、MCH轻度下降，少数可见 包涵体， Hb电泳偶可见HbH。 -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 3、HbH病：由于4个-基因缺失3个引起， 其临床症状轻重程度取决于其基因型的不同 。 单纯缺失型出生时贫血较轻或无贫血，此后 逐渐加重，通常为轻到中度贫血，伴有脾肿 大，偶有黄疸，当妊娠、感染、服用氧化性 药物时可加重，发育正常，骨骼面容改变不 明显，非缺失型多为HbH-CS，其发病年龄 较早，贫血较严重，肝脾大明显，多数需输 血， HbH及HbBart,s较高。 HbH病患者脐血中HbBart,s含量约为25%， 成年期HbH约0.8-40%，可有少量HbBart,s ，HbA2减少。HbH-CS病人可有少量HbCS ，约2-3%。HbQ-H病的电泳为约HbQ80% ，HbH15-20%，少量的HbBart,s，HbA、 HbA2不存在。 -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 4、 HbBart,s 胎儿水肿综合征： 4个-基因完全缺失，是-地贫中最严重的。胎 儿一般在23-38周或出生数小时内死亡，少数 可存和数天。 脐血电泳： HbBart,s 80-90%，不等量的 HbPotland 10-29%及微量的HbH,没有HbA、 HbA2、HbF。 -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 1、静止型-地贫 大多数没有症状，没有贫血，但血涂 片可见少数靶细胞，RBC脆性轻度降 低，HbA2略升高(3.5%)，也有少数 病例正常。 -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 2、轻型 -地贫 RBC脆性降低，Hb80g/l以上，MCV、 MCH明显降低，涂片可见小细胞低血色素 性贫血，有靶型红细胞。 电泳：HbA2显著升高 (3.5-7%)，HbF可正 常，部分病例轻度升高，一般不超过5%， 但如同时有缺铁性贫血时， HbA2不高，经 铁剂后HbA2又可升高。 -地贫的临床分型特征地贫的临床分型特征 3、重型-地贫，须定期输血维持生命。 重度贫血，Hb50g/L以下，涂片可见靶型红 细胞增多，细胞大小不均，典型的小细胞低血 色素性贫血，MCV、MCH、MCHC明显降低 ，脾亢进时，RBC、WBC、PLT均减少。 电泳：HbF增高，达60%以上，也有少数患者 HbF为10-30%， HbA2含量变化较大，可以 1.4-4.1% 什么电泳技术什么电泳技术 电泳是利用混悬于溶液中的带电质点在外 加电场作用下，向着与之带有相异电荷的 电极方向移动的现象，利用这种原理达达 将多种组分物质分离分析的技术称电泳 技 术。 Hb电泳通常是PH8.5条件下的电泳，这时 大多数的Hb组份带负电荷，从负极向正极 移动，各成分的大小及带电量的不同，移 动的速度不同，而将不同组份分离出来。 常见的电泳区带常见的电泳区带 总结总结 总之 1、成年人的Hb电泳可见A区带及A2区带， 极少量的F 区带，出现其它区带均为不正常 区带。 2、各区带的定量值应在参考范围内。A2降 低，多见于-地贫， A2 升高多见于-地贫 。F升高或合并A2升高多见于-地贫。 总结总结 3、地贫的轻重程度一般与区带超出参考范围的多 少成正比，或者与出现异常区带的量成正比。 4、婴儿血或脐带血以F区带为主，有少量的A区 带，极微量的A2，如果是脐带血，A2往往检测不 出，随着年龄的增长， F区带减少，A急剧增长， A2慢慢增加，到2岁达到成人水平。如果幼儿的 电泳区带含量与成人参加水平有些少偏差，难以 下定论的，可建议满2岁后复查。 总结总结 5、如果想知道地贫的基因分型，需要采作 PCR技