碱法分离大米蛋白和淀粉工艺的优化及其产品功能性质研究.pdf

1 2 2 o o 5 ，V o L 2 6 N O 5 食品研究与开发 科 学 研 究 碱法分离大米蛋 白和淀粉工艺的优化及 其产品功能性质研究 H A B A P r p 6 F r a n c o i s ， 丁霄 霖 ， 张连 富 江南大学食品学院 ， 江苏无锡2 1 4 0 3 6 摘要 ： 本文以籼米为原料 ， 研 究了碱法提取 分离大米蛋 白和淀粉的工艺 ， 并 对大米分 离蛋 白和 大米淀粉 的功能性质进 行 了研 究。确定 了碱 法分离大米蛋 白和淀粉的最佳工艺条件 ： 氢氧化钠溶液浓度为 0 0 7 5 m o l L ； 提取 时间 6 h ： 料液比 l ： 7 g m L ； 温度 4 0。该优化 条件 下可以得到纯度 高于 8 0 的大米分 离蛋 白， 蛋 白提取 率为 8 6 2 3 ， 淀粉 回收率为 9 2 1 2 。所得 大米分 离蛋白溶解性 、 起 泡性好 ， 乳化性能欠佳。 关键 词 ： 大 米蛋 白 ；大 米 淀粉 ；功 能 性 质 上 J RU。l lEl CU CE 。I RA。I E A D S TARCH FR0M POLI S HED RI CE： PREPARATI ON AND CHARACTERI Z ATI ON HABA Pr p 6 Fr a n c o i s DI NG Xi a o l i n ZHANG Li a n f u S o u t h e r n Ya n g t z e Un i v e r s i t y S c h o o l o f F o o d S c i e n c e a n d T e c h n o l o g y， Wu Xi ， J i a n g s u， 2 1 4 0 3 6 Ab s t r a c t ：T h i s s t u d y d e s c ri b e s t h e e x t r a c t i o n o f p r o t e i n a n d s t a r c h f r o m ri c e p o l i s h e d fl o u r wi t h s o d i u m h y d r o x i d e ( N a O H ) T h e e x p e ri m e n t a l o p t i mu m c o n d i t i o n s o f 0 0 7 5 mo l L N a O H，e x t r a c t i n g t i me 6 h o u r s r a t i o o f r i c e fl o ur t o Na OH s o l u t i o n 1 ： 7g mL a nd t e mpe r a t ur e 4 0we r e d e t e r mi n e d b y us i n g o r t h o g o n a l a r r a y e x pe rime n t a l d e s i g n Un de r t he s e o p t i mu m c o n d i t i o n s ， up t o 8 6 2 3 o f p r o t e i n a n d 9 2 1 2 o f s t a r c h w e r e r e c o v e r e d Th e p r o t e i n c o n t e n t ( n i t r o g e n X 5 9 5 1 o f t h e r e c o v e r e d p r o t e i n c o n c e n t r a t e wa s a b ov e 8 0 Th e ni t r o g e n s o l ub i l i t y ，f o a mi n g a n d e mu l s i f y i n g p r o pe r t i e s o f t h e p r o t e i n c o n c e nt r a t e we r e d e t e r m i ne dTh e f un c t i o na l p r o pe rti e s i n c l u di n g s we l l i n g p o w e r ， s o l u b i l i t y ，t u r b i d i t y ，s y n e r e s i s ( r e t r o g r a d a t i o n ) a n d g e l a t i n i z a t i o n p r o p e rt i e s o f t h e i s o l a t e d s t a r c h we r e a l s o d e t e rm i n e d Ke y wo r d s ：ric e p r o t e i n；r i c e s t a r c h；f u n c t i o n a l p r o p e rt i e s 大米是世界上 的主要粮食之一 ， 全世界一半以 上 、 我 国三分之二以上的人 口以大米为主食 ， 大米 通常 以白色精米的形式来消费_ l 。 