（有机化学专业论文）neem的微波提取及一种显色定量方法的建立.pdf

耻 、乡 n e e m 的微波提取一种显色量方法的建立 摘要 研究生戴建明指导教师刘准教授g s v r a g h a v a n 教授 v y a y l a y a n 教授 在该论文中我们报道了一种定量n e e m 提取物中总 l i m o n o i d s 化合物的显色定量方法。为消除来自于提取物中 其它组份的干扰，我们采用了一种多组份校正的方法。在 分析处理光谱时，我们发展了一种数学模型辅助分析的方 法。这些形成了一个完整的分析方法体系。通过对其应用 发现利用这套分析方法，我们可以快速有效地测得n e e m 各 部分提取物中的总l i m o n o i d s 及总简单萜类化合物的含量， 并且有效地消除了来自各组份的干扰。f 通过研究n e e m 树各 部分中总l i m o n o i d s 含量我们发现其分布有以下顺序：种子 叶子 种壳 叶柄。通过对比h p l c 及新发展的显色定 量体系对n e e m 种子提取物的定量分析，我们得出 a z a d i r a c h t i n 一一种很重要的l i m o n o i d s 占总l i m o n o i d s 化台物的 约5 8 。) 我们还研究了各种参数对n e e m 的微波协助提取的 影响，发现提取时间，微波功率对提取效率有重要影响。 通过对比微波协助提取( m a e ) ，室温下溶剂提取( r t e ) ，及 回流下溶剂提取( r f x ) ，我们发现样品的特性对微波提取 加速效应有重要影响。通过研究溶剂对m a e 的影响，我们 发现溶剂对目标物的溶解特性是影响m a e 的一个非常重 要的因素。 豸株车当妻| m i c r o w a v e a s s i s t e de x t r a c t i o na n dd e v e l o p m e n t o fac o l o r i m e t r i cm e t h o d f o r t h ed e t e r m i n a t i o no f a z a d i r a c h t i nr e l a t e dl i m o n o i d sf r o mn e e m a 。b s t r a c t ac o l o r i m e t r i cm e t h o dw a sd e v e l o p e dt od e t e r m i n et h eq u a n t i t 3 ，o ft o t a l a z a d i r a c h t i nr e l a t e dl i m o n o i d s ( a z r l ) i nn e e m e x t r a c t s am a t h e m a t i c a lm o d e l w a sa l s o d e v e l o p e d t oa i di nt h e m u l t i v a r i a t ec a l i b r a t i o nt e c h n i q u ef o rt h e a n a l y s i s o ft h e s p e c t r a w i t h t h i sm o d e la n dt h em u l t i v a r i a t ec a l i b r a t i o n t e c h n i q u e ，t h ec o l o r i m e t r i cm e t h o dc a nb eu s e dd i r e c t l yt oa n a l y s et h ep u r i f i e d n e e ms e e dk e r n e le x t r a c t sa n dt oe l i m i n a t ei n t e r f e f e n c e sf r o mo t h e ra b s o r b i n g s p e c i e s t h ea z r l a n d s i m p l et e r p e n o i d s ( s t ) c o n t e n t i nt h en e e ms e e dk e r n e l ， t h es e e ds h e l l t h el e a fa n dt h e1 e a fs t e mw a sd e t e r m i n e dw i t hc o n v e n t i o n a l e x t r a c t i o nm e t h o da n dt h e n e w l yd e v e l o p e dq u a n t i f i c a t i o nt e c h n i q u e t h e r e s u l t ss h o w e dt h a tt h ea z r lc o n t e n ti nt h e s ep a r t so fn e e md e c r e a s e si nt h e o r d e ro s e e dk