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微生物与 洁净作业知识 贵州天地药业有限责任公司 1 第一部分 微生物知识 第一章 微生物概论 一、什么是微生物 微生物（microorganism, microbe）是一些肉眼看不见的微小生物的总 称。包括属于原核类的细菌、放线菌、支原体、立克次氏体、衣原体和蓝细 菌（过去称蓝藻或蓝绿藻），属于真核类的真菌（酵母菌和霉菌）、原生动 物和显微藻类，以及属于非细胞类的病毒、类病毒和朊病毒等。 微生物千姿百态，有些是腐败性的，即引起食品气味和组织结构发生不 良变化。当然有些微生物是有益的，它们可用来生产如奶酪，面包，泡菜， 啤酒和葡萄酒。微生物非常小，必须通过显微镜放大约1000 倍才能看到。 比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想像一下一滴牛 奶，每毫升腐败的牛奶中约有5千万个细菌，或者讲每毫升牛奶中细菌总数 约为50亿。也就是一滴牛奶中可有含有50亿个细菌。 2 二、微生物的分类 根据微生物有无细胞基本结构、分化程度、化学组成等特点，可分为三 大类。 1. 非细胞型微生物 无细胞结构，无产生能量的酶系统，由单一核酸（ DNA/RNA）和蛋白质衣壳组成，必须在活细胞内增殖。病毒属于此类微生 物。 2. 原核细胞型微生物 细胞核分化程度低，只有DNA盘绕而成的拟核， 无核仁和核膜。这类微生物包括细菌、衣原体、支原体、立克次体、螺 旋体和放线菌。 3. 真核细胞型微生物 细胞核的分化程度高，有核膜、核仁和染色体， 能进行有丝分裂。如真菌、藻类等。 3 三、 微生物的作用及危害 1. 微生物的作用 绝大多数微生物对人和动物是有益的，已广泛应用于农业、食品、 医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。例 如与我们日常生活密切相关的如酸奶、酒类、抗生素、疫苗等。 2. 微生物的危害 微生物中也有一部分能引起人及动、植物发生病害，这些具有致病 性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（感冒、伤寒、痢 疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。 从药品生产的卫生学而言，微生物对药品的原料、生产环境和成品的污 染是造成生产失败、成品不合格的重要因素。 4 第二章 微生物的类群和形态结构 微生物种类繁多，人们研究得最多、也较深入的主要有细菌、放线 菌、蓝细菌、支原体、立克次体、古菌、真菌、显微藻类、原生动 物、病毒、类病毒和朊病毒等。现择要介绍如下： 一、细菌 细菌是一类细胞细而短（细胞直径约0.5m-5m）、结构简 单、细胞壁坚韧以二等分裂方式繁殖和水生性较强的原核微生物， 分布广泛。 2. 细菌的特殊结构 特殊结构是指某些细菌具有的结构，包括荚膜、鞭毛、菌毛和芽孢 ，其中芽孢抵抗力最强，灭菌就以杀灭芽孢为依据。 5 1. 细菌的形态与基本结构 观察细菌最常用的仪器是光学显微镜，其大小可以用测微 尺在显微镜下测量，一般以微米为单位。细菌按其形态不同， 主要分为球菌、杆菌和螺形菌三类。 （1） 球菌 多数球菌直径在1微米左右，外观呈球形或近 似球形。由于繁殖时分裂平面不同可形成不同的排列方式，分 为双球菌、链球菌、葡萄球菌等。 （2） 杆菌 形态多数呈直杆状，也有的菌体稍弯，多数呈 分散存在，也有的呈链状排列，分为棒状杆菌、链状杆菌、球 杆菌等。 （3） 螺形菌 菌体弯曲，呈弧形或螺旋形。如幽门螺杆 菌。 细菌虽小，仍具有一定的细胞结构和功能。细胞壁、细胞 膜、细胞质和核质等各种细菌都有，是细菌的基本结构。 6 2. 细菌的特殊结构 特殊结构是指某些细菌具有的结构，包括荚膜、鞭毛、 菌毛和芽孢，其中芽孢抵抗力最强，灭菌就以杀灭芽孢 为依据。 u 什么是芽孢？ 某些细菌在一定的环境条件下，胞质脱水浓缩，菌 体内部形成一个圆形或椭圆形小体积称芽孢。 芽孢的特点：芽孢是细菌的休眠状态，无繁殖能 力。芽孢不直接引起疾病；当环境适宜时，芽孢又能 发育成细菌的繁殖体，大量繁殖而致病；一个细菌只 能形成一个芽孢，一个芽孢只能形成一个繁殖体；芽 孢抵抗力极强在自然界克存活几年甚至几十年，灭菌以 杀灭芽孢为依据； 根据芽孢的大小、形态、和在菌体 内的位置，可鉴别细菌。 7 8 9 2. 细菌的繁殖 二分裂繁殖是细菌最普遍、最主要的繁殖方式。其繁 殖速度很快，大多数细菌约2030分钟繁殖一代，少数细 菌繁殖速度较慢，需18小时才可繁殖一代。 细菌的繁殖条件：丰富的营养物质：包括水分、无机 盐类、蛋白胨、糖及生长因子；合适的酸碱度：大多数 致病菌最适pH7.2-7.6；恰当的温度:大多数致病菌最适 生长温度37；足够的气体：主要是氧气和二氧化碳。 10 细菌细胞分裂的电镜超薄切片图 杆菌二分裂过程模式图 11 二、 真菌 真菌是一类有细胞壁，无叶绿素，以寄生或腐生方 式生存，少数为单细胞，多数为多细胞，能进行无性或 有性繁殖的一类真核细胞型微生物。 真菌包括单细胞与多细胞两类。单细胞真菌呈圆形 或卵圆形，称为酵母菌；多细胞真菌由菌丝和孢子组成 ，并交织成团，称丝状菌或霉菌。 真菌生长的最适的温度为2228，最适的pH值为 4.06.0。其繁殖能力强，但生长速度比细菌慢，常需 1-4周才形成菌落。真菌对热的抵抗力不强，一般加热 6070 1小时即被杀死，但对干燥、日光、紫外线和 一些化学消毒剂有抵抗力，对2.5碘酒、10甲醛则 较敏感。 12 三、 病毒 病毒属非细胞型微生物，在自然界分布非常广泛，可 在人、动物、植物、真菌和细菌中寄居并引起感染。病毒 是体积最小、结构最简单的微生物，它仅有一种核酸（ DNA或RNA）作其遗传物质。病毒必须在宿主活细胞内寄生 ，依靠细胞提供的能量、营养物质及生物大分子合成机制 ，完成病毒的复制过程。 病毒与人类的关系极为密切，人类的传染病约75是 由病毒引起的。有些病毒传染性强，可引起世界大流行（ 如流感、艾滋病等）。 13 理化因素对病毒的影响 （1）物理因素 温度 多数病毒耐冷不耐热。在干冰温度（-70）和液氮温 度（-196）下，病毒感染性可保持数月甚至数年。在5060 30分钟，100几秒钟即可灭活。 pH 多数病毒在pH59范围内稳定，强酸或强碱条件下可被灭 活。 射线 X射线、射线和紫外线都能灭活病毒。 （2）化学因素 主要有化学消毒剂、抗生素及中草药等。除强酸、强碱消毒剂外 ，酚类、氧化剂、卤素类、醇类等对病毒均有灭活作用。 14 第三章 微生物的营养 一、微生物的营养要求 微生物生长繁殖所需的营养物质主要有水、碳源、氮源、 无机盐和生长因子等。 1. 水 水是各种生物细胞必需的，是良好的溶剂，微生物的新陈代 谢过程中的一切生化反应都离不开水的作用。 2. 碳源 碳源是合成菌体成分的原料，也是微生物获取能量的主要来 源。整体上看来，微生物可以利用的碳源范围极广，分为有机 碳源和无机碳源两大类。