黄颡鱼生理学实验项目申请书.doc

编号： 地理与生命科学学院2011年度大学生科研基金项目申请书项目名称： 养殖密度对黄颡鱼血液指标（红细胞、白细胞及血红蛋白含量）的影响 项目负责人： 张驰骋 年 级 ： 09级生物科学 联系电话电子邮箱 1115739177163.com 指导教师 肖玲远 填表日期 2011年11月28日 地理与生命科学学院 制二一一年九月申请者的承诺：我承诺对本人填写的各项内容的真实性负责，保证没有知识产权争议。如获准立项，我承诺以本表为有约束力的协议，遵守相关规定，按计划认真开展研究工作，取得预期成果。地理与生命科学学院有权使用本表所有数据和资料。 申请人（签章） 年 月 日填 写 说 明一本表适用于学生向地理与生命科学学院申报大学生科研计划项目。 二填表前，请先仔细阅读生物科学专业大学生科研及创新训练项目管理办法。三项目申请表作为项目执行过程中检查、验收等管理活动的重要依据文件，由项目负责人填写。四、本表要按顺序逐项填写，内容要实事求是，表达要明确、严谨。本申请表一式三份，要求一律用A4纸双面打印，于左侧装订成册。 五、编号由学院统一填写。 项目名称养殖密度对黄颡鱼血液指标（红细胞、白细胞及血红蛋白含量）的影响项目类别A.重点项目 B.一般项目拟申请经费1500元起止时间2012年 1 月至 2013年 1月预期成果形式以论文形式发表负责人姓名性别出生年月专业年级项目分工联系电话签字张驰骋男1990.12生物科学09参与并负责项目各项流加成员熊帆枫男 1988.09生物科学09鱼种的采集及饲刘鹏男 1991.02生物科学09实验操作及设备管李能勋 男 1987.10生物科学09相关资料的搜集整指导教师情况姓 名肖玲远职 称 副教授学历/学位大学/学士研究专长人体解剖生理学理论与实验教学电 、项目简介 黄颡鱼是通过溶解在水中的氧气而生存的一类水生动物，其血液中各项生理生化指标在正常情况下是保持相对恒定的。红细胞是血细胞中数量最多的一种，是脊椎动物体内运输氧和二氧化碳的重要载体；而白细胞虽然数量很少，但它是黄颡鱼具有免疫活性的一类细胞，其吞噬异物并产生抗体的作用，可以抵御病原体对鱼体入侵，且与机体伤病的损伤治愈密切相关。通过改变黄颡鱼水体养殖密度，观察研究黄颡鱼血液中红细胞、白细胞数量变化及对血红蛋白含量影响。二、选题依据（包括项目的学术价值、应用价值、国内外研究现状分析）黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)，鲇形目，鲿科，黄颡鱼属。又名黄腊丁、嘎牙子、黄鳍鱼、黄刺骨等，是我国江河湖一种名贵的淡水经济鱼类，广布于中国东部各太平洋水系。黄颡鱼肉质细嫩、少刺无鳞、味道鲜美、营养丰富，具食疗功效，深受广大养殖者和消费者青睐，而且在日本、韩国、东南亚等国家也有巨大的市场潜力，是出口创汇的优良品种。溶氧量（D.O.）是黄颡鱼养殖环境中的重要因子，它直接影响黄颡鱼的呼吸、代谢等生理学功能。在养殖环境中溶解氧受诸多因素的影响，养殖密度是一个影响溶氧量极其重要的因素，所以可以通过改变养殖密度来改变其溶氧量。鱼类的血液指标是鱼体重要的生理指标之一。鱼类的血液指标受环境条件和营养状况等因素的影响，能反映鱼体营养健康状况，可以用作监测水体环境变化的生物学指标。因此，研究养殖密度对黄颡鱼的几种血液指标（白细胞数目、红细胞数目、血红蛋白含量）的影响具有重要的学术、应用价值和研究意义。