（植物学专业论文）黑柄炭角菌生物学特性及其活性物质的初步研究.pdfVIP

夺 捅要 本文以产于浙江北部的黑柄炭角菌( 杪a ，a 门j 弘劫p s ) 为实 验材料，利用菌种分离、液体深层发酵、p c r 、柱层析、纸层析、紫 外光谱、高效液相色谱技术和化学反应等手段，对黑柄炭角菌的生物 学特性、液体发酵的培养条件以及部分生物活性成分进行了研究，主 要内容包括：黑柄炭角菌培养的营养因子以及环境条件的摸索，液体 培养基及培养条件的筛选，发酵罐深层发酵曲线的测定，黑柄炭角菌 菌索、菌丝及菌核的工t s 序列分析、菌丝体多糖的分离纯化及结构 的鉴定，黑柄炭角菌菌丝多糖的提取的条件优化，甘露醇的提取及含 量分析，发酵菌丝、菌索以及菌核核二肾的含量分析，实验结果如下： 1 优化筛选出了黑柄炭角菌最适合的固体培养基和最佳的培养 条件。黑柄炭角菌对葡萄糖、果糖的利用效果较好；黄豆粉、花生粉、 蚕蛹粉是良好的氮源；柠檬酸对菌丝体生长有促进作用；黑柄炭角菌 是一种中温性真菌，在2 2 一3 0 下均能够生长，但最适合的温度是 2 5 一2 6 ；菌丝在p h 值为5 0 8 0 之问均能够生长，但是以6 o 左 右为最佳。 2 优化筛选出了黑柄炭角菌菌丝体最适液体利- 子培养基和最佳 培养条件，培养基配方为：土豆2 0 、蛋白胨5 、蚕蛹粉1 0 、葡萄 糖2 0 、硫酸镁1 、磷酸二氢钾0 5 、磷酸氢二钾1 、硫酸锌1 、 柠檬酸1 。 3 测定了黑柄炭角菌菌丝体发酵罐深层发酵的生长曲线，确定 发酵刷期以6 6 h 为宜，并根据其生长规律，将其分为四个典型生长时 划：生长延迟期、生长对数期、生长稳定划及衰老期。 4 运一日p c r 扩增技术了黑柄炭角菌菌索、试管培养菌丝、发酵 菌丝以及菌核的完整的i t s 区( 工t s l + 5 8 s + i t s 2 ) ，并通过序列测定， 通过对比发现前三者的p c r 扩增产物iu 泳图谱及整个碱基序列完全 一致，可证明本文分离得到的黑柄炭角菌菌株以及发酵菌丝与原始采 的菌株为同一菌种。且其与菌核的工t s 序列的一致性为8 7 9 1 ， 表明同种不同产地的菌株有较火的差异。 5 用正交试验确定了以9 5 ，加3 倍量的水溶液浸泡提取黑柄 炭角菌菌丝体5 h ，为水溶性多糖的最适提耳又力法，从每克菌丝体中 提珥义的多糖最高可含1 5 6 8 m g 。 6 黑柄炭角菌菌丝体经热水浸提、崞析、脱蛋白，得到粗多糖， 冉经d e a e 一5 2 柱层析纯化得到纯多糖x n l 和x n 一2 ，其中x n l 经葡 聚糖g 一1 0 0 柱层析、紫外和荧光光谱检测证明其为单一成分，纸层析 表明j 单糖组分中含有葡萄糖，用高碘酸反应证明其糖基有( 1 6 ) 位糖二岢键。 7 黑柄炭角菌发酵菌丝体含有丰富的廿露醇，每克干菌粉、菌 索和菌核的甘露醇含量分别为5 7 5 m g 、5 3 7 m g 、6 5 0 m g 。 8 高效液相色谱技术分析表明，黑柄炭角菌发酵菌丝、菌索及 菌核的腺背含量分别为8 7 9 m g g 、2 2 0 m g g 、0 2 9 m g g ；尿苷含量 分别为0 3 2 m g g 、2 0 7 m g g 、0 2 4 m g g 。另外还有三种含量相对较 高的e 它核二乩有待进一步的确定。 关键词：黑柄炭角菌，生物学特性，活性物质，多糖，核苷 憎 ， ， 鸯 a b s t r a c t t h eb i o l o g i c a lc h a r a c t e r sa n d s o m eb i o a c ti v ec o m p o u n d s o fz 儿刎a 刀鳓p s ， w h i c ho r i g i n a l1 yc 0 1 1 e c t e d f r o mn o r t h e r n z h e j i a n gp r o v i n c ew e r es t u d i e db y m e a n so ft i s s u e1 s o 上a t l o n ， 1 i a u i df e r m e n t a t i o n ，p c r ，c 0 1 u m nc h r 。m a t o g r a p h y ，t l c ，h p l c a n d s d e c t r u mt e c h n 0 1 0 9 y 。 t h em a i n c o n t e n t s i n c l u d e d t h e o d t i m i z a t i o no ft h en u t r i t i o u s f a c t o r sa n dt h ee n v l r 。n m e n t a l c o n d i t i o n sf 。ri t sg r o w t h ，s c r e e n i n go fi t s1 i q u i df e r m e n t a t l o n c o n d i t i o n ： d e t e 砌i n a t i o no ft h eg r o w t hc u r v eo f t h es p a w n1 n t h ed r o c e s so ff e r m e n t a t i o n ：a n a l y s iso ft h e i t ss e q u e n c eo 士 r h i z o m o r p ha n dm y c e l i u m ：i s 0 1 u t i o n ，p u r i f i c a t i o n a n ds t r u c t u r a l a n a l y s i s o fp 0 1 y s a c c h a r i d e e x t r a c t e df r o m t h em y c ej - 1 a o 士 彳订a ，j a力j 如e s ：e x t r a c t i o n a n d d e t e r m i n a t i o n o 士 t h e w a t e r s o l u b l ep 0 1 y s a c c h a r i d e ，m a n n i t 0 1a n d n u c l e o t l d e s 。