e r n e l l e a f s e e ds h e l l l e a fs t e m w i t ht h e i p l c q u a n t i f i c a t i o nt e c h n i q u e ，t h ec o n t e n to f a z a d i r a e h t i ni nt h en e e ms e e dk e r n e l w a sd e t e r m i n e d ，a n dt h ec o m p a r i s o no ft h ea z a d i r a c h t i nc o n t e n ta n dt h ea z r l c o n t e n ts u g g e s t e dt h a ta z a d i r a c h t i na c c o u n t sf o ra r o u n d5 8 o ft h et o t a la z r l m i c r o w a v e a s s i s t e de x t r a c t i o n ( m a e 、o fa z r la n ds tf r o mv a r i o u sp a r i so f n e e mw a sa l s oi n v e s t i g a t e d v a r i o u sp a r a m e t e r sa f f e c t i n gt h ee x t r a c t i o ns u c ha s t h ep o w e ra n dt h em i c r o w a v ei r r a d i a t i o nt i m ew e r es t u d i e d t h ec o m p a r i s o no f t h em a ew i t ht w oc o n v e n t i o n a le x t r a c t i o nm e t h o d s v i z r o o mt e m p e r a t u r e e x t r a c t i o n ( r t e ) a n dr e f l u xt e m p e r a t u r ee x t r a c t i o n ( r f x lr e v e a l e d t h a tt h e p r o p e r t yo fs a m p l em a t r i xa f f e c t e dt h es p e c i a la c c e l e r a t i n ge f f e c to f t h em a e t h es t u d yo nt h ei n f l u e n c eo fs o l v e n t so nt h em a es h o w e dt h a tt h es o l u b i l i t y o ft h es o l v e n tt ot h et a r g e tc o m p o n e n t sa n dt h ea b i l i t yo ft h es o l v e n tt oa b s o r b m i c r o w a v e e n e r g yp l a y e da ni m p o r t a n tr o l ei nm a e 第一部分前言 i i 简介 踟( 苦楝) ，a z a d r a 曲t a 蝴是一种广泛分布于热带及 亚热带的植物。自远古时代起古印度人已经发现了其药 物特性。据记载其叶子，小枝，树庞种子，树根及花都可 入药( q 脚p a 黜e ta 上，1 9 9 2 ) 。其杀虫活性也于很早以前被 一些农民所认知。 虽然其杀虫活性在很久以前就被认讽但是直到 1 9 2 7 年才有了关于它的驱虫特性的报道晒ma n d 1 9 2 7 ) 。他们发现在1 9 2 6 - 1 9 2 7 年的蝗虫周期中，当其它树的 叶子都被吃光的时候，唯独n 咖的叶子幸免于难。第一 个关于其拒食特性报道出现在1 9 6 2 年唧啦e ta 1 ， 1 9 6 2 ) 。他们发现仅仅o 1 的l l e o l n 种子的悬浮液可以完全 抑制沙漠蝗虫& g n 9 a r i a 以及迁徙蝗虫l o c u s t a 也i g r a t o r i a 进 食这个发现吸引了世界各地的许多生物学家化学家 昆虫学家的注意并掀起了l l o i h n 作为杀虫剂的研究热潮。 研究发现f l e e l n 种子有很高的l i m o n o i d s 含量。这些 l i a n o n o i d s 是其杀虫活性及药理作用主要活性物质到目 前为止，约有2 0 0多种l i 帕n o i d s已被分离和鉴定。 a z a d i r a c h t i n 是这些l i 1 0 n o i d s 的种。由于它在n e e m 种子中 的高含量以及其杀虫的高活性a z a d i a c h t i n 被认为是n e e m 的最重要的成份。