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(法医学专业论文)家兔创伤性多器官功能障碍综合征肾抗氧化能力变化的研究.pdf.pdf 免费下载
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文档简介
中文摘要 索兔刨伤性多器官功能障碍综合征 肾抗氧化能力变化的研究 摘要 多器官功能障碍综合征( m u l t i p l eo r g a nd y s f u n c t i o n s y n d r o m e ,m o d s ) 是当今国内外医学界正积极研究的时代 性重要课题。系严重创伤或手术、感染、烧伤等原因导致 的机体同时或序贯地出现两个或两个以上器官功能障碍 甚至衰竭的综合征,死亡率很高。在法医实践中创伤引起 的m o d s 也是常见死因之。但m o d s 发生过程中肾脏 出现功能障碍乃至衰竭的机理以及肾在抗氧化能力变化 中的作用至今尚不清楚。本实验采用挤压双后肢肌肉丰富 部位复合静脉注射内毒素( 1 i p o p o l y s a c c h a r i d e ,l p s ) 复制了 实验动物( 家兔) 的m o d s 的模型,并通过观察肝肾功能、 多器官形态学改变以及肾脏组织抗氧化能力的变化和氧 化损伤程度,来探究m o d s 的发病机理,为法医实践中 对严重损伤导致死亡的定性提供一定理论依据;并可为临 床有效救治严重多发损伤提供科学依据。 f 方法:健康新西兰大耳白兔4 0 只,体重1 8 2 2 k g , 雌雄不拘,实验前2 4 小时禁食,自由饮水。动物俯卧位, 用自制带槽兔台固定双后肢,双后肢肌肉丰富部位上压 2 2 5 k g 标准重物,3 小时后解压,间隔3 0 分钟后,再负 重3 0 分钟,重复2 次,然后耳缘静脉注射l p s2 m g k gb w , 笼中饲养,达到预定时间采血、收集标本待检。实验分为 4 组,挤压复合内毒素1 0 小时组即( c + l o ) 组,挤压复 中文摘要 合内毒素2 小时组即( c + l 2 ) 组,单纯挤压组( c ) 组和 假手术组s h a m 组。测定血中丙氨酸氨基转移酶( a l a n i n e a m i n o t r a n s f e r a s e ,a l t ) 、天门冬氨酸氨基转移酶( a s p a r t a t a e a m i n o t r a n s f e r a s e ,a s t ) 、尿素氮( b l o o d u r e an i t r o g e n ,b u n ) 、 肌酐( c r e a t i n i n e ,c r ) 含量;取肺、肝、肾部分组织测定湿一 千重比、水含量;动物处处死后取肾组织测定丙二醛 ( m a l o n d i a l d e h y d e ,m d a ) 、超氧化物歧化酶( s u p e r o x i d e d i s m u t a s e ,s o d ) 、过氧化氢酶( c a t a l a s e ,c a t ) 、谷胱甘肽 过氧化物酶( g l u t a t h i o n ep e r o x i d a s e ,g s h p x ) 、总抗氧化能 力( t o t a la n t i o x i d a n tc a p a c i t y ,t a o c ) ;取各脏器1 0 中性 缓冲福尔马林固定后进行光镜观察。假手术组在相同时 刻取血、组织检查测定。采用p o m s 软件进行统计分析。 结果:1 肝功能和肾功能的变化:a l t 于s h a m 组、 c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分别为3 5 - 9 6 6 u l 、1 5 0 9 0 3 9 0 9 u l ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、7 2 1 2 1 2 3 8 u l ( 分 别与s h a m 组、c 组比较p 0 0 1 ) 、1 9 1 5 7 l 7 8 7 8 u l ( 分别 与s h a m 组、( c + l 2 ) 组比较均为p o 0 1 ) 。 a s t 于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组 分别为1 5 6 2 4 - 5 3 2 u l 、1 6 4 6 0 4 - 8 5 7 2u l ( 与s h a m 组比较 p o 0 1 ) 、1 2 3 6 2 3 1 1 4 u l ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、3 3 4 4 3 - 1 4 8 1 3 u l ( 与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较均为 p 0 0 1 ) 。 b u n 于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组 分别为6 4 9 4 - 2 5 5 m m o l l 、1 2 8 5 4 - 2 5 1 m m o l l ( 与s h a m 组 比较p o 0 1 ) 、1 0 8 7 - t - 3 1 6 r e t o o l l ( 与s h a m 组比较p o 0 1 、 1 9 1 8 _ _ + 4 8 2 r e t o o l l ( 分别与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比 中文摘要 较p o 0 l 、p o 0 l 、p o 0 1 ) 。 c r 于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分 别为8 0 7 5 1 4 7 0m o l l 、8 2 2 0 2 1 5 0 1 a m o l l ( 与s h a m 组比 较p o 0 1 ) 、8 3 1 2 1 4 0 1 p m o l l ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、 1 4 6 5 0 + 4 6 2 3 9 m o l l ( 分别与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比 较p o 0 l 、p o 0 1 、p o 0 1 ) 。 