（人体解剖与组织胚胎学专业论文）正常壁虎（gekko）脊髓基本结构及其损伤后再生的基础研究.pdf

南通大学学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下( 或 我个人) 进行研究工作所取得的成果除文中已经注明引用的内 容外，本论文不合任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果。 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在论文中作了明确的 说明并表示了谢意。本声明的法律结果由本人承 学位论文作者签名： 5 月8 日 学位论文出版授权书 本人完全同意中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程 ( 以下简称“章程”) ，愿意将本人的学位论文提交“中国学术期刊( 光 盘版) 点子杂志社”在( ( 中国优秀博硕士学位论文全文数据库中全 文发表。中国优秀博硕士学位论文全文数据库可以以电子、网络及 其他数字媒体形式公开出版，并同意编入 中国知识资源总库；在( ( 中 国博硕士学位论文评价数据库中使用和在互联网上传播，同意按“章 程”规定享受相关权益。 作者签名：导师签名：塑 2 0 0 6 年5 月8 日2 0 0 6 年5 月8 日 j，、f磐年碥| ； 关于论文使用授权的说明 本人完全了解南通大学有关保留、使用学位论文的规定，即： 学校有权保留、送交论文的复印件，允许论文被查阅，学校可以 公布论文的全部或部分内容，可以采用影印或其他复制手段保存 论文 导师签名：弓乏哦尥 论文作者签名：捌一 日 期：2 0 0 6 年5 月8 日 缩略词表 英文缩写 b f g f b s a b r d u c c c k 8 1 8 c n s e m g 哑心 h e i g m l n 匝f n f o c t p b s p n s s s c i w 缩略词表( a b b r e v i a ti o n ) 英文全称 b a s i cf i b r o b l a s tg r o w t hf a c t o r b o v i n es e r u ma l b u m i n 5 - b r o m o d e o x y u r i d i n e c e n t r a lc a n a l c y t o k e r a t i n8a n d18 c e n t r a ln e r v o u ss y s t e m e l e c t r o m y o g r a p h y g l i a lf i b r i l l a r ya c i d i cp r o t e i n h e m a t o x y l i n - - e o s i n i m m u n o g l o b u l i n m i n u t e m e d i c a ll o n g i t u d i n a lf a s c i c u l u s n e u r o f i l a m e n t o p t i c u a lc u t t i n gt e m p e r a t u r e p h o s p h a t eb u f f e rs o l u t i o n p e r i p h e r a ln e r v o u ss y s t e m s e c o n d s p i n a lc o r di n j u r y w e e k 中文全称 碱性成纤维细胞生长因子 牛血清白蛋白 5 溴脱氧尿嘧啶 中央管 角蛋白8 1 8 中枢神经系统 肌电图描记 胶质纤维酸性蛋白 苏木精一伊红 免疫球蛋白 分钟 内侧纵束 神经丝 冰冻切片包埋剂 磷酸盐缓冲液 周围神经系统 秒 脊髓损伤 周 中文摘要 正常壁虎脊髓基本结构及其损伤后再生的基础研究 硕士研究生：杨慧 中文摘要 导师：顾晓松教授 丁斐教授 目的研究正常壁虎( g e k k o ) 脊髓基本形态，以及在断尾和脊髓横断损伤 后脊髓形态学改变，观察低等脊椎动物脊髓再生的形态学变化过程。 方法通过对5 只正常壁虎脊髓冰冻切片进行h e 及n i s s l 染色，观察各脊 髓节段的基本形态，测量和统计各脊髓节段横截面矢状径、横径、 灰质、白质、灰白质比以及中央管周围细胞的数量。在第5 、6 尾髓 之间横断损伤以及第1 0 腰髓横切损伤，通过对脊髓纵切面组织的 h e 染色、b r d u 标记、免疫组织化学染色、运动终板染色观察脊髓 再生形态学变化，并观察后肢运动功能恢复状况。 结果( 1 ) 正常壁虎脊髓基本形态：成体壁虎脊髓充满整个椎管，分为颈、 胸、腰、荐、尾几个节段( c 8 ，t 5 ，l 1 3 ，s 2 ，c 0 2 7 3 3 ) ；各脊髓节段横 截面矢状径和横径相差较大，c 5 为脊髓矢状径最大的节段，l 11 为 脊髓横径最大的节段；在颈、腰膨大处灰、自质之比值( g m w m ) 较大；中央管周围细胞以腰膨大处数量最多。 ( 2 ) 壁虎断尾损伤后形态学改变：在损伤处脊髓灰质、白质和中央 管周围均观察到b r d u 阳性细胞；室管膜细胞的增殖反应局限于近损 伤处脊髓节段，并可迁移封闭损伤末端，形成顶囊状结构；3 - 5 尾 髓室管膜细胞数量，在断尾损伤后2 w 达到最大值，随后开始下降， 4 w 后基本恢复至正常值。 ( 3 ) 壁虎l 1 0 脊髓横切损伤后形态学改变：损伤节段脊髓室管膜细 胞发生增殖反应，b r d u 标记阳性；脊髓损伤1 w 后，灰质及白质组 织中均有g f a p 免疫组织化学染色阳性细胞；脊髓损伤后4 w ，缺损 中文摘要 处有新生的结缔组织修复，并且观察到n f 染色阳性的纤维；两断端 中央管重新连接；动物后肢运动功能明显的恢复，腓肠肌运动终板 染色恢复呈阳性。 结论( 1 ) 本实验对正常壁虎脊髓形态的矢状径、横径、灰白质比、中央 管周围细胞的数量等特征性参数进行了测量和统计，为研究壁虎脊 髓再生过程中形态学改变提供了基础。 ( 2 ) 壁虎断尾损伤后脊髓可以再生，而且可能与室管膜细胞的增殖 和迁移有关。 ( 3 ) 脊髓横切损伤后，室管膜细胞发生明显增殖反应，损伤处缺损 得以修复，动物后肢运动功能部分得到恢复。 关键词脊髓再生；壁虎( g e k k o ) ；室管膜细胞 英文摘要 m o r p h o l o g i c a ls t u d yo fn o r m a lg e k k os p i n a lc o r da n dr e g e n e r a t i o n a f t e ri n j u r y m a s t e rc a n d i d a t e ：y a n gh u i s u p e r v i s o r ： g ux i a o s o n gp r o f e s s o r d i n gf e i p r o f e s s o r a b s t r a e t o b j e c t i o n ：t oi n v e s t i g a t e t h eb a s i cf o r mo fn o m a lg e k k o a n dt h e m o r p h o l o g i c a lc h a n g ea f t e rt a i la m p u t a t i o no rs p i n a lc o r dt r a n s e c t i o n ，t o d i s c u s st h e m o r p h o l o g i c a ld e v e l o p m e n to fl o w e rv e r t e b r a t es p i n a lc o r d d u r i n gr e g e n e r a t i o n m e t h o d s ：t of i n dt h em o r p h o u so f e a c hs e g m e n t so fs p i n a lc o r d h es t a i na n d n i s s ls t a i nw e r eu s e dt os t u d ys p i n a lc o r df r o z e ns e c t i o no f5n o r m a lg e k k o s a g i t t a l a n dt r a n s v e r s ed i a m e t e r so fe a c hs e g m e n t ，a n dt h en u m b e ro f e p e n d y m a lc e l l sa r o u n dc e n t r a lc a n a lo ft h es e g m e n tw e r em e a s u r e d ，a sw e l la s t h es i z eo fg r e ym a t t e r w h i t em a t t e ra n dt h e i rr a t i o ( g r n w m ) t h et a i lw a s a m p u t a t e da tt h el e v e lo f6 t hs e g m e n t a n dt h e1o t hs e g m e n to fl u m b e rc o r e w a st r a n s e c t e df o rt h es p i n a lc o r di n j u r ye x p e r i m e n t h es t a i n b r d us t a i n i m m u n o h i s t o c h e m i s t r y m o t o re n dp l a t es t a i na n di m a g ea n a l y s i sw e r eu s e di n l o n g i t u d i n a l s e c t i o no fs p i n a lc o r