长期以来，这种化合物被广泛用作鉴 定n ( 艳1 1 1 种子等级以及商业上n e o l n 杀虫剂的标准物质 a z a d i r a c h t i n 含量可以用高压液相色谱或超临界流体色谱 的方法予以测定。 1 2 问题鉴定 1 2 1 商业上嗍杀虫剂的标准选择 ! i z a d i r a c h t i n 虽然是r 州n 种子中活性很高的一种成 份，但它并非唯一的活性成份。其它的l i m o u o i d s 化合物 大部分都有杀虫活性其中有一些甚至比a z a d i r a c h t i n 更 为有效。因此仅用此一种化合物来作为删杀虫剂的 商业标准些太武断。由于大部分的l i m o n o i d s 都有活性， 用l i l i l o n o i d s 的总含量来作为标准会更有道理。 1 22 n e e m 提取物中l i m o n o i d s 总含量的测定 在天然产物的定量分析中，h p u 3 是一中非常有效的 方法。a z a d i r a c h t i n 含量的分析可以很容易地用这种方法 进行。然而如果用这种方法来分析提取物中的每一种 成份是不可能的原因之一是不可能找到一个能分离 所有这些化合物的分离条件。另外即使能找到分离条 件，也并不是所有的化合物都可以找到定量所需的所 有标准物质。因此h p l c技术并不能有效解决这一定量 问题。 显色方法以及紫外可见分光光度计的方法曾是最 早应用于分析化学的一种方法这种方法可以用于对 一类化合物进行定量。如果能找到一种合适的显色方 法这种古老的方法倒可以有效地解决这一定量问题。 1 2 3 商业上n e _ 娜n 杀虫剂的生产 合成农药虽在农业生产中起着举足轻重的作用，但 也为人类社会带来严重的环蜕生态等问题。近年来， 人们把目光转向生物界去寻找解决办法。天然产物用于 农药为之兴起。n e e m 是其中非常有潜力的一种。 商业上n e 鲫杀虫剂的生产主要是用水或有机溶剂 一步提取的方法。这种方法提取的效率低时间长溶剂 消耗量大污染严重。寻找一种更为有效的提取方式势 在必然。微波协助提取是今年来发展起来的一中提取 新技术。它利用微波对物质加热的特殊机理达到快速 有效的提耽并能节约溶剂的使用( p a r e , 1 9 9 5a b ：p a r ea n d b e l a n g e r , 1 9 9 7 ) 。据报道，这种新技术对于天然产物的提 取尤为有效( p a r e , 1 9 9 f ；a ，b ) 。如果将这种技术引入n e e i l 杀 虫剂的生产，将会有很大的商业价值。 1 3 目标 本论文的目标是： a ) 建立一种定鐾i i e e l l l 提取物中总l i m n o i d s 的方法。 b ) 用新建立的方法来测定n e 啪树各部分中l i m c n o 】d s 的含量。 c ) 研究各种条件对微波协助提取n e l l 中l i n x l a o i d s 的 影响。 第二：部分文献综述 2 1 有关n e e m 2 1 1 简述 a d r i e nh e n r il a u r e n td ej u s s i e u 于1 9 8 0 年描述n e e m 树为 a z a d i r a c h t ai n d i c a 。其分类学位置如卜- ( s h m u t t e r e r ，1 9 9 5 ) ： o r d e r ：r u t a l e s s u b o r d e r ：r u t i n e a e f a m i l y ：m e l i a c e a e ( m a h o g a n yf a m i l y ) s u b f a m i l y ：m e l i o i d e a e t r i b e ：m e l i e a e g e n u s ：a z a d i r a c h t a s p e c i e s ：a z a d i r a c h t ai n d i c a n e e m 是一种常青或落叶树。其高度可达2 5 米。枝干向 四周伸展形成椭圆形树冠。树干略短而直，直径可达1 5 3 5 米。树皮中等厚度，外观程棕色，内部红棕色。非对称轮生 叶序，叶柄长2 0 4 0e m 。叶子长约3 8c i i l 。在印度，r l e e r l l 一月 至四月开花果实五月至八月成熟。果实程椭球形，长1 4 2 4 厘米。每个果实有一颗种子。在印度，一棵1 5 2 0 年的 n e e m 树可产果实1 3 公斤，在非洲产量可达2 0 5 公斤。种子 可占总果实的十分之( s c h m u t t e r e r ，1 9 9 0 ) 。 n e e m 可适应于各种气候和土壤条件。一般情汲下，它 可以在海拔7 0 0 米以下生跃。但在温度允许的情况下，其 生长的海拔高度可达1 5 0 0 米。它可以忍耐非常高的气温， 但最适宜的温度范围为9 5 - 3 7 摄氏度。它也可以在非常干 旱的条件下存活。通常可以忍耐7 。8 个月的干旱期。其发 达的根系可以摄取9 1 2 米深的地下水以至于可以存活于年 降水量1 3 0 毫米的地区。但最适合生长的地区是年降水量 为4 5 0 1 2 0 0 毫米。 