（分析化学专业论文）三苯甲烷酸性染料共振散射光谱法测定氨基糖苷类抗生素.pdf

l1 d e t e r m i n a t i o no fa m i n o g l y c o s i d ea n t i b i o t i c sw i t h t r i p h e n y l m e t h a n e a c i dd y e sb yr e s o n a n c e l i g h t s c a t t e r i n gs p e c t r o m e t r y m a jo r ：a n a l y t i c a lc h e m i s t r y d i r e c t i o no fs t u d y ：m o l e c u l a rs p e c t r a la n a l y s i s g r a d u a t es t u d e n t ： w a n gq i u h o n g s u p e r v i s o r ：p r o f t a n gn i n g l i c o l l e g eo fc h e m i s t r ya n db i o e n g i n e e r i n g g u i l i nu n i v e r s i t yo f t e c h n o l o g y s e p t e m b e r , 2 0 0 8t oa p r i l ，2 0 10 99 川6川7，mmmi7，iiiiiy 研究生学位论文独创性声明和版权使用授权书 独创性声明 本人声明：所呈交的论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成 果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含他人已经发 表或撰写过的研究成果，也不包含为获得其它教育机构的学位或证书而使用过的材 料。对论文的完成提供过帮助的有关人员已在论文中作了明确的说明并表示谢意。 学位论文作者( 签字) ：塑叁丝 签字日期：赳业牛一 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解( 学校) 有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并 向国家有关部门或机构送交论文的印刷本和电子版本，允许论文被查阅和借阅。本 人授权( 学校) 可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采 用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国科学技术信息 研究所将本学位论文收录到中国学位论文全文数据库，并通过网络向社会公众提 供信息服务。( 保密的学位论文在解密后适用本授权书) 学位论文作者签名：弘必乒 签字日期：如扣彳7 日 导师签字：纽孑镉 签字日期：扩年易月p 日 摘要 本论文采用共振散射法研究了三苯甲烷类酸性染料铝试剂、铬天青s - c u ( i i ) 络合物和铬天青 s - f e ( i i i ) 络合物与氨基糖茁类抗生素( a g s ) 反应的情况，讨论了适宜的反应条件、影响冈素和分 析化学性能，建立了定量测定a g s 的新方法。 论文共分为四章。 第一章为绪论，介绍了氨基糖苗类抗生素的结构、性质，并且对氨基糖苷类抗生素的测定方 法进行了综述。同时介绍了三苯甲烷类酸性染料特别是铝试剂和铬天青s 的结构、性质、应用等。 第二章以铝试剂为探针，用共振散射法研究了铝试齐u ( a t a ) 与氨基糖苷类抗生素硫酸卡那霉 素( k a n a ) 、硫酸新霉素( n e o ) 、硫酸庆人霉素( g e n ) 的相互作用情况，建立了测定氨基糖苷类 抗生素的共振散射新方法。在n a a c h a c 缓冲溶液中，铝试剂与氨基糖苷类抗生素本身的共振散 射强度均较弱，但两者相互作用形成复合物时，共振散射强度显著增强，k a n a 、n e o 、g e n 的最大散射波长分别位于2 7 5 n m 、2 8 8 n m 、2 6 3 n m 处。在一定范围内，散射强度与抗生素的浓度 成正比，线性范围k a n a 为0 0 2 5 0 9 9 9 m l ，n e o 为0 0 2 5 - 。1 2 i _ t g m l ，g e n 为0 0 2 - - - 1 2 1 x g m l 检出限k a n a 为1 3 6n g n ：l l ，n e o 为7 2n g m l ，g e n 为6 6n g m l 。