项目工作总结

1 / 26 项目工作总结 编写目的 XXX 公司业务管理系统的开发已经基本完成。写此项目开发总结报告，以方便我们在以后的项目开发中来更好的实施项目的订制开发 ; 让我在今后的项目开发中有更多的有据的资料来规范我们的开发过程和提高我们的开发效率 ,从而创造更多公司效益。背景项目名称： XXX 业务管理系统软件名称： XXX 业务系统客户： XXX 用户： XXX 员工 参考资料项目开发文档：软件开发数据模型： PDM_数据库开发文档： XXX 业务管理系统数据库设计说明书软件业务流程参考： XXX 业务管理系统流程说明 .doc软件使用手册参考： XXX 业务管理系统功能说明软件业务流程参考： XXX 业务管理系统流程说明 .doc软件中使用到的第三方控件： ComponentArt for 软件中使用的安全Ikey 驱动： Ikey 以上参考资料是截止 XX-08-31 是最新的资料文档。如有修改，即使修改此处的参考文档名称。 2 开发工作评价对生产效率的评价 系统开发已历时快年的时间了 开发的反复性比较多。 对客户的需求理解不是很透彻。综合以上，此项目的开发效率不是很高，相反有相当一定时间的浪费。对产品功能的评价经 过我们公司各位同事的共同努力协作， XXX 业务管理系统已经很好的完成了客户的业务流需求。经过对客户使用过程的观2 / 26 察，此项目开发的还是比较成功，但是还是存在着一些问题，造成这些问题的原因是多方面的。如：前期系统数据库的设计缺陷和部分代码的构建缺陷、客户需求的理解上也存在一定问题，这就需要我们用一定的时间来维护客户使用过程中提出的新问题和存在的 debug。总的来说，此系统的功能开发还是一个比较成功的案例。对技术方法的总结在此项目中使用到技术和工具： 使用代码生成器：使用代码生成器 动软 .Net 代码自动生成器 ,此工具在很大程度上提高了编码效率，从而加快了项目的开发进程。在以后的项目中，我们要尽量的来使用一些类似的工具来在最短的时间内完成工作。在今后的项目开发中，我们最好是能开发出适合自己的代码生成工具，更大限度的节省开发周期和开发费用。 使用数据库建模工具； PowerDesigner 工具来建立系统数据库模型，以方便程序员很好的理解业务流和掌握系统架构者的架构思想，更好的满足客户的功能需求。在今后的项目开发中，我们要更好的来完成系统的前期数据库模型的建立，最大的来优化系统功能。 使用第三方控件：此系统中 使用了 ComponentArt 第三方控件。此控件在很大程度上满足了客户对软件界面的需求，从而也给软件的操作带来了方便。本项目中只使用了 ComponentArt 一种第三方控件，在今后的项目开发过程中，要继续使用第三方的控件。这样以来，无论是针对软件界面的美观性、友好性来说、易3 / 26 操作性而言，还是针对系统开发效率而言，这都是很好途径。但需要意的是：在是使用第三方控件时，要谨慎的选择一些网络中的比较常见的第三方控件。 使用自定义控件：此系统中使用了自定义控件 (GhdGridView),此自定义控件可以很好的 统一系统中的所有信息显示表格样式。如客户对数据显示样式有什么新的意见，我就不需要修改每一个页面的表格样式，我们只需要修改 GhdGridView 控件的样式，系统中的所有继承自 GhdGridView 的表格样式都可以改变。 系统开发框架：此系统的框架使用的是简单三层结构，此框架在开发一些中小软件是比较实用的。但是我们要是可以开发出自己的框架，把一些通用的功能开发到框架中。这样以来，在以后的系统开发中，针对系统中一些通用的功能就不需要再开发，从而也可以很好的提高我们的开发效率；减少很多维护费用。使我们的技术不断 的更加成熟。 系统安全加密：此系统中针对客户提出的系统安全问题，我们采用了 Ikey 加密硬件钥匙来验证客户端登陆客户的合法性，此 Ikey 钥匙可以绑定到一个系统使用用户，也可以让多个用户来使用一个加密钥匙来验证登陆系统的合法性。