兽医药理学》兽医毒理学基本概念.ppt

兽医毒理学基本概念 Toxicology 由”toxikon”与”logols”两个希腊文组合而成 。 定义：研究化学物质对生物机体的损害作用 及其作用机理的科学 兽医毒理学主要研究任务 兽药、添加剂、饲料中有毒有害物质的 检测及安全性评价 动物性食品中药物残留检测 一、毒物及其毒性 p6 毒物（poison or toxicant) 毒素（toxin) 由活的机体产生的 毒性（toxicity) 危险性（risk) 染毒剂量、时间、途经、接触频率有关 具有选择性（选择毒性） 安全性（safety) 毒性参数 p10 阈剂量/观察到损害作用的最低剂量（LOAEL） 无作用剂量NOEL/未观察到损害作用剂量NOAEL 致死剂量/浓度（LD/LC） 绝对致死剂量LD100 最小致死量LD01/MLD 最大耐受量LD0/MTD 半数致死量LD50 (mg/kgbw) 半数耐受量TLm (mg/L) 日许量ADI 毒 性 作 用 p66 对生物膜的损害作用 自由基对膜蛋白脂质的氧化；膜通透性 、 流动性、膜电荷的影响等 与生物大分子的共价结合 与核酸/蛋白/脂质的共价结合 影响细胞内钙稳态 对酶系统的干扰 二、毒物的毒性作用评价 p83 一般毒性（general toxicity) 特殊毒性（special toxicity) 致突变作用 致癌作用 生殖发育毒性 致敏作用 神经毒性 免疫毒性 急性毒性 蓄积毒性 亚慢性毒性 慢性毒性 （一）一般毒性试验 定义：在一定剂量、一定接触时间、一 定接触方式下，总体毒效应。 急性毒性（acute toxicity)： 一次或于24h内多次接触外源化学物后， 在短期内发生的毒性效应。 1、急性毒性试验目的 了解毒性强度（LD01、LD50、LD100、 LD0/MTD）； 毒性作用及靶位，初步评价其危险性； 剂量-效应关系，为其他毒性试验的剂量设计、 观察指标作参考； 了解致死原因。 2、急性毒性试验 半数致死量测定的试验设计 1） 实验动物 啮齿类：大、小鼠、豚鼠、家兔 非啮齿类：犬、猫 常用实验动物体重 大鼠小鼠家兔 180-200g18-22g2-2.5kg 动物数量：小鼠 10只/组 大鼠 5只/组 雌雄各半 2）染毒途经：经口/经呼吸道/经皮肤/注射染毒 注射方式小鼠大鼠家兔犬 iv0.2-0.5 1.0-2.0 3.0-10.035.0-50.0 im0.1-0.2 0.2-0.5 0.5-1.02.0-5.0 sc0.1-0.5 0.5-1.0 1.0-3.03.0-10.0 ip0.2-1.0 1.0-3.0 5.0-10.05.0-15.0 常用实验动物注射量 3）剂量设计 预试验LD0，LD100 分组：改良寇氏法（Kaber) 各组动物数相等，按等比级数设计剂量 公比 r =(b/a)(1/n-1) r在1.21.5 一般分为4 6组，各组剂量分别为： a ；ar ； ar2； ar3 ； ar(n-1) = b 4）试验期限及观察指标 试验期限：一般为一周 中 毒 部 位 毒 性 症 状 表 现 中枢神经系统 呆滞:对刺激反应迟缓、减弱、消失；不安：对刺激反应 过敏、 兴奋；强直：行动姿势改变、叫声异常、震颤、 共济失调 植物神经系统 瞳孔缩小、放大; 分泌增多，如流涎、流泪 呼 吸 系 统 鼻孔流鼻涕、呼吸缓慢、困难、潮式呼吸、速率加快等 心血管 系统 心动过速、缓慢、心律不齐、心跳过强、微弱 胃 肠 系 统 气胀、腹泻、便秘、粪便不成形、粪便黑色 生 殖 系 统 乳腺膨胀、会阴部污浊、阴囊下垂等 皮肤、 毛 皮肤发红、松弛、皮疹、毛竖起 粘 膜 口腔流粘液、充血、溃疡、出血性紫绀 眼 睛 上睑下垂、眼球突出混浊 其 他 直肠温度升高、降低；消瘦；拒食等 观察指标 5）LD50的计算 LD50 = lg-1Xm i (p 0.5) Xm：最大剂量的对数（lgb) i: 相邻两组对数剂量之差（lgr) p: 死亡率总和（以小数表示） 3、急性毒性试验评价 表. 化学物质的急性毒性分级标准(WHO, 1977) 毒性分级 ig大、小鼠LD50 吸入大、小鼠LC50 经皮兔LD50 人口服可能的 (mg/kg) (ppm) (mg/kg) 致死量(g/60kg) 极 毒 5000 10000 2180 1200 *吸入毒性LC50指中毒栏中的浓度, 一次中毒2-4小时, 观察24天 （二）特殊毒性 1、致突变作用（mutagenesis) 基因突变：碱基置换、移码、片断改变 染色体畸变：断裂、缺失（微小体）、 成环状、易位等 致突变检测方法： 体外：Ames试验 体内：微核试验，显性致死试验 2、生殖发育毒性作用 生殖毒性 主要研究外来化合物对生殖细胞发生、 卵细胞受精、胚胎形成、妊娠、分娩和哺 乳过程的损害作用及其评定 发育毒性 对子代在胚胎期、胎儿期和幼仔发育的 影响及其评定 生殖发育毒性评价方法 （1）三段生殖毒性试验 阶阶段给药给药 时间时间 观观察指标标 一般生殖毒性 妊娠前期（ 14d, 60d) 孕后20d剖检检，受精率、妊娠率 、活胎数、死胎数、畸胎数、着 床数等 致畸试验试验器官形成期(检检 栓后716d) 畸胎总总数、畸形总总数 围产围产 期毒性 试验试验 孕后6d至产产后 20d 受孕率、产产仔数、死亡率、存活 率、外观观畸形、生长长指数 （2）繁殖试验 评价对亲代生殖和子代的发育、生殖 影响。 分一代和多代系列试验 多代繁殖试验可观察对子代的生殖毒性 。 三、兽药的安全性毒理学评价 特殊毒性： 致突变 致畸 体外：Ames试验（必做） 染色体畸变试验（选做） 体内：微核