df o rt h e i r m o r p h o u sc h a n g ed u r i n g r e g e n e r a t i o n ，b e s i d e s ，h i n dl i m bm o t o rf u n c t i o nw a sa l s om e a s u r e d r e s u l t s ：f 1 ) n o r m a lg e k k os p i n a lc o r df i l l st h ee n t i r ev e r t e b r a lc a l l a la n ds h o w s n oe v i d e n c eo ff o r e s h o r t e n i n g i ng e k k o t h es p i n a lc o r di n c l u d s8c e r v i a l s e g m e n t s ，5t h o r a c os e g m e n t s ，13l u m b e rs e g m e n t s ，2s a c r a ls e g m e n t s ，a n d 2 7 - 3 3c a u d a ls e g m e n t s ( c 8 ，t 5 ，l1 3 ，s 2 ，c 0 2 7 3 3 ) t h es a g i t t a ld i a m e t e rw a s l a r g e s ta ts e g m e n tc 5 ，a n dt h et r a n s v e r s ed i a m e t e rw a sl a r g e s ti ns e g m e n tl1 1 ， t h es a g i t t a la n dt r a n s v e r s ed i a m e t e ro fe a c hs e g m e n tc h a n g ed i s t i n c t l yw i t ht h e s e g m e n t g r n w mw a sl a r g e s ta tt h ec e r v i c a la n dl u m b a re n l a r g e m e n t sa n dt h e 1 u m b a re n l a r g e m e n th a dt h el a r g e s ta m o u n to fe p e n d y m a lc e l l s ( 2 ) a f t e rt a i la m p u t a t i o n ，b r d up o s i t i v en u c l e iw e r ef o u n di ng r e ym a t t e r , w h i t em a t t e ra n de p e n d 3 7 m a lt u b e e p e n d y m a lc e l l sp r o l i f e r a t e di nt h ec a u d a l s t u m p sa n dm i g r a t ei n t ot h el e s i o ns i t e n em i g r a t i n ge p e n d y m a lc e l l ss e a lo f f 4 一 j 英文摘要 t h ed a m a g e dc o r ds t u m pf o r m i n gt h et e r m i n a lv e s i c l e 1 1 1 en u m b e ro f e p e n d y m a lc e l l si nc 0 3 5s e g m e n t sw a sl a r g e s ta t2w e e k sa f t e rt a i la m p u t a t i o n , a n dd e c r e a s e dp r o g r e s s i v e l yt on o r m a la t4w e e k sa f t e rt a i la m p u t a t i o n ( 3 ) a f t e rt r a n s e c t i o no fl o t hl u m b a rc o r e ，b r d up o s i t i v en u c l e iw a sf o u n d i nt h ee p e n d y m a lt u b e ，1 wa f t e rt h et r a n s e c t i o n ，g f a pp o s i t i v ec e l l sw e l e f o u n db o t hi nw h i t em a t e ra n dg r e ym a t e ri nt h el e s i o ns i t e 4 wa f t e r t r a n s e c t i o n , n e o f o r m a t i v ec o n n e c t i v et i s s u ea p p e a r e di nt h el e s i o ns i t ea n dn fp o s i t i v e n e u r o f t b r aw a sf o u n d t h ec u te n do fe e n t r a lc a n a lr e c o n n e c t e d ，m e a n w h i l e m o t o rf u n c t i o no fh i n dl i m br e c o v e r e d 。