这样以来，即使用户的密码不慎丢失，或者被不法人员取得，这样就最大的提高了我们系统的安全性。 Ikey 加密钥匙是很好的加密 B/S 架构软件的硬件工具，在以后的软件安全方面可以借鉴。 3 项目经验总结签定合同 一个项目的开发成败或者说4 / 26 项目开发带来效益的大小，在很大程度上是受项目合同签定的影响的。 往往，很多一部分公司与客户签定的项目合同都是很模糊的，也很难签定的比较清楚，这样以来就会导致在项目的开发后期，工作两会越来越大，影响项目的竣工周期；而且，项目的开发费用一般是不会变的。这样以来，我们就大大的降低了我们的开发效益。虽然需求范围很难签定的明确，但是我们在签定合同时，要尽量的去把合同功能边界和添加新功能的条件签定。开发团队 在项目确立后，要尽快的建立起项目开发团队。项目团队成员的团结合作、相互沟通是非常重要的，团队成员之间要相互学习彼此的优点和技术，使团队的能力不断的提高。这样，在项目的开发过程中 ，团队才不会被难题困住不动。另外，团队中要有一个项目负责人，这个人无论是在与客户的沟通上，还是在技术上都要是很出众的人，此项目负责人要能很好的沟通客户与开发成员之间，以此来更好的理解客户的功能需求。人的记忆力总是有限的，所以就要求开发团队成员要尽量的书写一些开发文档，这些文档往往是我们在项目开发后期要用到的可寻资料。 项目团队士气是项目成功的一个因素 ,我们需要不断的来培养我们的团队气势，使我们的团队不断的壮大。需求的调研 在项目确立后，就到了需求调研分析阶段。 项目组对客户的整体组织结构、公司有关人员 的关系、职责等如果5 / 26 没有一个很好、足够的了解掌握，这样项目组就无法很好的完整的整理到客户的需求、或者说客户真实的功能需求，如此以来我们就为自己埋下了地雷 ,影响项目的开发周期，这就要求我们要与客户搞好无论是工作上的还是生活上的朋友关系 ,要深入的去了解客户需求。 我们要尽量的让客户也参与到项目的开发团队中来，也就是说我们要使客户把自己也纳入到项目的开发团队中来，如此一来，我们掌握客户需求的真实性、可靠性就会大大的提高 ,也就不会为项目的后期功能开发埋下陷阱 在需求调研过程中，如果缺乏足够用户参与，这样的需求 调研也是失败的。很多程序员不愿参与到客户的需求调研中去，为什么呢？很简单，与客户沟通不如与代码沟通容易有意思。尽管这样，我们还是必须用足够多的时间去和客户进行沟通，了解他们真实的需求。很多用户也是如此，他们自己也不愿意参与到项目的需求调研中来，为什么呢？需求调研有出去和朋友一块烂漫对吗。虽然现状如此，我们还是要努力的使客户参与到需求的调研中来。 模糊需求，也就是模棱两可是需求规格说明中最为可怕的问题。一是指诸多客户对需求说明产生了不同的理解；一是指单个读者能用不止一个方式来解释某个需求说明。针对对这 种情况，就要求我们的调研人员要能够从多个角度来分析客户的不同需求，整理出最终的需求与客户确认，定出最终真实可靠的需求，我们绝不能凭借我们自6 / 26 己的单面理解来定立客户的最终需求。 在一个项目的开发中，文档的书写是极为中要的一项工作。因为，某些文档就是我们在开发后期与客户沟通的可寻依据、也是我们程序员在编码过程中要用到的重要文档。我们绝对不能认为，凭借我们的大脑来记录所有的开发需求。；即使，你说你是天才，你要用你那颗爱因斯坦的大脑来记录所有的开发需求，那也是不可能的，人的精力总是有限的。这就要求我们在需求调 研中做好需求文档的记录和整理。 需求调研工具选择，客户一般对图形还是比较感兴趣的，所以我们在调研过程中，我要尽量的采用图形化界面来和客户沟通需求。比如可以采用 Rose 工具，把客户的意思转换为用例图、时序图、协作图、状态图、类图等，使表达的意思更加直观。这样客户会更快的进行问题的实质。做好开发计划 在项目确立后，我们就需要做好项目开发计划，需求调研用时，开发用时，测试用时，实施用时，维护用时。