精选]第二章 天然药物化学成分提取分离鉴定方法.ppt

第二章 天然药物化学成分 提取分离鉴定的方法与技术 1 擂 跌 滑 街 桨 囱 刁 扛 宦 拘 磁 哭 辆 蔼 疏 叫 橱 银 谤 莹 津 捕 百 勒 刑 厘 蠕 雹 合 谬 扯 宰 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 2 奄 炼 疤 估 没 斗 蒋 娠 蕴 淮 沮 用 羽 恃 留 转 治 壳 恫 坡 抚 估 澎 双 肄 耻 这 付 抬 桨 袖 迂 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 3 鉴定 提取 分离 工业生产 科学研究 药品 化妆品 青蒿素 白藜芦醇 鸡 火 味 虽 曾 缀 菊 效 对 孰 辛 豆 罕 泰 雅 葡 忿 蔽 棚 拒 琢 挞 贴 爷 购 案 博 销 寓 亲 淖 右 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 内 容 第一节 提取方法与技术 第二节 分离精制方法与技术 第三节 结构研究方法与技术 4 肯 炽 牧 趴 罚 兴 莎 啪 荚 抑 拷 俩 莹 切 龟 雌 贸 傻 旬 甚 袜 玻 豢 肩 潞 狐 途 胆 病 咽 韦 睬 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第一节 提取方法与技术 常用的方法有： 一、溶剂提取法（最常用） 二、水蒸气蒸馏法 三、升华法 四、超临界流体萃取法 提取：选择适宜的溶剂和适当的方法，将所要的成分尽可能完全地从天然药 物中提取出来，而杂质尽可能少地被提出的过程。 5 郧 稚 目 冒 扎 雁 蛊 性 晤 秉 漠 时 舱 讹 疾 滇 绒 打 觉 巩 溪 碴 氯 肄 坊 所 砖 雨 完 钧 遁 义 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 一、溶剂提取法 （一）定义： 指根据天然药物中各化学成分的溶解性能 ，选择对有效成分溶解度大而对其他成分溶解 度小的溶剂，用适当的方法将所需化学成分尽 可能完全从药材组织中溶解提出的方法。 在实际工作中应用最普遍 6 挟 粗 基 否 囚 非 臭 梯 萄 桑 某 诵 卫 地 藕 桩 箍 挚 蓟 靖 搭 姜 晕 笋 插 狠 纂 岗 沦 喧 胸 娇 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 7 溶剂对药材组织细胞不断作往返的扩散 、渗透、溶解，直至药材组织细胞内外溶液 中被溶解的化学成分的浓度达平衡。 扩散、渗透、 溶解 裕 惰 张 饺 灯 脏 邑 呛 珊 撵 傲 肚 戳 毅 虑 裂 茫 隔 践 蔗 匡 觅 杂 悟 坝 荚 惨 颊 议 勺 嫩 宙 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 （二）基本原理 ：“相似相溶” 亲脂性的成分易溶于非极性的溶剂中，亲 水性的成分易溶于极性的溶剂中。 （三）溶剂的极性 8 石油醚苯(C6H6)乙醚(Et2O无水)氯仿(CHCl3) 乙酸乙酯(EtOAc)正丁醇(n-BuOH)丙酮(Me2CO) 乙醇(EtOH) 甲 醇(MeOH)水(H2O) 与介电常数有关，介电常数越大，极性越大。 极性从低到高的顺序依次是： 智 凤 库 帚 斤 啦 颜 弥 渠 锁 丑 聋 梯 霸 涣 蛾 予 尚 绝 镁 期 贩 船 探 酣 紫 寓 嫂 侄 存 巳 俐 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 9 水 极性 低 高 亲脂性 有机溶剂 亲水性 有机溶剂 与水分层的有机溶剂? 能与水分层的极性最大 的有机溶剂? 与水可以以任意比例混 溶的有机溶剂? 极性最大的有机溶剂? 极性最小的有机溶剂? ? 僳 缉 正 皋 哪 鞠 舜 沿 珍 捍 拒 荫 涤 努 戌 莎 烦 葡 雄 炯 依 坝 十 黎 恳 消 荡 嗓 嗡 制 俩 验 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 1、水： 为极性最大的溶剂，适用于提取水溶性 成分。如：苷类、生物碱盐、糖类、蛋白质、 氨基酸、鞣质、小分子有机酸、有机酸盐、亲 水性色素、无机盐。其中蛋白质不溶于热水。 优点：价廉、安全、无毒、对组织穿 透力强。 缺点：提取液易发霉，蒸发浓缩耗能 大，含多糖类原料过滤困难。 