在大肠腺癌中的表达课件

刑 钮 梅 扫 寒 长 责 肿 连 预 弗 吾 徒 柒 牲 讨 厨 朱 搞 护 荐 宵 粉 泌 茫 水 惫 予 甜 汲 戍 良 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 / 僳 哉 挤 纤 腻 终 戎 绿 默 辑 缀 奶 炎 混 糯 蛆 模 渠 令 雅 糙 觉 烃 组 捂 密 镑 钠 此 玩 正 跃 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2在大肠腺癌中的表达 桂 坡 痹 厩 股 疥 肖 淄 油 礁 短 湛 烹 馈 哨 钒 拱 区 快 唉 派 率 朵 糜 计 层 回 筷 愿 懈 德 羡 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 第一部分 大肠腺癌中EphA2表达及其与 临床病理学因素、DNA倍体、 细胞周期关系的研究 褒 咀 轩 闸 俞 褥 铀 亨 臻 砖 榷 惩 顶 怖 瀑 鸥 真 朴 避 褥 推 侩 围 附 解 搪 杆 筷 贼 黎 屹 梁 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2基因的介绍 EphA2是Lindberg于1990年用简并引物从人角化细胞 cDNA文库中筛选得到的一个Eph（Erythropoitin- produceing hepato-cellular,Eph) 亚家族成员 。 人EphA2基因定位于1p36.1,有17个外显子。 Eph受体家族是已知最大的酪氨酸蛋白激酶受体 (receptor tyrosine kinase, RTK)家族最大的家庭。 Eph家族受体激酶和他们EFN配体介导的细胞信号传 导参与神经系统的基本发生过程、神经系统的信号传 递，在细胞的分化、发育、增殖，组织和器官的形成 、血管生成、细胞与细胞之间的粘附及肿瘤的发生 和肿瘤的新生血管的形成等过程中发挥重要的和必 不可少的作用。 睦 谚 轨 两 刽 挚 郝 惶 吮 撞 锑 瘦 绵 酥 牵 很 日 实 顽 嗽 唯 琉 意 容 刑 绑 碍 鳖 什 褐 凋 潭 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2与肿瘤的关系 EphA2广泛高表达于不同的肿瘤组织和细胞系，如 ：乳腺癌、恶性黑色素瘤、前列腺癌和食管癌，肾 细胞癌等，目前认为EphA2参与肿瘤的发生和发展 ，是功能强大的癌基因。 EphA2的高表达能诱导非转化乳腺和前列腺上皮细 胞在体内、外的恶性转化，并促进其侵袭转移 。 应用EphA2蛋白的抗体靶向抑制试验，下调EphA2 蛋白表达的同时，也抑制了肿瘤细胞的生长，进而 降低肿瘤的恶性程度 。 濒 陕 拥 敲 诗 涤 祝 轴 佬 比 萝 导 薯 跌 镰 祈 脯 盎 哗 透 妈 雇 蒙 油 过 醋 窟 衅 瘟 台 厕 沼 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 154例大肠腺癌组织和相应正常大肠粘膜组织均来自郑州大学第一、二附属医院和河 南省肿瘤医院2001年1月2004年12月手术切除标本的存档蜡块 (其中66例为手术切 除新鲜标本和蜡块和88例存档蜡块) 1份置4%多聚甲醛中固定存放另2份置-82中存放 石蜡包 埋、切 片、 HE 染色 石蜡包埋 、切片， 进行免疫 组化 提取总 mRNA 、 进行RT - PCR 实 验 标 本 FCM检 侧DNA 倍体、细 胞周期 细胞增 殖率 贡 呸 楼 穿 禄 嚏 靶 额 惑 硕 莆 逸 戊 碑 族 猿 娠 更 娥 澈 畸 骸 愚 纹 除 止 试 茬 减 愚 胞 斥 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 临床病理资料 154例（88例存档石蜡包埋标本和66例 手术切除新鲜大肠腺癌标本）大肠腺癌 患者，术前均未接受化疗、放疗及其他 治疗。其中男性 78例，女性 76例，年龄 在 23-85岁之间，平均年龄为 49.7岁。 述 获 腔 荣 搀 冀 炳 慢 芍 二 惰 所 欠 筋 绒 藕 沾 绚 孝 床 稳 侵 诛 耐 发 裳 迎 馋 嘎 郝 珠 啄 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 66例新鲜手术切除标本均为大肠腺癌： 分化程度:高分化腺癌30例，中分化腺癌23 例，低分化腺癌13例。 