在我们做好了计划后，我们要随时的跟踪计划任务的完成进度，从而使我们的项目进度掌控在我们的开发周期范围之内，今日计划 、行动，明日成功。很好的沟通 在其他行业中，人与人的之间的沟通只很重要的。项目开发也不例外，很好的沟通能够加快项目的进度，这就要求我们每一个开发人员要学会和善于沟通于客户和同事之间。在一个项目的开发过程中，我们与客户的沟通是一个不断交流和沟通的过程。在开发到一定的7 / 26 阶段，我们就需要和客户沟通已有功能，尽量的去避免一些隐藏的问题，及时的发现问题，解决问题，从而按时或者提前完成项目的开发。做好工作总结 在项目进行的过程中，我们要不断去整理自己的工作情况和做好总结，这样以来，无论是在自己的技术还是其它方面，都会对我 们有很大的提高，在长期的积累后，无论是我们个人能力，还是我们的团队能力都会有很大的提高。 个人工作总结一般包括几部分，这是大纲，供参考： 1、开头，即概述部分 2、主要工作内容，即干了什么 3、工作中存在即发现的问题 4、原因分析 5、针对问题的建议改进措施 6、下一步工作计划 7、对以上几个部分做简单总结提问者评价 谢谢一年时间弹指一挥间就毫无声息的流逝， 就在此时需要回头总结之际才猛然间意识到日 子的匆匆。 XX 年是我生命中最重要的一年。 这年里， 我的家人平安幸福美满的生活， 我的朋友快乐轻松勇敢地奋进， 而我， 在马总、 卢部长、 沈经理和各位同事的指导和关心照顾下， 一步步慢慢成长， 不断进步。 8 / 26 这份工作带给我丰富的生活经验， 提供给我优越的奋斗平台， 在我的人生道路中凝聚了 璀璨的闪光点。 周围的同事们赐予我与生俱来最充实最宝贵的精神财富， 大家虽处在压力无处不在的现代潮流中， 但还是激流勇进， 奋力拼搏， 互相关心帮助， 这点让我十分地感动和震撼。 在批评、 团 结、 再批评的科学合理的集体建设理论指导下， 我们项目 组发展空间不断扩大、 凝聚力空前强大， 前景一片大好。 面对项目 发展好景， 作为其中的一份子， 我内心狂喜。 在此， 我希望在以后的时间里为公司 多做事， 做实事， 把我分内的事做好做足， 脚踏实地的走好每一步。 所以， 乘此良机， 我想我有必要做一个对这个重要年份的工作总结， 反思一下过去的不足， 以及为将来新的一年制定一个旨在提高自 我、 实现自 身价值的初步蓝图， 望领导和同事们指证和监督。 具体工作如下 ： 一、 项目 立项及现状 这一年中， 我们项目 组主要负责新的项目 的选定及策划、 招商工作。 在众多项目 中， 我们从 XX“1+8” 城市圈建设及 XX 市蓬勃发展的房地产建设中窥探到巨大的商机， 并且我们从实地考察， 发现 XX 市现有的几个灯饰市场因自 身原9 / 26 因或者市政建设原因， 均无法满足各经营户及消费者的需要。 与此同时， XX 市仅有的几个灯饰市场均扎堆 XX 区， 而在拥有 200 万原住居民及 30 万居住能力的 XX 区却无一个相关的专业市场。 因此， 项 目 组报经集团批准， 充分利用以上客观优势， 融合我们市场得天独厚的地理位置及便利的交通优势， 拟打造 XX 市第一家专业的中高档灯饰市场。 正在前期招商工作稳步前进时， 我们却遭遇到了 由美国次贷危机引 起的波及全球的金融危机。 这次金融危机使整个世界， 包括中国在内的经济建设都遭遇了极大打击， 尤其是中国的房地产遭遇了 极大的冲击。 房地产的崩盘， 也造成了 灯饰行业的巨大震动。 国内许多灯饰厂家纷纷宣告破产倒闭， 灯饰行业一片萧条。受此大环境的影响， 使得很多原 本对本市场信心十足的商户也开始犹豫或者打消了 到本市场设点的打算。 