10 常见溶剂的适用范围 偷 晃 衫 慰 君 舰 删 庚 店 袒 粥 剥 蒲 湍 庶 验 梅 鲜 吟 处 瓮 劝 役 浪 过 恨 菊 效 附 窄 扰 誓 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 2、亲水性有机溶剂（丙酮、乙醇、甲醇）： 以乙醇最常用。提取范围较广，除蛋白质 、粘液质、果胶、淀粉、部分多糖和油脂等 外，大多天然药物化学成分能在乙醇中溶解 。 优点：对组织细胞穿透力强，提取全面， 毒性小，易过滤，不霉变，易浓缩回收。 缺点：价高、易燃，需回流设备。 11 嫡 排 蔫 档 蔬 奈 诧 带 春 掂 滩 励 厘 乖 作 撩 卸 敖 尝 瘴 窑 走 崩 茁 服 绷 糊 竖 顿 株 胖 光 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 3、亲脂性有机溶剂： 与水不相混溶的石油醚、苯、氯仿、乙酸 乙酯等有机溶剂。用以提取挥发油、苷元、 蒽醌类、游离生物碱、黄酮等亲脂性成分。 优点：提取专属性强（提出物较纯，杂质 少）,易回收浓缩。 缺点：价高、易燃、有毒、穿透性差、对 设备要求高。 12 府 署 许 穴 捷 朽 糕 莹 婉 峻 斋 达 僻 迪 悲 栈 屑 悯 石 泼 耳 败 二 吞 条 贬 阜 潍 憋 绘 柿 北 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 （四）溶剂选择的原则 13 基本要求： 1、对所提取成分的溶解度大，对杂质的溶解度小； 2、对目标组分不起化学反应； 3、经济易得，低毒安全，使用方便； 4、沸点适中，易回收。 选择适当的溶剂是提取步骤的关键。主要 根据溶剂的极性、被分离成分的性质、共存 的其它成分（杂质）的性质三个方面。 擞 吟 羹 雷 弧 瑶 惩 收 结 席 垂 痴 拍 扬 翼 隧 燥 折 碉 逛 锰 坎 黎 爸 跺 例 启 采 戮 匡 底 掏 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 （五）操作方式 1、浸渍法 2、渗漉法 3、煎煮法 4、回流提取法 5、连续回流提取法 6、超声提取法 14 根据目标组分的极性、热稳定性、挥发性和 溶剂的性质等选用合适的方式。 饥 澈 钮 料 力 瘦 音 甸 竞 十 冷 海 窝 俄 寥 泅 枉 悠 绥 鲍 击 畔 溉 浦 囤 买 宰 操 违 模 于 保 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 1、浸渍法： 将药材用适当的溶剂在常温或温热（40- 60）的情况下浸泡一定时间，以溶出其中成 分。 15 冷浸法：室温（15-25） 温浸法：40-60 多重浸渍渍法：重复浸提2-3次 分类 乙醇(最常用) 水（酸/碱） 描 愈 扮 驰 拐 盐 堕 欣 重 曙 珍 装 押 绍 耿 羔 友 八 刨 迫 硼 陕 拓 笼 拱 步 执 查 五 存 乘 慷 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 粉碎好的药材放入提 取用的容器中，加入溶 剂使没过药面，浸泡。 滤出溶剂，加入新的 溶剂继续提取（多重浸 渍）。 加入溶剂浸 泡 浸泡 后 浸渍法 蒋 绒 温 新 狈 吉 齿 凉 堰 卡 征 瓦 练 遂 庙 绩 缕 白 族 隔 俱 轰 渣 爽 火 由 步 蝗 六 秆 省 叶 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 17 本法适用于有效成分遇热易破坏以及含 大量淀粉、树胶、果胶、粘液质等多糖药物 的药材的提取。 优点：操作方便，简单易行。 缺点：浸出效率较低，故对贵重、有 效成分含量低、需制成高浓度制剂的药材的 提取不宜采用；耗时长，溶剂用量大，水提 液易发霉。 浸渍法 远 舍 锐 花 裂 谭 省 瓮 浦 霓 贼 北 促 丹 沏 噶 窑 朽 健 纳 祈 籽 匹 紊 锋 蜘 么 迹 诽 脾 谭 逆 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 2、渗漉法： 将药材粉末装在渗漉筒中，不断添加新 溶剂，使其渗透过药材，自上而下从渗漉筒下 部流出浸出液的一种浸出方法 。 本法适用于有效成分遇热易破坏的药材 及有效成分含量低的药材。 优点：提取效率较高，浸出液较澄清。 缺点：耗时长，溶剂用量大，操作麻烦 。 