厌氧发酵指标测定方法.doc

COD的测定（快速密闭催化消解法）试验步骤：1、 取1ml滤液(5000r/min条件下离心10min,过滤)于50ml容量瓶中定容(稀释倍数由滤液SCOD的浓度而定，通常是稀释至10002500mg/L，选择消化液)，从中量取3ml于消化管（注意干燥）中，每个样品做3个重复；同时以同量的蒸馏水代替样品，做空白试验。2、 依次加入1ml掩蔽剂、3ml消化液（注意准确）、5ml催化剂（每加入一种试剂后都要摇匀），旋紧密封塞，混匀。3、 放入已预热到165的消解炉中，消解22min，冷却。4、 将样液移至150ml锥形瓶中，用蒸馏水冲洗消化管（至少洗3次，共约30ml），冲洗液移入锥形瓶中。5、 加3滴邻菲罗啉指示剂，用硫酸亚铁标准溶液滴定，溶液颜色由黄到蓝突变成红褐色为终点，记录硫酸亚铁标准溶液用量（样品的记为V1，空白对照的记为V0）。6、 滴定使用0.05 mol/LFeSO4：先配0.2mol/L FeSO4，然后稀释得到（量取250mL0.2mol/L FeSO4于1000mL容量瓶即得0.05 mol/LFeSO4，标定后使用）标定方法：准确吸取10.00mL重铬酸钾标准溶液（C(1/6K2Cr2O7)=0.2500mol/L）于250mL锥形瓶中，加水稀释至55mL左右，缓慢加入5mL浓硫酸，混匀，冷却后，加入23滴邻菲啰啉指示剂，用0.05 mol/LFeSO4滴定，溶液的颜色由黄色经蓝绿色至红褐色即未终点。CFeSO4=0. 25*10/V计算： COD（mgL-1）（V0-V1）C8100050/V2 V1滴定样品消耗的硫酸亚铁标准溶液的体积，mLV0滴定空白消耗的硫酸亚铁标准溶液的体积，mLV2水样体积，mL，本试验中V23mLC硫酸亚铁标液的浓度，molL-150水样的稀释倍数8氧（1/2O）摩尔质量V硫酸亚铁标准溶液的标定时，用去的硫酸亚铁溶液的体积，mL试剂配制：掩蔽剂：称取30.0g硫酸汞（分析纯）溶于100mL的10硫酸中。10硫酸：取50mL蒸馏水，缓慢加入10mL浓硫酸，冷却后定容至100mL。催化剂：称取8.8g分析纯硫酸银溶于1L浓硫酸中。消化液：称取19.6g重铬酸钾，50.0g硫酸铝钾，10.0g钼酸铵，溶解于500mL水中，加入200mL浓硫酸，冷却后，转移至1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容。（该溶液浓度c1/6K2Cr2O7=0.4molL-1，用于测COD浓度在10002500mgL-1的水样，滴定时用的硫酸亚铁浓度为0.05molL-1。）消化液：称取5.0g重铬酸钾，50.0g硫酸铝钾，10.0g钼酸铵，溶解于500mL水中，加入200mL浓硫酸，冷却后，转移至1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容。（该溶液浓度c1/6K2Cr2O7=0.1molL-1，用于测COD浓度在500-1000mgL-1的水样，滴定时用的硫酸亚铁浓度为0.02molL-1。）消化液：称取2.45g重铬酸钾，50.0g硫酸铝钾，10.0g钼酸铵，溶解于500mL水中，加入200mL浓硫酸，冷却后，转移至1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容。（该溶液浓度c1/6K2Cr2O7=0.05molL-1，用于测COD浓度在50mgL-1以下的水样，滴定时用的硫酸亚铁浓度为0.01molL-1。）重铬酸钾标准溶液：（c1/6 K2Cr2O7=1molL-1）称取经过130烘34h的重铬酸钾（分析纯）49.031g，溶于400mL水中，必要时可加热溶解，冷却后，稀释定容至1L，摇匀备用。