g a s t r o c n e m i u sm o m re n dp l a t es t a i n w a sp o s i t i v e c o n e l u s i o n s ：( 1 ) w ef o u n dc h a r a c t e r i s t i co ft h ep a r a m e t e r sm e a s u r e di ng e k k o s p i n a lc o r d t h e s em e a s u r e m e n t so fs p i n a lc o r ds e g m e n t sa p p e a rt op r o v i d e v a l u a h l ea n dp r a c t i c a ls t a n d a r dq u a n t i t a t i v ef e a t u r e sa n dm a yp r o v i d eb a s i c d a t af o ru n d e r s t a n d i n gt h em o r p h o m e t r i ec h a r a c t e r i s t i c sr e l e v a n tt oe a p a c i t vo f t h es p i n a lc o r dr e g e n e r a t i o n ( 2 ) a f t e rt a i la m p u t a t i o n ，g e k k o ss p i n a lc o r dc a l lr e g e n e r a t e ，t h e r ei sa s t r o n gp r o l i f e r a t i o no fe p e n d y m a lc e l l s ，w h i c hi ss u p p o s e dt ot a k eab i gr o l ei n s p i n a lc o r dr e g e n e r a t i o n ( 3 ) a f t e rs p i n a l c o r dt r a n s e c t i o n ，t h e r ei sa s t r o n gp r o l i f e r a t i o no f e p e n d y m a lc e l l s ，t h ec u tg a pc a nb er e f i l l e d ，m e a n w h i l e , t h er e c o v e r yo f m o t o rf u n c t i o no f h i n dl i m bw e r ef o u n d k e yw o r d s ：s p i n a lc o r dr e g e n e r a t i o n ，g e k k o ，e p e n d y m a lc e l l s 引言 引言 脊髓作为中枢神经系统( c n s ) 的一部分，不但是支配肢体运动、感 觉、内脏活动的低级中枢，而且是联系高级神经中枢即大脑和外周神经系 统的关键结构。传统观念认为，成体中枢神经系统损伤不能再生，脊髓损 伤( s c i ) 后由于局部缺乏合适的微环境，损伤的神经元无法再生。s c i 是指创伤本身造成的灰质和白质受损，神经通路中断和继发性s c i 。继发 s c i 是指创伤引起了局部一系列生化改变，使组织缺血、缺氧，膜脂质过 氧化，最终导致脊髓细胞死亡，退变，上、下行纤维传导中断。 s c i 具有高发生率，高致残率，高耗费，低死亡率等特点，且患者多 为青壮年，丧失劳动能力，s c i 患者生活质量极低，使家庭，乃至于社会 承受着巨大的经济和精神负担。近年来，随着交通和建筑业的发展，s c i 的发生率每年都在上升，据统计资料显示，在美国原发性s c i 发病率约4 0 例1 0 0 万，每年新增加将近1 1 0 0 0 例，用于s c i 治疗的费用超过6 0 亿美 元，平均每个瘫痪病人的终身治疗费用约1 0 0 万美元。 由于神经组织结构的特殊性以及损伤导致的一系列病理变化，使得 s c i 的治疗进展缓慢，除了急性期内的临床复位固定手术外，只有使用一 些神经营养因子，或做康复训练治疗，但均不能恢复病人的正常生理功能。 几十年来，各国神经科学家努力不懈地攻克这一医学上的难题，对于脊髓 横断性损伤仍有大量研究。 