本项目拟通过对黄颡鱼的免疫系统、呼吸代谢等方面的研究，使人们对黄颡鱼体内许多复杂代谢得到更深入的认识，为人们以后在黄颡鱼的养殖方面的改善，提供了一个理论性的依据，使人们获得更高的生产，创造更多的物质财富。目前国内外关于黄颡鱼血液指标的研究只集中在饥饿处理及病菌侵害等对其血液指标的影响，但养殖密度对黄颡鱼血液指标(血细胞）的影响的研究，目前国内外尚属空白。三、研究方案（包括研究目标、研究内容、研究方法、实验方案、技术路线、可行性分析等）研究目标：黄颡鱼在不同养殖密度下对其血液指标中的红细胞、白细胞数目以及血红蛋白含量的测定。通过血液生理学实验得出其数据，并进行科学分析，最终得出结论。研究内容：黄颡鱼在水中生活的溶氧条件为：溶氧在3mgL以上时生长正常，低于2mgL时出现浮头，低于1mgL会窒息死亡。因此研究就在鱼体能正常生活的情况下通过一定量的水中黄颡鱼的条数设置不同的养殖密度梯度，再分别对其血液指标中红细胞、白细胞数目及血红蛋白含量的测定。并最终得出结论。研究方法：项目采用实验室人工养殖黄颡鱼作为试验材料，并对其进行具体详细的种类鉴定后，根据其生境（温度、PH、溶氧量等）及其各项生理指标，进行编号，栓挂标签后分组人工饲养（保持单一变量原则）然后根据黄颡鱼在不同梯度的养殖密度条件下，相同温度、PH中提取其血液标本。对其进行实验红细胞、白细胞数目和血红蛋白含量的测定。将所得数据记录于下表中：养殖密度 （条百升） 测量指标（个cm或gmL） 备注数据及 简要分析红细胞数目白细胞数目血红蛋白含量5101520253035404550 研究技术路线：结合此实验项目的研究目标、内容和方法，确定出整个项目实施的大体流程，并根据它的可行性方案分析，现有条件的合理运用，以及时间方面的进度安排，最终确定其研究技术路线。研究技术路线首先从课题项目的提出开始，围绕这个实验的各个方面和多角度全面分析，有鱼的养殖技术；养殖条件中养殖密度的变化（单一变量原则）；抽取鱼体尾静脉一定量血液样本；将抽取出的血液样本分组检测；检测项目包括红细胞数目、白细胞数目和血红蛋白含量三项指标；将检测出的各个数据对应记录至表格中；对数据进行处理，绘出三条曲线图；最后得出结论总结项目报告。 主要技术路线流程见下页：养殖密度对黄颡鱼血液指标（红细胞、白细胞及血红蛋白含量）的影响捕捉或购买同种类别的黄颡鱼人工饲养一段时期（保持鱼体正常生活）改变相同量水中的养殖条数提取鱼体内的血液样本并迅速其血液样本进行技术分析将测定出的血液红细胞、白细胞、血红蛋白 含量记录于上表中处理表格（绘出坐标图）整理分析数据得出结论项项目可行性分析： （1）现有资源条件：项目组成员经过对实验室的资源考察和与实验项目指导老师的反复思考讨论，结合我们地理与生命科学院的实验室先进设备、仪器。提出了此项研究课题，并且方案切实可行，又有理论依据，因此可行性充分。 （2）科学储备：自从2009年9月我们刚进校以来，项目组成员就认真学习包括植物学、动物学、生物化学、生物统计学、生理学等一系列专业理论知识，并认真参加了各科各个项目的实验课程，积累了扎实的专业理论基础和实践经验。并且在此之前项目组成员在课外阅读的与本项目相关的知识颇为广泛，并对鱼类养殖都有着相当的兴趣爱好。