将所建立的方法用于市售 氨基糖苷类抗生素注射液、滴眼液和软膏含量的测定，结果令人满意。同时讨论了离子强度和表 面活性剂对体系共振散射强度的影响，测定了铝试剂和硫酸庆人霉素的络合比，探讨了它们反应 的机理，二者主要是通过静电引力和氢键形成复合物。 第三章研究了铬天青s c u ( i i ) 络合物与氨基糖苷类抗生素硫酸新霉素( n e o ) 、硫酸庆大霉素 ( g e n ) 、硫酸卡那霉素( k a n a ) 等氨基糖苗类抗生素( a g s ) 之间的共振散射光谱及其分析应用。在 b r 缓冲溶液中，铬天青s - c u ( i i ) 络合物和抗生素本身的共振散射( r l s ) 均很微弱，但在表面活 性剂s d s 存在下，两者相互作用形成离子缔合物时r l s 显著增强，最人散射峰均位于3 2 4 n m 处， n e o 、g e n 和k a n a 的浓度分别在0 0 2 2 5 p g m l 、0 0 2 3 9 9 m l 和0 0 2 3 p g m l 范围内与 r l s 强度成线性关系，其检出限分别是4 6 n g m l 、1 0 5n g m l 、1 5 8n g m l 。方法有较好的选择 性，可用丁市售抗生素注射液或滴眼液中药物含量的快速测定。 第四章研究了在表面活性剂d b s 存在卜，铬天青s - f e ( i i i ) 络合物与硫酸新霉素之间的相互 作片j 情况。在o 0 1 m o l l 盐酸介质中，铬大青s - f e ( i i i ) 络合物和硫酸新霉索( n e o ) 本身的共振散 射( r l s ) 均很微弱，但两者相互作用形成离子缔合物时r l s 增强，最大散射峰位t - 3 3 2 n m 处， 在0 0 2 1 8 9 9 m l 范周内n e o 浓度与r l s 强度成正比，检出限是2 3 n g m l ，方法有较好的选择 性，可用于市售硫酸新霉素滴眼液和新霉素氟轻松软膏中药物含量的快速测定，结果令人满意。 关键词：铝试剂；铬天青s c u ( i i ) ；铬大青s - f e ( 1 l i ) ；氨基糖苜类抗生素：共振散射；测定 a b s t r a c t i nt h i sp a p e r , t h er e a c t i o no ft r i p h e n y l m e t h a n ea c i dd y ea u r i n t r i c a r b o x y l i ca c i d t h ec h r o m e a z u r o ls - c u ( i i ) c o m p l e xa n dt h ec h r o m ea z u r o ls - c u ( i i ) c o m p l e xw i t ha m i n o g l y c o s i d ea n t i b i o t i c s w a ss t u d i e db yr e s o n a n c er a y l e i g hs c a t t e r i n gr e s p e c t i v e l ya n dp r o p e rr e a c t i o nc o n d i t i o n s ，i m p a c t i n g f a c t o r sa n da n a l y t i c a lc h e m i c a lp r o p e r t i e sa n dd i s c u s s e d n e wm e t h o d sf o rt h ed e t e r m i n a t i o no fa g s h a v e b e e nd e v e l o p e d t h ed i s s e r t a t i o ni sc o m p o s e do ff o u rc h a p t e r s c h a p t e r li s p r o l e g o m e n o n t h es t r u c t u r ea n dp r o p e r t i e s o fa g sa l ei n t r o d u c e d 1 1 1 e d e t e r m i n a t i o nm e t h o d so fa g sa r ea l s or e v i e w e d m e a n w h i l