毕竟， 对于商人来说， 盈利永远是真理， 而就目 前的状况来看， 一来生意不好做， 再让他们拿出巨资投入， 可能性不大； 二来 2016 年整个灯饰行业发展的前景还不甚明朗， 商户本身对这个行业信心不足， 因此， 还在等待与观望之中； 三来年底也是商家资金回流的关键时刻， 10 / 26 这个时刻比较敏感及尴尬； 四来本市场虽然对外宣传称 11 月 份会开始改造， 但是到目 前为止， 穿过市场的道路及市场改造似乎都还遥遥无期， 根本毫无动静， 商 户对此表示高度关注， 也因此不愿意有进一步的行动。 正因为如此， 使得我们的招商工作在经历了 前期的火爆之后， 慢慢陷入了 僵局。 二、 工作成绩 基于项目 组马总、 卢部长、 沈经理给予的宝贵机会和同事们的照顾帮助， 自开始在此工作以来， 我获得了 不少锻炼机会， 在招商技巧、 谈判技巧、 应变能力、团队精神、 团队合作及口才方面都有所进步。 在这次招商工作中， 我和同事们一起对 XX 市所有的灯饰市场的商户进行了 面对面的交流及沟通， 并通力合作， 在卢部长的指导及帮助下， 截止到目 前为止， 灯饰方面已预定 14 家， 电料方面已预定 26 间。 虽然离 70%的工作目 标相差甚远， 但在目 前的大环境下来看， 成绩虽然不甚满意， 但我们也已拼尽全力 卢部长总是教育我们说： 我们的工作最主要的是细心和沟通能力， 事情多而杂， 工作心态很重要， 要努力做好自 己的事情， 积极响应集体精神。 应该说， 马总的人格魅力、 卢部长的实战经验、 沈经理的激情让我们终生受益， 让我们从他们身上学到的不仅是做事的方法， 更重要的是做人的道理， 做人是做事的11 / 26 前提和基础。 这些经验和教导将使我受用终生。 三、 工作目 标及打算 对于参加工作才 1 年半的我来说， 在领导和同事们的细心关怀和指导下， 通过自 身的努力， 各方面均取得了 一定的进步， 感觉这一年中自 己在工作技能上了一个新的台阶， 做工作有了 计划和步骤， 行动也有了 方向， 从根本上摆脱了 刚刚接手时没有方向的乱撞， 不知工作重点的现象。 不仅仅能埋下头去忘我地工作， 还能在回过头的同时， 对工作的每一个细节进行检查核对， 对工作的经验进行总结， 尽量使工作程序化、 系统化。 在稳步中前进， 向更高层次努力。 孔子曾经说过： “ 学然后知不足。 ” 只有通过不断的学习 ， 才能发现自 身的不足之处， 才能明确自 己前进的方向， 才能不断改造自 我， 发展自 我。 自 古就有一个真理： 勤能补拙， 像我这样不够聪明的人就应该足够的勤奋， 付出足够的时间和精力， 才能做出让大家和自 己满意的成绩， 美化箱子苦寒来一直是我坚守的原则。 下面是我对于自 己这一年多锻炼后的小小认识， 总结以下几点： 一、 统一思想， 端正态度 态度决定一切： 12 / 26 实践中相互交流学习 ， 不仅注意学习 的方法， 更要有正确的学习 态度， 对待他人的观点和意见， 以包容的心态听取别人的意见和建议， 只有不断学习 ， 思考总结， 才能不断提高， 把事情做好。 二、 明确目 标， 个人目 标与公司 目 标统一 只有上下统一起来， 步调一致， 才能往前走。 实现目 标要有一种正确的观念，方法并将目 标切实分解落实， 只有分解的， 能实现的目 标， 才是可行的目 标， 政策和策略的重要性不言而喻。 三、 加强专业知识的学习 这是目 前我们招商人员所欠缺的一块儿， 也是非常重要的一块知识。 为此，我认真的学习 ， 阅读大量的招商及灯饰行业相关资料， 从报纸上、 电视上、 网络上学到了 许多知识， 充实了 我的头脑。 在今后的工作中， 我还要进一步解放思想、更新观念、 拓宽视野、 丰富知识， 努力工作。 四、 进一步规范自 己的工作流程， 加强工作的计划性 规范的工作流程可以大大减少出错的几率。 在新的一年里要严格按照规范，避免一些低级性错误出现， 减少混乱， 养成良好的工作习 惯， 增强自 己的计划性，这样可以 避免遗忘做的事情， 减少丢三落四现象的出现。 13 / 26 时间在迁移， 今年即将悄然而逝， 等待我们大家的又是一个充满新意的新年。新年新气象， 一年之计在于春。 