大米蛋 白的氨基酸组成平衡合理 ， 且蛋氨酸含 量高， 是其它植物蛋 白所无法 比拟 的。大米蛋 白被 公认为优质的食 品蛋 白， 符合 WHO F AO推荐的理 想模式。 大米蛋 白的生物价很高( 2 1 8 ) ， 其营养价值 可与鸡蛋 、 牛乳 、 牛肉相媲美l 3 。 另外 ， 大米蛋 白是抵 抗原形蛋 白， 不会产生过敏反应l 4 ， 对生产婴幼儿食 品是十分有利的。大米蛋白不仅具有独特的营养功 能， 还有其它一些保健功能。近来 的研究表明， 大米 作者简介 ： H AB A P 6 p 4 F r a n c o i s ， 男 ， 江南大学硕士 ， 主要从事天然活 性成分及功能食品的研 究与开发。 蛋 白能够降低血清胆 固醇的含量_ 5 。 国外十分重视 大米蛋 白的研究和开发利用_ 4 ， 而 国内对大米蛋白 功能性的研究较少。 大米的两个主要成分为蛋 白质和淀粉 ， 含量分 别约为 8 和 8 0 。 蛋 白质含量不高。 大米蛋 白由四 个组分组成 ： 碱溶性的谷蛋 白( 8 0 ) ， 水溶性清蛋 白 ( 9 1 1 ) ， 盐溶性球蛋 白( 7 1 5 ) 和醇 溶性 谷蛋 白( 2 4 ) 。 可以看出， 8 0 以上的大米蛋白是碱溶 性蛋 白， 因此可用碱液 提取大米蛋 白， 然后通过调 节蛋白质的等电点沉淀蛋白， 进而得到高浓度 的大 米蛋白， 拓展大米蛋 白的应用范围。 蛋 白质 的功 能性 质与蛋 白质在食 品体系 中的 用途关系十分密切 ， 蛋 白功能性质的研究是开发和 有效利用蛋白质资源的重要依据 。高溶解度的植物 维普资讯 科 学 研 究 食品研究与开发 2 o o 5 V o 12 6 N o 5 蛋 白具有 良好的功能性质 ， 比较容易参 与到各种食 品中去 。 大米蛋白是有待大力开发的宝贵的蛋 白资源。 本文研究 了碱法提取分离大米蛋 白和淀粉 的最佳 工艺 ，并对大米分离蛋 白的功能性质进行 了研究 。 本课题 的研究很有现实意义 ， 对资源 的高附加值全 利用提供 了依据。 1 材料 与方 法 1 1 实 验 原料 籼米无锡市售 1 2 实验仪器与设备 粉碎机 ， L X J I I 离心沉淀机 ， wS C S色差计 ， K wS S A E 3 o o鼓风恒温干燥箱 ， 真空 干燥箱 ， 8 1 2磁力搅拌器 ， HH 一4数显恒温水浴锅 ， U V分光光 度计 ， 凯氏定氮装置 。 1 3 实 验方 法 1 I 3 1 碱法分离大米蛋 白和淀粉的工艺流程 水 然 图 1 碱法浓缩大米蛋白和淀粉工艺流程图 1 - 3 2 理化 指 标测 定 1 I 3 2 1 水分含量 ： 参照 A A C C 4 4 1 5 A方法 1 I 3 2 2 脂肪含量 ： 参照 AA C C 3 0 2 5方法 1 3 2 3 灰 分 含 量 ： 参 照 A A C C 0 8 1 7方 法 1 I 3 2 4淀粉含量 ： 参照 A AC C 7 6 1 3方法 1 I 3 2 5 干物质 中蛋 白质含量 ： 参照 AA C C 4 6 1 3 方法 ， 氮换算为蛋白质的系数为 5 9 1 4 碱法分离蛋 白和淀粉的效果评价 1 3 1 4 1 大米蛋 白提取率的计算 在 本实验中采用双缩尿法测定提 取液 中的蛋 白质含量 ， 以牛血清白蛋白做标准曲线 ， 如下所示 。 0 2 4 6 8 l 0 l 2 Bo v in S e r u m Al b u min C o n c e n t r a t i o n ( m mL ) 图 2牛 血 清 白蛋 白标 准 曲 线 蛋 白提取率是一定量米粉 中提 取得到的蛋 白 量占原料总蛋 白量的 比值 ， 计算公式如下 ： 蛋白质提取率( ) = 1 0 0 方程 原料质量 原料中蛋白质含量 J 1 -土 1 4 2 淀粉回收率的计算 淀粉回收率是 指一定量大米淀粉 中所 得到的 淀粉量 占原料总淀粉量的比值 ，采用蒽酮 比色法 ， 标准曲线如下 ， g 皇 0 n 皇 羽 毛 C 0 0 1 0 2 0 3 0 4 O 5 0 6 0 G l u c o s e c o n c , e n t m fi o n ( IJ g mL ) 图 3淀粉含量测定标准 曲线 计算公式如下 ： 淀粉 回收率( ) = 1 0 0 x x _W x 0 9 1 0 0 方 程 2 式中： S 一由标准曲线得到的试样溶液中的含糖量 W( g ) 一 试样 重 量 0 9 一葡萄糖转化成淀粉 的系数 1 4 I 3 大米分离蛋白的功能性质 大米分离蛋 白的溶解性 、 起泡性和乳化性 的测 定 ， 参见 H a l l ( 1 9 9 6 ) 方法。 