兽医临床病理学ppt课件

临床化学检验 一、临床化学自动分析仪 世界上第一台用于临床生化检验的自动分仪，是美国泰 克尼康公司（TECHNICON）， 于 1957年生产的，仪器名为 Auto Analyzer。是一台单通道、连续、流动式自动分析仪 。最初只用于Glu. BUN测定。报告结果是光密度值。 1964年，泰克民康公司又生产出连续多道自动分析仪 SMA（Sequential multiple Auto analyzer），该仪器由电 子计算机控制，每小时测150个样本，每个样本同时测定20 个项目，使连续流动分析达到了一个新的水平。 65年以后，各种自动分析仪器应运而生。 1目前临床常用的自动分析仪器有： （1）生化分析仪： 有全自动、半自动之分 国产：上海、北京等，4万元以上； 进口：美国、日本、法国、意大利、瑞士等， 10-15万元； （2）血气酸碱分析仪； （3）血细胞计数仪； （4）5020型血红蛋白仪： （5）全自动电位滴定仪：DL58 15万元/台 （6）全自动血液细胞分析仪： BC-2000，15万元/台 2评价自动分析仪器的原则： （1）方法先进 （2）重复性好； （3）要有准确重复的分析系统； （4）能自动定时； （5）结果报告醒目、直观； （6）适应范围广，一机多用 （7）灵敏性好； （8）处理能力强； （9）实用。 二、质量控制 1质量控制的目的 保证检测结果准确可靠，同时起到： （1）了解试验结果精密度的动态情况； （2）观察试验结果漂移及增降趋势； 从而采取措施预防严重误差的出现。 （3）与国家规定的标准物进行比较，以了解和校正 其准确度； （4）为不同测定方法的比较及选择提供参考； （5）监测仪器的工作状态； （6）了解操作者的操作水平； （7）作实验室间的比较，以利相互交流和提高。 2与质量控制有关的概念 【误差】 指的是实验结果与真实数值之间的差异。 系统误差（恒定误差） 分析过程中一些经常性出现的原因所成。 仪器使用不当 分析方法不完善 试剂不纯 环境改变 操作失误 随机误差 （偶然误差） 事先无法预料，出现误差的大小没有规律，完全符合 概率论定律。这种误差通过严格操作规程，认真细致的工 作是可以减少。当测定次数增多时，此时误差可相应抵消 。 过失误差 由工作不慎或操作不当而引起。如配错试剂，搞错样 本，操作不正确，读数、记录或计算有误等。 绝对误差 即测定值与真值之差。 如：称量为1.655g，实重1.654g，绝对误差为0.001g。 相对误差： 绝对误差在真实数值中所占的百分率 如上例： 相对误差=0.001/1.654100% = 0.06% 【准确度】 测定值与真值之间的符合程度。 误差愈小，准确度越大。 【精密度】 每次测定值与算术平均值之间的符合程度。 通常把测定值与算术平均值之间的差异称之为偏差。 偏差愈小，精确度愈高。 3减少误差的措施 纠正系统误差 a校准仪器和量具： b作阴性、阳性对照； c用多种方法相互比较： d用参照标准样本检验。 减少偶然误差 a精心操作，严格执行操作规程； b固定使用已校正的仪器； c重复测定取均值等。 消除过失误差 a作好原始记录； b建立核对检查制度； c制订统一的操作规程，人人遵守。 三、临床化学检验 （一）. 常用的检验项目 蛋白质； 葡萄糖； 脂类； 无机离子 有机物：BUN，尿酸，肌肝、肌酸； 微量元素：Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo； 血气分析与酸碱平衡等。 （二） 各项检验 【蛋白质】 1.研究进展迅速 蛋白质的合成、降解、转换更新和代谢调节 蛋白质生理功能的进一步研究。 蛋白质的遗传变异，通过它了解遗传特征。 以新技术对血浆蛋白质进行微量和特异检测分析。 在进化与个体发育的研究中，发现不少正常胎儿期蛋 白可以在恶性肿瘤患者重新出现。 蛋白质实际用于组织与细胞培养。 在肿瘤的发病学研究中广泛涉及血浆蛋白质。 2.蛋白质的功能 可概括为： 营养作用 维持血浆胶体渗透压 维持血浆正常pH值 运输作用 免疫与防御功能 催化作用 代谢调控 凝血、抗凝血及纤溶作用等。 3.蛋白质的分类 盐析法：白蛋白和球蛋白 电泳法：白蛋白、1、2、球蛋白 4.