2 肺脏、肝脏、肾脏湿一干重比、水含量 2 1 肾脏湿一千重比于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + lj o ) 组分别为3 9 0 0 3 6 、4 5 2 - - + 0 2 3 ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、 4 5 4 - + 0 2 5 ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、5 1 4 0 6 5 ( 分别与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较p o 0 1 、p o 0 5 、p o 0 5 ) 。 水含量于s h a m 组、c 组、( c + l2 ) 组和( c + l i o ) 组分 别为7 4 1 5 2 3 6 、7 7 8 2 1 1 2 ( 与s h a m 组比较p o 0 5 ) 、 7 7 9 2 1 1 4 ( 与s h a m 组比较p o 0 5 ) 、8 0 3 1 2 0 3 ( 分别与 n 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较p o 0 1 ) 。 2 2 肺脏湿干重比于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分别为3 3 4 0 1 3 、4 9 1 o 4 3 ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、 4 9 0 - + 0 2 3 ( 与s h a m 组比较p o 01 ) 、5 7 4 1 0 5 ( 与s h a m 组、 c 组、( c + l 2 ) 组比较p o 0 l 、p o 0 5 、p o 0 5 ) ;水含 量于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分别为 7 0 d 0 1 1 1 、7 9 4 8 1 7 0 ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、7 9 5 7 0 9 9 ( 与s h a m 组比较p o 0 1 1 、8 2 1 9 + 2 3 1 ( 均与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较p o 0 1 ) 。 2 3 肝脏湿干重比于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l 1 0 ) 组分别为3 6 5 0 1 9 、3 8 4 - + 0 1 5 ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、 3 8 5 0 1 a ( 与s h a m 组比较p o 0 1 ) 、6 4 0 l 倒分别与 中文摘要 s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较p o 0 1 、p o 0 1 、p 0 0 1 ) : 水含量于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l 1 0 ) 组分 别为7 2 5 5 1 4 4 、7 3 9 7 1 0 0 ( 与s h a m 组比较p o 0 5 ) 、7 4 0 1 0 9 l ( 与s h a m 组比较p 0 0 5 1 、8 3 4 6 3 9 l ( 分别与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较均p 0 0 1 ) 。 3 肾抗氧化能力变化及氧化损伤 3 1s o d 活性于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分别为5 3 3 7 2 8 5 1 0 n u m gp r o t 、4 1 5 ,6 4 2 0 a 6 n u r n gp r o t ( 与s h a m 组比p o 0 1 ) 、3 4 9 3 9 2 2 5 7 n u m gp r o t ( 与s h a m 组、c 组比较p 0 叭) 、2 1 5 3 1 4 1 4 8 n u m gp r o t ( 与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较均为p 0 0 1 ) 。 3 2g s h p x 活性于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分别为4 9 a 1 8 4 7u r a gp r o t 、3 8 6 9 3 0 8 u m gp r o t ( 与 s h a m 组比p 0 0 1 ) 、3 0 5 4 1 9 7 u m gp r o t ( 与s h a m 组、c 组比p 0 0 1 ) 、1 7 7 4 5 8 3 u m gp r o t ( 与s h a m 组、c 组、 ( c + l 2 ) 组比较分别为p 0 0 1 、p 0 0 1 、p 0 0 5 ) 。 3 3c a t 活性于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l i o ) 组分别为2 。1 0 0 2 0u gp r o t 、1 8 1 o 0 4 u gp r o t ( 与s h a m 组比p o 0 1 ) 、1 6 6 0 ( n s gp r o t ( 与s h a m 组、c 组比较 p 0 0 1 1 、1 4 3 0 1 6 u gp r o t ( 与s h a m 组、c 组( c + l z ) 组比较均为p o 0 1 ) 。 