et h es t r u c t u r e ，p r o p e r t i e sa n da p p l i c a t i o n o f t r i p h e n y l m e t h a n ea c i dd y e ，e s p e c i a l l ya u r i n t f i c a r b o x y l i ca c i da n dc h r o m ea z u r o ls a r es u m m e r i s e d i nc h a p t e r2 ，t h er e a c t i o n so fa u r i n t r i c a r b o x y l i ca c i d ( a t a ) a n da m i n o g l y c o s i d ea n t i b i o t i c s k a n a m y c i n ( k a n a ) ，n e o m y c i ns u l f a t e ( n e o ) ，g e n t a m y c i ns u l f a t e ( g e m ) a l es t u d i e db yr e s o n a n c e l i g h ts c a t t e r i n gi nt h es i t u a t i o n s oan e wm e t h o df o rt h ed e t e r m i n a t i o no f a g sh a sb e e nd e v e l o p e d i nn a a c - h a cb u f f e rs o l u t i o n a t aa n da g sa l o n ec a l lo n l yp r o d u c ew e a kr e s o n a n c el i g h t s c a t t e r i n g ( r l s ) s i g n a l s h o w e v e r , w h e nt h e yr e a c tw i t he a c ho t h e ra n df o r mc o m p l e x e s ，t h er l s i n t e n s i t yc a nb ee n h a n c e dg r e a t l y a n dt h er e s p e c t i v em a x i m u ms c a t t e r i n gw a v e l e n g t h so fk a n a ， n e o ，g e na l el o c a t e da t2 7 5 n m ，2 8 8 n m ，2 6 3 n md e p a r t m e n t t h er l si n t e n s i t yi sp r o p o r t i o n a lt ot h e c o n c e n t r a t i o no fa n t i b i o t i c si nac e r t a i nr a n g e ，t h el i n e a rr a n g e sa l eo 0 2 5 - - 。0 9 i t g m lf o rk a n a ， 0 0 2 5 1 2 p g m lf o rn e o 0 0 2 1 2 i ，t g m lf o rg e na n dt h ed e t e c t i o nl i m i t sa r e l 3 6n g m lf o r k a n a ，7 2n g m lf o rn e o ，6 6n g m lf o rg e n t h i sm e t h o dh a sb e e ns u c c e s s f u l l ya p p l i e dt ot h e d e t e r m i n a t i o no fa m i n o g l y c o s i d ea n t i b i o t i c si n j e c t i o n s ，e y ed r o p sa n do i n t m e n t a l s ot h ee f f e c to nt h e i n t e n s i t yo fr e s o n a n c es c a t t e r i n gi o n i cs t r e n g t ha n ds u r f a c t a n tw a sd i s c u s s e d ，t