1 9 5 6 年w i n d l e 曾对2 5 年来这方面的研究材料做过综述，总的印象是 低等脊椎动物( 鱼类、两栖类) 的脊椎被切断后有再生现象，特别是胚胎时 期比幼体和成体更为明显。但在成体哺乳类却没有发现真正的再生。高等 脊椎动物胚胎期脊髓损伤后可以再生，发育5 天的鸡胚脊髓横切损伤后4 8 小时，轴突可以穿越损伤处生长。s h i m i z u 等人发现，鸡的脊髓再生可以 发生于胚胎发育的第1 5 天，而脑干一脊髓神经元纤维投射损伤的再生局 限于胚胎第1 3 天内。将胚胎1 4 1 6 天的胚胎期脊髓移植入出生1 天的新生 大鼠脊髓缺损处，可以发现由脑干长出的轴突穿过损伤处组织到达腰膨 大。这表明高等脊椎动物中枢神经系统再生可以在严格的时间窗内发生， 在不同的发育时期，促进神经再生和抑制神经再生的因素存在差异，对脊 引言 髓再生的促进作用和抑制作用发生变化。 然而，在成年低等脊椎动物，中枢神经再生的机制仍然是悬而未决的 问题，以往的研究表明，低等脊椎动物允许脊髓再生的内在因素是非常复 杂的，经过多种实验证明，脊髓再生有四个特征：( 1 ) 轴突再生；( 2 ) 保留神 经发生的能力；( 3 ) 利于神经再生的胶质细胞反应；( 4 ) 保留或重新形成“胚 性”的营养环境。 对低等脊椎动物中枢神经再生的研究旨在发现其再生的机制与哺乳 动物的不同之处，阐明信号系统、转录因子及其效应产物，能够为哺乳动 物乃至人类的中枢神经系统再生提供借鉴，如生产具有治疗价值的蛋白， 发现药理学可以干预的通路等等。一旦掌握了允许脊髓再生的内在机制， 科学家们就可提出全新的治疗方法，应用于人类脊髓再生，为众多s c i 患 者带来康复的曙光。 第一部分 第一部分正常壁虎( g e k k o ) 脊髓基本形态初步研究 材料和方法 1 材料 1 1 动物 实验用动物捕获自野生环境，经鉴定为多疣壁虎( g e k k o j a p o n i c u s ) 。 选择成年正常壁虎5 只，体重3 0 5 克，全长约1 0 厘米，无断尾或其他 损伤，雌雄不限。 1 2 试剂 ( 1 ) 4 多聚甲醛：多聚甲醛4 0 9 加d d h 2 0 4 0 0 m l ，加热至7 0 c 左右， 用1 m n a o h 调p h 至7 0 ，用d d h 2 0 定容至5 0 0m l ，再加0 2 mp b5 0 0m l ， 总体积为1 0 0 0m l 。 ( 2 ) o c t ( s a k i au s a ) 1 3 实验仪器 ( 1 ) 冰冻切片机( l e i c a 公司)， ( 2 ) 显微镜( l e i c a 公司) 2 方法 2 1 取材 动物经低温冰浴处理后，打开胸腔，暴露心脏，分别用生理盐水和4 多聚甲醛完成灌流固定( 有效灌注量大于动物体重的2 倍) 。动物固定后 去除表面皮肤及软组织，充分暴露椎管，剥离骨组织，取出完整脊髓，供 以下实验使用。 2 2 标本处理及冰冻切片 将所取的上述实验材料立即放入新鲜配制的4 多聚甲醛后固定4h ， 0 i mp b s 漂洗3 次后转移至3 0 蔗糖p b 溶液中。冰冻切片( 2 0 岬厚) ， 贴于明胶包被的载玻片上。 2 3h e 染色 ( 1 ) 水洗3 - 5 m i r a ( 2 ) h a r r i s 苏木素液5 m i n ；( 3 ) 水沈；( 4 ) 0 5 盐酸酒精分色；( 5 ) 水洗蓝化1 5 3 0r a i n ；( 6 ) 7 0 乙醇5m i n ；( 7 ) 8 0 乙醇5m i r a ( 8 ) 伊红液( 9 5 乙醇溶液) 3 - 3 0s ；( 9 ) 9 5 乙醇i5m i n , 第一部分 ( 1 0 ) 9 5 乙醇1 1 5m i r a ( “) 1 0 0 乙醇i5m i n ；( 1 2 ) 1 0 0 乙醇5m i n ； ( 1 3 ) 二甲苯+ 乙醇( 1 ：1 ) 5m i n ；( 1 4 ) 二甲苯i5m i n ；( 1 5 ) 二甲苯 1 1 5m i n ；( 1 6 ) 二甲苯i5m i n( 1 7 ) 中性树胶封片。 2 4 n i s s l 染色 ( 1 ) 水洗3 5m i r a ( 2 ) 焦油紫液1 5 m i n( 3 ) 水洗；( 4 ) 7 0 乙 醇5 m i n ；( 5 ) 8 0 乙醇5 m i n ；( 5 ) 9 5 乙醇i5 m i r a ( 6 ) 9 5 乙醇1 1 5m i r a ( 7 ) 1 0 0 乙醇i5 m i r a( 8 ) 1 0 0 乙醇1 1 5 m i n ；( 9 ) 二甲苯+ 乙醇( 1 ： 1 ) 5m i n ：( 1 0 ) 二甲苯i5m i n ；( 1 1 ) 二甲苯1 1 5m i n ；( 1 2 ) 二甲苯i i i 5m i n ；( 1 3 ) 中性树胶封片。 2 5 图像处理、测量及数据分析：应用l e i c aq w i n 图像处理软件测量各 脊髓节段横截面矢状径、横径、及灰、白质面积，测量值通过s t a t a 7 o 统 计软件计算均值和标准差。 