浸润深度:粘膜层10例，粘膜下层0例，肌 层14例，浆膜层37例，外周组织5例。 转移：有淋巴结转移者16例，无淋巴结转 移者50例；有血道转移者1例，无血道转 移者65例；无种植性转移。 饯 撅 度 钝 咙 稿 番 宙 万 哨 雹 宽 调 刑 丸 哈 帘 锅 绵 奸 选 馋 钥 桐 恳 嫂 的 究 捎 烁 茹 俞 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 88例存档蜡块全部为腺癌: 分化程度：高分化腺癌21例，中分化腺癌18例， 低分化29例和未分化20例； 浸润深度：粘膜层62例，粘膜下层1例，肌层17 例、浆膜层5例，外周组织3例； 转移：有淋巴结转移者14例，无淋巴结转移者74 例；有血道转移者11例，无血道转移者77例； 有种植性转移者10例，无种植性转移者78例 。 投 弧 婴 亥 岂 危 瘴 灶 蜂 车 诞 咬 絮 基 爪 懂 磁 多 卞 妨 褐 呕 攘 堪 神 掺 蛇 曝 慷 服 慰 残 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 技 术 路 线 免疫组化（SP法)FCMRT-PCR技术 检测154例大肠腺癌组织 和相应正常食管组织中 EphA2蛋白表达 检测66例大肠腺癌手术切 除新鲜组织和相应正常大 肠粘膜手术切除新鲜组织 中DNA倍体、细胞周期、 细胞增殖率 探讨EphA2表达与大肠腺癌病理临床因素、DNA倍体、细胞周期的关系 检测66例大肠腺癌手术切 除新鲜组织和相应正常大肠 粘膜手术切除新鲜组织中 EphA2mRNA表达 拘 潮 汲 仕 先 肇 柜 维 避 病 羞 弄 嗡 屎 稚 壕 艺 赡 曝 丑 叫 路 韧 乃 电 饶 莹 鱼 帧 鲤 排 妹 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 一. 免疫组化 v 步骤 （略） v 对照组设计：以已知EphA2阳性食管鳞癌和正常食管 粘膜腺体组织切片作为阳性对照，用正常兔IgG代替一抗 作为阴性对照，用PBS代替一抗作为空白对照。 v 免疫组化结果判定及定量分析：EPhA2免疫组化阳性 表达位于细胞胞浆，呈棕黄色。定量分析采用高清晰图 像处理系统，随机取10个高倍视野进行图像分析，对免 疫组化切片检测EphA2阳性细胞数，依据阳性细胞所占肿 瘤细胞面积的百分比和染色强度判断结果。 实 验 方 法 烈 拯 盈 垮 洋 探 宏 矛 宣 岗 恢 娘 背 陈 咯 九 孪 培 搜 炭 墅 急 抛 镊 境 库 皖 膀 转 这 并 界 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 二 .组织中总RNA的提取及RT-PCR v步骤 （略） v RNA浓度的测定 （略） v对照设置 ：（1）阴性对照：以去离子水代替提取 的总RNA，结果阴性。 v（2）内参对照：用-actin作为内参引物，与 EphA2和KAI1引物分别同管扩增，结果在紫外灯下 出现一条330bp的荧光带 v结果判定 v阳性判断标准为：目的EphA2基因RT-PCR产物凝 胶电泳后在紫外灯下分别出现一条586bp的荧光带 。 实 验 方 法 嘶 栈 颐 钥 恢 再 翠 旨 憋 沦 页 悲 源 旧 忧 增 纂 嚼 坍 开 誊 海 梅 赫 轩 涸 倍 滋 龟 具 姿 留 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 取大肠腺癌和正常大肠粘膜组织0.5g 剪碎100、300目尼龙网上搓 收集细胞液，800prm/min离心2min 70%乙醇(4)中固定1h LPR染液,避光冷藏(4)5min Stain 1ml避光30min. 上机检测 FCM实验步骤： 爬 津 搬 揽 坞 帚 哭 卸 脏 怂 褒 烙 悔 镍 哭 冯 砚 寨 矗 抡 请 匈 太 矮 盼 杜 姿 胖 噪 破 锻 斋 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 FCM对照组设计和诊断标准： 设正常对照组：用正常人外周血淋巴细胞，即二倍体细胞作为DNA含量 和肿瘤细胞DNA倍体、细胞周期的参考标准 DNA倍体分析:用Partec流式细胞仪,计数10000个细胞,具有相同DNA含 量的细胞群表现为直方图中独立的峰,即每个峰表示一定DNA含量或倍体 的细胞亚群。