目可行性分析： （1）现有资源条件：项目组成员经过对实验室的资源考察和与实验项目指导老师的反复思考讨论，结合我们地理与生命科学院的实验室先进设备、仪器。提出了此项研究课题，并且方案切实可行，又有理论依据，因此可行性充分。 （2）科学储备：自从2009年9月我们刚进校以来，项目组成员就认真学习包括植物学、动物学、生物化学、生物统计学、生理学等一系列专业理论知识，并认真参加了各科各个项目的实验课程，积累了扎实的专业理论基础和实践经验。并且在此之前项目组成员在课外阅读的与本项目相关的知识颇为广泛，并对鱼类养殖都有着相当的兴趣爱好。项目可行性分析：（1） 现有资源条件：项目组成员经过对实验室的资源考察和与实验项目指导老师的反复思考讨论，结合我们地理与生命科学院的实验室先进设备、仪器。提出了此项研究课题，并且方案切实可行，又有理论依据，因此可行性充分。（2） 科学储备：自从2009年9月我们刚进校以来，项目组成员就认真学习包括植物学、动物学、生物化学、生物统计学、生理学等一系列专业理论知识，并认真参加了各科各个项目的实验课程，积累了扎实的专业理论基础和实践经验。并且在此之前项目组成员在课外阅读的与本项目相关的知识颇为广泛，并对鱼类养殖都有着相当的兴趣爱好。项目可行性分析： （1）现有资源条件：项目组成员经过对实验室的资源考察和与实验项目指导老师的反复思考讨论，结合我们地理与生命科学院的实验室先进设备、仪器。提出了此项研究课题，并且方案切实可行，又有理论依据，因此有充分的可行性。 （2）科学储备：自从2009年9月我们刚进校以来，项目组成员就认真学习包括植物学、动物学、生物化学、细胞生物学、生物统计学、生理学等一系列专业理论知识，并认真参加了各科各个项目的实验课程，积累了扎实的专业理论基础和实践经验。并且在此之前项目组成员在课外阅读的与本项目相关的知识颇为广泛，并对鱼类养殖都有着浓厚的兴趣爱好。四、项目的创新点、特色和解决的关键技术本项目研究养殖密度对黄颡鱼血液指标（红细胞、白细胞数目及血红蛋白含量）的影响，而在此以前，前人对黄颡鱼生理研究的进展有如下几个方面：1、瓦氏黄颡鱼血清的鳞组分的测定。2、黄颡鱼消化器官蛋白酶和淀粉酶活性测定分析。3、光镜技术对瓦氏黄颡鱼的消化道和消化腺初步研究。4、淡水白鲳、团头鲂、黄颡鱼的主要消化酶活性对比研究。5、黄颡鱼消化道黏膜的扫描电镜观察。6、中华倒刺鲃、黄颡鱼和华鲮的消化酶活性的比较分析。7、 黄颡鱼不同组织中同工酶的表达模式的研究等。8、黄颡鱼血清免疫球蛋白的纯化及分子量的初步测定。 前人针对上述7个生理方面的研究，而未对养殖密度对黄颡鱼血液指标的影响，不同养殖密度对应着不同的溶氧量，间接的反映着不同的溶氧量对黄颡鱼血液指标的影响前人还没有彻底进入对黄颡鱼血液指标这一方面的研究，因此该课题是一项较为新的生理方面的研究，前人的研究都基本不涉及到有关血液方面。本项目的创新点：养殖密度对黄颡鱼血液指标的影响，是建立在外界条件下对黄颡鱼体内血液指标的影响，因此该提法是较为新的方式的提法，该项目所要用到的实验装置也是较新的实验装置，该项目切中了鱼类生理代谢和调控的三项重要指标，通过对该课题的研究，从而使人们进一步揭示了黄颡鱼的生理奥秘，这三种指标可能涉及到黄颡鱼的一些呼吸代谢，循环，还有免疫等方面，使人们对黄颡鱼体内许多复杂代谢得到更深入的认识，通过这一方面的研究，分析、总结，并得出结论，为人们以后在黄颡鱼的养殖方面的改善，提供了一个理论性的依据，使人们获得更高的生产，创造更多的物质财富。