2 1 2 杀虫活性 n e e m 有着良好的杀虫活性。其杀虫谱广( 见表2 1 ) ，更 为重要的是其特殊的杀虫机理使得它有着由于合成杀虫 剂所没有的许多特性。普通的合成杀虫剂通常有“击倒” 特性。这样，害虫在很短的时间内就可以发展抗药 性。另外，合成杀虫剂不但可以杀掉害虫而且可以通过中 毒的害虫传到其天敌，造成严重的生态问题。而n e e m 杀虫 剂有着迥然不同的机理，它是通过多种不同的机理的综合 来控制虫害。通过驱除特性，可以在害虫接触庄稼之前得 到控制；通过影响害虫的进食，生长等行为，可以使虫害 在稍长的周期得以控制；通过影响其繁殖行为，可以在虫 害周期的最开始得以控制。通过这种多机理的作用，害虫 抗药性的发展基本不可能。另外，调查表明n e e m 产品对多数 害虫的天敌如：一些益虫，鸟类，及温血动物基本没有毒副 作用。 表2 1 对n e e m 敏感的昆虫数目( 按o r d e r 排列，摘自 m e r u m o e r o l u l 、 o p c o j c 叫- ) u u 5 p o l 3 i “一u b l a t t o d e a ( r o a c h e s o rc o c k r o a c h e s ) 6 d e r m a p t e r a ( e a r w i g s ) c a e l i f e r ar s h o r t h o m e dg r a s s h o p p e r sa n d l o c u s t s ) e n s i f e r a ( l o n g h o m e dg r a s s h o p p e r s a n d c r i c k e t s ) p h a s m i d a ( w a l k i n g s t i c k s ) i s o p t e r a ( t e r m i t e s ) t h y s a n o p t e r a ( t h r i p s ) p h t h i r a p t e r a ( l i c e ) h e t e r o p t e r a ( t r u eb u g s ) h o m o p t e r a ( l e a g a n d p l a n t h o p p e r s ，a p h i d s p s y l l i d s ，w h i t e f l i e s ，s c a l ei n s e c t s ) h y m e n o p t e r a ( s a w f l i e sa n dw a s p s ) c o l e o p t e r a ( b e e t l e s ) l e p i d o p t e r a ( b u t t e r f l i e sa n dm o t h s ) d i p t e r a ( m i d g e sa n df l i e s ) s i p h o n a p t e r a ( f l e a s ) t o t a i4 1 3 2 1 3 物种 的大 化合 部分 l i m o n o i d s 及其活性 l i m o n o i d s 是一类高度氧化的三萜类化合物。这类化合 类占所有已分离鉴定化合物数目的三分之一。n e e m 部分杀虫活性，抗菌特性，及部分药物性质是由这类 物引起的。l i m o n o i d s 主要从种子中分离得到。其中一 也已从其叶子，小枝，树皮及果皮中得到。 基于其结构，l i m o n o i d s 可以化为九组：a z a d i r o n e ， a m o o r a s t a t i n ，v e p i n i n ，v i l a s i n i n ，g e d u n i n ，n i m b i n ，n i m b o l i n i n ， 6 。扒 ， ，o b o 砣卯 。为的4 s a l a n n i n 及a z a d i r a e h t i n ( k r a u s ，19 9 5 ) 。其中以a z a d i r a c h t i n 一组最 为重要，其次是s a l a n n i n 。另外一些如：a m o o r a s t a t i n 和v e p i n i n 组 中，虽也分离出一些化合物，但由于量少，其生物活性未得 测试下面按类别列出一些重要化合物及其活性。 2 1 3 1 ，a z a d i r o n e n i m b i n i n ( 1 ) ，a z a d i r o n e ( 2 ) ，a z a d i r a d i o n e ( 3 ) 是该组中最为重要 的兰种化合物。n i m b i n i n ( 1 ) 早在1 9 4 2 年就被分离出来 ( s i d d i q u i ，1 9 4 2 ) ，并于近年被证明有抗菌特性( s i d d i q u i ，1 9 9 0 ； c o h e ne ta 1 ，1 9 9 6 ) 。