在正常对照组中,第1个峰代表单倍体(2C)细胞亚群,在实验 组中，第1个峰代表双倍体(G0/G1 ,2C)细胞亚群,第3个峰则代表四倍体 (G2/M，4C)细胞亚群，两峰之间代表S期细胞亚群。计算机系统算出每 个峰下的面积所表示的该倍体的细胞占全部细胞的百分比。 诊断标准:根据左连富的标准,DNA倍体单倍体细胞百分数与正常对照组 单倍体细胞平均百分数相比较,在其两个标准差之内为正常,否则为异常。 壤 算 栓 铁 檬 淋 诡 详 菠 苇 芭 任 酿 耪 芦 栗 镜 赣 遵 宙 庭 孔 似 瑞 牢 末 醋 付 檀 佛 暖 媚 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 FCM计算标准： DNA指数(DI)计算公式：DI=样品细胞G1峰道数均值正常组 织细胞G1峰道数均值。 DNA含量分析:以DNA指数(DI)表示细胞DNA相对含量，根 据DI值判断DNA倍体。0.9DI 1. 1 为DNA二倍体;DI 1. 1 为异倍体。 细胞周期分布的计算：运用DNA细胞分析软件，计算出各时 相的分布百分比，以S期细胞比率(SPF)和增殖指数（PI）表 示细胞的增殖活性。 SPF( %) = S ( G0/ G1 + S + G2M) 100 % PI=(S+G2)（G1+S+G2）100% 霸 骸 歉 席 尝 奎 埃 犀 光 洱 瓤 想 剥 须 太 缸 啤 漂 蒂 函 塘 癌 范 光 捆 蕊 淄 吴 挝 字 窿 聋 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 统计学处理 所有数据均经SPSS 12.0软件进行统计分析。计数资 料计算阳性率，计量资料用采用XS表示；阳性率 之间的比较采用2检验（chi-square）及Fisher确定概 率计算法；两组均数的比较用t检验(t-test)；两组以 上均数的比较用方差分析（ANVOA）和 Spearman 等级相关分析；两变量之间的关系分析采用相关分 析；多变量之间的关系分析采用秩和Chi-sguare 检 验；行程列表Chi-sguare检验。显著性水准=0.05。 许 馈 密 宗 痢 缓 尖 汝 维 具 哪 迁 柜 枯 绒 蹄 豫 荒 讯 戈 阐 魁 感 喀 哟 丫 砷 律 箍 乌 孤 标 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 恢 竟 蓝 赵 宰 仍 渍 义 美 纹 衅 钞 球 敌 沦 陪 在 溯 但 兽 杭 昆 饿 萝 陇 钓 擒 拄 玫 视 呈 臣 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2mRNA及蛋白表达与大肠腺癌 的关系：免疫组化结果 缺 意 洼 呆 斧 拥 俄 巡 惹 旷 秒 忻 堵 菇 搂 开 雁 仔 菇 眶 净 夫 墙 廓 峙 翔 偿 阮 狙 琶 理 怜 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 免疫组化检测结果： EphA2蛋白定位于癌细胞、 粘膜上皮细胞及癌组织血管 内皮胞浆内，呈棕黄色。 阴性对照均无阳性显示。 大肠腺癌组织及正常粘膜组织中大肠腺癌组织及正常粘膜组织中 EphA2EphA2蛋白的表达蛋白的表达 涕 刻 呀 战 靶 糯 鳃 务 之 溅 卉 半 嘲 峰 微 迷 眩 殿 争 哼 峦 妥 那 盖 袜 拦 旅 药 拓 窟 创 拧 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 正常粘膜 116(75.3) 6(3.9) 26（16.9） 6（3.9） 1.3690.663 腺 癌 12（7.8）32（20.8）48（22.7） 62（40.3）4.7890.542 组别 EphA2蛋白表达（例数%）a 阳性细胞面积（XS)b 0级 I级 II级 III级 一一. . 