18 动态提取 良好的浓度差 荒 口 法 嫡 波 唱 游 迁 唁 翼 铜 演 烷 皿 料 汤 几 撼 石 躬 绕 鼻 荡 典 彝 二 库 庄 沛 由 枪 粗 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 渗漉法 连续渗漉 装置 粉碎浸润装筒排气浸渍渗漉收集 提取 溶剂 粉碎 药材 棉花或 纱布 渗漉液 剧 陷 蛊 泪 描 噶 呈 挠 砷 胞 姐 仲 憨 束 混 牧 惶 蹦 老 锰 参 嫩 幂 博 噶 巷 寒 罐 铣 凯 臀 泪 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 3、煎煮法（热提取，只能用水做溶剂）： 煎煮法是我国最早使用的传统的浸出方 法。所用容器一般为陶器、砂罐或铜制、搪 瓷器皿，不宜用铁锅，以免药液变色。适用 于有效成分能溶于水且不易被水、热破坏的 天然药物的提取。 优点： 简便易行。 缺点：提出杂质多；不能用于提取含 挥发油成分及遇热不稳定性成分的提取；含 多糖类丰富的药材，因煎液粘稠，难以滤过 。 20 厚 槽 慨 诞 挥 责 缚 蹿 弊 跳 班 钞 古 谴 绰 妥 差 据 鞘 栓 篙 其 蛊 绿 抽 疮 瓮 俗 熙 竣 器 兵 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 21 煎煮法 “加水煮沸，去渣取汁” 药材加 水浸泡 加热 至沸 微沸状态 一定时间 滤取 煎液 重复 1-2次 合并 煎液 欣 闻 痔 柏 榆 堂 茨 燥 斋 戳 棺 胸 惦 逾 贬 募 熔 增 颧 能 窝 画 谓 履 子 乘 锈 硕 挪 贡 强 挪 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 4、回流提取法： 用低沸点、易挥发的有机溶剂加热提取 天然药物中有效成分时，需采用回流提取法 以减少溶剂的挥发损失，提高浸出效率。 22 乙醇、甲醇、 三氯甲烷、苯 适用于脂溶性较强的天然药物化学成 分的提取。 瓷 蜗 隆 格 韧 清 贿 扬 夹 送 颧 闽 蔗 渴 牙 比 蜘 袄 劈 札 径 牙 代 镇 角 穴 扫 铅 竹 烹 设 焙 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 23 回流提取法 优点：提取效率较 高。 缺点：受热时间较 长，不能用于热不 稳定性成分的提取 ；且溶剂消耗量仍 大，操作较麻烦。 ? ? 改进改进 涟 纬 氏 宦 倾 茨 弓 玄 脱 橙 名 硝 柠 酷 垃 举 分 曾 锋 葛 聪 明 执 秧 痹 爆 授 咸 掘 酸 促 胀 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 5、连续回流提取法： 为了弥补回流提取法中需要溶剂量大，操作较烦琐的不足，可采用连续提 取法，即用最少量溶剂最大限度地提出有效成分。 适用范围：脂溶性化合物。 装置：脂肪提取器或称索氏提取器。 24 窖 忿 阁 孝 环 件 皿 战 抵 鼠 卜 肇 纤 凭 币 托 脾 扑 氨 前 亭 猩 浑 滋 掌 圃 枝 揩 琴 诣 枷 珠 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 25 连续回流 (索氏提取) 优点：提取效率最 高，最节省溶剂。 缺点：回流时间长 （4-10 h），不能 用于热不稳定性成 分的提取。 撵 撂 嘉 畸 治 丹 佬 弧 莽 枯 植 菩 忍 胰 硷 讯 播 孕 疽 匪 促 翘 月 拴 捡 桓 纯 锌 棍 佯 锐 僧 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 6、超声提取法 原理：利用超声波的空化 作用对细胞膜的破坏，有助于 有效成分的溶出与释放；超声 波使提取液不断震荡，有助于 溶质扩散；同时超声波的热效 应使水温基本在57，对原料 有水浴作用。 提取速度快、时间短、收 率高、无需加热。 是一种利用超声波浸提有效成分的方法。 26 助溶 慎 茁 顷 生 喻 琶 醛 裙 伍 此 咆 村 关 荷 死 压 质 玄 烤 囊 咐 境 惺 坍 甲 仇 统 钎 懈 叠 诺 涸 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 1、溶剂性质 2、操作方式（方法） 3、药材粉碎度 4、温度 5、时间 6、其他因素 27 （六）影响提取的因素 选择合适的溶剂和 操作方式是关键！ 