3 4t a o c 能力于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l i o ) 组分别为0 5 9 0 0 9 u m gp r o t 、0 5 0 0 0 2 u m gp r o t ( 与s h a m 组比p o 0 1 ) 、0 4 8 0 0 1 u m gp r o t ( 与s h a m 组比p 0 ,0 1 ) 、 0 4 1 0 0 3 u m gp r o t ( 分别与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比 较均为p 0 0 1 ) 。 4 中文摘要 3 5m d a 含量于s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组和( c + l l o ) 组分别为0 5 8 _ _ + o 0 7 n m o l m gp r o t 、0 6 7 _ + 0 0 4 n m o l m gp r o t ( 与s h a m 组比p 0 0 1 ) 、o 8 0 o 0 3n m o l m gp r o t ( 与s h a m 组、c 组比p 0 0 1 ) 、0 9 1 0 0 8 n m o l m gp r o t ( 分别与s h a m 组、c 组、( c + l 2 ) 组比较均为p 0 0 1 ) 。 4 光镜观察 肌肉:受压肌肉肿胀,断裂破碎,肌纤维横纹模糊不 清或消失,有的肌纤维边缘呈锯齿状,间质出血、水肿及 白细胞浸润。 肾脏:肾小球有扩张、充血,白细胞浸润。肾小囊增 宽,囊腔含有絮状蛋白性物质:近曲小管细胞高度浊肿, 胞体增大,胞浆较疏松,管腔内有蛋白性絮状物,有的管 腔几乎消失;肾小管管腔可见均质蛋白管型。有的细动脉 似有透明血栓;间质明显淤血。肺脏:血管充血、水肿、 白细胞浸润,局限性肺不张。肝脏:白细胞浸润,肝细胞 受破坏。以上各组织形态变化从c 组、c + l 2 组到c + l 。 组呈逐渐加重趋势。7 s h a m 组上述组织无异常。厂一 结论:1 挤压双后肢肌肉丰富部位复合静脉注射内毒 素较好复制广泛软组织损伤后m o d s :2 肾脏的抗氧化能 力下降和氧化损伤可能是m o d s 发生、发展过程中肾功 能障碍的重要发病机制。 关键词:氧化应激,创伤,多脏器功能障碍综合征, 内毒素,法医病理学 苤茎塑墨 s t u d i e so n c h a n g e s o fr a b b i tk i d n e ya n t i o x i d a n t a b i l i t yw i t ht r a u m a t i cm u l t i p l eo r g a n d y s f u n c t i o ns y n d r o m e a b s t r a c t o b j e c t i v e :m u l t i p l eo r g a nd y s f u n c t i o ns y n d r o m e ( m o d s ) i sa n i m p o r t a n tt o p i ci n v e s t i g a t e di nt h er e a l mo f m e d i c i n e i ti sa s y n d r o m e t h a tt w oo rm o r e o r g a n s s i m u l t a n e o u s l y o r s e q u e n t i a l l ya p p e a rd y s f u n c t i o n e v e n f a i l u r ea f t e rs e v e r et r a u m ao r i n j u r y ,i n f e c t i o n ,b u r na n ds o o n a l s oi ti sa n i m p o r t a n tc o m m o nc a u s eo fd e a t hi n j u d i c i a lp r a c t i c e b u tt h ec h a n g e so fa n t i o x i d a n ta b i l i t yi n k i d n e yd u r i n g t h e p a t h o g e n e s i s o fm o d sh a v e b e e n u n c l e a r i nt h i s s t u d y ,t h er a b b i tm o d e lo fm o d sw a s d e v e l o p e dt h r o u g h l p sv i a t h ev e i na n d c o m p r e s s i n g h i n d l i m b sw h e r em u s c l ei s a b u n d a n t ,w eo b s e r v e d m o r p h o l o g i c a la n df u n c t i o n a lc h a n g e so ft h eo r g a n sa n d t h ea n t i o x i d a n t a b i l i t y o f k i d n e y ,t oi n v e s t i g a t e i t s p a t h o g e n e s i si n f o r e n s i cm e d i c i n ea n dh o p et od i r e c tt h e t h e r a p yi nc l i n i c a lm e d i c i n e m a t e r i a l sa n dm e t h o d s :f o r t yh e a l t h yn e wz e a l a n d w h i t er a b b i t so fe i t h e r s e x ,w e i g h t i n g1 8 - 2 2 k g ,w e r e r a n