凡必须利用有机碳源的微生物就是异 养微生物，凡能利用无机碳源的微生物就是自养微生物。糖类 是最广泛利用的碳源。 15 3. 氮源 氮源主要是供给合成菌体结构的原料，很少作为能源利用。与碳源相 似，微生物作为一个整体来说，能利用的氮源种类十分广泛。某些微生 物（如固氮菌）能利用空气中分子态的氮或利用无机氮化物如铵盐、硝 酸盐合成有机氮化物。 4. 无机盐类 无机盐主要可为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素。微生物需 要的无机盐类很多，主要有P、S、K、Na、Ca、Mg、Fe等，其主要功能为 构成菌体成分；调节渗透压；作为某些酶的成分，并能激活酶的活性 等。 5. 生长因子 有些微生物虽然供给它适合的碳源氮源和无机盐类，仍不能生长，还 要供给一定量的所谓“生长因子”。其种类很多，主要是B族维生素的化 合物等。生长因子可以从酵母浸出液、血液或血清中获得。 16 第四章 微生物的生长和繁殖 一、微生物的生长和繁殖 微生物在适宜的环境条件下，不断地吸收营养物质，并按照自己的 代谢方式进行代谢活动，如果同化作用大于异化作用，则细胞质的量不 断增加，体积得以加大，于是表现为生长。简单地说，生长就是有机体 的细胞组分与结构在量方面的增加。 单细胞微生物如细菌，生长往往伴随着细胞数目的增加。当细胞增 长到一定程度时，就以二分裂方式，形成两个基本相似的子细胞，子细 胞又重复以上过程。在单细胞微生物中，由于细胞分裂而引起的个体数 目的增加，称为繁殖。在一般情况下，当环境条件适合，生长与繁殖始 终是交替进行的。从生长到繁殖是一个由量变到质变的过程，这个过程 就是发育。 微生物处于一定的物理、化学条件下，生长发育正常，繁殖速率也 高；如果某一或某些环境条件发生改变，并超出了微生物可以适应的范 围时，就会对机体产生抑制乃至杀灭作用。 17 二、细菌纯培养的群体生长规律 (1)延迟期：少量细菌接种到新鲜培养基后，一般不立即进行繁殖，生长 速度近于零。因此在开始一段时间，细菌数几乎保持不变，甚至稍有减少。 这段时间被称为延迟期，又称为迟缓期、调整期或滞留适应期。处于延迟期 细菌细胞的特点是分裂迟缓、代谢活跃。延迟期的长短与菌种、种龄、接种 量和培养基成分有关。 (2)对数期：对数期又称指数期。这一阶段突出特点是细菌数以几何级数 增加，代时稳定，细菌数目的增加与原生质总量的增加，与菌液混浊度的增 加均呈正相关性。 (3)稳定期：又称恒定期或最高生长期。处于稳定期的微生物，新增殖的 细胞数与老细胞的死亡数几乎相等，整个培养物中二者处于动态平衡，此时 生长速度又逐渐趋向零。稳定期的细胞内开始积累贮藏物，如肝糖、异染颗 粒、脂肪粒等，大多数芽孢细菌也在此阶段形成芽孢。如果为了获得大量菌 体，就应在此阶段收获，因这时细胞总数最高；这一时期也是发酵过程积累 代谢产物的重要阶段，某些放线菌抗生素的大量形成也在此时期。 (4)衰亡期：稳定期后如再继续培养，细菌死亡率逐渐增加，以致死亡数 大大超过新生数，群体中活菌数目急剧下降，出现了“负生长”，此阶段叫 衰亡期。 18 第五章 热 原 一、什么是热原？ 热原：指微量即能引起恒温动物体温异常升高的物质的总称。是微 生物的代谢产物，大多数细菌都能产生，致热能力最强的是革兰阴性 杆菌所产生的热原，真菌和病毒也能产生热原。 热原是微生物产生的一种内毒素，它存在于细菌的细胞膜和固体膜 之间。内毒素是由磷脂、脂多糖和蛋白质所组成的复合物，其中脂多 糖是内毒素的主要成分，具有特别强的热原活性，因而大致可以认为 “内毒素=热原=脂多糖”。 