h ed e t e r m i n a t i o no ft h e c o m p o s i t i o nr a t i oo fa t aa n dg e n t h e i rm e c h a n i s mw a sd i s c u s s e d n em a i nf o u n d a t i o no ft h e r e a c t i o ni sd u et oe l e c t r o s t a t i ca t t r a c t i o na n df o r m i n gac o m p o u n dw i t h h y d r o g e nb o n d i n g i nc h a p t e r3 , t h er e a c t i o n so fc h r o m ea z u r o ls c u ( i i ) a n ds o m ea m i n o g l y c o s i d ea n t i b i o t i c s ( a g s ) s u c h a sk a n a m y c i n ( k a n a ) ，n e o m y c i ns u l f a t em e o ) a n dg e n t a m y c i ns u l f a t e ( g e n ) a r es t u d i e db yr l s i n b rb u f f e rs o l u t i o n ，c h r o m ea z u r o ls - c u ( i i ) a n da n t i b i o t i c sa l o n ec a nr e s p e c t i v e l yp r o d u c ev e r y w e a kr l ss i g n a l s h o w e v e r , w i t ht h ep r e s e n c eo fs u r f a c t a n ts d s ，w h e nt h e yr e a c tw i t he a c ho t h e rt o f o r mt h ei o na s s o c i a t i o nc o m p l e x e s ，t h er l si n t e n s i t yc a nb ee n h a n c e dg r e a t l y a n dt h em a x i m u m s c a t t e r i n gp e a ki s a t3 2 4 n m t h e r ew e r eal i n e a rr e l a t i o n g s h i pb e t w e e nt h er l si n t e n s i t ya n dt h e a n t i b i o t i c sc o n c e n t r a t i o nb e t w e e nt h er a n g eo fo 0 2 2 5 1 a g m lf o rn e o ，0 0 2 3 “g m lf o rg e n a n d 0 0 2 3 肛g m lf o rk a n a ，a n dt h ed e t e c t i o nl i m i t sr e s p e c t i v e l ya y e4 6 n g m lf o rn e o ，1 0 5n g m l i i f o rg e n ，15 8n g m lf o rk a n a w i t hg o o ds e l e c t i v i t y , t h i sm e t h o dh a sg o o ds e l e c t i v i t ya n dh a s s u c c e s s f u l l ya p p l i e dt ot h eq u i c kd e t e r m i n a t i o no fa n t i b i o t i c sf o ri n j e c t i o n sa n de y ed r o p ss a m p l e s i nc h a p t e r4 ，t h er e a c t i o no fc h r o m ea z u r o ls - f e ( i i i ) c o m p l e xa n dn e o m y c i ns u l f a t e ( n e s t u d i e d i no olm o l lh c