第四节 血细胞分析仪计数法课件

血细胞分析仪的应用 n 血细胞检验的质量控制 n 血液分析仪校准规范化的建议 【操作】 1标本准备 2准备仪器 3测定质控物 4测定血液标本 5结果报告 1. 1. 熟悉仪器的正确使用方法熟悉仪器的正确使用方法 2 2开启电源开启电源 3 3检测空白本底检测空白本底 1. 1.采末梢血，手工稀释采末梢血，手工稀释 2. 2.采静脉血采静脉血 血细胞分析仪的操作 血细胞检验的质控 1环境要求 高精度设备，温度1525之间，湿度35 85%。防止电磁波干扰，不能使用磁饱和稳压器，仪器应 有良好的接地装置。 2抗凝剂 使用ICSH推荐的EDTA-K2，不能使用肝素抗凝剂 ，肝素影响白细胞和血小板的测定。 3采血要求 操作顺利，抗凝迅速而且完全，标本中不能 有小凝块和纤维蛋白丝。特别是使用末梢血，采集和稀释过 程是影响数据准确性的重要因素。 4特殊标本 肝病病人和新生儿的红细胞对溶血剂有很强 的抵抗作用，可导致白细胞计数结果的假性偏高和血红蛋白 测定结果的假性偏低。有些白血病当白细胞数量过多时应校 正RBC测定值，同时过多的白细胞也会干扰血红蛋白测定的 光密度。 注意事项注意事项 5稀释液、溶血液 最好使用原装试剂，兼容试剂使用 前要进行对照试验，要在有效期内使用。 6测试要求 4h内测试完毕，最长不宜超过6h，置于室 温，不宜在冰箱保存。测定过程中仪器有故障报警时应查 找原因，消除警告，重新测试。有提示信息要注意分析提 示内容，具体分析所测数据是否可用。废液桶要低于仪器 ，以免废液返流到真空管中，损坏设备。 7仪器要求 血液分析仪的型号众多，原理、试剂、操 作过程及要求不尽相同，要熟悉仪器性能，严格按照操作 手册进行操作和维护、保养。新安装的或维修过的旧仪器 一定要进行校准和性能评价后才可用于临床样本分析。 8质量控制要求 血液分析仪一旦出现问题将可能造成 整批错误，因此必须进行室内质量控制和参加室间质评活 动。 血细胞分析仪的保养维护 n每日维护 清洗检测器、浮球定量器、进样针、进样管 道。 n每周维护 清洗旋转阀托盘、白细胞检测部、红细胞、 血小板检测部、分血阀 n长期维护 清洗限流器小孔，全面清洗管道 常见故障 nCLOG 堵塞 判断：计时超长、计数声音不规律。 原因：棉花纤维、纤维蛋白丝、血凝块、 蛋白变性、空气中灰尘微粒、盐类结晶 、微孔冲洗不够。 处理：毛刷刷洗、吸耳球冲洗、次氯酸钠 浸泡后吸耳球冲洗 血细胞分析仪性能评价 根据国际血液学标准化委员会（ICSH） 对血细胞分析仪的评价方案，对于新安装 的和维修后的血细胞分析仪都要进行性能 测试评价，合格者方可使用，以保证检验 质量，其评价内容包括以下内容包括以下 几个方面： 血细胞分析仪性能评价指标 n稀释效果 n精密度 n携带污染率 n可比性 n准确度 n白细胞分类结果 血细胞分析仪性能评价指标 （一）稀释效果 是评价血细胞分析仪的测定值与稀释倍数 是否成比例关系，通过测定求出仪器工作的最 佳线性范围。 测定值与稀释倍数之间的线性关系范围越 大越理想，其范围至少包括正常和常见的病理 范围。 血细胞分析仪性能评价指标 （二）精密度 指同一标本用同一种方法在同样条件下反复测定 多次，每次测定结果与平均值的接近程度。常用变异 系数（CV%）表示，CV值越小，精密度越高，仪器质量 越好。包括批内精密度和批间精密度 批内精密度：指一批样本同时测定时的精密度； 批间精密度：指两批或两批以上的样本同时测定时的精 密度； n要求：实验测得的批内和批间精密度都应达到仪器设 计要求，一般CV0.05），则认为与常规方法有可比性，反之 无可比性。 血细胞分析仪性能评价指标 （五）准确度 指测定值与真值之间的一致性。 真值必须用决定方法或参考方法测得，可 采用ICSH推荐的方法测定，其评价方法与可比 性基本相同。 