19 二、热原的基本性质 1、耐热性 在通常的灭菌条件下，热原往往不能被破坏，一般采用 180，3-4h;250,30-45min或650，1min可彻底破坏热原。 2、滤过性 热原直径约为1-5um，可通过一般滤器，甚至是微孔滤膜， 孔径小于1nm的超滤膜可除去绝大部分甚至全部热原。 3、水溶性 热原可溶于水。 4、不挥发性 热原具有不挥发性，但可溶于水蒸气所夹带的雾滴而带入 蒸馏水中，因此，蒸馏水器上附有隔沫装置。 5、被吸附性 热原可以被活性炭，离子交换树脂，石棉滤板等吸附。 6、其他 热原能被强酸、强碱、强氧化剂、超声波等破坏。 20 三、污染热原的途径 1、从溶媒中带入 溶媒常是注射剂中污染热原的主要途径。通常蒸 馏器结构不合理，操作不当，注射用水贮放时间过长，均易导致注射用水 含有热原。 2、从原辅料中带入 有些原料本身容易滋生微生物，如果贮存时间过 长或包装损坏，均易污染热原。 3、从容器、用具、管道与设备中带入 配制注射剂的容器、用具、管 道、滤器等，使用前清洗不彻底或灭菌不完全，均可污染热原。 4、制备过程中污染 环境的洁净级别达不到规定要求、或操作时间 过长、灭菌不及时或灭菌不彻底、包装不严密等，都可能使注射剂污染热 原。 5、从输液器中带入 有时输液本生不含热原，但还是发生热原反应， 一般就是由于输液用具污染热原而发生的热原反应。 21 四、除去热原的方法 1、高温法 耐热器具洁净后用250干热灭菌30min以上可以破坏热原。 2、酸碱法 玻璃器具可采用重铬酸钾硫酸清洁液或稀氢氧化钠处理破坏 热原。 3、吸附法 活性炭具有较强的吸附热原作用，同时兼有脱色助滤作用。 应选用针用规格活性炭，常用量为0.1%-0.5%。此外，活性炭与白陶土合用 也可除去热原。 4、离子交换法 热原分子含有带负电荷的磷酸根与羧酸根，强碱性阴离 子交换树脂可吸附除去溶剂中的热原。 5、凝胶滤过法 用二乙氨基乙基葡聚糖凝胶滤过可除去热原。 6、反渗透法 选用三醋酸纤维素膜或聚酰胺膜进行反渗透可除去热原。 7、超滤法 3.015nm的超滤膜能除去热原。 22 第六章 消毒与灭菌 下列术语常用于表示物理或化学方法对微生物的杀灭程 度。 消毒：杀死物体上病原微生物的方法,并不一定能杀死含 细菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。 灭菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求 高，包括杀灭细菌芽孢在内的全部病原微生物和非病原微 生物。 抑菌：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂 为各种抗生素，可抑制细菌的繁殖。 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般 不死亡。同一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时 常为防腐剂。 消毒与灭菌的方法一般可分为物理学方法和化学方法两大 类。 23 一、物理消毒灭菌法 用于消毒灭菌的物理因素有热力、辐射、过滤等。 1. 热力灭菌法 热力灭菌法分干热灭菌和湿热灭菌两大类，相同温度下， 后者的灭菌效力比前者大。 高温对细菌具有明显的致死作用，因此最常用于消毒与灭 菌。多数无芽孢的细菌经5560作用3060分钟后死亡。