9 第一部分 结果 1 正常壁虎脊髓形态 壁虎脊髓充满整个椎管，脊柱长度与脊髓的节段完全相对应。壁虎脊 髓呈扁圆柱状，有明显的背侧正中间沟和腹侧正中裂，两侧有脊神经根相 连。脊髓节段的划分如下：8 个颈髓节段( c ) 、5 个胸髓节段( t ) 、1 3 个 腰髓节段( l ) 、2 个荐髓节段( s ) 以及2 3 3 个尾髓节段( c o ) i l8 】。颈、 腰膨大明显，颈膨大节段位于第5 7 颈髓，腰膨大位于第1 0 1 2 腰髓( 如 图1 n i s s l 染色和图2 h e 染色) 。自c 4 开始有脊神经发出，c 5 - 8 发出脊 神经形成臂丛神经支配前肢；l 1 0 1 3 发出脊神经形成腰丛神经支配后肢。 正常壁虎各脊髓横截面形态如图1 和图2 所示。脊髓形态在颈髓节段 矢状径较长，呈三角形。上颈段( 颈膨大前的脊髓节段) 脊髓横截面矢状 径相对较长，颈膨大脊髓节段横截面横径明显变大。h e 染色和尼氏染色 可见呈“h ”形的灰质，两侧形状相等。各脊髓平面灰质形态不尽相同， 一般前角比后角宽大，尤以颈、腰膨大处明显。前角不似高等哺乳动物短 宽且钝，而呈椭圆形，较长，内含大量运动神经元，颈膨大处前角可见运 动神经元整齐排列在一条直线上( 如图3 ，b ) 。所有脊髓节段后角均比前 角短，灰质细胞数量较前角少，而且细胞体积也较小，可见较多胶质细胞。 白质主要由纵行和横行的纤维束组成，其间散在分布较多胶质细胞，白质 边缘处尤其多见。脊髓灰质联合为后联合，灰质前联合缺失( 如图3 ，c ) ， c 1 节段灰质联合细胞数量最多，随后灰质联合细胞数量逐渐减少，至颈膨 大处最小，以后的脊髓节段中灰质联合数量又逐渐增加，直至腰膨大减少。 中央管位于灰质联合腹侧端，与白质的内侧纵束( m l f ) 【2j 相邻。h e 和 n i s s l 染色可见以中央管为中心有呈放射状排列的室管膜细胞，胞核深染 ( 如图3 ，d ) 。 胸段和上腰段脊髓横截面形态相似，均较小，呈半圆形。脊髓灰质面 积小，神经元数量较少，灰质后联合细胞数量较多。 腰膨大脊髓节段l 1 0 1 2 横截面横径显著增大，呈梯形，灰质面积增大， 灰质细胞增多，有大运动神经元排列于脊髓前角，灰质后联合细胞数量减 少，中央管周围深染的室管膜细胞数量增多。 荐骸和尾髓横截面又恢复成近三角形，灰质神经元数量较少。 第一部分 2 图1 ，正常壁虎各脊髓节段横截面n i s s l 染色。脊髓形态在颈髓节段矢状径值较大，呈 三角形，到胸髓和上腰段脊髓逐渐改变呈半圆形，至腰膨大脊髓节段横径显著增大， 呈梯形，骶髓和尾髓又恢复呈近三角形。b a 产1 0 0 口m 第一部分 图2 正常动物脊髓组织横截面h e 染色。图a ，颈髓，呈三角形，矢状颈较大，灰质前 角有较多大运动神经元，后角多胶质细胞；图b ，胸髓，横截面积较小，呈半园形，横 径较大，灰白质细胞均较少；图c ，腰髓，腰膨大处脊髓横截面积最大，灰白质细胞较 多，尤其中央管细胞较其它脊髓节段多；图d ，尾髓，横径较大，灰质细胞较少。 第一部分 图3 正常脊髓横截面n i s s l 染色。图a ，颈髓，灰质有较多深染神经元，白质中散在分 布胶质细胞；图b ，颈膨大，前角运动神经元排列整齐；图c ，颈髓，可见较宽的灰 质联合，灰质前联合缺失；图d ，颈髓中央管，细胞数量较多，核深染。 2 测量及统计结果 对5 套全脊髓横截面连续冰冻切片进行n i s s l 染色，分别测量脊髓横 截面最大横径( t r a n s v e r s ed i a m e t e r ) ，最大矢径( s a g g i t a ld i a m e t e r ) ，灰质面 积( g r a y m a t t e r a r e a ) ，白质面积( w h i t e m a t t e r a r e a ) ，以及中央管周围细胞 计数统计，并计算灰、白质比( g n n w m ) 。 整个脊髓横截面矢状径，横径，灰白质面积都有相同的变化趋势，都 在颈腰膨大处相对较大，胸段和上腰段值较小。横径的变化比矢状径更大， 颈膨大处以白质增大为主，而腰膨大处则以灰质面积增大为主。荐、尾段 脊髓因横截面积较小，所以以上各值均较小，但是灰、白质面积比值比胸 段和上腰段大。各脊髓节段横截面上述统计指标均值和标准差如图4 和表 格所示。 颈髓横径值最大的节段为c 6 ，均值为1 1 3 1 。0 6 1 1 1 2 。1 6 7 6 ( 弘m ) ；c 5 节段矢状径最大，均值为7 0 8 0 6 9 1 + 7 1 7 2 6 3 1 ( p m ) ，c 5 为全长脊髓矢状 径最大的脊髓节段；颈髓最大灰、白质面积位于c 6 节段，均值为1 9 5 4 1 0 2 1 3 3 3 4 6 3 ( 舯) ，最大白质面积均值为4 4 5 7 5 7 9 8 4 4 0 1 7 6 ( 胂) 。 腰髓横径、矢状径灰、白质面积最大脊髓节段为l 1 1 。