lm e d i u m ，c h r o m ea z u r o ls - f e ( i l i ) c o m p l e xa n dn e o m y c i ns u l f a t e ( n e o ) a l o n er e s p e c t i v e l yc a i lo n l yp r o d u c ev e r yw e a kr e s o n a n c el i g h ts c a t t e r i n g ( r l s ) s i g n a l h o w e v e r , w h e nt h e yr e a c tw i t he a c ho t h e rt of o r mt h ei o na s s o c i a t i o nc o m p o u n d ，t h er l si n t e n s i t yc a nb e e n h a n c e dg r e a t l ya n dt h em a x i m u ms c a t t e r i n gp e a ki sa t3 3 2 n m t h e r ei sal i n e a rr e l a t i o n s h i pb e t w e e n t h er l si n t e n s i t ya n dn e o m y c i ns u l f a t e ( n e o ) i nt h er a n g eo fo 0 2 - 1 8 p g m l ，a n dt h ed e t e c t i o nl i m i t s a r e4 6 n g m l t h i sm e t h o dh a sg o o ds e l e c t i v i t ya n dh a sb e e ns u c c e s s f u l l ya p p l i e dt ot h eq u i c k d e t e r m i n a t i o no fn e o m y c i ns u l f a t ee y ed r o p sa n dn e o m y c i ns u l f a t ea n df l u o c i n o n i d ec r e a mw i t h s a t i s f a c t o r yr e s u l t s k e yw o r d ：a u r i n t r i c a r b o x y l i ca c i d ；c h r o m ea z u r o ls - c u ( i i ) ；c h r o m ea z u r o ls - f e ( i i i ) ； a m i n o g l y c o s i d ea n t i b i o t i c s ；r e s o n a n c el i g h ts c a t t e r i n g ；d e t e r m i n a t i o n i i i 目录 摘要l a b s t r a c t i i 第一章绪论1 1 1 氨基糖苷类抗生素的结构与性质1 1 2 氨基糖苷类抗生素的分析方法3 1 2 1 微生物法3 1 2 2 分光光度法4 1 2 3 荧光分析法6 1 2 4 共振散射法7 1 2 4 1 酞菁类染料探针8 1 2 4 2 偶氮类染料探针8 1 2 4 3 纳米微粒探针1 0 1 2 4 4 量子点探针1 0 1 2 5 化学发光法1 2 1 2 6 免疫分析法1 2 1 2 7 色谱分析法13 1 2 7 1 高效液相色谱法一1 3 1 2 7 2 薄层色谱法( t l c ) 1 4 1 2 8 电化学分析法1 5 1 2 9 毛细管电泳法( c e ) 1 5 1 3 三苯甲烷酸性染料的性质和应用一1 5 1 3 1 三苯甲烷酸性染料的性质和应用1 5 1 3 2 铬天青s 、铝试剂的结构与应用1 6 1 3 ，2 1 蛋白质探针1 7 1 3 2 2 核酸探针1 7 1 3 2 3 测定金属离子1 8 1 3 2 4 测定无机阴离子19 1 3 2 ，5 测定药物19 1 4 本论文研究内容1 9 第二章铝试剂氨基糖苷类抗生素体系的共振散射光谱研究及其分析应用2 l 2 1 实验部分21 2 1 1 主要仪器和试剂2l 2 1 。2 实验方法2 2 2 2 结果与讨论2 2 2 2 1 共振散射光谱2 2 2 2 2 条件优化2 3 2 2 2 1 缓冲溶液选择2 3 2 2 2 2 缓冲溶液用量的影响2 4 2 2 2 3 铝试剂用量的影响2 5 2 2 2 4 时间影响2 6 2 2 2 5 离子强度影响2 6 2 2 2 6 表面活性剂影响。