经 80湿热510分钟可杀死所有细菌繁殖体、真菌和酵母菌。 细菌芽孢对高温有很强的抵抗力，例如炭疽芽孢杆菌的芽孢， 耐受515分钟的煮沸，而肉毒梭菌的芽孢则需煮沸35小时 才死亡。如：葡萄糖注射液为121、12min、FO值12，氯化 钠注射液为121、15min、FO值15，治疗性品种为121、 10min、FO值10。 24 2. 辐射灭菌法 （1）紫外线 作用于DNA，使细菌DNA的复制和转录受到干 扰，导致细菌变异或死亡。波长在265-266nm杀菌效果最强 ，主要用于室内空气和工作台面的消毒。 （2）电离辐射 对各种细菌均有致死作用。常用于大量一 次性医用塑料制品的消毒和食品的消毒。 （3）微波 是一种波长为1mm1m的电磁波，可穿透玻璃、 塑料薄膜及陶瓷等物质，但不能穿透金属表面。多用于检验 室用品、无菌室的用具的消毒。 3. 滤过除菌法 用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去,以达到除 菌目的。滤菌器含有微细小孔0.22微米,只允许液体或气 体通过,而大于孔径的细菌等颗粒不能通过 。 适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等的除菌。 25 二. 化学消毒灭菌法 许多化学药物能影响微生物的化学组成、物理结构 和生理活性，从而发挥防腐、消毒及灭菌的作用。 洁净室(区)应定期消毒，使用的消毒剂不得对设备、 物料和成品产生污染。消毒剂品种应定期更换，防止 产生耐药菌株。 影响消毒剂作用效果的因素：消毒剂的性质、浓 度及作用时间；细菌的种类和生活状态；环境因 素，如有机物的含量、温度、湿度及酸碱度等。 26 常用消毒剂的种类和用途 类别作用机制常用种类用途 酚类 蛋白变性，细胞膜损 伤 石炭酸 地面、器具表面、皮肤消 毒 醇类蛋白变性乙醇皮肤、体温计消毒 氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾 皮肤、尿道、蔬菜、水果 消毒 重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞皮肤、粘膜、小创伤消毒 氧化剂氧化、蛋白沉淀 过氧乙酸、碘 酒 塑料、玻璃器材、皮肤消 毒 表面活性 剂 蛋白变性，细胞膜损 伤 新洁而灭手术洗手、浸泡手术器械 27 第二部分 洁净作业知识 28 一、洁净室 1.1、洁净室的含义： 洁净室是需要对尘粒及微生物数量进行控制的房间（区域） ，该房间（区域）的建造结构、装备及使用不仅能够截留粒子 而且会尽可能地减少粒子向该房间（区域）介入，并且，可根 据需要对该房间（区域）的温度、湿度以及压差等参数进行控 制。 1.2、洁净室对药品生产的意义： 药品，特别是静脉注射的药品，必须确保不受微生物的污 染。悬浮在空气中的微生物大都依附在尘埃粒子表面，进入洁 净室的空气，若不除尘控制微生物粒子，药品的质量就难以保 证；药品生产过程中产生的各种粉尘必须除去，以防止药物的 交叉污染和污染大气环境。药品生产中也会产生有害、高温、 高湿的气体，需要及时排除，以保证生产人员的健康，保证生 产不受影响，保证产品质量。调节控制空气至合适的温度和湿 度，不仅是为生产人员提供舒适的生产劳动环境，而且也是药 品生产质量保证的需要。 