a z a d 的n e ( 2 ) 和a z a d i r a d i o n e ( 3 ) 于1 9 7 1 年被 l a v i ee ta 1 分离。这两个化合物都有拒食特性，其中3 比2 略 活泼( s c h w i n g e r e ta 1 ，1 9 8 4 ) 。目前，3 及其一些衍生物已被人 工合成( f e m a n d e z - m a t e o sa n db a r b a , 1 9 9 5 ；f e r n a n d e z m a t e o se t a 1 1 9 9 7 ) 。 该组中其它活性化合物多是这三种化合物的衍生 物。有：n i m b o c i n o l ( 4 ) 7 - b e n z o y l n i m b o c i n o ! ( 5 ) ，17 - e p i a z a d i r a d i o n e ( 6 ) ，17 b h y d r o x y a z a d i r a d i o n e ( 7 ) ，1 7 b h y d r o x y n i m b o c i n o l ( 8 ) ，7 - d e a c e t y l 7 - b e n z o y l n i m b i n i n ( 9 ) ，l b ，2 b e p o x y n i m b i n i n ( 1 0 ) 。这些化合物表现 出中等拒食活性( k r a u s ，e ta 1 ，1 9 8 l ；i s h i d a , e ta 1 ，1 9 9 2 ；l e e ，e la 1 ， 19 8 8 ，j e y a b a l a n ，1 9 9 7 ) 。 1 1 ) r = a o 1 9 ) r = b 2 o o， ： o ( 3 ) r = a c ( 4 ) r = h ( 5 ) r = b z 1 7 ) r - - a e ( 8 ) r = h o ( 1 0 l o 2 1 3 2 g e d u n i n g e d u n i n ( 1 1 ) 及其衍生物7 - d e a c e t y l g e d u n i n ( 1 2 ) ，7 - b e n z o y l g e d u n i n ( 1 3 ) ，m a h m o o d i n ( 1 4 ) 主要从n e e m 种子中分离出。但1 1 与 1 2 也在叶子和树皮中发现( l a v i ea n dj a i n ，1 9 6 7 ；k r a u s e t a 1 ， 1 9 8 1 ；s i d d i q u i ，e ta 1 ，l9 9 2 ；m a c k i n n o n ，1 9 9 7 ) 。前三种化 合物对某些种类的昆虫有拒食特性及抑制生长的作 用( i s h i d a ， 1 9 9 2 ) ，而1 4 则表现出杀菌活性( s i d d i q u ie ta 1 ， 1 9 9 2 ) 。近年来，有报道表明1 l 及1 2 可以抑制某些昆虫的繁殖与 生长( j e y a b a l a n ，1 9 9 7 ) 。m a c k i n n o n ( 1 9 9 7 ) 还研究了l l 及其九种衍生 物的抗m alaria 活性，发现只有1l 有活性。 8 臼： ，_ f 1 1 ) r = a c 1 2 ) r = h ( 1 3 ) r = b z o o ( 1 4 ) c h 2 0 h 2 1 - 3 - 3 v i l a s i n i n v i l a s i n i n 本身从n e e m 叶子中分离出来，但它的几个衍 生物从种子及n e e m 油中分离出。其衍生物1 , 3 - d i a c e t y l v i l a s i n i n ( 1 5 ) ，1 - t i g l o y l - 3 - a c e t y l v i l a s i n i n ( 1 6 ) ，a n d1 - s e n e c i o y l 一3 一a c e t y l v i l a s i n i n ( 1 7 ) 具有非常好的拒食活性( k r a u s ，1 9 9 5 ) 。 ( 】5 ) r 2 a c ( 1 6 ) r = t i g ( 1 7 ) r = s e n 2 1 3 4 n i m b i n n i m b i n ( 1 8 ) 及其一些衍生物从种子中分离出来，但其 更多的衍生物是从其它部分i n ：叶子，小枝，或树皮中分 离得到。n i m b i n ( 1 8 ) 具有良好的拒食活性，对e p i l a c h n a v a r i v e s t i se c 5 0 为5 0 p p m ( k r a u s ，19 9 5 ) 。 臼 m e o o c 、 ， 凇 m e o o c 弋邑a c ( 1 8 ) ( 1 9 ) n i m b l i d e ( 1 9 ) 从新鲜的n e e mh f 予中分离出，后来证明具 有良好的药物特性特别是其抗肿瘤的活性( e k o n g 1 9 6 7 ； c o h e ne ta 1 ，1 9 9 6 ；o l i n s u k o ne ta 1 ，1 9 8 6 ) 。 