大肠腺癌组织和正常粘膜组大肠腺癌组织和正常粘膜组 织中织中EphA2EphA2蛋白表达蛋白表达 注：注：a:a: 2 2 =70.5706, P70 30 5 (16.7) 8 (26.8) 9(30.0) 8(26.8) 0.577 性别b 男 78 7(9.0) 21 (26.8) 26(33.3) 2 4(30.9) 女 76 5 (6.6) 11(14.5) 22 (28.9) 38 (50.0) 0.074 a: 2=7.580; b:2=6.928 恨 痹 炔 铲 扇 畦 旱 困 拣 效 左 距 瑟 界 妻 淑 好 泪 汀 腮 熟 攀 正 蚌 履 羔 肖 慰 宦 砸 呀 魁 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P 肿 瘤部 位c 升结肠 14 0 (0.0) 1 (7.1) 2 (14.3) 11 (78.6) 横结肠 6 1（16.7） 1(16.7) 3(50.0) 1（16.7） 降结肠 4 0(0.0) 1(25.0) 2(50.0) 1(25.0) 乙状结肠 23 3(13.0) 3(13.0) 8(34.8) 9(39.1) 直 肠 86 4(4.7) 24(28.0) 28(32.6) 29(33.7) 结肠 24 4(16.7) 2(8.3) 5(20.8) 11(45.2) 0.0798 大体类型d 隆突型 108 6（5.55） 25（23.14）31（28.7） 46（42.59） 溃疡型 6 0 （0.00） 3（50.0） 3（50.0） 0（0.00） 浸润型 27 3（11.11） 3（11.11）12（44.44） 9（33.33） 管周型 13 3（23.08） 1（7.70） 5（38.46） 7（53.85） 0.0228 c:2=9.8600; d：2=7.5625 三、EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系 （B) 详细部位不清 酷 豺 胸 箱 误 货 粉 壶 稀 吏 盎 朴 小 蚁 兑 镊 眼 炙 抠 疼 捐 颤 抄 凰 垄 殊 西 全 笛 搽 突 品 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因 素的关系(C) 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P 肿瘤体积 (直径cm) 9.1 7 2(28.6) 2(28.6) 2(28.6) 1(14.2) 0.533 2=10.723 晤 敏 袖 浇 贵 辣 盔 娃 呈 槐 咙 斩 权 滥 畅 戳 勒 诗 铆 存 宾 瞒 戎 章 裙 疗 按 烹 庸 哄 见 腑 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2蛋白表达与大肠腺癌患者临床病理学因素的关系(D) 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P 分化程度a 高分化 51 3(5.0) 7(13.7) 18(35.3) 23(45.1) 中分化 41 1(2.4) 9 (22.0) 18(43.9) 13(2.4) 低分化 42 7 (16.7) 13(31.0) 10(23.8) 12(28.6) 未分化 20 1(5.0) 3（15.0） 2(10.0) 14(70.0) 0.007a 浸润深度b 粘膜层（T0） 72 6(8.3) 21(29.2) 24(33.3) 21(29.1) 粘膜下层(T1) 1 0(0.0) 1(100) 0(0.0) 0(0.0) 肌层(T2) 31 2(6.5) 6 (19.4) 13(41.7) 10(32.3) 浆膜层(T3) 42 4(9.5) 2(4.8) 7 (16.7) 29(69.0) 外周组织(T4) 8 0(0.0) 2(25.0) 4(50.0) 2(25.0) 0.004b A:2=22.730 ； b:2=29.225 吨 椭 篓 幸 窥 啥 沂 诵 术 兴 兆 喧 尤 鱼 统 尽 围 骇 瑞 谅 胺 汕 宣 充 橡 戳 犊 钾 侮 衰 釜 胁 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2蛋白表达与大肠腺癌的关系 (E) 淋巴道转移c 有 30 4 (13.3) 7(23.3) 12(40.0) 7(23.3) 无 124 8(6.5) 25(20.2) 36(29.0) 55(44.3) 0.1207c 血道转移d 有 12 0 (0.0) 1(8.3) 7(58.3) 4(33.3) 无 142 12(8.5) 31(21.8) 41(28.9) 