2 7 2 2 3 共存物质的影响2 8 2 2 4 标准曲线2 9 2 2 5 样品分析3 0 2 2 6 反应机理及共振散射增强的原因3 l 2 2 6 1g e n 与铝试剂的结合反应3 l 2 2 6 2 共振散射增强的原因3 1 2 3 结论31 第三章铬天青s - c u 配合物与氨基糖苷类抗生素相互作用的共振散射光谱研究及其 应用3 3 3 1 实验部分3 3 3 1 1 主要仪器与试剂3 3 3 1 2 实验方法3 4 3 2 结果与讨论3 4 3 2 1 吸收光谱和共振散射光谱3 4 3 2 2 条件优化3 5 3 2 2 1 反应介质的影响3 5 3 2 2 2 缓冲溶液用量的影响3 6 3 2 2 3c a s 用量的影响：3 7 3 2 2 4c u ( i i ) 用量的影响3 7 3 2 2 5 表面活性剂的影响3 8 3 2 2 6 反应时间的影响3 9 3 2 2 7 试剂加入顺序的影响3 9 3 2 2 8 离子强度的影响 3 2 3 干扰离子的影响 3 2 4 线性范围和检出限 3 2 5 样品分析 3 3 结论 第四章铬天青s - f e ( i i i ) 配合物共振散射光谱法测定硫酸新霉素 4 。1 实验部分 4 1 1 主要仪器和试剂 4 1 2 实验方法4 4 4 2 结果与讨论4 4 4 2 1 共振散射光谱4 4 4 2 2 条件优化4 5 4 2 2 1 缓冲溶液选择4 5 4 2 2 2 试剂加入顺序的影响4 5 4 2 2 3 反应时间的影响4 6 4 2 2 4 铬天青s 用量的影响4 6 4 2 2 5f e ( 1 1 1 ) 用量的影响4 7 4 2 3 表面活性剂的影响4 7 4 2 4 离子强度的影响4 8 4 2 5 干扰离子的影响4 9 4 2 6 标准曲线5 0 4 2 7 样品分析5 0 4 3 结论5 1 参考文献：5 2 符号与缩写6 1 致谢6 2 个人简历6 3 申请硕士期间参与项目6 3 硕士期间发表论文6 4 桂林理工大学硕士学位论文 第一章绪论 1 1 氨基糖苷类抗生素的结构与性质 氨基糖苷类抗生素是临床上常用的一类抗生素，由链霉素或小单胞菌培养液中 提取，或以天然品为原料半合成制取而得的一类水溶性碱性抗生素，其分子结构中 都有一个氨基坏醇和一个或多个氨基糖分子，由配糖键相连接。用于临床的主要是 链霉素( s t r e p t o m y c i n ) 、卡那霉素( k a n a m y c i n ) 、新霉素( n e o m y c i n ) 、妥布霉素 ( t o b r a m y c i n ) 、庆大霉素( g e n t a m y c i n ) 及其衍生物的硫酸盐( s u l p h a t e ) ，结构如下图所 不o h n h 2 o n h 2 r l = r ：- c h 3 r 1 = - c h 3 ，r 2 = - h r l = r 2 = h o o h 庆大霉素c 1 庆大霉素c 2 庆大霉素c l a n h 2n h 2 h 妥布霉素( t o b r a m y c i n ) o hn h 2 桂林理5 - 大学硕士学位论文 h 卡那霉素( k a n a m y c i n ) r i = c h 2 - n h 2 ，r 2 = h 新霉素b r 1 = h ，r 2 = c h 2 n h 2 新霉素c o o h n h r 2 r i = l h a b ，r 2 = h ，r 3 = h ，r 4 = h 阿米卡星( a m i k a c i n ) 图1 1 几种氨基糖苷类抗生素的结构图 f i g 1 1t h es t r u c t u r eo f a m i n o g l y c o s i d e a n t i b i o t i c 它们自问世以来一直是临床上重要的抗感染药物，这与其独特的药理特点有 关：( 1 ) 抗菌谱广；( 2 ) 属于静止期杀菌剂；( 3 ) 属药物浓度依赖性抗生素，故一般每同 剂量只需一次给药；( 4 ) 稳定；( 5 ) 不需做皮肤过敏试验，用药方便；( 6 ) 耐氨基糖苷类 2 桂林理工大学硕士学位论文 钝化酶的品种对耐药菌感染有效；( 7 ) 价格相对比头孢菌素等低。 氨基糖苷类抗生素的副作用： ( 1 ) 耳毒性，由于药物在内耳蓄积，可使感觉毛细胞发生退行性和永久性改 变。