是的， 新年里， 机会多， 希望多， 挑战也多， 我不能预计明年会有什么酸甜苦辣在等着我， 但我明白， 机会只给有准备的人。 我也应该为未来做点准备。 明年确实是一个更加具有挑战性的一年， 工作方面， 基本功在慢慢扎实， 对商户也慢慢了 解， 一切都变得有条理起来， 所以希望来年踏踏实实脚踏实地的做好本职工作， 扩大自 己的知识面， 交际面， 提高自 身素质，不断学习 新的知识， 提高业务能力， 团结关心同事， 服从领导安排， 为公司 谋福利， 为自 己开拓美好前程。 生活方面， 做到毋必、 毋固、 毋意、 毋我， 做一个积极乐观、 勇于进取的人。 此时， 我心里只有感激， 感谢公司 为我提供的一切机会， 感谢领导对我的严格要求， 感谢同事们的关心和互相支持。、项目基本情况项目基本情况 项目基本情况 项目基本情况 基于 LC-MS 法测定水产品及饲料中己烯雌酚的研究是浙江省科技厅 XX 年度分析测试科技 计划项目，项目标号 XXF70026.项目承担单位为杭州市农业 科学研究院。 我们在日常检测中常使用酶联免疫吸附法作为一种14 / 26 半定量筛选法，但由于 用该方法一旦检出，需要通过其他方法确认，目前的液相色谱法的检出限又达不 到要求，因此对己烯雌酚液相色谱质谱联用法的研究开发就很是迫 切，该法可以同时满足检出限、定性和定量的要求。 1、项目合同规定的主要内容 LC-MS 测定参数的确定 水产品及饲料中己烯雌酚提取条件的确定 水产品及饲料中己烯雌酚净化条件的确定 2、项目预期目标 形成一套利用LC-MS 测定水产品及饲料中己烯雌酚的方法。 该方法技术指标 己烯雌酚最低检测限 ng/ml。 己烯雌酚回收率：饲料中 85；水产品中 80。 精密度：变异系数 10 、项目执行情况项目执行情况 项目执行情况 项目执行情况 对照合同书项目总体实施结果对照合同书项目总体实施结果 对照合同书项目总体实施结果 对照合同书项目总体实施结果 课题组经过近 2 年的研究与实施，按照制定的项目实施计划，已经完成了 质谱条件的调谐和确定、 UPLC 条件的优化确定；水产品及饲料中己烯雌酚提取 试剂 的选择、提取方法的确定；水产品及饲料中己烯雌酚净化条件的确定等三项 合同规定的主要研究内容，实现了合同书中规定的与其目标。项目总体完成情况 如下： 形成了一套利用 LC-MS 测定水产品及饲料中己烯雌酚的方法 经过实验验证，该方法对水产品、饲料中己烯雌酚最低检测限为 /ml。 15 / 26 经过实验验证，该方法对水产品、饲料中己烯雌酚检测回收率为饲料中 85 ，水产品中 80。 )项目主要工作措施与结果项目主要工作措施与结果 项目主要工作措施与结果 项目主要工作措施与结果 、 LCLC LC LC- -MSMS MS MS 测定己烯雌酚的 测定己烯雌酚的 测定己烯雌酚的 测定己烯雌酚的 UPLC UPLC UPLC UPLC 和和和 MS MS MS MS 参数的确定 参数的确定 参数的确定 参数的确定 己烯雌酚检测的质谱条件：根据三离子原则，用m/z267,251 和 237 配合保留时间确认己烯雌酚的存 质谱参数：己烯雌酚属于酚类化合物，所以离子源为负离子源，用 1ug/mL 标准 溶液调谐 MS 参数。经过调谐，得出离子丰度最大的质谱参数： 毛细管电压 3KV ，离子源温度 110，脱溶剂气温度 300，脱溶剂气流量 600L/h，锥孔气流量50L/h。 扫描方式为多反应检测 (MRM)，负离子方式。用于定量分析的离子为 m/z267 237,锥孔电压 40v 和碰撞能量 28eV，定性分析离子 m/z267251, 锥孔电压 40v 和碰撞能量 25eV，分析时氩气流量 /min。 己烯雌酚检测的 UPLC 色谱条件 UPLC 系统使用Waters 超高效液相色谱柱； 流动相的选择及优化：选甲醇作为流动相。