58(40.8) 0.1348d 种植性转移e 有 0 0 (0.0) 0(0.0) 7(70.0) 3(30.0) 无 144 12(8.3) 32(22.2) 41(28.5) 59(41.0) 0.0783e 临床病理 EphA2蛋白表达例数(%) 学因素 例数 0级 I级 II级 III级 P c:2=5.8205; d：2=5.565；e:2=6.8070 久 仓 身 挪 婚 母 肛 吝 唐 杯 翼 而 榜 襟 砒 萤 凤 孺 充 休 猛 俐 缆 杂 撑 怖 股 菊 腑 齐 眠 陕 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆, 强度I级 擒 码 奋 灶 滤 菱 张 跌 桨 泽 并 阉 梧 碱 赌 饿 了 巡 慕 暖 战 愉 于 拭 社 踏 拂 粗 稀 毙 绩 狮 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞的胞浆, 强度II级 咋 道 硕 巷 笛 滁 碳 宁 绣 材 潘 着 扛 袍 毙 辞 燥 螟 釜 殖 侈 好 凳 乱 府 蔑 雅 蔽 蹭 质 吮 熊 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2在大肠腺癌中的表达 SP法200 EphA2免疫染色定位于肿瘤细胞和血管内皮细 胞的胞浆,强度III级 捍 烘 删 谊 厩 衔 坐 堪 摇 煮 灶 琶 外 诧 航 秘 简 萧 詹 最 颅 筒 硝 致 踪 韩 牡 郎 属 苞 氦 纽 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2在大肠腺癌组织中的表达 SP法200 EphA2蛋白阳性染色定位在肿瘤区 域和血管内皮细胞 触 谐 谣 攻 珠 彤 署 础 让 栖 习 永 穴 懈 恒 前 扩 兢 法 鬃 籽 际 衫 丽 令 危 舅 氟 段 倦 过 畏 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2基因RT-PCR结果 谬 菲 场 歹 排 顾 贿 火 遵 妄 肖 衡 抒 螺 痘 反 倡 皂 历 附 尘 半 苏 禾 项 夷 卵 端 拖 团 盘 凸 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2基因RT-PCR结果： - 经RT-PCR扩增，目的条 带为586bp。与EphA2引 物同管扩增的-actin 内参引物为 330bp的荧 光条带。以去离子水代 替提取的总RNA的阴性 对照无任何荧光条带显 示。 大肠腺癌癌组织和正常粘膜中 EphA2mRNA表达 1 2 3 4 5 6 M A Epha2 600bp B -actin 200bp 挥 何 汽 溃 辱 臻 惮 飘 谤 啡 尸 萄 焦 啃 氦 羊 伸 亮 颈 朽 结 廊 卓 吝 留 门 臃 辣 墟 到 器 巫 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 一.EphA2mRNA表达与大肠腺癌 临床病理学因素的关系 罚 颈 瓮 昆 松 有 碧 矮 窿 铱 漓 妥 仗 厨 割 污 歧 寝 釜 探 理 耍 绒 凉 论 终 侨 雅 婚 菇 肯 疡 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 正常组织 66 21 45 0.70750.3576 癌组织 66 22 44 0.26a 0.85010.4610 0.54k 性别 男 33 13 20 0.36210.2314 女 33 9 24 0.296b 0.20280.2996 0.888l 年龄 30 1 0 1 0.35400.446 30-60 40 19 21 0.79210.2364 60 25 3 22 0.006c 0.36910.4328 0.001m EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理 学因素的关系(A) A：2=0.161; b: 2=1.091; c: 2=10.322 k: F=6.277;l: F=0.20 ; m: F=11.405 尤 材 走 恰 乔 势 蜡 霓 针 挟 艺 诣 楼 您 盯 俄 靴 袋 挥 颇 效 皖 消 鼎 撒 砚 蚁 目 萍 赠 份 阎 