2结果 与讨 论 2 1 操作要点 维普资讯 i 4 2 o o 5 ，V o L 2 6 N O 5 食品研究与开发 科 学 研 究 2 1 1 大米预处理 ：将淘洗后 的大米 日光下晒干 ， 然后粉碎成小颗粒过筛。 2 1 2 在选定 的实验条件下 ， 加入碱液 ( 氢氧化钠 溶液) 进行提取 ， 同时用磁力搅拌器搅拌。 2 1 I 3 提 取 分 离 工 艺 中 的 离 心 条 件 为 3 0 0 0 r p m， 3 0mi n s 。 2 1 4 通过氢 氧化钠 和盐 酸溶液调节蛋 白溶 液的 等电点 p H 5 5 ， 沉淀大米蛋白。 2 1 5 在操作过程中为 了节约水资源 ， 最后离心后 得到的上层液体可以循环利用 。 2 2 正交试验数据分析 在单 因素 实验 的基础上 ，以氢氧化钠溶液浓 度 、 搅拌时间、 料液 比和温度为因素 ， 以大米蛋 白的 提取率 、 淀粉提取率 和淀粉中蛋 白含量 ( 残余蛋 白) 为指标进行 四因素三水平 ( 3 ) 的正交实验 。 表 1 正 交实验因素、 水平表 正交实验设计及结果见表 2 。 表 2 正交实验设计 ( L 9 3 4 ) 及其实验结果 a ： 见表 l 对应的编码值 b ： 烘干后淀粉中的蛋白含量 应用统计学极差分析来评价正交实验结果 ， 见表 3 。 表 3 实验结果的统计学分析 影响因素排序 ( 从 主到次 ) A B C D I 7 1 8 7 7 7 4 8 43 7 9 2 8 3 7927 0 I I 82 2 07 7 9493 8 1 40 7 7929 7 淀粉提取率 ( ) I I I 8 5 7 8 0 8 5 5 2 7 7 9 1 7 3 8 1 2 9 7 极差 R 1 3 9 0 3 1 0 6 8 4 2 2 3 4 2 0 2 7 影响因素排序( 从主到次) A B C D I 2 7 33 1 9 3 0 1 88 7 2 0 63 残 余 蛋 白 c II ： 啷5 6 3： 引8 5 ；： 剐6 0 07： 6 6 极差 R 1 7 2 6 0 4 1 3 0 2 8 0 0 4 9 0 影响因素 排序 ( 从主到次 ) A D B C 从 表 3中可 以看出 ， 影响大米蛋 白和淀粉提取 率 的主次顺序都是 ： A B C D，即影响因素的主次 顺 序为氢氧化钠溶液 浓度 提取时 间 料液 比 温 度 。 本实验 的最优水平组合为 A B C D ， 即氢氧化钠 溶 液浓 度 0 0 7 5 m o l L ； 提取时 间 6 h ； 料液 比 1 ： 7 g m L ； 温度 4 0 o C 。 2 3 理 化成 分 比较 测 定大米粉与优化条件下得到 的大米分离蛋 白的理化成分 ， 进行 比较见表 4 。由表 4可知 ， 大米 分离蛋 白中的蛋 白含量是大米粉中蛋 白含量的 1 O 倍 多 。 表 4 大米粉和大米浓缩蛋白成 分比较 2 - 4 大米浓缩蛋 白的功能性质 2 4 1 大米浓缩蛋 白溶解性的测定 测定不同 p H( 2 0 ， 4 5 ， 6 0 ， 8 0 ， 1 0 0和 1 1 5 ) 条件 下 大米浓缩 蛋 白的溶解 度 ， 测 定结果 如 图 4 所 示 。 2 4 5 6 8 l 0 l 1 5 pHVa l ue s 图 4 不同 p H对大米浓缩蛋 白溶解度的影 响 由图 4可知 ， 在 p H 4 5时 ， 大米分离蛋白的溶 解度最低 ； 相反在 p HI 1 5时 ， 溶解度最 高 ， 可达 到 9 8 0 4 加 加 0 一 0 一 n 1 0 0 J =l Z 维普资讯 科 学 研 究 食品研究与开发 2 o o 5 V o L 2 6 N O 5 2 4 2起泡 性 评价 蛋 白起泡性 的指标 为蛋 白起泡能力 和气 泡稳定性。大米浓缩蛋 白的起泡能力和气泡稳定性 分别为 1 9 9 mL和 1 1 7 rai n ，与具有 良好起泡性能的 卵 白蛋 白的起泡能力和气泡稳定性 ( 分别为 2 0 m L 和 1 2 0 m i n ) 相比， 起泡性能差别不大。 表明大米浓缩 蛋 白具有 良好的起泡性 ， 这说明大米浓缩蛋 白中具 有二级和三级结构的蛋 白分子含量较少。 2 4 3 乳 化性 评价蛋 白乳化性 的指标包括乳 化能力和乳化 稳 定性 。本 实验 采用 大 豆 油 、 玉 米 油对 大 米浓 缩 蛋 白和牛血 清 白蛋 白的乳化 能力和乳化液稳定性进 行比较 ， 结果如表 5所示。 表 5 大米浓缩蛋白和牛血清 白蛋白的乳化特性 由表 5可知 ， 牛血清 白蛋 白的乳化性远远高于 大米 浓缩 蛋 白的乳 化 性 。分 析原 因 ， 大米 浓 缩 蛋 白 的疏水性相对较低 ， 即不利于蛋 白和油之问的相互 作用 ， 从而乳化性能低 。 