2 1 3 5 n i m b o l i n i n 该组中有两种化合物表现出生物活性，o h c h i n o l i d eb ( 2 0 ) 和2 1 一o x o o h c h i n o l i d e ( 2 1 ) 。2 0 具有非常高的拒食活性， 对某些昆虫其e c 5 0 为2 0 p p m 。它还对某些昆虫表现出中等 活性的抑制生长作用( 勋。a t l s ，1 9 9 5 ) 。 a c o ” 2 静) g 1 ) 2 1 3 6 s a l a n n i n s a l a n n n ( 2 2 ) 是n e e m 中含量较高的一种化合物。其本身 及其一些德生物具鸯毖a z a d i r o n e ，g e d u n i n ，或n i m b i n 缝孛像合 物高的多的拒食活性。表2 + 2 列出s a l a n n i n 及其一魑衍生物 的生物活蕊。 表2 2 s a l a n n i n 及其一些衍生物的生物活性( 摘自k r a u s ， 。，。j!i!i：!i，。，。 c o m p o u n d s a n dt e s t o r g a n i s m sb i o l o g i c a la c t i v i t i e s s a l a n n i n ( 2 2 ) e a r i a si n s u l a n a e p i l a c h n a v a r i v e s t 括 h e l i o t h i sv i r e s c e n s m u s c ad o m e s t i c a p o p i l l i a j a p o n i c a r e t i c u l i t e r m e ss p e r a t u s s p o d o p t e r a f r u g i p e r r d a s p o d a p t e r a l i t t o r a l i s a0 0 1 ae c 5 0 。1 4 p f m ge c 5 0 2 1 7 0 p p m a1 0 0 a tl ，0 0 0 p p m a e c 5 0 。2 8 0 p p m ae c 5 0 * 1 9 5 b t g d i s c ae d 5 0 2 1 3 注g c m 2 a00 】 3 - d e a c e t y i s a l a n n i n ( 2 3 ) e p i l a c h n at a r i v e “i s h e l i o t h i sv i r e s c e n s p o p i l l i a j a p o n i c a r e t i c u l i t e r m ss p e r a t u s s a l a n n o l ( 2 4 ) e p i l a c h n a v a r i v e s t i s s a i a n n o l a c e t a t ef 2 5 ) e p i l a c h 行疗v a r i v e s t i s p o p i l l i a j a p o n i c a s a l a n n o l a c t a m e - 2 1 ( 2 6 ) e p i t a c h n av a r i v e s t i s s a l a n n o l a c t a m e - 2 3 ( 2 7 ) e p i l a c h n av a r i v e s t i s ae c 5 0 22 0p p m ae c 5 0 2 1 7 0 p p m g e c 5 0 = 3 9 0 p p m ae c 5 0 = 5 5 2i z g d i s c a e c 5 0 。1 0 p p m ae c 5 0 2 9 p p m a e c 5 0 一2 6 0 p p m a9 5 a t1 0 0 p p m a9 5 a t1 0 0 p p m a 。a n t i f e e d a n ta c t i v i t y ；g = g r o w t h d i s r u p t i n ga c t i v i t y ；e c = e f f e c t i v e c o n c e n t r a t i o n ；e d = e f f e c t i v ed o s e 1 2 4 ) r i = i v a l ，r 2 = h 1 2 5 ) r 1 = i - v a l ，r 2 = a c 1 2 6 ) r 1 t s e n ，r 2 = h 2 1 3 7 a z a d i r a c h t i n 及其类似物 无论是从杀虫活性还是从其含量来讲，该组化合物 是最重要的一组。a z a d i r a c h t i n ( 2 8 ) 及其多数类似物有着比其 它组中化合物高的多的活性。表2 3 列出a z a d i r a c h t i n 及其部 分类似物的生物活性。 