测定方法 凯氏定氮法（参考标准方法） 消化 用浓硫酸将蛋白质消化为硫酸铵；（耗时） 蒸馏 用碱性溶液碱化消化液并蒸馏挥发； 吸收 用酸性溶液（硼酸）吸收气态氨（使H+） 滴定 用已标定的无机酸滴定，计算总氮量 定蛋白（总氮量-非蛋白氮）6.25=蛋白含量 双缩脲比色法（血浆总蛋白测定推荐方法） 原理 蛋白质中的肽键（-CONH-）在碱性条件下与 Cu2+络合成紫红色化合物，产生的颜色在一定范围 内与蛋白质含量成正比。此反应和二分子尿素缩合 后的产物双缩脲（ H2N-CO-NH-CO-NH2）与碱性铜溶 液作用形成紫红色化合物的反应相似，故称为双缩 脲反应。 此方法简便、准确、重复性好，但灵敏度较其 它方法稍差，是目前临床上最常规的方法。 紫外分光光度法 原理 蛋白质分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白质溶液在 280nm处有一吸收峰。可用于测定蛋白质但需避免核酸干扰。 优点 敏感而简便，可保留蛋白生物活性。需紫外分光光度计 及石英比色皿。 缺点 各种蛋白质中芳香族氨基酸含量和比例不同；在280nm测 定易受游离色aa和酪aa以及尿酸和胆红素的干扰；导致 准确性和特异性受影响。 折光测定法 原理 溶解在溶液中的固体可增加溶液的光折 射率，在固定波长和温度下，光折射率 和血清中蛋白质含量成正比。 优点 简便、快速，易掌握，重复性较好，适合临床； 缺点 准确性较差。 自动生化分析仪测定 5.临床应用 TP：少见，属相对性； 常见于脱水、休克、某些肿瘤等； TP：肝脏疾病、肾脏疾病、肠道吸收不良 A ：少见属相对性，。 常见于脱水、休克。 A ：肝炎、肝硬化、慢性胃肠疾病； 某些寄生虫感染、长期饥饿或营养不良。 G：慢性肝炎、肝硬化； G：饲喂初乳不足、免疫缺陷病； A/G倒置 是肝功能损害的一个重要指标。 【葡萄糖】 （BGBlood Glucos） 一、血糖的来源、去路和调节 1.概念 血 糖： 指血液中的葡萄糖 血糖水平： 即血糖浓度 参 考 值： 3.96.7mmol/L（人） 2.糖的来源与去路 3.糖的生理功能（能量资源和结构材料） 氧化供能：分解代谢提供机体75%能量； 机体组成成分之一 糖占机体干重的2%; 形成糖原储存在肝脏与肌肉中； 形成糖蛋白和蛋白多糖（激素、酶、受体等）、糖脂 （神经组织和细胞膜重要组分）； 转变作用 其它糖及糖衍生物（核糖、脱氧核糖、氨基多糖） 等；非糖物质（脂肪、氨基酸核酸）。 糖代谢紊乱 供能障碍 一系列代谢变化。 4.血糖水平恒定的生理意义 保证重要组织器官的能量供应，特别是某些依赖葡萄糖 供能的组织器官 脑组织不能利用脂酸，正常情况下主要依赖葡萄糖供能； 红细胞没有线粒体，完全通过糖酵解获能； 骨髓和神经组织代谢活跃，经常利用葡萄糖供能。 5.血糖浓度的调节 肝脏调节 转运调控：肝细胞膜 G 载体可允许G 快速转运，达到平衡 时，肝内外G 浓度几乎相等。 酶的双向调控：通过神经-激素的作用，使肝细胞内各种糖 代谢的酶活性改变。 葡萄糖-6-磷酸酶，可促进肝糖原水解， 补充和升高血糖 。 促进组织摄取葡萄糖，促进肝糖原合成、抑制肝糖原分解 、 抑制糖异生而降糖。 神经调节 主要通过下丘脑和自主神经（交感和副交感）直接作用 于肝脏获调节激素的分泌而影响血糖。 激素调节 降糖激素：胰岛素 胰岛素样生长因子 升糖激素：胰高血糖素 肾上腺素 生长激素 皮质醇 甲状腺激素 二.糖代谢紊乱 1.高血糖症与糖尿病 高血糖症:空腹血浆血糖（FPG）7.3mmol/L（130mg/dl） 高糖饮食； 见于糖尿病；内分泌腺 生理性：情绪紧张； 病理性： 功能亢进；颅内压升高 肾上腺分泌 刺激血糖中枢； 脱水。 尿糖： 若血糖浓度高于肾糖阈值9.0mmol/L，即超过了肾 小球滤过率，出现尿糖。 糖尿病（diabetes mellitus,DM） 定 义： 是一种慢性、复杂的代谢紊乱性疾病，系胰岛素 相对或绝对不足，或利用缺陷引起。 临床特征：血糖持续升高，甚至出现糖尿。 “三多一少”：多尿、多饮、多食、体重减轻。 发病机制 胰腺细胞的自身免疫性损伤 机体对胰岛素的作用产生抵抗 2.