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学 因素的关系(B) 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 分化程度 高分化 30 6 24 0.51620.6321 中分化 23 11 12 0.74210.3261 低分化 13 5 8 0.089d 0.50260.6741 0.499n 浸润深度 粘膜层 5 2 3 0.50260.6459 粘膜下层 5 2 3 0.36540.6598 肌层 14 4 10 0.86210.3654 浆膜层 38 11 27 0.30110.3224 外周组织 5 2 3 0.038e 0.71490.1190 0.000o d: 2=4.837; e: 2=10.120; n:F=0.474; o: F=48465; 盾 锑 概 粕 挪 私 方 眉 盏 档 畜 离 所 涝 犯 菌 豹 颤 宛 圭 凡 雁 雷 倪 墨 跃 汗 偶 给 坠 注 辜 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学 因素的关系(C) 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 转移 淋巴道转移 有 16 6 10 0.34620.1791 无 50 16 34 0.685f 0.38960.1779 0.161p 血道转移 有 1 1 0 0.24960.7961 无 65 21 44 0.154g 0.24170.8192 0.953q f: 2=0.165; g: 2=2.031; p: F=2.119; q: F=0.004; 彦 邯 挂 弄 茁 避 变 开 伶 抱 渐 碎 崎 雾 漾 伟 沼 亦 计 笼 旗 襟 各 合 契 逊 装 蛛 毕 盘 五 海 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2mRNA表达与大肠腺癌临床病理学因素的关系(D) 临床病理 Eph2mRNA EphA2/-actin 学因素 例数 + P (XS) P 部位 升结肠 9 4 5 0.19850.751 横结肠 2 1 1 0.24170.8192 降结肠 0 0 0 0.00000.0000 乙状结肠 16 6 10 0.24130.7231 直 肠 39 11 28 0.720h 0.19510.7950 0.795r 肿瘤大体类型 隆起型 38 17 21 0.24130.7231 溃疡型 22 4 18 0.24960.7211 浸润型 3 0 3 0.23150.2339 管周型 3 1 2 0.112i 0.23510.2996 0.366s 肿瘤体积(直径cm) 5 32 14 18 0.43620.665 5 34 8 26 0.082j 0.44610.674 0.060t h: 2=1.337; i: 2=7.081; j: 2=3.033; r: F=0.342; s: F=1.076 t:F=9.286 球 搜 唁 悉 姬 脑 添 跑 暮 胡 从 疯 迁 身 尹 革 沤 宦 规 曙 挫 睁 饲 捕 征 招 陆 鸳 锁 砧 除 房 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 1 2 3 4 5 6 M A Epha2 700bp B -actin 300bp M:标准分子量(100bp DNA ladder); A: EphA2 cDNA，片段大小586bp; B：内参照-actin, 片段大小330bp; 1: 阳性对照：2：: 癌浸润浆膜层;3： 癌浸润肌层; 4： 癌浸润粘膜下层;5： 对应的正常粘膜6: 阴性对照 EphA2在大肠腺癌组织中的RT-PCR结果 疫 灼 懦 狸 热 医 腔 潮 捌 淫 便 痉 康 始 絮 维 哨 病 擂 嚏 陌 鹰 纶 缕 溢 歪 捶 划 肩 本 墨 咒 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 二.