表2 3 a z a d i r a c h t i n 及其部分类似物的生物活性( 摘自k r a u s ， compou!n2d竺s!)!biologicalactivity a z a d i r a e h f i na ( 2 8 ) f a c r i c o t o p u s l u c i d u e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s h e l i c o v e r p a z e a h e l i o t h i sv i r e s c e n s o n c o p e h u s f a s c m t u s p e r i d r o m as m | c i a s c h 括t o c e r c a g r e g a r i a s p o d o p t e r a f r u g i p e r d a s p o d o p t e r a l i t t o r a l i s a z a d i r a e h t i nb ( 2 9 ) e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s h e l i o t h i sv i r e s c e n s s p o d o p t e r a l i t t o r a l i s a z a d i r a e h t i ne ( 3 3 ) 1 0 0 a tl p , g m l e c s 0 21 3p p m l c s o = 1 6 6p p m e c s 0 2 0 7 p p m e d s 0 2 0 7 p p m e c s o = o 0 7 p p m e d s o = 3 5n g e c s o = 8 0n g c m e d 5 0 = o 2 6p p m 1 0 0 a t0 0 7p p r n e c s o = o 0 8 p p m l c s 0 21 0 0 p p m e c s o = o0 7 p p m ( t ) g7 0 a t 0 0 1p g ( f ) g8 5 a t 2p p m l l c s 0 2 0 8 0p p m g e c s 0 50 1 7 p p m f i9 7 a t lp p m g a g g g g g a g a g l a ) ) 0 0 e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s a z a d i r a e h t i ng ( 3 4 ) e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s a z a d i r a c h t i nl ( 3 5 ) e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s 3 - d e a c e t 3 ，i a z a d i r a e h t i n ( 3 6 ) e p i l a c h n a v a r i v e n s g i s h e l i o t h i sv i r e s c e n s ( t ) ge c s 0 2 05 7p p m ge c 5 0 = 7 6 9 p p m ( f ) ge c s 0 2o 2 5p p m v e p a o l ( 3 7 ) e 口i l a c h n av a r i v e n s t i s( f ) h e l l o t h i sv i r e s c e n s s p o d o p t e r al i t t o r a l i s a z a d i r a c h t o l ( 3 8 ) e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s 2 口，3 0 - d i h y d r o t i g l o y l a z a d i r a c h t o l ( 3 9 ) e p i l a c h n a v a r i v e n s t i s s p o d o p t e r a l i t t o r a l i s ge c s o = o3 8p p m l l c s o = 0 3 7p p m g e c s o = 0 0 9p p m g1 0 0 a t lp p m a5 7 a t lp p m a e c s 0 2 2p p m ge c 5 0 = 0 0 8 p p m g e c 5 0 = 0 4 5p p m f i7 9 a t1p p m e c = e f f e c t i v ec o n c e n t r a t i o n ；( f ) = a p p l i c a t i o nb yf e e d i n g ；f i 2 f e e d i n gi n h i b r i o n ；o = g r o w t hi n h i b i t i