在 UPLC 系统对甲醇水进行优 化得到最佳洗脱方式： 甲醇水梯度洗脱， 01min， 15 30， 12min，16 / 26 30 70 ， 23min， 30 15%；柱温： 30；流速 /min；进样量： 10l。 、 LCLC LC LC- -MSMS MS MS 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚主要指提取剂与提取方法的确定 主要指提取剂与提取方法的确定 主要指提取剂与提取方法的确定 主要指提取剂与提取方法的确定与优化 与优化 与优化 与优化。 (1)水产品中己烯雌酚主要以游离态形式存在，经过提取实验后，选择使用甲醇直接提取。 (2)饲料属于成分非常复杂的混合物，必须用足量 有机试剂提取，并且保证 己烯雌酚不被氧化。提取试剂主要在甲醇、乙腈、乙酸乙酯、乙醇与三氯甲烷等 有机试剂及混合液选择。在提取实验中，乙酸乙酯提取效率最高，有 90以上 的提取效率。 (3)提取方法主要为均质，超声提取，实验标明在充分混匀时，有机试剂超 声提取能有效提取出水产品及饲料中己烯雌酚。 经提取实验后，得出 LC-MS 测定己烯雌酚的提取方法 水产品中己烯雌酚的提取： 搅碎水产品于 50ml 离心管中，加入 10ml 乙酸乙酯，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于3000r/min 离心 10min，将上清液移出，残渣中再加乙 酸乙酯 10ml，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于 3000r/min 离17 / 26 心 10min，将上 清液移出，将两次上清液合并，如有混浊，再次离心 5min。将合并的上清液乙 酸乙酯定容于 25ml 容量瓶中，备用。 饲料中己烯雌酚的提取： 称取 粉碎的饲料样品于加入 20ml 乙酸乙酯， 2g 抗坏血酸，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于 3000r/min 离心 10min，将上清液移出，残渣中再加乙 酸乙酯 20ml，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于3000r/min 离心 10min，将上 清液移出。残渣中加乙酸乙酯20ml 再重复提取一次，三次上清液合并，备用。 、 LCLC LC LC- -MSMS MS MS 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚浓缩净化条件的确定 浓缩净化条件的确定 浓缩净化条件的确定 浓缩净化条件的确定 水产品样品脂肪含量通常很高，饲料样品成分复杂，其中微量成分的准确测 定，不仅要提取充分，还要经过浓缩净化。准备从两个不同方向进行净化条件的 实验，比较得到理想的浓缩净化方法。 使用 SPE 小柱进行净化。通过对不同的 SPE 小柱、流速、过柱溶液、洗 脱试剂等方面比较优化。 由于己烯雌酚属多酚类化合物，呈酸性，易溶于稀碱水溶液，调整 pH 又能溶于适当极性的有机溶剂，因此，可在提取后调整 PH，采用液液萃取法净 化，同时己烯雌酚易氧化，可考虑加入防氧化剂提高净化效率 (1)水产品中己烯18 / 26 雌酚的净化： 分别利用酸性氧化铝柱、中性氧化铝柱、低碳 C18 柱，高碳 C18 柱，对提取 液净化，净化效果理想，但样品加标回收率较低，考虑到直接测定回收率较高， 分离效果较好，对仪器污染较低，检测成本也 能降低，故选择取 10ml 定容提取 液氮吹吹干，用 1ml80%甲醇溶解后，过 滤膜上机测定。 (2)饲料中己烯雌酚的净化： 液液萃取法净化：将提取液转入鸡心瓶中，于 50 旋转负压蒸干，分别 用 30， 20，20ml 三 氯 甲 烷 洗 入 150ml 分 液 漏 斗 中 ， 加 入10ml1mol/LNaOH 溶液， 抗坏血酸，震摇 30s，弃去有机相。