29 洁净度级别尘粒最大允许数（粒/m ） 微生物最大允许数 0.5m5m 浮游菌（ cfu/m3） 沉降菌（ cfu/皿） 100级35000051 10000级35000020001003 100000级35000002000050010 300000级1050000060000100015 1.3、洁净室（区）空气洁净度级别 1.3.1 1998版GMP对药品生产洁净室（区）的空气洁净度划分为100级、 10000级、100000级、300000级四个级别，具体划分详见下表： 30 1.3.2 2010版GMP对药品生产洁净室（区）的空气洁净度划 分为A级、B级、 C级、D级四个级别，具体划分详见下表： 洁净度级别悬浮粒子最大允许数/立方米 静态动态 0.5m5.0m0.5m5.0m A级352020352020 B级3520293520002900 C级3520002900352000029000 D级352000029000不作规定不作规定 31 洁净度级 别 浮游菌cfu/ m3 沉降菌 (90mm) cfu/4h 表面微生物 接触碟 (55mm) cfu/碟 5指手套 cfu/手套 A级 1111 B级 10555 C级 1005025 D级 20010050 微生物监测的动态标准 32 1.4、洁净室（区）的送风量和换气次数 1.4.1 1998版GMP送风量计算： 单向流（层流）洁净室送风量=洁净室断面面积()风速 乱流（非单向流）洁净室送风量=洁净室容积（ m3)换气次数（次/h） 换气次数： 10000级洁净室换气次数n25次/h； 100000级洁净室换气次数n15次/h； 300000级洁净室换气次数n12次/h； 1.4.2 2010版GMP送风量计算： 单向流（层流）洁净室送风量=洁净室断面面积()风速 乱流（非单向流）洁净室送风量=洁净室容积（m3)换气次数（次/h ） 洁净区生产环境的空气换气次数应根据热量平衡及风量平衡计算， 并加以验证。 33 项 目标 准 要 求 材料及装修 标准 洁净室内表面应平整、光滑、无裂逢、接口严密、无颗粒 脱落、防霉、防静电、避免眩光并耐受清洗和消毒、墙壁 与地面交界处宜成弧形或采取其它措施，以减少灰尘积聚 和便于清洁。 温 度 温度与药品生产工艺要求相适应，无特殊要求时，温度应 控制在1826。 湿 度 湿度与药品生产工艺要求相适应，无特殊要求时，湿度应 控制在4565%。 1.5、洁净室（区）内部分参数控制要求 34 项 目标 准 要 求 照 明 主要工作室的照度宜为300Lx，对照度有特殊要求的生 产部位要设置局部照明（例如质控室可见异物抽检）。 压 差 1998版 GMP 空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5帕， 洁净室（区）与室外大气的静压差大于10帕，并应有指 示压差的装置。 2010版 GMP 洁净区与非洁净区之间、不同级别洁净区之间的压差应 不低于10帕斯卡。必要时，相同洁净度级别的不同功能 区域（操作间）之间也应当保持适当的压差梯度。 噪 声 动态测试时室内噪声级应70dBA;空态测试时乱流洁净室 噪声级应60dBA，层流洁净室噪声级应65dBA。 洁净室（区）内部分参数控制要求 35 项 目标 准 要 求 新风量 进入洁净室的空气必须经净化处理，洁净室内应供给的新 风量，其数值应取下列风量中的最大值： 乱流洁净室总送风量的10%，平流洁净室总送风量的 2%； 补偿室内排风和保持室内正压值所需的新风量； 保证室内每人每小时的新风量40m。 洁净区域人数 根据洁净区域空间大小与新风量，保证室内每人每小时的 新风量，制定洁净区域各房间能够容纳多少人。 