包括对前庭神经功能的损害，表现为眩晕、恶心、呕吐、眼球震颤和共济失 调等；另一方面是对耳蜗神经的损害，表现为听力减退或耳聋。 ( 2 ) 肾毒性，由于主要经。肾排泄，尿药浓度高，并在肾蓄积。可损害肾小管 上皮细胞，表现为蛋白尿、管形尿，严重者可致氮质血症及无尿症。忌与肾毒性 药物合用。各种氨基糖苷类抗生素的肾毒性取决于其在肾皮质中的聚积量和其对 肾小管的损伤能力，其发生率依次为n e o m y c i n k a n a m y c i n g e n t a m y c i n t o b r a m y c i n s t r e p t o m y c i n n e t i l m i c i n 。 ( 3 ) 神经肌肉阻断作用口1 能与突触前膜上的钙结合部位结合，从而阻止乙 酰胆碱释放。发生肌肉麻痹，呼吸暂停。可用钙剂或新斯的明等胆碱酯酶抑制剂 治疗。不同氨基糖苷类抗生素引起神经肌肉麻痹的严重程度顺序依次为 n e o m y c i n s t r e p t o m y c i n a m i k a c i n 或k a n a m y c i n g e n t a m i c i n t o b r a m y c i n 。 ( 4 ) 变态反应，偶尔引起皮疹、血管神经性水肿、发热等，也可引起过敏性 休克，尤其是链霉素。 众所周知，氨基糖苷类抗生素具有以上的副作用，再加上近年来新一代头孢菌 素类和喹诺酮类药物在临床中得到广泛应用，使得氨基糖苷类抗生素的使用和销量 受到影响。但是，氨基糖苷类抗生素对常见的革兰阴性杆菌相比其他抗生素具有良 好的抗菌疗效，在临床上被用于治疗需氧革兰阴性杆菌所致的严重感染。现有的全 国重点城市抗生素市场排序资料显示，氨基糖苷类位列第五，仍为临床上使用量最 大的五大抗生素之一。因为所有品种均具不同程度的耳、肾毒性以及对神经肌肉的 阻滞作用，临床应严格掌握适应症，避免滥用和产生突出的不良反应。这类药物均 属浓度依赖性杀菌剂，用药后的临床疗效和毒性与血药浓度密切相关。因此，为了 科学合理、安全有效地使用这类抗生素。氨基糖苷类抗生素的定量分析，特别是痕 量分析受到了临床医学和分析工作者的重视，选择合适的血药浓度检测手段是十分 必要的。 1 2 氨基糖苷类抗生素的分析方法 1 2 1 微生物法 氨基糖苷类抗生素的药物效价测定，各国药典大都采用微生物法h 1 ，微生物法 所需设备简单，价格低廉，但影响因素复杂，操作费时，随着各种新技术的发展， 桂林理工大学硕士学位论文 将会逐步被其它方法所取代。毛耀南b 1 等人采用微生物测定法，枯草芽孢杆菌作为 实验菌，测定硫酸阿米卡星血药浓度，线性范围1 0 - - 4 0 0 9 9 m l ，可以作为硫酸阿米 卡星血药浓度的常规检测方法。 1 2 2 分光光度法 分光光度法用于定量测定，具有方法简便、分析精度高、重复性好、可测范围 广和仪器价廉等优点，是药物分析中应用较多的一类方法，但此方法费时。此法主 要是基于其与金属离子形成络合物或与有机试剂产生显色反应来进行测定。 c o n f i n o m 3 基于磷酸氢二钠亚硝酰合铁( i i i ) 对伯、仲脂肪胺的r i m i n i 反应，提 出了一种用于新霉素、卡那霉素、妥布霉素和阿米卡星的分光光度测定法，方法迅 速，可替代较慢的微生物法用于抗生素的生产和纯度控制，也可用于制剂中这些抗 生素的测定。冯学忠h 1 等人以水为参比液，采用紫外分光光度法在2 3 2 n m 波长处测 定硫酸庆大霉素注射液中庆大霉素的含量。实验结果表明，庆大霉素在1 0 6 0 u m l 浓度范围内，其吸光度与浓度呈良好的线性关系，相关系数r = 0 9 9 9 8 ，平均回收率 为9 9 2 ，r s d 为0 8 ( n = 6 ) 。分光光度法测定氨基糖苷类抗生素的情况见表1 1 表1 1 分光光度法测定氨基糖苷类抗生素 t a b l e ! ：! 一s e e c t i 业h o t o m e 塑里里星! 皇q 尘! o ! ! 蔓篁鱼篁墅! ! 里i 璺垒堑q 垒q ! 垒鱼墨 试剂测定对象 酸度摩尔吸光系数 线性范围测定样品 ( p h )e l ( m o l c r n ) 4 猩红s 卡那霉素2 8 7 2 3 4 x 1 0 4 3 x 。1 6 0 m - 7 “。1 8 l 7 5 引 注射液m 曲利本蓝票喜娄霎3 嘶7 1 ，1 。2 x ，l g 。o 2 1 、8 9 4 0m m 轧g l 注射液， 竺罴3 瞒2 1 删0 1 1 扩0 4 眈o 1 以“9 2 3 毗m g l 蒸麓盒篓 滂胺天蓝雹坠星5 5 4 8 3 1 0 3 0 - - 6 , 7m g 。