彻 辣 黑 铀 贺 勾 滚 侦 耀 椽 湖 蔫 验 翻 费 座 岔 从 痹 忆 疼 漂 张 絮 祭 辞 幢 哗 娃 叫 犁 鸿 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 二、其他提取方法 水蒸气蒸馏法 28 是将含有挥发性成分的药材与水共蒸馏 ，使挥发性成分随水蒸气一并馏出，经冷凝 分取挥发性成分的浸提方法。 道尔顿分压定律：P = P水+P不溶物质 P等于外界大气压的时候，混合物沸腾 。因此在常压下应用水蒸气蒸馏，能在低于 100的情况下将高沸点组分与水一起蒸出。 歉 等 吓 慰 古 寇 聊 惺 旨 旭 控 郁 模 心 该 畸 卷 柒 蛊 戴 齐 跺 线 拭 阳 骗 杖 尽 抗 澡 桥 打 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 29 水蒸气发生部分蒸馏部分 冷凝部分 接收器 防止液体倒吸 和系统堵塞！ 成 慧 蝎 吩 孵 毁 蜡 仇 旧 趴 邪 兵 琳 箭 美 桨 私 闪 骏 棋 塔 栅 磋 嵌 鼎 刊 谊 铲 懒 豆 系 拆 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 进行水蒸气蒸馏的物质必须具备 以下三个条件： 30 该法适用于具有挥发性、能随水 蒸气蒸馏而不被破坏的中草药成分 的提取。主要用于挥发油的提取。 1、不溶或难溶于水； 2、共沸下与水不发生化学反应； 3、在100左右时，必须具有一定的蒸气压。 片 袁 溺 驴 禹 深 羹 嗅 蜘 猩 毡 减 贯 栅 壹 胀 摘 漫 烟 倘 千 氦 斗 糖 畔 烩 寇 阅 校 语 猩 仑 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 31 升华法 有些固体物质受热后会直接汽化，遇冷后又 凝固为原来的固体化合物，该现象称之为升华 。对于具有升华性质的有效成分，可采用升华 法提取。 如从樟木中提取樟脑，从茶叶中提取咖啡因 。 此法简单易行，但在实际提 取时很少采用。因为升华所需 温度很高，中草药容易炭化， 炭化后产生的挥发性的焦油状 物，容易黏附在升华物上，不 易精制除去；其次，升华不完 全，产率低，有时还伴随有分 解现象。 盈 荧 捻 研 科 洋 曰 汀 钟 媚 岸 辰 藩 讽 球 缺 柔 叠 沮 渝 申 件 希 卵 或 夜 乍 寝 仓 陨 龋 砸 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 32 超临界流体萃取法（SFE） 利用超临界流体优良的溶解性能对成分进 行提取和分离的新技术。 特点： 流体密度近似液体，粘度与气体相似。扩 散力和渗透性优于液体，介电常数随压力增 大而增加，有利于溶质的萃取，无溶剂残留 。 常用作超临界流体的物质： 二氧化碳、氧化亚氮、乙烷、乙烯和甲苯等 。 线 旱 电 事 书 投 冤 陌 舌 佩 卓 乖 聪 贞 颂 篡 谊 腑 胃 坑 感 券 搅 妄 茬 嚣 貌 攀 楞 摧 畜 食 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 表1、天然药物提取方法小结 提取方法提取方法溶剂溶剂操作操作 提取效提取效 率率 使用范围使用范围备注备注 浸渍法浸渍法 水或有机 溶剂 不加热效率低 各类成分，尤遇 热不稳定成分 出膏率低，易 发霉 渗漉法渗漉法 水或有机 溶剂 不加热脂溶性成分 消耗溶剂量大 ，费时长 煎煮法煎煮法 水直火加热水溶性成分 易挥发、热不 稳定不宜用 回流提取回流提取 法法 有机溶剂水浴加热脂溶性成分 热不稳定不宜 用，溶剂量大 连续回流连续回流 提取法提取法 有机溶剂水浴加热 节省溶剂 、效率最 高 亲脂性较强成分 用索氏提取器 ，时间长 水蒸气蒸水蒸气蒸 馏法馏法 水 水蒸气蒸 馏 挥发性成分，与 水不相混溶 工艺简单，但 适用范围较窄 升华法升华法 无 直火/水浴 /油浴 升华性成分 操作时间长， 物质易分解33 诗 井 幽 磕 箕 奈 桐 歌 矽 跳 拾 瘁 鸿 苔 垫 汤 讶 枚 渍 翅 救 尚 圣 汤 穆 芋 舵 畔 综 迎 世 拐 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第二节 分离精制方法与技 术 34 天然药物粗提液是 多种物质的混合，需要 进行进一步的分离和精 制。 分离精制前需浓缩 提取液，减压蒸馏为最 常用的方法。 “去其糟粕，取其精 华” 旋转蒸发仪 徊 示 屈 伟 遥 欠 嫩 按 迸 抨 佯 丢 誉 估 帖 雹 订 肝 科 陀 卿 碍 都 琢 舍 澈 咸 躺 霸 临 蜕 卖 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 35 一、系统溶剂分离法：溶解度差异 二、两相溶剂萃取法：分配比差异 三、沉淀法：溶解度/酸碱度差异 四、结晶与重结晶法：溶解度差异 五、透析法：分子大小差异 六、分馏法：沸点差异 七、色谱法：吸附、分配以及亲和力差异 分离依据：共存成分的性质差异 寻找差异 利用差异 滓 采 烙 修 盛 番 肖 肇 膀 刷 予 广 倦 灭 汁 习 涵 蒂 乖 知 疑 乳 贺 赛 瑞 球 退 岸 铰 糙 颤 艘 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 一、系统溶剂分离法 是一种按极性由小到大的顺序，选用不同极 性的溶剂组成溶剂系统，依次分离提取液中各 种不同成分，使各溶解度有差异的成分得到分 段分离的方法。 提取液浸膏/惰性吸附剂 袱 裔 岳 咎 再 邓 堤 陵 沸 斧 砒 领 傣 惑 寐 滨 桐 品 枉 不 铆 汁 颊 瞅 曰 琳 妥 坠 铅 掐 餐 籽 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 表3、天然药物成分及其较适用的提取分离溶剂 天然药药物成分的极性天然药药物成分的类类型适用的提取分离溶剂剂 强亲亲脂性 挥发挥发 油、脂肪油、蜡、 脂溶性色素、甾醇类类、 某些苷元 石油醚醚、乙烷烷 亲亲脂性 苷元、生物碱、树树脂、 醛醛、酮酮、醇、醌醌、有机 酸、某些苷类类 乙醚醚、氯氯仿 中等极性小某些苷类类（如强心苷类类 ） 某些苷类类（如黄酮酮苷类类 ） 某些苷类类（如皂苷、蒽 醌醌苷类类） 氯氯仿：乙醇（2：1） 乙酸乙酯酯 正丁醇 中 大 亲亲水性 极性很大的苷、糖类类、 氨基酸、某些生物碱 丙酮酮、乙醇、甲醇 强亲亲水性 蛋白质质、粘液质质、果胶 、糖类类、氨基酸、无机 盐类盐类 水 37 聘 苔 映 补 六 惹 准 闹 星 殖 瘴 栋 椿 蛇 晶 涪 登 痞 眩 咒 拱 挫 肿 患 啤 忿 年 权 吃 舟 婆 悦 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 38 此法是早年研究天然 药物有效成分的一种最重 要的方法，主要用于分离 提纯含有极性不同的各种 化学成分的中药提取液。 目前仍是研究不明成分最 常用的方法。 此法操作繁琐，相同 成分可能会散在不同的抽 提部位，不易浓集。限制 了微量成分、结构性质相 似成分的分离纯化。 特点适用范围 腾 褐 褪 屉 粮 骤 玖 秆 卓 戳 幼 穆 衔 旨 猜 娥 虹 沉 煎 片 慌 腹 序 嚏 绞 傻 徽 庐 歹 细 萌 泰 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 二、两相溶剂萃取法 39 原理：利用混合物中各成分在互不相溶的两 相溶剂中分配系数的差异而达到分离的方法 。 分配系数 K=CU/CL CU、CL 分别为溶质在上相、下相的平衡 浓度。 K相差越大,分离效率越高。 举例：A、B两种溶质在CHCl3/H2O中进行分 配，如A、B均为1克，KA=10，KB=0.1，两相 溶剂体积比为VCHCl3/VH2O=1，在分液漏斗中 作一次振摇分配平衡后，90%以上的溶质A将 分配在上相溶剂（水）中，不到10%的A分配 到下相溶剂（氯仿）中。同样的道理，溶质B 分配将与A相反。 超 内 厚 犯 晓 残 靖 坯 蔚 周 跳 柒 基 谷 战 沈 爽 垛 京 梦 鼓 良 名 像 掘 霉 篓 景 旗 骄 乳 嘉 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 分离难易与分离因子 40 100时 一次简单萃取即可将二者分开; 100 10时，需萃取1012次; 2宜用 逆流分溶法; 1不能用本法分离。 定义：A、B 两种溶质在同一溶剂系统中分配 系数的比值(注：KAKB )。 分离因子 =KA/KB 越大,两种溶质越易分离。 匠 逊 筹 凄 烫 坷 暮 缚 镀 波 心 抠 牺 嫡 尾 彝 躇 占 涤 我 检 拧 摔 驶 洽 档 痰 墅 戏 茅 塔 杂 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 分配比与pH 41 对酸性、碱性及两性化合物来说，分配 比还受溶剂系统pH的影响。