洁净室（区）内部分参数控制要求 36 二、污染洁净室（区）洁净度的因素。 2.1、来自外部的污染物质。 a.大气污染 b.大气中的微生物 2.2、洁净室内的污染源主要来自四个方面： a.作业人员； b.水 c.建筑围护结构、设施的产尘，这里包括墙、顶棚、 地面和一些裸露管线的产尘； d.设备及产品生产过程的产尘。 37 污染发生源粒状污染物有害气体备注 人体 粉尘、皮屑、污 垢、细菌、纤维、 化妆品 体臭、CO2、氨、 水蒸气 吸烟 粉尘（焦油、尼古 丁等）二甲基硝酸 铵等 CO、CO2、NO、 NO2、甲醛、丙 烯醛、碳氢化合 物 在洁净室内禁 止吸烟，在一 般空调房间内 也不宜吸烟 办公设备 纸张、家具的纤维 及尘粒 臭氧、氨、溶剂 挥发物（VOC） 2.2.1、室内发生污染空气的主要物质，见下表： 38 污染发生源粒状污染物有害气体备注 机械运转设 备 转动设备磨损的粉 尘、纤维、碳化油脂 等 润滑油挥发物 燃烧器具烟尘 CO、CO2、SO2、 NO2、碳氢化合物 等 建筑材料 细菌、霉菌、壁虱、 石棉纤维、玻璃纤 维、粉尘等 甲醛、氡气、溶 剂、粘接剂中有机 溶剂挥发物（VOC ） 清洗、灭菌 材料 喷射剂（氟化碳氢 化合物）、杀菌 剂、防霉剂、溶 剂、洗涤剂的挥发 物 39 2.3、人员与室内空气污染 2.3.1、作业人员的发尘量： 洁净室内的尘源，主要来自生产工艺设备运转发尘，产品和材料运送过 程中发尘，洁净室内建筑内表面等的发尘和人员产尘。来自生产设备运转 中的尘粒有的可通过局部排风装置排除；按洁净室的管理规定，产品和材 料均应进行清洁，在运送过程中的发尘量与人体发尘量相比是很少的；洁 净室内表面只要严格按规定进行清扫、清洁，其发尘量也可控制到很少。 洁净室的尘源主要来自操作人员的发尘，即使按“人净程序”进行了人身净 化，洁净室内人员产尘仍是主要污染源。 在洁净生产环境内，工作人员的发尘量多少与其穿着的洁净工作服种 类、形式和洁净服的着装材质类型有关，与工作人员在洁净室内的活动、 动作的幅度等因素有关。 2.3.2、人体发菌量： 生物洁净室，包括制药工业、生物制品工厂、医院的手术室等，必须控 制人体的发菌量，人体的细菌散发量与服装、人员的活动及场所等因素有 关。 40 三、洁净室（区）的卫生管理要求 3.1、人员卫生 3.1.1、穿戴要求： 根据各生产区域的规定穿戴工作服，并遵守净化程序。 穿戴洁净工作服时，应先戴口罩后再穿洁净服，然后对着 镜子检查穿戴工作服的情况，要求帽子要包盖全部头发，口 罩要遮住口鼻、胡须、衣服要拉（扣）好，鞋带系好等。 在10000级和100000级（B级和C级）空气洁净度级别的洁净 区工作，每班洗一次洁净服、洁净工作鞋和口罩。 更换下来的工作服应分区域堆放，装入专用容器中，标记 明显。 不同洁净区域的工作服不能同时在同一洗衣机内洗涤。 洁净的工作服应存放在与使用工作服洁净度级别一致的区 域内存放。 41 3.1.2、个人卫生： 随时注意保持个人清洁卫生，做到“五勤”：勤剪指甲，勤理发剃 须，勤换衣服，勤洗澡洗头、勤洗手。 工作前洗干净手，不涂抺化妆品，上岗时不佩戴饰物、手表。 不携带个人物品进入生产区， 不在生产区内吃东西及吸烟。生 产区内的饮水间要干净、整齐，对生产不造成污染。 洁净室内随时注意保持手的清洁（上塞人员、胶塞漂洗人员需 戴上经清洗并消毒过的乳胶手套后操作），手或手套在消毒以后 ，不能接触与工作无关的物品，严禁裸手直接接触药品及与药品 直接接触的物料、设备、容器表面。一旦手或乳胶