横径均值为 1 1 5 7 1 7 1 8 4 8 6 2 6 4 ( 口m ) ，l 1 l 是脊髓全长横径最大的脊髓节段；矢状径均 值为5 9 4 9 5 2 7 + 5 8 3 3 8 0 1 ( 胂) ；灰质面均值为1 9 5 2 6 8 1 1 2 2 7 7 7 3 ( 胛2 ) ； 白质面积均值为3 9 3 3 5 5 8 5 3 7 2 6 1 8 ( 舯2 ) 。 在颈膨大和腰膨大处灰质和白质之比值( g m w m ) 较大，在l 1 3 脊髓 第一部分 节段比值达最大，均值为0 5 3 7 0 4 8 + 0 0 8 1 9 1 7 2 。 中央管周围室管膜细胞以腰膨脊髓节段数量最多，最大值处为l 1 2 ， 平均值为3 2 9 1 8 3 1 1 5 1 7 6 。 1 0 0 0 一 d g i t t t ld i a - 1 。t c r l 藿1 4 0 0 睡泌 8 0 0 孙i f 蠢矽嘏 i 蒜体：移爵魄 4 。0 ：【 01 5 0 0 0 0蚶 ：4 0 0 0 0 0 一 h a o 。名宅譬乞召军筝曷= 葺葺曼量- ”墨b 暑言宰譬掌蜀= 兽霉曼曼 1 t o l l l # 6 0r 一| | | 燃童宝躺 趟 呈篓醅黼絮磷黼 e 聍- - 1 0 i 图4 对5 只不同正常壁虎脊髓横截面矢状径、横径、灰质面积、白质面积、狄白质面 积比以及室管膜细胞数量统计。 1 4 第一部分 表格：各脊髓节段横截面各统计指标均值和标准差。 脊髓节段矢捩径( p )横径“)襄虞面税( i j r ，白质面积( p ，)灰白质比中柬管周围细胞薮 c lm ( 3 1 l m 幅) l m t “( 1 1 9 i 口4 t m n m m ) m w ， m m t 日e 口4 口o id b w n 舢( 魁2 5 1 蛳6 2 缸册3 1 3 1 s i 5 7 5 1 6 | )4 l n o l ， 矩w “5 0 嚣 d 3 “1 1 4 ( s 2 5 蛳t 4 7 ( 1 1 45 l m il t c w 埘3 l ，2 t ) 4 1 删9 2l 佑m o ( a _ n 6 h能“5 l t m4 b 斯，1 8 “l 1 5 j 7 l 3 7 m 1 t 1 黜 q 婚l o 簋“b t 埘1 佛) 西蕊i 口，唧 l 岍9 懈瑚哪i 棚( 2 4 1 1 7 堋 q e5 ( i l m 6 一“i 伸”i 目)玎f sl a ) 7 眠札瑚l 1 1 3 1 l i 也l 删 麒地2f 1 3 m 辩) “踊70 8 i 1 榔“o * m ) 目蝴协w d 3 咀q i l 4 l 讯。蛳1 1 1 1 慨4ti 髓矩丁l 撇1( 1 0 i 5 )蜘懦咖蛸)矩m 7 ( m 螂 日 啪鳓舯删i ) - 瞳螂( 1 5 1 硎，l i 虼a 2 “ 3 ” 拍l l 7l * 0 7 ，e w q 椰，2 7 眈* 目嗍 5 “7 7 0 i 啪“1 r h b ( - 越础，螂 “l 辨2 1 2 2 m0 蝴僻，撕2 i 伸璃呻口l ”( 3 船 口 5 l ，”i 柚t 1 2 蛐l 叻t 见埘l m 1 1 1 4 1 5 l 目越2，煳7 “( 嘲 “l n 0 s 瑚， n盯州l 舒目l 胤姗瓯蚓啪”7 i 虬3 h 虼9 ( 口 w i hl 删3 磊“- t 日删 “# 倒t n蹦删m l 1 7 描位( 1 螂6 5 绻咖2q 2 ，w 0 h 口 她t ” 目蝴 q e i 口l l s 11 缸l i t 蜥哪 斟拈日 n4 t l ，0 1 3l 弭)螂1 坤( 1 4 l n 0 谯1 4 1 l 竹7 l 瑚盯嘲)m l ( 7 s l n ih 5 l ) 5 艚b( 州m 矩辨”犯g f 蚓m 研 5 5 8 1 “2 ) 6 弛gl0 觚蚺l 目n5哪瓶3 1 5 h 帆0 螂，2 4 帅og t l “1 3 u 4 4 7 “i ：娜口o 删 e 船咖7 * 舢2 ( 蛹铒，3 自9 ( 蛳l ，5 ( 哪“ h 0 蚺( 柚“* 鲫6 l 鲫槲) 御“i 脚6 7 ，i e 狮科3 删f 目船)7 9 1 2 t2 1 * m 3 7 】“h 1 3 f l 蜘慨“删飒f 魄“，t 0 ”l m l 甜，御i 封“f 嚣“，盏镕i f0 0 i $ ， 1 7 , j 滞旧7 m “口l 7 啪7 i q ( 蜘o 睨2 7 日0 ( 2 1 4 )”1 w ( m w 晰l扎辫“l * 船2 1 7 椭 7 i l5 i l 也3 唧挑 l 蛳76 4 l 埘6 j 9 ，1 5 2 1 1 3 0 0 i 1 | 4 )鹅掰 “i 晰) l 3 6 2 9 ( 1 1 00 5 ) 0 0 1 1 1 1 ( 辊3 辨2 il2 1 2 i1 9 l “2 9 1 ，3 t 7 2 9 1 0 6 1 0 1 ) 删( h $ 描 1 9 5 l n ( 5 1 1 1 1 4 ) 39 9 “l 照n 7 1 曲67 3 a o | 0 蚰3 2 6 4 1 49 ( 缁7 9 n 5 1 3 i ( 1 1 i i 嘶)口鲫( 35 * l i o6 2 ( 3 