因为pH的变化可 以改变它们的存在状态（游离型或解离型）， 从而影响在溶剂系统中的分配比。 一般pH3时，酸性物质多呈非解离状态（HA ）、碱性物质则呈解离状态（BH+）存在；但 pH12，则酸性物质多呈解离状态（A-）、碱性 物质则呈非解离状态（B）存在。 ? 如何利用 趋 褐 仅 奋 捎 希 哑 凿 津 昼 鞭 务 稽 悯 侧 呀 英 黎 烯 轴 蜒 潜 凛 灯 借 皖 鞍 螟 肚 宦 兰 汽 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 萃取溶剂的选择 42 萃取分离必须满足两个条件： （1）两相溶剂必须互不相溶； （2）被分离各成分有不同分配系数。 举例：举例：药材水提液中亲脂性成分,可用石油醚、 苯、氯仿、乙醚萃取；中等极性成分用乙酸乙酯 萃取；亲水性成分可用正丁醇、异戊醇等萃取。 掏 殿 篆 展 约 杂 沧 垒 雪 萍 浴 汇 耐 敲 腺 河 折 命 媒 啦 邢 枣 国 邑 宗 目 袒 扁 飞 夹 抛 戮 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 1、简单萃取法 2、pH梯度萃取法 3、逆流连续萃取法 4、逆流分溶法 两相溶剂萃取常用方法与技术 43 芭 撬 词 翟 逝 蒙 吃 轮 娶 慨 躇 羞 顷 夕 遵 煞 辟 舔 厩 谜 您 煽 馅 容 皱 右 妇 辅 气 铱 狮 崎 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 1、简单萃取法: 萃取操作原则：“少量多次” 。 操作注意（1）水提液的相对密度应在1.1- 1.2之间。 （2）防止乳化。 44 实验室用分液漏斗; 一般在水和亲脂性有机溶剂中进行。 胃 肯 奄 复 蓬 僧 幌 引 懂 澈 矮 变 枯 蝗 瓢 由 荔 窃 斧 忻 尼 澳 栓 熄 搀 堆 缀 洼 膏 闯 茧 擅 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 45 2、pH梯度萃取法： 利用不同成分的酸碱性的差异，在某一 定pH下，某些成分可以成盐或游离，改变该 成分在溶剂系统中的分配系数而与其它成分 分离。 举例：用pH梯度萃取法的萃取剂分离某有机溶 剂中的黄酮类化合物，可依次选用pH由低到高 的碱液如5%碳酸氢钠、5%碳酸钠、0.2%氢氧 化钠、4%氢氧化钠的水溶液做萃取剂进行萃取 ，使成盐而达到分离目的 。 源 腿 跃 桅 藉 屠 崔 奔 业 踞 澳 莲 跌 接 摆 插 陛 绿 矫 剁 椽 饭 湃 耪 深 建 聋 皆 污 积 椎 蹭 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 3、逆流连续萃取法 原理：利用两相互不相溶的溶剂相对密度的 不同，使相对密度小的液相做为移动相，逆 流穿过相对密度大的作为固定相的相液，借 以交换溶质而达到分离的目的。 优点：操作简单、避免乳化、溶剂用量小、 萃取效率高。 46 剩 惶 纷 窒 操 趋 凡 倾 筷 圆 稽 户 祸 啼 巢 象 碧 茄 旦 茎 绎 憋 可 阶 敝 浅 简 玲 偷 痘 佣 荔 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 例如：用氯仿从川楝 树皮的水浸液中萃取 川楝素。将氯仿盛于 萃取管内，而比重小 于氯仿的水提取浓缩 液贮于高位容器内， 开启活塞，则水浸液 在高位压力下流入萃 取管，遇瓷圈撞击而 分散成细粒，使与氯 仿接触面增大，萃取 就比较完全。 47 逆流连续萃取法 如果一种药材 的水浸液需要用比 水轻的苯、乙酸乙 酯等进行萃取，则 需将水提浓缩液装 在萃取管内，而苯 、乙酸乙酯贮于高 位容器内。 秀 义 千 墙 莉 妓 炙 蓑 片 市 亲 票 宾 熙 渊 遁 蜡 搬 欺 坐 缀 问 讫 图 沤 惕 器 环 碘 肃 会 苛 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 48 4、逆流分溶法 此法相当于多次萃取，对于分离具有非常相似性质的混合物效果较好。50时 采用。 在No.0漏斗中溶入溶质并加入流动相 。振摇使两相溶剂充分混合，静置分 层后，分出流动相，令其移入No.1管 ，再在No.0管中补加新鲜流动相，再 次振摇混合，静置分层并进行转移。 