重铬酸钾标准溶液：（c1/6 K2Cr2O7=0.1molL-1）取c1/6 K2Cr2O7=1molL-1标准溶液10mL，用蒸馏水稀释定容至100mL，摇匀备用。硫酸亚铁标准溶液：（cFeSO4=0.2molL-1）称取FeSO47H2O（分析纯）55.6g，加水和5mL浓硫酸溶解，稀释定容至1L，摇匀备用。硫酸亚铁标准溶液：（cFeSO4=0.02molL-1）量取cFeSO4=0.2molL-1的硫酸亚铁标准溶液100mL，定容至1L，摇匀备用。试亚铁灵指示剂（邻菲罗啉指示剂）：称取1.485g邻菲罗啉（C12H8N2H2O）和0.695g硫酸亚铁（FeSO47H2O）溶于水中，稀释至100mL，储于棕色瓶中。碱度的溴甲酚绿甲基红指示剂滴定法分析1 主要仪器 三角瓶（150mL）、电炉、量桶、半微量滴定管、移液管2 试剂2.1无二氧化碳水：配制试剂所用的蒸馏水使用前煮沸15min，冷却至室温备用。 2.2甲基红：（0.1）0.025甲基红溶于25mL乙醇中2.3溴甲酚绿甲基红：取25mg溴甲酚绿和5mg甲基红于25mL95乙醇中2.4硫代硫酸钠溶液（0.1molL-1 12Na2S203=0.0500molL-1Na2S2O3） 2.5.硼砂 （分析纯）2.6盐酸标准溶液（0.0200molL-1）：用刻度吸管吸取8.3mL浓HCl（=1.19gmL），并用蒸馏水稀释至1000mL，此溶液浓度O.100molL-1，储存备用。使用时，取200mL以蒸馏水定容至1000mL，即为0.02molL-1的HCl溶液，其准确浓度标定如下：称约0.3g（精确到0.0001g）硼砂于锥形瓶中，加入无C02去离子水稀释约30mL，加入3滴甲基橙指示剂，用HCl标准溶液滴定至由桔黄色刚变为桔红色，记录HCl标准溶液的用量（平行滴定三次）。按下式计算其推确浓度：C=m/（0.1907xV）式中， C一盐酸溶液的浓度， molL-1； V一消耗的盐酸标准溶液体积， mL; m硼砂的质量3.步骤水样经滤纸过滤或于5000r/min条件下离心10min，取5mL的上述滤液或上清液为样品，样品的量以消耗HCl标准溶液820mL为宜。样品取平行试样两份，分别置于150mL三角瓶。加入30mL无CO2蒸馏水稀释。 同时以等量的不含样品的无CO2蒸馏水为空白对照4.滴定步骤如下。 加入3滴溴甲酚绿甲基红指示剂和硫代硫酸钠溶液（1/2Na2S2O3）1滴（后者用于排除游离氯的干扰）。用0.0200molL-1的HCl标准溶液滴定至恰现淡红色，记录HCl标准溶液的用量V1mL，空白对照中消耗的HCl量为V0mL。（平行滴定三次）。5.计算1碱度碱度（以mmolL-1计）=（V1-V0）*C/V2*1000 式中： C一盐酸标准溶液的浓度， mo1L-1 V1一试样消耗盐酸标准溶液的体积， mL； V2一试样的体积， mL； V0一空白对照消耗HCl标准溶液的体积， mL。 当试验结果以mgCaCO3L-1表示时，则上述浓度要乘以50，即：碱度（以mgCaCO3L-1计）碱度（以mmolL-1计）x50VFA的测定（蒸馏滴定法）仪器：5mL半微量滴定管、蒸氮仪、容量瓶、250mL锥形瓶、5mL移液管试剂：0.02molL-1NaOH溶液、1molL-1H2SO4溶液、1%酚酞试验步骤：1、 取2mL滤液（5000r/min条件下离心10min，过滤）于25mL容量瓶中定容。2、 取5mL加入到蒸氮装置，同时加入5mL催化剂（1molL-1H2SO4溶液），蒸出100mL溶液。3、 向蒸出液中加入3滴酚酞，用0.02molL-1的NaOH标准溶液滴定，溶液颜色由无色突变成粉红色为终点，记录NaOH溶液消耗量（V）。