本项目的特色：研究黄颡鱼的生理是建立在外界条件养殖密度（相当于不同溶氧量）的影响，同时也是建立在细胞水平上的研究，众所周知红细胞，白细胞，血红蛋白是黄颡鱼血液中最重要的三种组分，通过外界环境对这三种血液组分的影响的分析，可以揭示黄颡鱼一些重要的代谢机制、生理活性，同时该研究方法也为其他鱼类的研究提供了方法借鉴本项目需要解决的关键技术如下：1、怎样养殖黄颡鱼。2、怎样才能保证黄颡鱼在不同密度环境中存活，且不影响（除本项目测定生理指标外）其他生理指标。3、怎样采集黄颡鱼的血液。4、怎样使用实验室仪器或实验方法来测定黄颡鱼的血液指标（红细胞、白细胞及血红蛋白含量）。五、项目进度安排（查阅资料、选题、自主设计项目研究方案、开题报告、实验研究、数据统计、处理与分析、研制开发、填写结题表、撰写研究论文和总结报告等） （1）2011年11月份 通过查阅大量相关资料，并由自身学习所掌握的理论知识，结合生理学指导老师对学校现有条件的分析，对其可行性的了解，讨论出最终的选题方向并决定研究黄颡鱼具体项目的研究名称。即为：养殖密度对黄颡鱼血液指标（红细胞、白细胞数目及血红蛋白含量）的影响。并列出初步的研究方案和技术路线。 （2）2011年12月1日2011年12月31日 再通过广泛查阅一些有针对性和拓展性强的资料，对实验设计的方案进行完善，细化项目研究的每一个步骤和流程。 （3）2012年1月1日2012年8月31日 通过在外地区捕捉或本地区购买黄颡鱼的鱼苗或成鱼，保证试验取材的充足。通过学习黄颡鱼的养殖技术，在实验室对黄颡鱼进行人工饲养和驯化，做好实验前的准备工作。保证其在实验室环境下的正常生活。 （4）2012年9月1日2012年10月31日 通过在不同养殖密度条件下对鱼体内血液的抽取样本，检测各组血液中红细胞、白细胞数目和血红蛋白含量，并记录数据在方案表格中。 （5）2012年11月1日2012年11月31日 比较表格中的各组实验数据，并对其进行科学的处理和分析，绘出一个反映黄颡鱼三种血液指标在不同养殖密度条件下的坐标曲线图。并得出最后结论。 （6）2012年12月1日2012年12月31日 填写出实验项目的结题表，并撰写出各自的研究论文，提交总结报告，最后完成此次项目试验。六、拟利用资源（科研教学设施、仪器设备、资料等）1.养殖条件（1）多功能循环养殖箱 （2）食物（饵料或小型鱼类等）等2.取材工具注射器、试管等 3.处理仪器 移液管、 酒精灯等4.处理药品（1）抗凝剂（防止血液凝固）(2) 染液等（将白细胞和红细胞染成不同的颜色，便于观察、计数和统计）5.观察仪器 血红蛋白测定仪、血细胞计数板、暗视野显微镜等 七、经费使用计划序号支持项目金额（元）1调研及黄颡鱼的采集购买10002实验试剂及药品3003黄颡鱼饵料（黄粉虫、小鱼等）6004打印资料200合 计2100八、项目预期成果（研究论文、设计、研究报告、申请专利、开发软件、研制产品、获奖等）黄颡鱼主要分布在我国河川、湖泊、沟渠、等水域中，营底栖生活，杂食性，喜群居，在弱光条件下摄食和活动，以动物饵料为主食，在自然条件下，孵化出膜35天的鱼苗以自身的卵黄为营养，以后幼鱼以轮虫、枝、角类、水蚯蚓等为食，成鱼阶段主食各种小鱼、虾；人工养殖时，可摄食动物饵料，也可摄食人工配合饲料。 此项目所研究的是溶氧量对黄颡鱼血液生理指