2 5 大米 淀粉 的功 能性 质 2 5 1 色差分析 对大米粉和大米淀粉进行色泽测定 ， 结 果如表 6所示 。 表 6 大米粉 和大米淀粉的色差 比较 样品 大米粉和大米淀粉色差值 L a b 2 5 2溶胀能力和溶解性 分别在 6 5、 7 5、 8 5和 9 5条件 下 ， 测定 大米淀粉的溶胀能力和溶解性 ， 结果如图 6 ， 7所示。 兰 T e mp e r a t u r e ( C ) l 5= I Te mper a t u r e ( u C ) 由图 5 ， 6可以看 出， 大米淀粉的溶胀能力和溶 解性都随着温度的升高而呈现上升趋势。 2 5 3持水性 48 7 2 9 6 l 68 l 9 2 S t o r a g e Du r a t i o n ( Ho u r ) 如 图 7所示 ， 随着储存 时间的延长 ， 大米淀粉 严重失水 。 2 5 4浊度 喇 喇 D 0 D 勺 D S t o r a g e Du r a t i o n ( D a y ) 如图 8所示 ， 当储存时间为 3 d时 ， 大米淀粉 浊 度 最大 。 2 5 5 糊化特性 大米淀粉糊化特性如表 7所示 。 表 7 大米淀粉的糊化特性 样品 T o ( )T p ( )n ( ) A H g e l ( J g ) P HI R ( ) 大 米淀粉6 6 3 8 5 7 1 8 9 8 8 0 6 9 0 1 5 5 3 5 2 8 1 7 1 4 3 0 5 “ T o 、 T p 、 T c 分别代表起始温度 、 峰温度和终温度 ； A H g e l ： 热焓 ， R = T c - T o ： P H I = A H g e l R 3 结 论 3 1 确定 了碱法分离大米蛋 白和淀粉的最 佳工 艺 条件 ， 氢 氧化钠溶液浓度 为 0 0 7 5 m o l L ； 提取 时间 ( 下转 2 0页 ) 加 m 0 维普资讯 2 D 食品研究与开发 科 学 研 究 此 时 上 清 液 中可 溶 性 蛋 白的含 量 降 至 最 低 ， 为 2 9 mg m L 。当 p H值为 4和 4 5时， 未经透析的沉淀 悬 浮液在冷冻干燥后 ，所含 的可溶性蛋 白分别 为 4 1 5 和 4 5 5 ； 而经过透析 ， 粉末 中的可溶性蛋 白 的含量明显增加 ，分别达到了 5 8 9 和 6 9 0 。此 外 ， 与透析前相 比， 透析后的可溶性甘薯蛋 白呈现出 了多孔构造。 在非还原剂存在条件下 ， 电泳图谱显示 出甘薯可溶性蛋 白存在着 三种不 同的分 子形式 ： 2 2 k D a ， 3 l k D a及 5 0 k D a ； 但在还原剂存在条件下 ， 只 显示出 2 5 k D a一种蛋 白分子形式 ，说明这三种蛋白 质分子之间是通过 S S联结而成。虽然 P A S染色实 验未能证明上 述四种主要 甘薯水溶性 蛋 白是糖蛋 白， 但提取物中发现有低分子量的糖蛋 白存在。 参 考 文 献 ： 1 Woolf e ， J A Wo r ld s w e e t p o ta t o e s e c o n o my M Lon d o n ： C a mb ri d g e Un i v e r s i t y Pr e s s 1 9 9 2 ， 1 P 2 F AO F o o d a n d Ag r i c u l t u r a l o r g a n i z a t i o n S w e e t p o t a t oes p r odu c t i o n 1 0 9 r e c o r d s Ro me ， ha l y ： F AO 2 0 01 Av a i l a b l e 3 Ma e s h i ma M ；S a s a k i ， T ；A s a h i ，T C h a r a c t e r i z a t i o n o f m a j o r p r o t e i n s i n s w e e t pot a t o t u b e r o u s r o o t s J P h y t o c h e mi s t r y 1 9 8 5 ， 2 4 ， l 8 9 9 -l 9 0 2 4J o n e s ， D B ； G e t o r ff C E F I pomoei n ， a g lo b u l i n f r o m s w e e t pot a t oes I po moea b a t a t a s J o u r n a l o f B i o l o g i c al Ch e mi s t r y 1 9 3 1 ，93 ， 1 1 9 -1 26 5 D e b o r a ， Va r o n ； Wa n d a ，C o l l i n s ； E A l le n F o e g e d i n