气相色谱法测定氨苄西林钠舒巴坦钠中残留溶剂含量检验方法.doc

气相色谱法测定氨苄西林钠舒巴坦钠中残留溶剂含量检验方法 郭颖娜 华北制药股份有限公司，河北石家庄050015 摘要该文介绍了一种气相色谱法测定氨苄西林钠舒巴坦钠中有机溶剂丙酮、异丙醇、正丁醇、乙酸乙酯、甲基异丁基酮、二氯甲烷、甲苯残留量的分析方法。该方法采用外标法顶空自动进样，在非极性弹性毛细管柱1上进行分离，效果良好，验证了方法的准确性、精密度、专属性等方面，这也达到了中国药典及ICH的各项要求。 关键词氨苄西林钠舒巴坦钠；残留溶剂；气相色谱；顶空进样 R92A1672-5654（xx）01（b）-0128-02 残留药品中的残留溶剂对人体是有害的，生产过程中应使其含量控制在微量的范围之内。氨苄西林钠舒巴坦钠原料在分离、提取工艺中用到了有机溶剂丙酮、乙酸乙酯、正丁醇、异丙醇、甲基异丁基酮、二氯甲烷、甲苯。为安全使用产品，需监测和控制该产品的残留溶剂水平。而制药行业对产品中残留溶剂的监控广泛采用的是气相色谱法2，其操作简单，有较快的检测速度，能准确定量，该方法对残留溶剂监控起到非常重要的作用。 1实验仪器及条件 1.1仪器 Agilent6890N气相色谱仪、AgilentG1888顶空进样器。 1.2色谱条件 HP-1色谱柱（填料为100%二甲基聚硅氧烷,0.53mm30.0m）；柱温：用5min的时间维持在40，从10/min升到150，保持2min；载气：高纯氮气；柱流速：4mL/min（恒压模式）；进样口温度：150，分流比：5:1；氢火焰离子化检测器（FID）温度：280；顶空样品瓶保温温度80，保温时间30min3。 2溶液制备 2.1对照品储备溶液 称取丙酮、异丙醇、乙酸乙酯、正丁醇、甲基异丁基酮各约500mg，称取二氯甲烷150mg，甲苯约223mg，精密称定，分别置于50mL容量瓶中，用纯化水溶解定容至刻度，摇匀，作为对照品储备溶液。 2.2对照品溶液 分别精密量取二氯甲烷、甲苯储备液0.2mL、0.4mL、0.8mL、1.2mL、1.6mL、2.0mL、2.4mL、3.0mL，其他各储备液0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL、6.0mL、7.5mL，分别置于100mL容量瓶中，用纯化水稀释定容，作为对照品溶液R1（10%），R2（20%），R3（40%），R4（60%），R5（80%），R6（100%），R7（120%），R8（150%），共配制成8个系列浓度的线性溶液。 3试验操作 3.1准确度试验 称取氨苄西林钠舒巴坦钠样品约500mg，共9份，精密称定，分成3组，每组分别加入丙酮、异丙醇、正丁醇、乙酸乙酯、甲基异丁基酮、二氯甲烷、甲苯对照品溶液浓度50%、100%、150%的溶液，分别精密量取5mL，置于20mL顶空瓶中，把瓶口密封，注入色谱系统并分析，记录下色谱图，计算供试品各相应残留溶剂的平均回收率分别为89.4%，92.9%，81.0%，80.9%，86.4%，77.1%，83.0；RSD分别为3.4%，4.4%，4.5%,3.8%,5.4%,4.5%,4.7%。 3.2精密度试验 3.2.1重复性称取供试品约500mg，共称取6份，精密称定，置20mL顶空瓶中，精密加入纯化水5mL，摇匀，瓶口密封。注入色谱系统进行分析，记录色谱图，共6次测定。对进样6次的色谱图中主峰的峰面积进行记录，并对供试品中各残留溶剂含量的相对标准偏差进行计算，均小于10.0%4。 3.2.2中间精密度不同分析人员选用不同仪器，每人称取供试品3份，各约500mg，共称取6份，精密称定，置20mL顶空瓶中，精密加入纯化水5mL，摇匀，瓶口密封。注入色谱系统进行分析，记录色谱图，共6次测定。记录进样6次的色谱图中主峰的峰面积，且计算出供试品中各残留溶剂含量的相对标准偏差均小于10.0%。 3.3线性试验 分别精密量取5mL对照品溶液（线性溶液），置20mL顶空瓶中，瓶口密封，利用色谱系统进行分析，记录色谱图。标准曲线以峰面积对浓度进行绘制，计算相关系数、回归方程、截距和剩余标准差，各线性溶液浓度分别在对照品溶液浓度的10%150%范围内,均符合相关系数r0.99、截距10.0%、剩余标准差10.0%的要求。见表1。 3.4专属性 取供试品约500mg，精密称定，置20mL顶空瓶中，精密加入R6(100%)的对照品溶液5mL，摇匀，密封瓶口，注入色谱系统进行分析，记录色谱图，记录相邻峰的分离度，各峰之间的分离度均大于1.5，符合R1.5的要求。 3.5方法检测限、定量限 把对照品储备液分别稀释成一定浓度的溶液，采用色谱系统来分离，对溶液的浓度进行调整，使信噪比分别约为10:1和3:1，记录信噪比，确定定量限和检测限5。见表2。 3.6耐用性 色谱柱耐用性：选择不同批号色谱柱，称取供试品3份各约500mg，精密称定，置20mL顶空瓶中，精密加入纯化水5mL，摇匀，密封瓶口，注入色谱系统按确定的检测条件进行分析，记录色谱图，对供试品中各种残留溶剂含量，以及各测定结果的相对标准偏差加以计算。相对标准偏差均小于10.0，达到目标要求。 4结语 快速分析测定有机溶剂残留量时，该文选用了气相色谱法。由于该实验各溶剂的沸点低，故选用了顶空进样法6。氨苄西林钠舒巴坦钠是水溶性药品，可溶于纯化水中。故选用纯化水作为样品制备用溶剂。该实验采用非极性色谱柱，建立顶空气相色谱分析方法，该方法准确可靠，并验证了该方法的专属性、准确性、精密度等方面，对ICH及中国药典的各项要求也都是符合的，说明该方法可较好的用于氨苄西林钠舒巴坦钠的残留溶剂测定。 参考文献 1陆烨，夏宇沁，昌军，等.毛细管气相色谱法测定13种有机溶剂残留J.复旦学报:医学版，xx(2):222-226. 2黄凤丽.气相色谱在医药检测中应用的研究进展J.安徽农业科学，xx(33):16035-16037. 3张立庆,王东武.顶空进样-毛细管气相色谱法测定格列美脲原料药中5种溶剂残留的含量J.数理医药学杂志，xx(4). 4闫优优，梁毅.硫酸氢氯吡格雷有机残留溶剂的测定分析方法验证研究J.机电信息，xx(11)：3