课件：细菌形态学检查.ppt

细菌形态学检查,2019,-,1,使用工具-显微镜,显微镜：光学显微镜 所用放大倍数：101001000 所用镜头：油镜头 镜油：香柏油或石蜡油 香柏油折光率（n1.515）与玻片折光率（n1.52）接近 显微镜使用完毕须擦拭镜头。,2019,-,2,透射电子显微镜,2019,-,3,扫描电子显微镜,2019,-,4,细菌个体形态观察,细菌形态、大小、排列方式,2019,-,5,2019,-,6,球菌排列方式,2019,-,7,金黄色葡萄球菌的透射电镜照片,2019,-,8,金黄色葡萄球菌的扫描电镜照片,2019,-,9,炭疽杆菌,2019,-,10,2019,-,11,不染色标本检查,应用：主要用于观察活菌的动力和运动方式 常用方法：压滴法、悬滴法、暗视野映光法,2019,-,12,压滴法,2019,-,13,悬滴法,镜检,2019,-,14,染色标本的检查,染色方法的种类 单染法:采用一种染料染色 复染法（鉴别染色）:采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使不同种类的细菌、同种细菌的不同结构，分别染上不同的颜色，以便鉴别细菌。,2019,-,15,染色标本检查的基本程序,涂片干燥固定染色 涂片方式 干燥的方法 固定的方法、目的 染料种类：碱性染料、酸性染料、中性染料，碱性染料最常用,2019,-,16,复染法基本程序,初染媒染脱色复染,2019,-,17,革兰染色法（Gram染色）,染液组成： 结晶紫染液、 路哥氏碘液、95乙醇、稀释复红 染色方法：,结晶紫 初染,路哥氏碘液 媒染,95乙醇 脱色,稀释复红 复染,1分钟,30S1min,1分钟,影响革兰染色的关键步骤是脱色,2019,-,18,革兰染色结果,紫色革兰阳性菌 红色革兰阴性菌,2019,-,19,2019,-,20,染色结果图,革兰阳性菌,革兰阴性菌,2019,-,21,革兰氏染色结果,2019,-,22,染色原理,渗透学说：与肽聚糖结构有关 化学学说：与细菌细胞质中核糖核酸镁盐有关 等电点学说：与细菌所带电荷有关,2019,-,23,革兰染色意义,有助于鉴别细菌 有助于选择用药 有助于了解细菌的致病性,2019,-,24,影响革兰染色的因素,操作因素 涂片的厚薄 脱色时间的长短 染液因素 路哥氏碘液放置时间过长 95乙醇挥发 结晶紫与草酸铵混合时间太长 细菌因素： 细菌种类 细菌菌龄,2019,-,25,荚膜的观察,荚膜染色法 通常采用负染色法，即使菌体和背景着色而荚膜不着色，因而荚膜在菌体周围呈一透明圈。,荚膜是某些细菌细胞壁外面围着的一层较厚而固定的粘性物质。其含水量在90%以上。,2019,-,26,荚膜,2019,-,27,芽孢的观察,芽孢染色法 芽孢具有厚而致密的壁，透性低，不易着色。一般染色法只能使菌体着色而芽孢不着色（芽孢呈透明）。但芽孢一旦染上色后又难以脱色。 芽孢染色法采用着色力强的染料加热促使标本着色，然后水洗使菌体脱色，而芽孢保留染料，经复染，菌体和芽孢呈现不同的颜色。,2019,-,28,芽孢染色,2019,-,29,芽孢在菌体中的位置,2019,-,30,肉毒梭状芽孢杆菌,2019,-,31,鞭毛的观察,鞭毛染色法 细菌鞭毛极细，直径一般为10-20nm，鞭毛染色法的基本原理即在染色前用媒染剂处理，让媒染剂沉积在鞭毛上，使鞭毛加粗，然后再进行染色。 常用的媒染剂由单宁酸和氯化高铁或钾明矾等配制而成。,电镜观察,2019,-,32,鞭毛着生情况,2019,-,33,群体特征-培养特征,细菌的培养特征包括以下内容： 在固体培养基上，观察菌落大小、形态、颜色（色素是水溶性还是脂溶性）、光泽度、透明度、质地、隆起形状、边缘特征及迁移性等。 在液体培养中的表面生长情况（菌膜、环）混浊度及沉淀等。 半固体培养基穿刺接种观察运动、扩散情况。,2019,-,34,菌落特征,菌落的大小 形态：点状、圆形、丝状 、不规则形 、假根状、纺锤状 隆起程度：扁平、隆起、低突起、高突起、乳头状等 边缘：整齐、不整齐 表面状态：光滑、皱褶、颗粒状、同心圆状等 表面光泽：闪光、不闪光、有金属光泽 质地：粘、脆 颜色：乳白色、金黄色等 透明度：透明、半透明、不透明,菌落（colony ）-细菌细胞在固体培养基表面形成的细胞群体。,2019,-,35,产色素的细菌,2019,-,36,枯草芽孢杆菌菌落,2019,-,37,粘质沙雷氏菌的菌落特征,2019,-,38,铜绿假单胞菌的菌落特征,2019,-,39,大肠杆菌在普通细菌培养基上的菌落特征,2019,-,40,大肠杆菌在麦康凯琼脂平板上的粘稠菌落特征,2019,-,41,麦康凯琼脂培养基,成分: 蛋白胨 17g 脙胨 3g 猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g 氯化钠 5g 琼脂 17g 蒸馏水 1000mL 乳糖 10g 0.01%结晶紫水溶液 10mL 0.5%中性红水溶液 5mL,2019,-,42,麦康凯琼脂培养基,制法 1.将蛋白胨、胨、胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中，校正pH7.2。将琼脂加入600mL蒸馏水中加热溶解。将两液合并，分装于烧瓶内，121高压灭菌15min备用。 2.临用时加热溶化琼脂，趁热加入乳糖，冷至5055时，加入结晶紫和中性红水溶液，摇匀后倾注平板。 注：结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌。,2019,-,43,大肠杆菌在血平板上的菌落特征,2019,-,44,金黄色葡萄球菌在血平板上的菌落特征,2019,-,45,细菌群体培养特征,2019,-,46,液体培养基生长特性,2019,-,47,放线菌菌丝,2019,-,48,放线菌菌丝,2019,-,49,光学显微镜下的链霉菌菌丝,2019,-,50,放线菌无性孢子的观察,2019,-,51,放线菌（链霉菌）横隔孢子,2019,-,52,放线菌孢子,放线菌（链霉菌）孢子,2019,-,53,放线菌菌落特征及液体培养特征,菌落一般呈圆形，放射状。 菌丝缠绕紧密，形成小而不蔓延，未分化形成孢子丝前，类似细菌的菌落，光滑、粘实，孢子的形成会使菌落干燥、多皱，由于基内菌丝长在培养基内，菌落不易被挑起。 菌落正反面往往呈现不同颜色。 液体培养，常在管壁形成膜状菌落或沉降于管低，而不使培养基浑浊。,2019,-,54,链霉菌菌落,2019,-,55,放线菌菌落,2019,-,56,后面内容直接删除就行 资料可以编辑修改使用 资料可以编辑修改使用 资料仅供参考，实际情况实际分析,感谢您的观看和下载,The u