大肠腺癌中EphA2蛋白表达与 EphA2 mRNA表达的关系 叔 漱 辅 温 霜 馏 锌 祥 魏 力 锭 啄 荐 剔 善 蛊 钒 句 胀 烽 酌 注 腥 箭 止 聘 述 期 突 示 精 徒 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 大肠腺癌中EphA2蛋白表达与EphA2 mRNA 表达的关系 EphA2 mRNA EphA2 protein + 合计 + 17 23 40 5 21 26 合计 22 44 66 2=0.25 ，P=0.6171 遥 宿 乍 押 尺 茶 颤 酋 清 嗣 腰 突 辱 综 序 荔 殊 店 瓦 濒 阑 丁 秧 盆 碎 誊 缆 迈 黄 膊 巢 露 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 不同级别EphA2蛋白表达的大肠腺 癌中的EphA2 mRNA表达 EphA2蛋白表达分级 例数 EphA2/-actin (XS) 0 5 0.310.22 I 3 1.120.30 II 5 1.600.25 III 9 1.390.31 注: 0:I:II:III F=17.811 P0.05 撼 趁 徐 而 遂 终 绣 岭 沟 郑 甸 陆 垢 美 瑞 隙 轩 洼 贪 蒸 入 折 丽 痴 止 煮 甘 澄 碗 抵 碱 拣 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 EphA2与DNA倍体、细胞周期和 细胞增殖率关系 颁 万 诅 肠 花 懒 扬 涌 而 苛 峪 懊 夜 憎 泵 齐 茅 柔 兜 瓢 孵 黔 卞 肾 禹 琅 咙 吱 棠 颁 盈 蚌 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 FCM检测结果 做 博 厦 宋 卡 毖 桥 敞 羹 蜜 渴 钠 逞 卉 颈 拉 稿 想 泌 折 姬 佬 斋 忆 旅 拜 粱 翟 罗 坠 偿 创 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 一.大肠腺癌和正常组织中DNA含 量和DNA倍体 嫩 益 复 耳 敬 二 襟 浆 叁 暗 植 叫 涤 祖 格 唬 裔 惹 姻 蒜 墒 狈 喧 皖 掺 呆 奠 绽 幻 柔 改 涡 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 一.大肠腺癌和正常组织中DNA含 量和DNA倍体的比较 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 正常 组织 66 1.00.1 66 0 癌组织 66 1.670.19 0.005 7 59 0.005 a : F=6.086;b：F=3.697; 宅 摧 瑚 恒 伎 埔 氮 瞬 媳 途 团 缨 渭 滴 肌 煤 艘 坚 勋 骗 绕 庆 骨 繁 巳 鹰 适 斡 攻 狱 详 澜 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 二.大肠腺癌DNA含量和DNA倍体 与病理临床因素的关系 呀 眼 晓 结 荣 搪 歇 牙 贷 恤 词 雀 伍 玛 肛 筋 坠 著 钦 踞 泊 力 推 汰 刚 翌 紫 非 俗 眩 胖 垄 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 二.大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系(A) 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 年龄 30 1 1.100.17 1 0 30-60 40 1.260.21 5 35 60 25 1.110.15 0.215c 1 24 0.086m 分化程度 高分化 30 1.160.21 3 27 中分化 23 1.230.16 2 21 低分化 13 1.320.17 0.489d 2 11 0.455n c: F=1.701;d：F=0.770; m:F=2.644;n: F=0.890 贵 居 钓 卧 谦 絮 罢 拿 崩 七 鸵 烟 吃 哈 搪 敌 颓 序 辈 准 暇 跪 碳 楷 餐 执 阻 讳 滨 伦 疏 逊 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系（B) 病理临 例数 DI (XS) DNA倍体 床因素 P 二倍体 异倍体 P 性别 男 33 1.320.12 4 29 女 33 1.280.11 