孵)1 1 2 7 删1 1 5 l 猢1 8 1 4 1 7 i 捌1 3 ，删j ( 1 2 9 l $ 1 4 8 7 ”0 6 4 6 7 3 0 )2 9 1 3 l 23 i ) l i i5 9 4 t 5 83 3 ”1 1 6 7 1 1 1 “2 “，1 * 0 i1 1 2 2 7 77 3 i 删bt n m l 8 目洲 3 l ? z lf ) 工工25 7 删洲j j8 j 川3 1 1 ( 7 74 t ni $ 1 7 l l4 【7 7 1 3 5 3 3 9 3 t 瑚”)5 i l lo 拟5 0 2 )3 29 1 8 ( 3 l i i 4 口t 瓣( 掘, l l t l )l ( n4 1 8 7 7 9 )l l i 船5l l 蛳0 ”2 5 洲5 3 5 5 m 1 1 )( l m7 2 )3 21 6 5 ( 2i b 3 i 辨h 3 ( 4 17 7 9 瑚5 w k 蝴* m 越 l n 5 w 9 “，5 l 删嘶)丛2 ( 7 1 1 1 1 m ) m m m l n ，l m i n 1 4 w m * 第一部分 讨论 人们希望从低等脊椎动物中枢神经具有再生能力的现象中得到启示， 为人类中枢神经损伤的修复提供新的思路和依据。 正常壁虎脊髓的基本形态结构是其中枢神经再生的解剖基础。如结果 所示，壁虎脊髓的基本结构与哺乳动物相似。颈膨大位于c 5 c 7 ，腰膨大 位于l i o l 1 2 ，颈髓横截面横径，灰、白质面积最大值都出现在c 6 脊髓 节段，c 5 是脊髓全长矢状径最大的脊髓节段，腰髓横截面矢状径，横径， 灰、自质面积最大值的脊髓节段位于l l l ，l l l 是脊髓全长横径最大的脊 髓节段；灰白质比值最大的脊髓节段位于l 1 3 。 从染色结果和测量统计结果都可以显示脊髓横截面矢状径、横径、灰 质面积、白质面积及其比值都有相同的变化趋势，这样的变化趋势与人类 脊髓相似【3 4 1 。壁虎不同的脊髓节段横截面矢状径和横径变化都很大，但 是脊髓横径比矢状径变化更大，颈、腰膨大脊髓节段主要由于横径较大， 颈膨大主要以白质面积增大为主，而腰膨大则主要以灰质面积增大为主， 故灰、白质面积比在腰膨大脊髓节段较大。 与高等哺乳动物脊髓基本结构不同是，壁虎的脊髓充满整个椎管，并 且持续到达尾部。中央管周围有呈典型排列的，深染的室管膜细胞。室管 膜细胞在腰膨大数量最多，高等哺乳动物与之相似。在同为低等脊椎动物 的蝾螈体内，室管膜细胞仍与软脑膜相连，与放射状胶质细胞相似1 5 j ，所 以也称室管膜胶质细胞。断尾损伤后，新生室管膜腔的形成历来被认为与 断端室管膜胶质细胞有关【6 】。对于成年哺乳动物而言，在脊髓内也存在少 量缓慢增殖的室管膜细胞，这些细胞在体外培养实验中表现出具有分化潜 能，被认为是神经干细胞l ”。 低等脊椎动物壁虎脊髓与高等哺乳动物脊髓结构上的相似点和差异 是我们研究其再生能力的切入点。我们的实验对正常壁虎脊髓形态的某些 特征性参数进行测量和统计。为研究壁虎脊髓再生过程中形态学改变提供 基础。 * 第一部分 2 3 4 7 8 参考文献 c i t r o n ，b a ，c ta 1 ，u p r e g u l a t i o no fn e u r o t o x i es e r i n ep r o t e a s e s ， p r o t h r o m b i n , a n dp r o t e a s e a c t i v a t e dr e c e p t o r1e a r l ya f t e rs p i n a l c o r d i n j u r y jn e u r o t r a u m a 2 0 0 0 1 7 ( 1 2 ) ：p 11 9 1 2 0 3 c r u c e ，w l ，t e r m i n a t i o no fs u p r a s p i n a ld e s c e n d i n gp a t h w a y si nt h e s p i n a lc o r do f t h et e g ul i z a r d ，t u p i n a m b i sn i g r o p u n c t a t u s b r a i nb e h a v e v o l ，1 9 7 5 1 2 ( 4 6 ) ：p 2 4 7 9 k o ，h y ，e ta 1 ，g r o s sq u a n t i t a t i v em e a s u r e m e n t so fs p i n a l c o r d s e g m e n t si nh u m a n s p i n a lc o r d ，2 0 0 4 4 2 ( 1 ) ：p 3 5 4 0 k a m e y a m a , t ，y h a s h i z u m e ，a n dg s o b u e ，m o r p h o i o g i cf e a t u r e so f t h en o r m a l