l ”薹爵茹 新霉素 3 3 0 1 0 4 0 , - - 9 5 m 牡 一 依文思蓝 三? 苎要 5 6 2 6 3 1 0 4 0 - - - 1 2 o m r d l 滴耳液、 譬奎霉素 u 1 - 7 5 x 1 0 4 0 , - - 1 1 5m g l 爻磊蒜 2 5 】 妥布霉素 3 2 8 1 0 4 0 9 5m l 一 卡那霉素 2 0 1 0 4 0 - 16 0m g l 达旦黄 妥布霉素5 o 2 5 x 1 0 4 0 1 0 om g l 注射液、 庆大霉素 1 5 1 0 4 0 - - - 1 0 0m g l 人体血液 卡那霉素 1 5 3 1 0 4 0 - - - 1 4m g l 滂胺天蓝 庆大霉素4 5 1 1 2 1 0 4 0 - , , 1 2 5m l 注射液、 妥布霉素 1 4 7 1 0 4 0 - - 1 4m i 滴耳液 镧依文思蓝 ! ? 霉素 4 o 4 1 8 1 0 4 0 1 4 9 m l 涪耳漓 苎夸霉素 h u 3 1 0 1 0 4 肌1 4 9 m l 注1 ；- j 射- - r 液1 l x 嘲 曲利本蓝 ! 翟霉素5 o 3 6 4 1 0 3 0 - - 1 3 om g l 注射液 妥布霉素 “。 5 3 2 x 1 0 3 肚1 1 0m g l ” 妥布霉素 1 0 5 1 0 4 0 1 6nm l 曲利本红 庆大霉素 6 5 7 6 5 1 0 3 0 v l 4 v o vm ；l 注射液、 新霉素 1 4 0 1 0 4 0 15o m g t 滴耳液n 。3 5 桂林理工大学硕士学位论文 1 2 3 荧光分析法 李满秀幻等研究了阿米卡星与电子受体氯醌酸之间的倚移反应。实验表明： 在无水乙醇中，阿米卡星与氯醌酸在室温( 2 5 士5 ) 下可迅速形成紫色的荷移络合物， 此络合物常温下可稳定5 0m i n ，其荧光强度较阿米卡星显著增强，最大激发和发射波 长分别红移1 3 5n n l 和5 3n l n 。阿米卡星含量在8 0 8 0 0 1 a g l 范围内与其荧光强度呈良好 的线性关系，相关系数r 为0 9 9 9 4 ，检出限为2 8 9 “l 。该法用于实际样品分析，回收 率为9 5 5 1 0 1 4 ，相对标准偏差( r s d ) 为0 4 7 。他们还发现，氨基糖苷类药物庆 大霉素、卡那霉素及小诺霉素本身有微弱荧光，当它们在碱性条件下加入l 精氨酸、 硼酸并加热水解后，可产生较强荧光，这是因为氨基糖苷类药物水解后成为糖，糖 在精氨酸，硼酸存在下可产生强的荧光。由此可建立庆大霉素、卡那霉素及小诺霉 素这类氨基糖苷类抗生素衍生荧光法。庆大霉素、卡那霉素均1 o 1 0 。6 1 5 1 0 巧m o l l 范围内与荧光强度呈良好线性关系( r = 0 9 9 9 6 ，r = 0 9 9 9 4 ) ，小诺霉素在 4 0 x 1 0 8 o x l o 击m o l l 范围内与荧光强度呈良好线性关系( r = o 9 9 8 6 ) ，三者检出限分 别为5 8 1 0 ，6 1 x l o 7 和3 o 1 0 培m o l l b 3 。李满秀1 等利用2 巯基乙醇存在下， 氨基与邻苯二甲醛反应生成强荧光性吲哚取代衍生物体系建立了测定水溶液中氨基 糖苷类药物的直接荧光法。 s a n c h e z m a r t i n e z 等利用长波荧光法进行血清中阿米卡星的动力学测定心引，发 展了一种利用长波荧光团靛菁绿( i c g ) 的简单、快速测定阿米卡星的方法。在酸性介 质中染料被c e ( i v ) 氧化，导致荧光急剧猝灭，但阿米卡星存在时荧光猝灭受抑制， 这归因子荧光团和分析物之间的离子对的形成。利用停流混合技术，分别以 l e x ：7 6 5 n m 和) 、, e m ：8 1 2 m 作为激发和发射波长，每次测量在2 3 s 内完成。方法检出 限为0 0 2 1 a g m l ，精密度在4 8 6 范围内。方法具有良好的选择性，可在血清中存 在其他抗生素( 包括其它氨基糖苷类抗生素) 的情况下测定阿米卡星，样品的回收率在 8 9 4 1 0 4 7 之间。 r i z k 汹1 报道e u 3 + 与氨基糖苷类抗生素( a g s ) 结构中的氨基和羧基发生配位反 应，导致e u ”在6 1 6 n m 处的荧光强度增大，而非敏感跃迁( n o n h y p e r s e