计算：VFA（mgL-1，以乙酸计）=CV100060.512.5/VOV滴定样品消耗的NaOH标准溶液的体积，mLCNaOH标液的浓度，molL-1V0试样的体积，mL，本试验V05mL12.5待测液的稀释倍数60.5乙酸的分子量试剂配制：饱和NaOH溶液：取约5mL蒸馏水，加入NaOH固体，边加边搅拌，使NaOH溶于水中放出的热量尽快散失，直到溶液表面有晶体析出，即溶液达到饱和。待溶液冷却至室温，即可使用。0.02molL-1NaOH溶液：量取1mL NaOH饱和溶液至1000mL容量瓶中，定容。NaOH溶液的标定：取约0.3g（精确到0.0001g）硼酸，于250mL锥形瓶中，加入30mL无CO2水溶解，加入3滴1酚酞，用NaOH溶液滴定，溶液颜色由无色突变成粉红色为终点，记录NaOH溶液消耗量（V0）。 C（NaOH）（molL-1）=M/（61.83V0） M硼酸的质量，gV0NaOH溶液标定时，用去的NaOH溶液的体积，mL1molL-1H2SO4溶液：取60mL浓硫酸，缓慢加入至1000mL蒸馏水中，冷却，摇匀。1%酚酞：取1.00g酚酞，溶于60mL95乙醇中，用蒸馏水稀释至100mL，转移至试剂瓶中备用。纳氏试剂光度法测定氨氮一、方法原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应生成淡红棕色胶态化合物，此颜色在较宽的波长内具强烈吸收。通常测量用波长在410-425nm范围。二、干扰及消除脂肪胺、芳香胺、醛类、丙酮、醇类和有机氯胺类等有机化合物，以及铁、锰、镁和硫等无机离子，因产生异色或混浊而引起干扰，水中颜色或混浊亦影响比色。为此，须经过絮凝沉淀过滤或蒸馏预处理，易挥发的还原性干扰物质，还可在酸性条件下加热以除去。对金属离子的干扰，可加入适量的掩蔽剂加以消除。三、方法的适用范围本法最低检出浓度为0.025mgL-1（光度法），测定上限为2 mgL-1。采用目视比色法，最低检出浓度为0.02 mgL-1。水样作适当的预处理后，本法可适用于地表水、地下水、工业废水和生活污水中氨氮的测定。四、仪器1. 分光光度计2. pH计。五 、试剂配制试剂用水均应为无氨水。1） 纳氏试剂：可选择下列一种方法制备。 称取20g碘化钾溶于约100mL水中，边搅拌边分次少量加入二氯化汞（HgCl2）结晶粉末（约10g），至出现朱红色沉淀不易溶解时，改为滴加饱和二氯化汞溶液，并充分搅拌，当出现微量朱红色沉淀不易溶解时，停止滴加氯化汞溶液。 另称取60g氢氧化钾溶于水，并稀释至250mL，充分冷却至室温后，将上述溶液在搅拌下，徐徐注入氢氧化钾溶液中，用水稀释至400mL，混匀。静置过夜。将上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。称取16 g氢氧化钠，溶于50mL水中，充分冷却至室温。另称取7g碘化钾和10g碘化汞（HgI2）溶于水，然后将此溶液在搅拌下徐徐注入氢氧化钠溶液中，用水稀释至100mL，贮于聚乙烯瓶中，密塞保存。2） 酒石酸钾钠溶液：称取50g酒石酸钾钠（KNaC4H4O64H2O）溶于100mL水中，加热煮沸以除去氨，放冷，定容至100mL。3） 氨标准贮备溶液：称取3.819g经100干燥过的优级纯氯化铵（NH4Cl）溶于水中，移入1000 mL容量瓶中，稀释至标线。此溶液每毫升含1.0mg氨氮。4） 按标准使用溶液：移取5.00mL铵标准贮备液于500mL容量瓶中，用水稀释至标线。此溶液每毫升含0.010 mg氨氮。六、步骤（1） 校准曲线的绘制 吸取0、0.50、1.00、3.00、5.00、7.00和10.00mL铵标准使用液于50mL比色管中，加水至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液，混匀。