血细胞分析仪性能评价指标 （六）白细胞分类结果 正常血液标本血细胞分析仪白细胞分类结果 ，与人工涂片染色镜检分类结果要基本一致，经 统计学处理两者无显著性差异（p0.05），否则 仪器需要校正 血细胞检验的质量控制 概 述 血细胞检验的质量保证是临床检验的重要组成 部分。 血细胞分析仪的应用大大提高了实验的精密度 及工作效率，但如控制不好，其误差将大大超过手 工操作误差， 且一旦出现误差都是成批的，给临 床工作带来很大损失，故随血细胞分析仪的自动化 进程，对质量管理的要求更加迫切。 细胞分析仪的质量控制 血细胞分析仪是大批量、多参数、完全由 仪器按事先设定的程序自动进行测试，为确保 质量，必须建立严格的 室内质量控制制度 。 分析前质量控制 质量控制 分析中质量控制 分析后质量控制 （一) 分析前质量控制 1. 操作技术人员要求：仔细阅读仪器使用手册、维护、 保养、操作规程、异常报警含义、引起试验误差的因 素、质量控制，掌握用NCCLS推荐方法校准仪器每个 参数的程序。 2.仪器的安装条件：严格按仪器说明书中要求， 防电磁干扰、防热辐射； 实验台稳固，工作环境要清洁、防尘。 防潮、避免日光直射、通风、室温（1525）、相 对湿度80%； 使用电子稳压器、可靠的接地装置等。 （一）分析前质量控制 3. 仪器的验收 新仪器安装后或每次维修后，必须 对仪器的性能进行测试、校准、评价。按 ICSH的评价方案，WBC总变异30C均可影响结果。 掌握溶血剂用量和溶血时间：特别是半自动分析仪， 应严格按仪器操作规程操作。 溶血剂量不足或溶血时间过短，细胞溶解不完全； 溶血时间过久，使WBC明显变形，发生计数误差。 稀释液的渗透压、离子强度、电导率、PH值等 。 （二）分析中质量控制 3.标本要求：全自动血细胞分析仪要求用抗凝全血， 半自动分析仪一般用末梢血。 血液标本无凝血，仪器吸样前充分混匀。半自动仪 器的稀释器要定期校正，微量吸管要校正。 4.严格操作规程：操作规程是实验室的法规，必须人 人遵守，任何人不得擅自更改。做好仪器的日常保养 ，并认真做好记录。 5. 受检者生理状态对实验结果的影响：如：WBC的 日间变化，妊娠、新生儿WBC升高，运动后PLT升高， 服用某些药物的干扰等。 （二）分析中质量控制 6.注意仪器的报警、提示： （1）堵孔：出现异常波形、提示或出现 报警信号。 （2）检测过程中，有异常细胞或不典型 细胞，仪器出现报警信号，不同的仪器 报警种类不同。 （二）分析中质量控制 7. 注意病理因素对血液分析仪的影响： （1）冷球蛋白凝集RBC , RBC假性降低。 （2）血液中WBC显著增高影响RBC计数，或NRBC影响 WBC计数。 （3）某些肝病RBC膜质异常，抗溶血，RBC破坏不全， WBC假性增高，Hb假性降低。 （4）PLT聚集：大量巨PLT和小RBC影响PLT和RBC检查。 （5）高脂血症可使Hb假性增高。 以上影响可通过观察直方图的差异变化反映出来，所以 监测直方图的变化是质量控制的重要方法。 （三）分析后质量控制 1. 保留标本备查：样本检测完毕，应室温至少保留1d，以 备有疑问是复查、核对，以便寻找差错的原因。 2. 重视室内质控（IQC）：每天坚持做12次质控，只有 在控制限内才能发出病人报告。 3. 加强质控小组的责任：报告单的审核，双签名， 审核内容：各项参数是否与临床诊断相符，数据间是否 矛盾，观察直方图的变化，报告是否规范，书写是否 认真清楚，是否有漏项或错项，是否需要复查，日期 签名等。血细胞分析仪分类只能是一种初筛，用显微 镜确证和分类。 （三）分析后质量控制 4. 分析实验结果各参数间的关系 如RBC、HCT与MCV；Hb、RBC与MCH间， RDW与血片RBC形态变化之间的相关性，结 果异常时，应结合临床资料进行相关分析。