低血糖症 低血糖症低血糖症 是指血糖浓度低于2.2mmol/L 时临床出现一系列 因血糖浓度过低引起的症候群。 发病原因 来源 去路 激素效应：升血糖激素缺乏，降血糖激素过剩。 肝脏疾病：肝功严重损伤致肝糖原减少和糖异生严重障碍 。 长期饥饿或剧烈运动时代谢率增加，血糖消耗过多。 3.酮血症： 酮体形成过多引起血中含量增高，称为酮血症。 酮体：乙酰乙酸（20）、-羟丁酸（78）、丙酮（2 ） 三者统称为酮体 原因： 糖尿病 糖摄入不足： 脂肪动员 糖原储存过多：脂肪动员 碱中毒：代偿 酮体的生成 糖代谢障碍 脂肪酸分解 临床意义： 如有酮体存在，需确定酮酸中毒状态； 酮血症的诊断对指导胰岛素治疗最有价值。 三. 体液葡萄糖的测定方法 1.无机化学法 Folin-Wu法，基于葡萄糖醛基的还原性 Cu2+ Cu+； 特异性差。 2.有机化学法： 邻甲苯胺法、联苯胺法、氨基联苯法等 邻甲苯胺 + Glu 葡萄糖基胺 希夫氏碱（蓝绿色） 影响因素多。 3.酶法测定 己糖激酶法（法） 葡萄糖ATP 葡萄糖-磷酸ADP 葡萄糖-6-磷酸NADP G-6-PD -磷酸葡萄糖内酯+NADPH NADPH在340nm有吸收峰，其吸光度增加与标本中的葡萄糖 浓度成正比。 本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，适用于自动化 分析，为葡萄糖测定的参考方法，但是试剂较贵。 葡萄糖氧化酶法(GOD） 葡萄糖 O2 + H2O GOD 葡萄糖酸内酯 2O2 22O2 + 4-氨基安替比林+酚 红色醌类化合物+2O +O2 操作简单，特异性较高，是血糖测定的首选方法但溶 血、GSH、Vc、胆红素等可引起测定结果负偏差。 4.自动生化分析仪测定 四.血糖测定的临床应用 反应机体对Glu的利用情况：了解机体胰岛的功能， 了解肝脏糖原分解和糖元异生情况。 BS： 糖尿病 ； 肾上腺皮质机能亢进； 垂体机能亢进； 反刍兽氨中毒； 牛生产瘫痪； 用胰岛素过量； 绵羊肠毒血症等 BS： 肾皮质功能不全； 胰岛素分泌过多 肝功能不全； 牛的酮病； 新生幼畜低血糖等。 【血浆脂类】 血脂：胆固醇、胆固醇脂、甘油三脂、磷脂等。 1.测定方法： 移量法： 老方法，现已不用； 化学方法： 硫磷铁反应法 强酸试剂显色法 薄层析法： 酶法测定： 70年开始，需紫外分光光度计、氧电极 等，昂贵，少用。 自动生化分析仪： 多采用酶法测定，试剂盒较贵。 2. 临床应用： 动物原发性血脂症较少 主要是了解继发性疾病： 如： 内分泌障碍； 肝脏疾病； 胰腺疾病； 肾脏病等。 【血中有机物】 包括尿素痰（ BUN）、尿酸、肌酸、肌肝等 1.测定方法： 半定量试纸法； 色谱试纸法； 定量比色法； 自动生化分析仪测定。 2. 临床应用： 诊断泌尿系统疾病： 氮血症时 BUN，肾功能障碍时肌肝； 肾炎时尿酸。 鉴别肝脏疾病： 肝病、肝硬化等，BUN 判断疾病的预后： 肌肝50mg/L，提示严重肾损伤，预后不良； 肌肝100mg/L，动物即可死亡。 【血清无机离子测定】 包括K、Na、Ca、Pi、Cl、Mg等 1.测定方法： 火焰光度法： 离子选择电极法； 化学法：仍常用 原子吸收分光光度法：较理想，仪器较贵； 2.临床应用 了解机体离子的代谢状况。 【微量元素测定】 包括Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo等 1.测定方法： 原子吸收分光光度法； 极谱仪法。 2.临床应用 微量元素与生长发育的关系 Cu、Fe、Mn、Zn、Co、I等促生长； 缺乏其中一种，可引起发育停滞。 给发育不良的动物补Mn、Co，可加速生长，增加体 重。 微量元素能影响内分泌： 铅、镉、汞过多会干扰内分泌的功能。 缺Fe： 出现糖尿病； 生殖器官发育不全； 性功能紊化。 缺Mn：胰岛数目少； Glu利用； 精子数目； 缺Zn：性功能； 睾丸缩小； 精子生成停顿。 c微量元素与疾病： 缺Se ： 人的克山病； 动物白肌病； 幼畜腹泻等。 缺Zn： 影响组织的愈合过程； Cu、Fe、Zn缺乏：可降低机体的免疫力。 多数有致畸作用： 如： Cu、Fe、Mn、Zn、Se、I、镉 镍、砷、铟、汞、碲等。 镍、Fe、能