加1.5mL纳氏试剂，混匀。放置10min后，在波长420nm处，用光程20mm比色皿，以水为参比，测量吸光度。 由测得的吸光度，减去零浓度空白的吸光度后，得到校正吸光度，绘制以氨氮含量对校正吸光度的校准曲线。（2） 水样的测定 分取适量经絮凝沉淀预处理后的水样（使氨氮含量不超过0.1mg），加入50mL比色管中，稀释至标线，加1.0mL酒石酸钾钠溶液。以下同校准曲线的绘制。 分取适量经蒸馏处理后的馏出液，加入50mL比色管中，加一定量1molL-1氢氧化钠溶液以中和硼酸，稀释至标线。加1.5mL纳氏试剂，混匀。放置10min后，同校准曲线步骤测量吸光度。（3） 空白试验以无氨水代替水样，做全程序空白试验。七、 计算由水样测得的吸光度减去空白试验的吸光度后，从校准曲线上查得氨氮含量（mg）。 氨氮（N， mgL-1）（m/v ） *1000式中：m由校准曲线查得的氨氮量（mg）; v水样体积（mL）。八、精密度和准确度三个试验室分析含1.14-1.16mgL-1氨氮的加标水样，单个实验室的相对标准差不超过9.5；加标回收率范围为95-104。四个实验室分析含1.81-3.06mgL-1氨氮的加标水样，单个实验室的相对标准差不超过4.4；加标回收率范围为94-96。九、注意事项 纳氏试剂碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应除去。滤纸中常含痕量铵盐，使用时注意用无氨水洗涤。所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的玷污。TS、VS实验步骤仪器：恒温干燥箱；马弗炉；磁坩堝；干燥器；分析天平；操作步骤：将瓷坩堝用蒸馏水洗涤后在600摄氏度马弗炉灼烧一小时，待炉温降至100摄氏度后，取出瓷坩堝并于干燥器中冷却、称重。重复以上操作至恒重，记作a克。取新鲜污泥样12克（准确至0.0001g），置于瓷坩堝，一起称重记作b克。然后将含样品的瓷坩堝放入干燥箱，在105摄氏度左右干燥至恒重（24h），质量记作c克。将含干燥后含样品的瓷坩堝在通风处燃烧至不再冒烟，然后放入马弗炉，在600摄氏度下灼烧2个小时，待炉温降至100摄氏度时，取出瓷坩堝在干燥器内冷却后称重，质量记作d克。计算TS=（c-a）/m*1000 (g/L) VS=TS-灰分 （g/L） 灰分=（d-a）/m*1000 (g/L)m新鲜污泥的重量，m=b-a (g)。污泥中的TS和VS常以百分率表示，可计算如下：TS,%=(c-a)/(b-a)灰分,%=（d-a）/（b-a）VS,%=TS-灰分TOC的测定仪器：油浴锅 调温电炉 计时表 试剂：（1）0.8000molL-1（1/6K2Cr2O7）标准溶液。称取经130烘干的重铬酸钾（分析纯）39.2245g溶于水中，定容于1000ml容量瓶中。（2）H2SO4。（浓硫酸，分析纯）（3）0.2 molL-1 FeSO4溶液。称取硫酸亚铁（化学纯）56.0g溶于水中，加浓硫酸5ml，稀释至1L。（4）邻啡罗啉指示剂。称取邻啡罗啉（分析纯）1.485g与FeSO47H2O 0.695g,溶入100ml水中，定容。测定步骤： （1）称取过0.149mm（100目）筛孔的风干样0.05g（看情况称取样品重量），精确到0.0001g，放入硬质玻璃试管中，用移液管准确加入0.8000molL-1（1/6K2Cr2O7）标准溶液5ml，再加入5ml浓硫酸，缓慢摇匀，管口盖上弯颈小漏斗。静止5分钟左右。 （2）将油浴锅升温至170180左右，将准备好的样品放入油浴锅中，控制温度在175，待试管内液体沸腾时开始计时，煮沸5分钟，注意控制好时间，时间到后取出放在试管架上冷却。 （3）冷却后，将试管内容物倾入150ml三角瓶中，用蒸馏水洗净试管内部及小漏斗，使三角瓶内的液体总体积为6070ml。加入23滴邻啡罗啉指示剂，用0.2 molL-1 FeSO4溶液滴定，滴定过程中不断摇动三角瓶，溶液的颜色变化为橙黄蓝绿砖红色，砖红色即为滴定终点。此时需要记录FeSO4滴定毫升数（V）。每个样品一般做3个平行。结果计算：样品有机碳（gkg-1）=公式中：c-0.8000molL-1（1/6K2Cr2O7）标准溶液浓度 5-重铬酸钾标准溶液加入的体积（ml） V0-空白滴定用去FeSO4体积（ml） V-样品滴定用去FeSO4体积（ml） 3.0-1/4 碳原子的摩尔质量（gmol-1） 10-3-将ml换成L 1.1-氧化校正系数 m-烘干样质量，即风干样（1-含水率）样品有机质（gkg-1）=样品有机碳（gkg-1）1.724污泥或餐厨N、P、K、Na仪器：蒸氮装置、火焰光度计、开氏瓶（提前洗净烘干）试剂：硫酸、双氧水称取污泥或餐厨60度烘干样0.3000g于开氏瓶中，尽量全称在瓶底，加入8ml浓硫酸，冲下粘在壁上的污泥，瓶口加小漏斗，在电炉上慢慢升温至硫酸冒烟，加入8滴H2O2，轻轻摇动开氏瓶，加热10min后，关电炉，稍冷后加6滴H2O2，重复多次，直至溶液呈无色或淡黄色清液后，继续加热10min，除尽H2O2。冷却，转入100ml容量瓶。取10ml蒸氮（烧瓶里的蒸馏水加2滴浓硫酸和定氮指示剂，呈红色），加入约5mL10NaOH，用10mL2硼酸接收蒸出液，滴定蓝变红仪器：消煮炉 半微量定氮装置 半微量滴定管试剂：浓硫酸（化学纯） 30%过氧化氢氢氧化钠：质量浓度为40%的溶液 称取40g氢氧化学纯）溶于100ml水中。20gL-1硼酸：称取2g（或20g）硼酸溶于100ml（或1000ml）约60的水中，加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂，每升硼酸溶液中加入甲基红-溴甲酚绿混合指示剂5ml，一般呈微红色，此试剂宜现配现用，不宜久放。甲基红-溴甲酚绿混合指示剂 0.5g溴甲酚绿和0.1g甲基红溶入100ml 95%乙醇中。硫酸c(1/2H2SO4)=0.01 molL-1标准溶液：配置和标定方法为，测定步骤： （1）吸取消煮清夜5ml（量视情况而定）于蒸馏瓶内，再加入10ml40%氢氧化钠，用水清洗，用夹子夹紧入口。于150ml锥形瓶中，加入5ml硼酸指示混合液，放在冷凝管末端，管口置于硼酸叶面34cm处，通入蒸汽蒸馏，待馏出液体积约50ml时，即蒸馏完毕，取下。 （2）用c(1/2H2SO4)=0.01 molL-1标准溶液滴定馏出液，由蓝绿色至刚变为紫红色。记录所用酸标准溶液的体积V（ml）。空白测定所用酸标准溶液的体积V0，一般不超过0.4ml。结果计算：全氮（N）（%）=式中：V-试液滴定消耗标准酸溶液的体积，单位为毫升（ml）V0-空白滴定消耗标准酸溶液的体积，单位为毫升（ml）c-酸标准溶液的浓度，单位为摩尔每升（mol/L）0.014-氮的摩尔质量，单位为克每摩尔（g/mol）D-分取倍数，定容体积/分取体积m-称取风干样质量，单位为克（g）X0-风干样的含水量。 所得结果应表示至两位小数。取2ml到50ml容量瓶测磷；(不测)直接测钾、钠K的检测：仪器：火焰光度计 实验室常用仪器试剂：1mg/mL钾标准储备溶液： 称取1.9067g经105烘2小时的氯化钾，用水溶解后定容至1L。此溶液1ml含钾1mg，放于塑料瓶中。100ug/ml 钾标准溶液：吸取10.00ml钾标准贮备液于100ml容量瓶中，用水定容，此溶液1ml含钾100u