o n ；l = l a r v i c i d a la c t i v i t y ；( t ) = t o p i c a la p p l i c a t i o n r t 7 ” m e c o ( 2 9 ) r = t i g l o y l 1 3 8 ) r = h 1 3 9 jr = 2 t 1 3 - o i h y d r o t i g l o y l 4 ( 2 8 ) r 1 = t i g ；r 2 = a c ( 3 3 ) r 1 = h ：r 2 = a c ( 3 6 ) r 1 = t i g ；r 2 = h ( 3 0 ) 3 5 ) ( 3 1 ) 1 3 7 ) 除l i m o n o i d s 之外，简单萜类化合物如二帖或三萜类化 合物也是n e e m 中的重要成份。其中部分化合物也具有生物 活性( a r a ，1 9 8 8 ，1 9 8 9 ，1 9 9 0 ；m a j u m d e r ，e t a 1 ，1 9 8 7 ) 2 2 有关微波协助提取 2 2 1 微波 微波波段在电磁波谱中位于红外与r a d i of r e q u e n c i e s 之 间。其频率介于3 0 0m h z 和3 0g h z 。该波段除用于加热以 外，还广泛用于雷达通汛。为避免与这些应用相干扰，工 业，科研，及医学上划出专门的频率，称为i s m 频率。其 中2 4 5 0m h z 和9 1 5m h z 是工业上最常用的频率，而2 4 5 0 m h z 又是几乎所有的家用微波炉所采用的频率。 2 2 2 微波及其在化学中的应用 早在微波发展的初期，人们就已注意到微波对水加热 的特殊效果。随着微波技术的发展以及家用微波炉的普 及，微波的应用范围越来越广，也逐渐涉及其它的科研领 域。第一例微波在化学中的应用出现在1 9 7 5 年。a b u s a m a r a e ta 1 ( 1 9 7 5 ) 率先使用微波湿化消解的方法来消解生物样 品以分析其微量元素。由于其多方面的优越性，这种方法 得到迅速发展，被广泛地应用于生物样品，地质，土壤样 品的酸解。但是由于一个潜在的问题，即有机溶剂的易燃 性，使得有机样品在微波场中的应用迟迟得不到发展。只 到1 9 8 6 年，g a n z l e r e ta 1 ( 1 9 8 6 ) 才将微波技术应用于有机样 品的提取，并发现这种方法要比传统的提取方法有效得 多。p a r e 等人的一系列专利( p a r e ，1 9 9 5a , b ，1 9 9 6 ；p a r ee ta 1 ，1 9 9 1 ) 系统地阐述了微波在化学中的应用。并随之出现了专门的 微波仪器可淡藏功缝壳鼹直接暴露易燃的有机溶帮予微 波场中的弱点。另外，单模量，聚焦型微波场使得加热更 为有效；高压微波反应容器使得操作温度可以高遗溶帮沸 点许多，以加速反应，消解或提取的过程。 2 2 3 微波一物质摆互终用 微波与物质的相互作用主要是微波对极性物质的作 恶。一今极性分子，壶予不同源子静电负性不溺使彳薅整个 分子成为一个偶极子。微波场本身是一交变的电磁场。当 这个交变的蠢磁场作用予极缝分子时，弓f 起偶极子随外界 电场方向改变丽发生的振荡。在2 4 5 0m h z 的电磁波作用 下，偶极予以每秒钟2 4 5 x1 0 9 的速度改变方向。这种高速 的振荡造成微波慰极陵分子憋恢速藤熬。努井，叁子 微波可以穿遗到物体内部加热，造成一种整体的加热效 果，哥淡大大提高娜热效率，褥置使褥许多特殊应用成为 可能。 在微波加热过程中，两个决定物质性质的参数决定 了微波加热效率。它们是：介电常数( s ) 程损失窭 子( ”) 。介电常数描述个分子被电场极化的能力，而 损失霪予则是测量该物度将徽波能转纯成热麓的麓力。一 般来讲，随物质的介电常数及损失因子增加，其吸收微波 能的能力及微波加热效率会提高。 2 2 4 微波协助植物样品的提取 微波协助提取技术是将微波髓应用于固一液分离体 系并褥辫予掇鏊标纯合物默隧裰中转移到溶雾l 挺孛醵一 项技术。微波加热的特殊机理使得这项技术有一般传统提 取技术高得多的效率。 微波协助提取过程是几种不周效果综台。当使用一 种极性溶剂时，微波加热促使提取加速怒主要机理 ( h a w t h o r n ee ta l 。，1 9 9 5 ) 。在这种情况f ，微波仅仅是侉鸯一 种能量的提供者来加热提取系统。其特殊机理在使用非极 性溶裁辩则表现得非常滂楚。 p a r e 和b e l a n g e r ( 1 9 9 4 ) 研究了微波协助提取与传统的 永汽蒸馏新鲜薄荷叶子。其溶剂选用对微波透明的非极性 溶剂。电子显微镜扫描表明，4 0 秒的微波照射完全破坏了 叶子的内部结构，丽2 小时的水汽蒸馏则仅仅造成其腺体 的缝小觅蹦2 。1 ) 。其原爨怒薄赫燃子痰部浅不弱豹鲧 体，微管等结构组成。这些结构中有着不同的化学成分， 霖且有不同熬水分食藿。徽波可吸穿透溶翔直接舔辩避叶 子内部。由于叶子内部的不同结构及其不同的含水鼹，含 水多的部分可以有效鲍吸收微波并避速升温汽化，体积迅 速膨胀造成微观结构的破裂便出现如图2 1c 濒出瑷的愤 况。微结构