g I pomoei n i s t h e ma j o r s o l u b l e p rot e i n o f s w e e t pot a t o s t o r a g e r oot s H o r t S c i e n c e 1 9 8 9 ， 2 4 ( 5 ) ， 8 2 9 8 3 0 6 杨立明 ， 陈锡 民 浅谈甘薯综 合开发与利 用 J 国外农学一 杂粮 作 物 ， I 9 9 5 ， ( 2) ：4 4 4 5 7 K u s a n o S ；A b e ,H ；T a mu r a H I s o l a t i o n o f a n t i d i a fi c c o m po n e n t s f r o m w h i t e - s k i n n e d s w e e t p o t a t o( I pomoeo b a t a t a s L ) J B i o i Bi o t e c h n o 1 B i o c h e m2 0 01 ， 6 5( 1 ) ，1 0 91 1 4 8 王国扣 薯类 淀粉产 的废 水特性 及处理 方法 J 淀粉 与淀 粉糖 ( 4 ) ： 4 0 4 4 f 9 Y e h ， K W ； C h e n d C ； L i n M I ； C h e n Y M ； L i n C Y F u n c t i o n a l a c t i v i t y o f s por a mi n f r o m s w e e t pot a t o ( I p o m oea b a t a t a s L a m 1 ：a t u b e r s to r a g e p r o t e i n w i t h t r y p s i n i n h i b i t o ry a c t i v i t y J P l a n t Mo l e c u l a r B i o l o g y 1 9 97 ， 3 3 ， 5 6 5 5 7 0 1 O We n ， C h i Ho u ；Y e n ，C h o u C h e n ；H s i e n J u n g C h e n ； Y a w , H u e i L i n ； I j 唱 I j n g Ya n g ；Me i ， Hs i e n L e e An t io x i d a n t a c t i v i t ie s o f t r y p s i n i n h i b i t o r a 3 3 k D a l O O t s t o r age p rot e in o f S W L d t pot a to( i pom o e a b a t a t a s eL ) Li n 1 c v T a i n o n g 5 7 ) J A r F o o d t h e m 2 0 0 1 , 4 9 ， 2 9 7 8 2 9 8 1 1 1 We n ， C h i H o u ； Y a w ， Hu e i L i n D e h y d r o a s c o r b a t e r e d u c t a s e a n d mo n od e h y droa s e o r b a t e r e d u c t a s e a c t i v e t i e s o f t ryp s i n i n h i b i t o r s t h e ma j o r s w e e t p o ta t o( I poma e a b a t a t a s 1 L a m) r oot s t o r a g e p r o t e i n P l a nt S c i e n ce 1 9 9 7 ， 1 2 8 ， 1 51 1 5 8 1 2 Ma r k w e l l ， MAK； H a a s , s M ； B i e b e r ， L L ； T o lb e r t ， N E A m o d i fi c a ti o n o f t h e L o w r y p r o c e d u r e t o s i mp l if y p rot e i n d e t e r mi n a t i o n i n me mb r a n e and l i pop rot e i ns a m p l es J A n a1 B i o c h e m 1 9 7 8 ，8 7 ，2 0 6 - 2 1 0 1 3 P e t e rs o n ， GL A s i mp l i fi c a t io n o f t h e p rot e i n a s s a y m e t h od o f Low r y e t a1 w h i c h i s m 