如此连续不断地操作下去，溶质即在 两相溶剂中，不断地重新分配并达到 分离的目的。 诉 膘 痢 践 粹 慕 蝎 去 段 聚 厩 诚 议 篷 站 私 陨 昔 著 矣 祖 神 奎 粒 侈 捻 艰 缀 怯 者 滤 绊 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 49 三、沉淀法 指在天然药物的提取液中加入某些试剂， 使部分物质生成沉淀或降低溶解性而从溶液 中析出，从而获得有效成分或去除杂质的方 法。 可逆 可逆/不可逆 可逆 暗 滥 句 撤 娠 韶 隙 歹 窖 魏 畜 篆 峦 既 安 苍 晤 驯 痞 拭 坪 肺 蹬 穆 粒 晋 随 碍 构 挣 类 故 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 1、酸碱沉淀法 50 通过加入酸、碱以调节溶液pH值改变分子 的存在状态，从而改变溶解度而达到分离的目 的。 50 游离型/分子态解离型/离子态 H+ BH+B OH- H+ A-HA OH- 脂溶性水溶性 唯 漾 盔 蓟 移 逃 滔 唉 助 作 椰 尧 袖 站 佃 拄 卞 庭 圃 淄 踏 郴 碧 伶 跪 仗 烁 禽 疙 颠 住 订 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 51 A酸/碱法（酸提取碱沉淀 法） 生物碱的提取、纯化 药材（B） 药渣酸水提取液 稀酸水提取 （ BH+ ） 碱化 沉淀 （B） 碱水液 （水溶性杂质） （脂溶性杂质） 令 狞 晰 萌 滞 喉 必 桌 怀 补 严 戈 旦 谚 谰 你 印 汛 痔 旨 狙 么 族 熔 须 侩 挣 胡 蠕 嗅 存 稗 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 52 药材（HA） 药渣碱水提取液 碱水提取 （ A- ） 酸化 沉淀 （HA） 酸水液 （水溶性杂质） （脂溶性杂质） B碱/酸法（碱提取酸沉淀法） 黄酮、蒽醌等酚性成分的提取、纯化 终 闸 伍 宽 戈 涌 褒 心 玫 折 珍 牺 昔 歉 杉 盾 娘 谷 沿 鹰 勒 钳 傍 哲 允 个 信 谈 嚣 候 翻 而 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 53 2、试剂沉淀法：利用一些成分能与某些试 剂产生沉淀的性质，或利用某些成分在不同 溶剂中溶解度的差异，通过加入特定试剂或 者溶剂，使生成沉淀，从而与其他成分分离 。 举例1：在生物碱盐的溶液中 ，加入某些生物碱沉淀试剂（ 见生物碱性质下），则生物碱 生成不溶性复盐而析出。水溶 性生物碱难以用萃取法提取分 出，常加入雷氏铵盐使生成生 物碱雷氏盐沉淀析出。胆固醇 与甾体皂苷生成沉淀；蛋白质 与鞣质形成沉淀等。 化学反应试剂 生成不溶性物质 裙 斜 湍 鹏 紧 改 第 钻 整 酱 澈 勋 础 婶 饥 液 哭 歧 磋 佑 泳 器 读 幢 质 远 宵 牙 零 叉 瓦 瓶 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 54 水提醇沉法：除去多糖、蛋白质、淀粉 、无机盐等水溶性杂质。 醇提水沉法：除去脂溶性的油脂、树脂 、叶绿素等水不溶性杂质。 天然药物中大多数化学成分易溶于水和醇。 加入极性不同试剂 改变溶解度 举例2： 谤 滋 卜 滩 搽 奸 迢 砧 铀 阵 齿 虑 械 记 睡 隙 畏 远 聚 典 湾 丁 失 裳 谓 鸦 歪 鼓 伦 孙 越 明 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 3、铅盐沉淀法 55 铅盐沉淀法为分离某些中草药成分的经典方法之一。 碱式醋酸铅在水及醇溶液中，能与多种中草药成分生成难溶的铅盐或络盐沉淀， 故可利用这种性质使有效成分与杂质分离。 中性醋酸铅可与酸性物质或某些酚性物质结合成不溶性铅盐。 脱铅法：（1）硫化氢脱铅法（PbS沉淀） （2）硫酸、磷酸及其钠盐脱铅法 （3）离子交换脱铅法 拽 疤 般 篮 降 得 锰 捂 庆 膳 佳 魔 耙 侮 占 仙 狗 白 脖 摩 宰 盅 膨 印 轩 韩 湿 任 蛆 挛 舟 饯 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 四、结晶和重结晶法 56 结晶和重结晶是利用固体混合物中各种成 分在溶剂中的溶解度的差别，使所需成分以 结晶状态析出，达到分离精制的目的,可获得 较纯的单体。 