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文档简介
实验 八 核糖核酸的组分鉴定 一、实验目的 掌握核糖核酸组分鉴定的原理。 学会鉴定核糖核酸组分的方法。 核糖核酸的组成成分主要包括核糖、磷酸和碱基。 5 5 3 3 RNA含量为干菌体的2.67%10.0%, 二、实验原理 2.在碱性环境下,嘌呤碱能与银离子反应形成沉淀,但此处碱 性环境不能用一般的强碱,否则强碱会与银离子反应产生 沉淀而干扰结果判定。 3. 核糖核酸与浓盐酸共热时,会发生降解,形成的核糖继而 转变成糠醛,后者可与3,5-二羟基甲苯(地衣酚)反应, 在Fe3+或Cu2+催化下,生成绿色复合物。 4. 磷酸组分可与定磷试剂在酸性环境中反应,生成蓝色物质 。因此,可以根据以上性质,设计实验对各组分进行鉴定 。 (1)1.5M硫酸; (2)0.1mol/L硝酸银溶液; (3)1mol/L浓氨水; (4)三氯化铁-浓盐酸溶液: (5)地衣酚-乙醇溶液: (6)定磷试剂:17%的硫酸,10%的抗坏血酸和2.5%的钼酸 铵。 三、 试剂 1. 取100mg实验七中提取的酵母RNA,加入1.5M H2SO4 溶液5mL,在沸水浴中加热10-20分钟,使核酸充分 水解后,用于对各组分的鉴定。 2. 磷酸组分鉴定:取水解液1mL,加入干净的试管中 ,再加入等体积的新配制的定磷试剂1mL,混匀后 ,在45左右的水浴中加热15-30min,观察颜色变 化。 四、 实验步骤 3. 嘌呤碱的鉴定:取水解液1mL,加入干净的试管中 ,加入过量的浓氨水,再加入1mL的0.1M的硝酸银溶 液,观察沉淀的生成。 4. 核糖的鉴定:取水解液1mL,加入干净的试管中, 再加入2mL三氯化铁-浓盐酸溶液和0.2m
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