三七总皂苷对实验性糖尿病性心肌病大鼠心脏谷胱甘肽转移酶基因表达的影响(1)

精品文档 2016 全新精品资料 全程指 导写作 独家原创 1 / 3 三七总皂苷对实验性糖尿病性心肌病大鼠心脏谷胱甘肽转移酶基因表达的影响 (1) 【摘要】 目的探讨三七总皂苷对实验性糖尿病性心肌病大鼠心脏谷胱甘肽转移酶基因表达的影响。方法将 50 只造模成功的雄性 0只和空白对照组 10只，达美康对照组 10 只。治疗 4 周后提取各组心肌组织总过 内参照对 因的表达水平进行检测。结果不同剂量三七总皂苷组 对照组相比有显著性差异。结论三七总皂苷能够诱导 化谷胱甘肽与亲电子物质发生结合反 应，改善心肌细胞能量代谢，减轻心肌损害。 【关键词】 三七总皂苷 ; 糖尿病性心肌病大鼠 ; 谷胱甘肽转移酶类 ; 基因表达 糖尿病性心肌病自 1974 年由 首次提出以来，病因研究已深入到分子遗传、基因水平。对其发病机制已从代谢紊乱、收缩机制异常、微循环障碍、自主神经病变等多角度进行了深入研究。三七总皂苷是中药三七的主要有效成分 , 是防治心血管疾病的一种有效药物。为了深入探讨三七总皂苷对糖尿病性心肌病大鼠心脏超微结构的影响及基因分子水平上的作用机制，本实验进行了该方面的探讨。 1 材料与仪器 主要试剂和设备链脲佐菌素为美国 司产品，精品文档 2016 全新精品资料 全程指 导写作 独家原创 2 / 3 取试剂 自华美生物工程公司，为司产品 ;逆转录酶，核糖核酸酶抑制剂， 合酶，随机引物，琼脂糖均购自美国 司。德国产 00型冰冻切片机 ;美国产 502 型图象分析仪 ;日本产日立 射电镜。 药物三七总皂苷片，由浙江维康药业有限公司生产。达美康，法国施维雅公司产品。 2 方法 动物分组及处理选取 52 只雄性 鼠，给予腹腔注射链脲佐菌素，连续注射 10 周， 5 周后血糖浓度持续大于 ，表明已建立糖尿病模型。 10 周后，将 2只糖尿病大鼠处死，取部分心肌组织做电镜检查，发现线粒体变性，肌纤维收缩带形成，表明已建立糖尿病性心肌病动物模型 1。将 50 只造模成功的雄性 鼠随机分为治疗组 30 只和空白对照组 10 只，达美康对照组 10 只。治疗组分为 、中、高剂量组各 10 只，分别给予腹腔注射不同剂量，空白对照组给予腹腔注射同等量的蒸馏水，达美康对照组给予腹腔注射达美康悬浮液 20 mg/重。经处理后作病理切片，分别观察不同剂量的三七总皂苷和对照组空腹血糖，在光镜下和电镜下观察大鼠心脏超微结构的变化，包括心肌、心肌间质、心肌内中小血管的变化，电镜下心肌细胞超微结构、心脏微血管的变化。 精品文档 2016 全新精品资料 全程指 导写作 独家原创 3 / 3 心肌组织总 提取 治疗 4 周后将大鼠处死，取心肌组织约 100 剂抽提组织总 外分光光度计测 求 值介于 之间，根据 算总 量， 1%琼脂糖电泳观察总 质量。 保存备用。 反 转录体系为总 g，随机引物 1 l， 70 5 即冰上冷却，加入 10 l。5 l， 转录酶 2 l，加无 至总体积 25 匀， 37 60 后 70 5 存备用 物，上游： 5 ,下游： 5 片断长度 790 物，上游： 5 ,下游：5 片断长度 540 4 45 s， 58 30 s， 72 1 5 s 条件下合成，循环 35 次，产物于 %琼脂电泳后紫外灯下摄影，同时测目的带灰度值，与 较进行半定量。 统计学