然后用 20ml 三氯甲烷洗涤水相 3 加入 1mol/L 的碳酸氢钠溶液将 pH 调至，再用 30， 20， 20ml 三氯甲烷萃取三次，每次震摇 30s，将己烯雌酚回提至三氯甲烷中，令 三氯 甲烷通过无水硫酸钠干燥，将干燥过后的三氯甲烷溶液于 用5ml80%甲醇溶解后，过滤膜上机测定。 SPE 小柱净化：将提取液转入鸡心瓶中，于 50 旋转负压蒸干，用 2ml30 甲醇洗涤转入 7ml 离心管中。依次用 1ml 乙酸乙酯， 1ml 甲醇，活化 SPE 小柱。 1ml20甲醇平衡， 1ml 水保持湿润。加入样品，1ml30甲醇洗涤。正压挤干水 分，用 5ml80%甲醇洗脱，洗脱液过 滤膜待测。 、方法性能检验方法性能检验 方法性能检验 方法性19 / 26 能检验 (1)方法检出限：饲料和 水产品中的己烯雌酚经提取、净化和仪器分离测定 的最低检出限。以 3 倍噪音量的信号为准， LC-MS 的最低检测限可达 /g。 (2)方法回收率、变异系数： 回收率 样品类别 添加量 测定次数 均值 变异系数 鱼配合饲料 100ng/g 浓缩饲料 50ng/g 预混合饲料 150ng/g 甲鱼 20ng/g 己烯雌酚回收率：饲料中 85；水产品中 80，变异系数10。 )项目项目 项目 项目取得的研究成果 取得的研究成果 取得的研究成果 取得的研究成果 形成一套利用LC-MS 测定水产品及饲料中己烯雌酚的方法。 该方法技术指标 己烯雌酚最低检测限 ng/ml。 己烯雌酚回收率：饲料中 85；水产品中 80。 精密度：变异系数 10 、技术创新点和技术解决方案技术创新点和技术解决方案 技术创新点和技术解决方案 技术创新点和技术解决方案 (一 )技术创新点 1、能同时定性定量测定水产品、饲料中己烯雌酚残留。 2、 LC-MS 法能快速、准确的测定水产品及饲料中己烯雌酚 (二 )关键技术解决方案 、 LCLC LC LC- -MSMS MS MS 测定己烯雌酚的 测定己烯雌酚的 测定己烯雌酚的 测定己烯雌酚的 UPL UPL UPL UPLC CC 和和和 MS MS MS MS 参数的确定 参数的确定 参数的确定 参数的确定 己烯雌酚检20 / 26 测的质谱条件：根据三离子原则，用 m/z267,251 和 237 配合保留时间确认己烯雌酚的存 10ug/mLDES 标准溶液机械泵进 MS 检测器，用 SCAN 模式，测得己烯雌酚 准分子离子峰在 m/z267，在 MRM 模式下，得出信号最强的两个离子碎片 m/z251， m/z237。 己烯雌酚准分子离子峰 m/z267 己烯雌酚两个离子碎片 m/z251， m/z237。 质谱参数： 己烯雌酚属于酚类化合物，所以离子源为负离子源，用 1ug/mL 标准 溶液调谐 MS 参数。经过调谐，得出离子丰度最大的质谱参数： 毛细管电压 3KV ，离子源温度 110，脱溶剂气温度 300，脱溶剂气流量 600L/h，锥孔气流量 50L/h。 扫描方式为多反应检测 (MRM)，负离子方式。用于定量分析的离子为 m/z267 237,锥孔电压 40v 和碰撞能量 28eV，定性分析离子 m/z267251, 锥孔电压 40v 和碰 撞能量 25eV，分析时氩气流量 /min。 己烯雌酚检测的 UPLC 色谱条件 UPLC 系统使用Waters 超高效液相色谱柱； 流动相的选择及优化：由于使用 ESI-作为离子源，必须保证流动相不能含 有抑制分子电离的因子，乙腈和甲醇是最优先的选择。乙腈毒性较大，价格也远 高于甲醇，选甲醇作为流动相。在 UPLC 系统对甲醇水进行优化得到最佳洗脱 方式： 甲醇水梯度洗脱，21 / 26 01min， 15 30， 12min， 30 70 ， 23min， 30 15%；柱温： 30；流速 /min；进样量： 10l。 