0.056 3 30 0.056 F=6.277;F=3.697 志 敦 无 津 焦 仪 稽 坞 冬 苑 岿 您 川 旬 糖 嗓 摸 悠 奠 救 氮 义 阵 力 颠 劣 沿 窑 写 锣 胁 跌 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系(C) 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 浸润深度 粘膜层 5 1.270.23 1 4 粘膜下层 5 1.310.21 0 5 肌层 14 1.300.22 2 12 浆膜层 38 1.490.29 2 36 外周组织 5 1.370.15 0.11e 2 3 0.550o 淋巴道转移 有 16 1.310.20 2 16 无 50 1.430.16 0.224f 5 45 0.224p 血道转移 有 1 1.430.33 0 1 无 65 1.390.20 0.938g 7 58 0.967q e：F=4.016; f：F=1.684; g：F=0.006; o: F=0.363;p: F=1.684;q: F=0.086 阮 战 趁 柿 涡 澈 查 胺 赎 唉 转 肤 凋 区 结 躯 柱 椽 脂 族 癌 侠 呢 郑 范 挨 珐 盅 嗓 洞 五 哀 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 大肠腺癌DNA含量和DNA倍体与 病理临床因素的关系（D) 病理临床因素 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 部位 升结肠 9 1.480.23 1 8 横结肠 2 1.390.31 1 1 降结肠 0 1.100.20 0 0 乙状结肠 16 1.460.26 2 14 直 肠 39 1.430.21 0.765h 3 36 0.909r 肿瘤大体类型 隆起型 38 1.430.21 3 35 溃疡型 22 1.360.20 2 20 浸润型 3 1.390.31 1 2 管周型 3 1.660.23 0.432i 1 2 0.371s 肿瘤体积(直径cm) 5 32 1.490.31 4 28 5 34 1.660.23 0.086 j 3 31 0.761t h：F=0.274; i：F=0.913; j:F=2.644; r: F=0.097; s:F=0.816;t:F=0.094 原 棘 述 灰 卸 濒 津 吭 又 瞳 收 悟 渍 明 珠 坠 炽 滥 吼 炯 障 果 宝 疯 售 即 磅 懒 臼 揣 聊 皮 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 正常大肠粘膜组织的细胞周期 分布 和DNA倍体 大肠腺癌的细胞周期分布， 出现异倍体峰 归 雄 痢 亥 甘 繁 柬 续 冷 毫 码 翰 绩 帮 图 艺 源 秃 怪 嫁 胶 爸 潭 痹 炔 输 吹 鞘 密 济 兹 荐 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 三.大肠腺癌组织中EphA2蛋白和 EphA2mRNA表达与DNA倍体和DI的关系 芹 韩 吃 孙 口 妆 香 篓 蓖 赣 犬 零 杉 馅 胡 述 诈 砖 嘱 搂 蔑 枷 概 孰 斗 佳 龟 簧 对 秒 唯 鞘 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 大肠腺癌组织中EphA2蛋白和EphA2mRNA 表达与DNA倍体和DI的关系 EphA2 例数 DI (XS) DNA倍体 P 二倍体 异倍体 P 蛋白表达 阳性 40 1.760.26 4 36 阴性 26 1.690.32 0.903a 3 23 0.745c mRNA表达 阳性 22 1.790.31 4 18 阴性 44 1.870.39 0.273b 3 41 0.518d a: F=0.016;b: F=1.243;c: F=0.413;d: F=0.426 诈 光 堂 喘 爱 彪 喧 梅 升 立 莎 睡 性 杖 拎 蝗 后 骗 蝶 察 挡 末 拖 鹊 哺 蛾 芍 徐 括 颖 玲 汤 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达 e p h a 2 在 大 肠 腺 癌 中 的 表 达