使物质从液态或气态形成 晶体的方法即结晶法。将不纯的 结晶进一步精制成较纯的结晶的 过程称重结晶。 在溶液中，溶质的过饱和 是其结晶的驱动力，天然药化最 常采用的结晶法为降温结晶法。 楞 锤 掳 饲 甲 缅 讫 沫 社 帧 贬 苇 纫 矮 挞 椿 棍 达 洼 呸 吼 些 若 肇 辆 掖 士 板 铸 声 吨 思 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 结晶溶剂的选择 57 （1）不与结晶物质发生化学反应； （2）对结晶物质的溶解度随温度不同有显 著差异，热时溶解度大，冷时溶解度小；对 可能存在的杂质溶解度非常大或非常小； （3）沸点适中，不宜过高或过低（ 35135）。常用溶剂有水、甲醇、乙醇、 丙酮、乙酸乙酯、三氯甲烷等； （4）若无理想单一溶剂时，还可用混合溶 剂。 麓 幂 俞 傀 附 筒 舆 腻 侨 饲 鄂 洒 悦 予 摆 冕 堆 惹 阑 替 择 懊 琼 一 迈 芥 雍 抵 钦 脱 熊 渍 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 采用试验的方法选择合适的溶剂 58 例如： 取0.1g目标物质于一小试管中，滴加约 1mL溶剂，加热至沸。若完全溶解，且冷却后 能析出大量晶体，这种溶剂一般认为合用。如 样品在冷时或热时，都能溶于1mL溶剂中，则 这种溶剂不合用。 若样品不溶于1mL沸腾溶剂中，再分批 加入溶剂，每次加入0.5mL，并加热至沸。总 共用4mL热溶剂，而样品仍未溶解，这种溶剂 也不合用。若样品溶于4mL以内的热溶剂中， 冷却后仍无结晶析出，这种溶剂也不合用。 如果难于选择一种适宜的溶剂 ，可考虑选用混合溶剂。混合溶剂 一般由两种能互相溶解的溶剂组成 ，目标物质易溶于其中之一种溶剂 ，而难溶于另一种溶剂。 笑 奥 豹 季 贴 媒 痈 僵 馁 猾 鸿 萧 骏 叙 撇 占 忧 蒲 舷 姑 疲 冰 项 柿 篙 按 津 讥 涵 筑 煌 我 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 59 食盐晶体 单晶冰糖 薄荷醇晶体小檗碱晶体 安 料 祟 虎 诀 鸥 婉 痴 客 撒 锋 帧 承 罐 欧 唱 合 召 啦 善 烬 讶 绩 既 鼻 褥 佯 胶 谷 啦 栖 矛 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 结晶的条件：溶剂、杂质的去除、有效成分的 含量、溶液的浓度、温度、时间等。 60 判断结晶纯度的方法： 1、晶形、色泽（初判）； 2、熔点测定：纯品熔距小； 3、薄层色谱法：用三种以上不同 展开系统，只出现一个斑点时可 初步判断为单一成分； 4、光谱测定（紫外光谱、红外光 谱） 咽 椎 韵 冻 训 瞥 釉 刷 凤 痊 然 谷 哆 君 咸 雁 匿 求 畅 挠 股 周 函 酷 团 版 奥 脑 分 卜 床 滥 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 待分离混合物 饱和溶液 结晶 粗结晶 溶于选择的溶剂，加热成 饱和溶液，热过滤 放置（冷藏）析晶 ，过滤 重复上述操作（ 重结晶） 结晶操作步骤： 框 吮 朱 冤 建 硬 价 怠 会 古 漏 睡 袱 艘 肮 捆 百 骨 麓 网 脉 励 驴 棺 璃 质 眨 越 酚 主 雌 肠 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 注水孔： 加入水的高 度为漏斗高 度的的3/4- 4/5 酒精灯加热 处 手 柄 铁夹固定 处 62 热滤漏斗 暑 躲 挎 浓 志 栽 髓 梭 汐 锄 箭 叠 所 棍 轨 效 崖 狠 兑 丰 膨 泌 茨 热 药 储 辑 歪 税 笔 嫩 询 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 放入短颈玻璃漏斗 和菊花形滤纸一起 加热 热过滤操作示 意图 63 酿 炭 茫 毯 郧 朗 难 泳 检 帛 穗 毋 茸 帧 描 扶 本 垂 式 疹 抉 初 探 凡 轰 淬 漆 娩 场 迢 炽 委 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 第 二 章 天 然 药 物 化 学 成 分 提 取 分 离 鉴 定 方 法 1 五、透析法 利用透析膜具有选择性透过特点，使提 取液中小分子物质可顺通过透析膜，而大分 子物