、 LCLC LC LC- -MSMS MS MS 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚主要指提取剂与提取方法的确定与优化 主要指提取剂与提取方法的确定与优化 主要指提取剂与提取方法的确定与优化 主要指提取剂与提取方法的确定与优化。 (2)饲料属于成分非常复杂的混合物，必须用足量有机试剂提取，并且保证己烯雌酚不被氧化。提取试剂主要在甲醇、乙腈、乙酸乙酯、乙醇与三氯甲烷等 有机试剂及混合液选择。在提取实验中，乙酸乙酯提取效率最高，有 90以上 的提取效率。 (3)提取方法主要为均质，超声提取，实验标明在充分混匀时，有机试剂超 声提取能有效提取出水产品及饲料中己烯雌酚。 提取试剂效率实验：分别在水产品和饲料中加入10g/g 水平的己烯雌酚， 混匀，做提取效率实验。 水产品中，各提取试剂的提取效率 提取试剂 提取次数 提取效率 甲醇 乙酸乙酯 乙醇与三氯甲烷 饲料中，各提取试剂的提取效率 提取试剂 提取次数 提取效率 甲醇 乙酸乙酯 乙醇与三氯甲烷 经提取实验后，得出 LC-MS 测定己烯雌酚的提取方法 水产品中己烯雌酚的提取： 搅碎水产22 / 26 品于 50ml 离心管中，加入 10ml 乙酸乙酯，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于 3000r/min 离心 10min，将上清液移出，残渣中再加乙 酸乙酯 10ml，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于 3000r/min 离心 10min，将上 清液移出，将两次上清液合并，如有混浊，再次离心 5min。将合并的上清液用 乙酸乙酯定容于 25ml 容量瓶中，备用。 饲料中己烯雌酚的提取： 称取 粉碎的饲料样品于加入 20ml 乙酸乙酯， 2g 抗坏血酸，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于 3000r/min 离心 10min，将上清液移出，残渣中再加乙 酸乙酯 20ml，漩涡混匀 2min，超声提取 5min，于3000r/min 离心 10min，将上 清液移出。残渣中加乙酸乙酯20ml 再重复提取一次，三次上清液合并，备用。 、 LCLC LC LC- -MSMS MS MS 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚 测定己烯雌酚浓缩净化条件的确定 浓缩净化条件的确定 浓缩净化条件的确定 浓缩净化条件的确定 水产品样品脂肪含量通常很高，饲料样品成分复杂，其中微量成分的准确测 定，不仅要提取充分，还要经过浓缩 净化。准备从两个不同方向进行净化条件的 实验，比较得到理想的浓缩净化方法。 使用 SPE 小柱进行净化。通过对不同的 SPE 小柱、流速、过柱溶液、洗 脱试剂等方面比较优化。 由于己烯雌酚属多酚类化合物，呈酸性，易溶于稀碱23 / 26 水溶液，调整 pH 又能溶于适当极性的有机溶剂，因此，可在提取后调整 PH，采用液液萃取法净 化，同时己烯雌酚易氧化，可考虑加入防氧化剂提高净化效率 (1)水产品中己烯雌酚的净化： 分别利用酸性氧化铝柱、中性氧化铝柱、低碳 C18 柱，高碳 C18 柱，对提取 液净化，净化效果 理想，但样品加标回收率较低，考虑到直接测定回收率较高， 分离效果较好，对仪器污染较低，检测成本也能降低，故选择取 10ml 定容提取 液，氮吹吹干，用 1ml80%甲醇溶解后，过 滤膜上机测定。 不同小柱净化对水产品中己烯雌酚回收率的影响 柱子类型 测定次数 回收率 (%) 酸性氧化铝柱 中性氧化铝柱 低碳 C18 高碳 C18 不净化直接氮吹上机 (2)饲料中己烯雌酚的净化： 液液萃取法净化：将提取液转入鸡心瓶中，于 50旋转负压蒸干，分别 用 30， 20， 20ml 三