0 m g e n e r al l y a p p l ic a b l e J A n a1B io c h e m 1 9 7 7 ， 1 9 3 ，2 6 5 2 7 5 1 4 L a e mml i ， U K Cle a v a g e o f s t r u c t u r a l p r o t e i n s( 1 u r i n g t h e a s s e mb l y o f t h e h e a d o f b a c t e ri o p h a g e T 4 J N a t u r e 1 9 7 0 ， 2 2 7 ， 6 8 0 - 6 8 5 1 5 Z a c h a r i u s ， R M ；Z e l I ,T E G l y c o p rot e i n s ta i n i n g f o l l o w i n g e l e c t rop h o ms i s o n a c ryla mi d e g e l s J An a 1 B i o c h e m 1 9 6 9 ， 3 0 ， 1 4 8 1 5 2 1 6 日本生化学 会编 ， 蛋 白质 的化学 I ， 生化学 实验 讲座 1 ， 日本 ： 东 京化学同人 ， 1 9 7 7 ， 7 3 7 4 1 7 Y a o ， P L ； Hw a n g ，M J ； C h e n ， Y M ； Y e h ， K W S i t e d i r e c t e d m u t a g e n e s i s e v i d e n c e f o r a n e g a t i v e l y c h a r g e d t ry p s i n i n h i b i t o ry l o o p i n s we e t p o t a t o s p o r a mi n F EBS L e t t e r s 2 0 01 ， 1 3 41 3 8 收稿 日期 ： 2 0 0 5 一 O 6 一 O 3 4 4 、 # i 、 一、 一 、 一、 一、 一q 、 一 、 4、 一 q ( 上接 l 5页 ) 6 h ； 料液比 l ： 7 g ml ； 温度 4 0。 3 2 影 响大米蛋 白和淀粉 提取率 的主次 因素都 为 氢氧化钠溶液浓度 提取时间 料液比 温度 。 3 3 大米浓缩蛋 白与大米粉比较 ， 大米分离蛋 白中 的蛋 白含量是大米粉中蛋白含量 的 l 0倍多。 3 4 大米浓缩蛋 白溶解性 、 起泡性好 、 有利 于其在 食 品 中的应用 。 3 5 对大米 淀粉 的色泽 、 溶胀 能力 、 溶 解性 、 持 水 性 、 浊度和糊化特性都进行了测定。 3 6 在籼米食用受到 限制的情况下 ， 以其为原料分 离大米蛋 白和大米淀粉 ， 并根据各 自的特性应用到 食品工业中 ， 这对解决籼稻谷库存 和促进粮食生产 产业 化新 格局 的形 成是 有意 义 的 。 参 考 文 献： I K a h l o n T S ， C h o w ， F I ， and S a y r e ， RN 1 9 9 4 ， C h o l e s t e rol - l o w e ri n g p roF e r t i es o f ri c e b r a n ， C e r e a l F o o d Wo r ld ， 3 9 ( 2 ) , 9 9 - 1 0 3 2 L u md u b w o n g,N and S e i b ， P A ， 2 0 0 0 , R i c e S t a r c h I s o l a t io n b y A I k a l i n e Pr o te Di g e s t io n o f We t ml l i e d Ric e F l o u r , J o u r n al o f C e r e a l i e n ce 31 - o 3 7 4 3 Ha n n L P ， H o s e k ， R C all a n ， M and J o n es， F T ， 1 9 8 1 ， T h e d e v e l o p m e n t o f h i 曲- p rot e i n ri c e fl o u r for e a r l y c h i l d h o o d f e e d i n g , F o o d r e e h n o l o g y ， n o v ，3 8 - 4 2 4 J u ， Z Y H e t t i a r a c h c h y ， R a t h ， N ， 2 0 0 1 ， E x t r a c t i o n ， d e n a t u r a t io n and h y d rop h o b i c p rop e r t ie