d o m l y d i v i d e di n t of o u r e x p e r i m e n t a l g r o u p s t h e r a b b i t sw e r ef r e eo f c h o w , a c c e s st ow a t e rf r e e l y2 4 hb e f o r e e x p e r i m e n t i nt h ee x p e r i m e n t a lg r o u p t h eh i n d l i m b sw e r e 6 英文摘要 c o m p r e s s e dw i t h2 2 5 k g s t a n d a r d h e a v yo b j e c t f o r3 h , r e l e a s i n gc o m p r e s s i o n f o r3 0 m i n ,t h e nc o n t i n u i n gb e i n g c o m p r e s s e d f o r3 0 m i nt w i c e a t i e r c o m p r e s s i o n , l p s ( 2 m g k gb w ) w a si n j e c t e d i n t ot h ev e i n e x p e r i m e n t w a sd i v i d e di n t ol p sa n dc o m p r e s s i o nf o r10 h ( c + l j o ) g r o u p ,l p sa n dc o m p r e s s i o n f o r2 h ( c + l z ) g r o u p ,s i m p l e c o m p r e s s i o n ( c ) g r o u pa n dn o r m a l ( s h a m ) g r o u p i n e a c h g r o u p ,b l o o ds a m p l e sf o rd e t e r m i n i n gt h el e v e l so f a l t , a s t ,b u na n dc r ,t i s s u e sf o rd e t e r m i n i n gt h e1 e v e l so f m d aa n dt h e a c t i v i t y o fs o d ,c a t ,g s h p xa n d t a o cw e r et a k e na f t e re x p e r i m e n t s ,w h i l et h en o r m a l g r o u pw e r ed e a l ta tt h ec o r r e s p o n d i n gt i m e a n i m a l sw e r e p u tt od e a t ha n dt i s s u e sw e r ef i x e df o rm i c r o s c o p e p o m s s o f t w a r ew a su s e df o rs t a t i s t i c a la n a l y s i s r e s u l t s : 1 c h a n g e s o fl i v e ra n d k i d n e y f u n c t i o n s : p l a s m aa l tv a l u ew a s3 5 9 6 6u l 、1 5 0 9 | 0 3 9 0 9 u l ( p 0 0 1v ss h a mg r o u p ) 、7 2 1 2 1 2 3 8 u l ( p 0 0 1p s s h a ma n dc g r o u p ) 、1 9 6 7 l 7 8 7 8 1 3 l ( p 0 0 l v ss h a ma n d ( c + l 2 ) g r o u p ) i ns h a m 、c 、( c + l 2 ) a n d ( c + l i o ) g r o u p ,r e s p e c t i v e l y p l a s m aa s tv a l u ew a s1 5 6 2 5 3 2 u l 、1 6 4 6 0 8 5 7 2 u l ( p 0 01v ss h a m g r o u p ) 、1 2 3 6 2 _ + 3 1 1 4u l ( p 0 0 1 v ss h a m g r o u p ) 、3 3 4 4 3 _ _ 1 4 8 1 3 u l ( p 0 0 lv ss h a m 、c a n d ( c + l 2 ) g r o u p ) i ns h a m 、c 、( c + l 2 ) a n df c + l 1 0 ) g r o u p ,r e s p e c t i v e l y p l a s m ab u nv a l u ew a s6 4 9 2 5 5 r e t o o l l 、】2 8 5 7 英文摘要 2 5 1 m m o l l ( p 0 0 1v ss h a mg r o u p ) 、1 0 8 7 3 1 6 m m o l l ( p o 0 1v js h a mg r o u p ) 1 9 1 8 _ + 4 8 2 m m o l l ( p o 0 1 、 p 0 01 、p o 01 r e s p e c t i v e l y v ss h a m 、ca n d ( c + l z ) g r o u p ) i ns h a m 、c 、( c + l 2 ) a n d ( c + l l o ) g r o u p , r e s p e c t i v e l y p l a s m ac rv a l u ew a s8 0 7 5 1 4 7 0m o l l 、8 2 2 0 2 1 5 0 m o l l ( p 0 01v js h a m g r o u p ) 、8 3 1 2 4 - 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