白血病免疫分型.ppt

白血病的免疫分型,一.急性白血病FAB分型：1976年提出,以形态为基础。,ALL,AML,M0微小分化型急性髓细胞白血病,原始细胞30%M1急性髓细胞白血病未分化型,原始细胞90%M2急性髓细胞白血病部分分化型，原始细胞30-89%M3急性早幼粒细胞白血病，异常早幼粒细胞30%M4急性粒单核细胞白血病，原始细胞30%，单核20-80%M5急性单核细胞白血病，原单+幼单30%M5a未分化型，原单细胞80%M5b部分分化型，原单细胞30%，有核红细胞50%M7急性巨核细胞白血病，原巨核细胞30%,L1以小细胞为主，大小一致L2以大细胞为主，大小不一L3以大细胞为主，大小一致,二.急性白血病的MIC分型：1985-1986提出MIC：MorphologyImmunologyCytogenitics,80年代免疫学研究的进展，单克隆抗体的大量涌现，利用特异的单抗可以明确区分ALL、AML及进一步鉴定亚型，对研究白血病的生物学特性，指导临床治疗及判断预后起着重要的作用,三.免疫分型的作用：1.区分ALL、AML：形态、组化难以诊断的病例（不典型、治疗后）2.将ALL分为B、T细胞及根据细胞发育阶段分为几种亚型3.对M0、M6、M7具有诊断意义：M0：形态似ALL、组化（-）,髓标志+,T,B-M6：GlyA+，CD71+M7：CD41+，CD61+（IIb/IIIa）,四.正常血细胞分化发育过程中免疫标志变化特点及白血病细胞免疫标志特点,常用各系血细胞CD抗原1.T系：CD1-CD8（CD6不用）2.B系：CD10，CD19-CD24，FMC73.髓系：CD11b,CD13-CD16，CD33，CD644.干祖：CD34，CD117，CD38，HLA-DR,(一）.正常B细胞标志：CD19CD22TdTCD34CD10CD20FMC7CD23I期：+II期：+-+-/+III期：+-+期：+-+,泛B标志：CD19，HLA-DR，cCD79a/CD22幼稚B标志：CD34，TdT，CD10，成熟B标志：CD23，FMC7,B-ALL的分型,亚型CD19CD34TdTCD10CyIgSmIg急性早期B前体细胞白血病+-earlyB-precursorALL急性前B细胞白血病+-/+-PreB-ALL急性B细胞白血病+-/+B-ALL,意义：CommonB-ALL预后相对较好，CD34+B-ALL比CD34-预后好，但CD34+患者伴Ph1+预后差。B-ALL预后相对差，但随化疗方案改进，预后有所改善。,CD7CD2CD5CD34CD1aCD3c/mCD4CD8I期：+/-II期：+-+/-III期：+-+/+期：+-+/+/-+/-泛T：CD2，CD5，CD7，cCD3幼稚T：CD34，TdT，CD1a,CD4/8，成熟T：CD3，CD4，CD8,(二）.正常T细胞标志：根据在胸腺内发育阶段分4期,T-ALL的分型,分型CD7CD2TdTCD3c/m急性早期T前体细胞白血病+-+earlyTprecursorALL急性T细胞白血病+-+T-ALL,T-ALL特点：1.幼稚T细胞数量增多：CD34+，TdT+2.泛T标志丢失3.CD4/8双+或CD4/CD8单阳,意义：儿童：ALL发病率占肿瘤的25%，B-ALL预后比T-ALL相对好成人：ALL发病率20%T-ALL预后比B-ALL好。,(三).正常粒细胞标志,全粒细胞标志：CD13，CD33，cMPO幼稚粒细胞：CD34，CD117，HLA-DR，成熟粒细胞：CD15，CD11b，CD10，CD64,cMPOCD13CD34CD117HLA-DRCD33CD11bCD15CD64CD10幼稚粒+-成熟粒+-+,(四).正常单核细胞标志：,全单核细胞标志：CD33，CD13，HLA-DR幼稚单核细胞标志：CD34，CD117，成熟单核细胞标志：CD14，CD64,HLA-DRCD33CD13CD34CD117CD14CD64幼稚单+-成熟单+-+,(五).成熟粒、单核细胞主要区别：成熟粒细胞：CD33+HLA-DR-CD14-CD64+dim成熟单核细胞：CD33+HLA-DR+CD14+CD64+,正常BM各系细胞比率：淋巴：20-30%：T：70%，B：20%，NK：10%；单核：2-6%；粒细胞：40-60%；有核红：50%,FCM的主要测定指标：FSC，SSC，FL1，FL2，FL3（FL4）FSC：反应细胞的大小。SSC：反应细胞内颗粒性。FCM设门法：FSC/SSC：缺点：不能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开CD45/SSC：CD45是WBC抗原，RBC、Plt为阴性。CD45在成熟细胞表达强，幼稚细胞表达弱，在淋巴、单核及粒细胞表达强度不同。优点：能将淋巴、单核及幼稚细胞区分开。特异分析白血病细胞免疫表型,FCM标记方法：单标：一种单抗/tube:FL1,FSC,SSC(三参数）双标：(两种单抗/tube/)：FL1,FL1,FSC.SSC（四参数）三/四标：(三种单抗/tube)(四种单抗/tube)：FL1-FL3/4,FSC,SSC,Sidescatter,CD45,CD7,CD117,CD34,CD5,CD19,HLA-DR,CD11b,CD117,Pre-B-ALL,CD10-,CD34-,Sidescatter,CD45,CD20,CD117,CD34,CD19,CD34,HLA-DR,CD5,HLA-DR,CD10,CD117,CD33,CD33,CD38,CD23,CD23,Lamda,ForwardScatter,AML-M0:R3细胞表达CD34,CD38,CD117,HLA-DR,CD33,AML-M1:R3细胞表达CD117,CD7,CD34,CD33,HLA-DR,CD13,CD64,AML-M2:R3细胞表达CD117,CD34,CD19,HLA-DR,CD33,CD64,CD13,CD7,CD33,CD10,CD7,CD45,CD5,CD64,CD34,CD11b,CD117,Sidescatter,CD64,CD11b,CD34,CD19,CD13,HLA-DR,ForwardScatter,CD14,SideScatter,AML-M4:R3表达CD117,CD34,CD33,HLA-DR,CD64,CD13;R414.35%,CD45,CD5,CD14,CD34,CD11b,CD117,Sidescatter,CD64,CD11b,CD10,CD13,HLA-DR,ForwardScatter,CD14,SideScatter,AML-M5:R3,R4表达CD117,CD34,CD33,HLA-DR,CD11bCD64,CD13,CD14,CD19,CD33,CD10,CD7,CD7,CD64,CD45,CD64,CD34,CD5,CD19,CD11b,CD11b,GlyA,GlyA,CD45,CD5,CD19,CD64,CD34,CD11b,CD64,CD11b,CD117,诊断白血病主要标志：B-ALL：CD34，HLA-DR，CD19，CD10+/