《专题一复习》PPT课件.ppt

专题一 基因工程 （第一课时） 郑州二中 王丽娴,高中生物复习,学习目标,1、通过知识梳理，复习巩固基因工程的原理和操作程序。 2、通过相近概念的比较及针对性练习，掌握本节重难点和易错点。,基因工程,基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。,（DNA重组技术）,知识网络构建,基因工程,基本工具,操作程序,应用,分子手术刀：_ 分子缝合针：_ 分子运输车：_,转基因植物,1、操作环境：_ 2、操作水平：_ 3、原理：_ 4、优点： 与杂交育种相比： 克服了_ 与诱变育种相比： _改造生物遗传性状,限制酶,DNA连接酶,运载体,基因表达载体的构建,将目的基因导入受体细胞,目的基因的检测与鉴定,目的基因的获取,转基因动物,基因工程药物,基因治疗,体外,分子水平,基因重组,远缘杂交不亲和性,定向,蛋白质工程,崛起的原因,基本原理,一、基本工具,1、分子手术刀：限制酶 功能：识别DNA分子的_核苷酸序列，使每一条链 中_部位的_键断开。 练习： 请标出EcoRI、SmaI酶所识别的核苷酸序列，并写出剪切后 形成的末端及其名称,特定,特定,磷酸二酯,G A A T T C,C T T A A G,G G G C C C,C C C G G G,EcoRI,Smal,黏末端,平末端,EcoR,黏性末端,黏性末端,Sma,平末端 平末端,2、分子缝合针：DNA连接酶 功能：将切下来的_拼接成新的DNA分子， 连接_键。 种类：T4DNA连接酶既能“缝合”_末端，也能“缝 合”_末端 E.coliDNA连接酶只能“缝合”双链互补的_末端。 3、分子运输车：运载体 化学本质： 常用载体质粒 特点 其他载体：噬菌体衍生物、动植物病毒等,DNA片段,3，5磷酸二酯,平,黏,黏,能自我复制 有一个至多个_位点 有特殊的_ 对宿主无害,双链环状DNA分子,限制酶切,标记基因,二、基本操作程序,1、目的基因的获取： 目的基因：主要指_，如生物抗逆性基因 获取方法：_、_、_ 2、基因表达载体的构建：,编码蛋白质的基因,从基因文库中获取,PCR扩增,人工合成,质粒,目的基因,_个切口,_个切口,重组质粒,_种限制性内切酶,一,一,两,DNA连接,_酶,表达载体,（基因工程的核心）,3、将目的基因导入受体细胞 转化：目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持_的过程。 导入方法（连线）：,受体细胞 动物细胞 植物细胞 微生物细胞,导入方法 a.农杆菌转化法( ) b.显微注射法 c.基因枪法（ ） d.感受态细胞法（Ca2+处理法） e.花粉管通道法,稳定和表达,双子叶、裸子植物,单子叶植物,4、目的基因的检测与鉴定,目的基因,mRNA,蛋白质,个体性状,DNA分子杂交,分子杂交,抗原-抗体杂交,抗虫抗病接种实验,是否出现杂交带,是否出现杂交带,是否抗虫，是否抗病,是否出现杂交带,转录,翻译,检测,检测,检测,检测,现象,现象,现象,现象,个体水平鉴定,分子水平检测,三、易错点突破：,1、相关问题： （1）基因重组有哪些类型？ （2）天然质粒与表达载体之间有什么区别和联系？,表达载体是天然质粒经过修饰，加入启动子、终止子、目的基因。,基因工程 减四分体时期，一对同源染色体上，相邻的非姐妹染 色单体交叉互换。 减后期非同源染色体的自由组合 肺炎双球菌的转化,（3）如何检测目的基因是否成功表达？ （4）基因工程基本操作程序中哪些步骤需要碱基互补配对？,三、易错点突破：,分子水平：是否翻译-抗原-抗体杂交 个体水平：是否具有特定性状-抗虫、抗病、抗逆等,只有第三步将目的基因导入受体细胞不需要碱基互补配对。 （第一步存在逆转录法获得DNA，第二步存在粘性末端连接现象，第四步检测存在分子水平杂交）,2、几种酶的比较,连接两个DNA片段,连接单个脱氧核苷酸,使DNA双链互补碱基间的氢键断裂,连接单个核糖核苷酸,使目的基因或载体有特定末端,形成重组DNA分子,形成两条DNA单链,形成mRNA单链,3、辨析下列概念,（1）、基因文库、基因组文库、部分基因文库、cDNA文库 （2）、启动子，终止子；起始密码子、终止密码子,基因文库,基因组文库,部分基因组文库：,cDNA文库,启动子、终止子位于DNA上，启动或终止转录。 起始密码子、终止密码子位于mRNA上，起始或终止翻译。,你完成目标了吗？,1、通过知识梳理，复习巩固基因工程的原理和操作程序。 2、通过列表比较及针对性练习，掌握本节重难点和易错点。,综合练习：,1、(2012.山东理综) 毛角蛋白型中间丝(KIF )基因与绒山羊的羊绒质量密切相关。获得转KIF 基因的高绒质绒山羊的简单流程如图。 (1)过程中最常用的运载工具是_，所需要的酶是限制酶和_。 (2)在过程中，用_处理将皮肤组织块分散成单个成纤维细胞。在培养过程中，将成纤维细胞置于5% CO2的气体环境中，CO2的作用是_。,质粒,DNA连接酶,胰蛋白酶和胶原蛋白酶,维持培养基的PH值,(3)在过程