ln e r e s u l ts h o w e da sb e l o w ： 1 t h eo p t i m u mn u t r i t i o u s s o u r c e so fs o l i d m e d l u ma n d e n v i r o n m e n t a lc o n d i t i o nf o r 杪a a 门j 印e s w e r ea s 士。儿o w s ： t h e9 1 u c o s ea n dt h ef r u c t o s ew e r et h eo p t i m u mc a r b o n s o u r c e 士o r jt sg r o w t h ：t h es o y b e a np o w d e r ，p e a n u tp o w d e ra n d s 1l k w o r mn e t d o w d e rw e r et h eo p t i m u mn i t r o g e n s o u r c e ：t h ec i t r l ca c l d c a n d r o m o t e dt h eg r o w t h o fm y c e l i u m 。缈a ，j a 门。z p p s w a sa m i d d l e t e m p e r t u r ef u n g u sw h i c hc a ng r o wa tt h ec i r c u m s t a n c e o t 2 2 一3 0 ， b u t t h eo p t i m u mt e m p e r t u r e is2 5 一2 6 a n dt h e o p t i m u mp hf o rg r o w t h isa b o u t6 0 。 ， 2 t h eo p t i m u m m e d i u m c o n s t i t u t e s f o rt h ej - 1 q u lc l f e r m e n t a t i o no f妙a r j a 门j j p e s w e r e ： p o t a t oj u l c e 么u p e p t o n e5 ， s i1 k w o r mn e tp o w d e r l 0 ， 9 1 u c o s e2 0 ， m a g n e s l u m s u l f a t e1 ，z i n cs u l f a t e1 ，p o t a s s i u md i h y d r o g e n p h o s p h a t eo 5 ， 拿、 、 d i p o t a s s i u mh y d r o g e np h o s p h a t e1 。 3 f o u rt y p i c a lg r o w t hp e r i o d si nt h eli q u i df e r m e n t a t i o nw e r e d e s c r i b e d ：t h eh e s i t a t i o ng r o w t hp e r i o d ，t h er a p i dg r o w t h p e r i o d ， t h es t e a d yg r o w t hp e r i o da n dt h eo l dp e r i o d t h eb e s t f e r m e n t a ti o nti m eisa b o u t6 6h o u r s 。 4 t h ei n t e r n a lt r a n s c r i b e ds p a c e r ( i n c l u d i n gi t s l ， i t s 2a n d 5 8 s r d n ag e n e ) o fn u c l e a rr i b o s o m a ld n af r o mt h em y c e l i u ma n d r h i z o m o r p ho f 五夕a j a 力扩? p e sw e r ea m p li f i e db ym e a n so fp c r t e c h n 0 1 0 9 y 。 t h ep c rp r o d u c t s e l e c t r o p h o r e t i cp a t t e r n sa n d n u c l e o ti d e s e q u e n c e w e r e c o m p l e t ea c c o r d a n t ，t h e r e s u l t i n d i c a t e dt h a tt h ef e r m e n t a b l em y c e li u i n 、 c u l t u r e dm y c e l i u m w h ic hg r e wo nt h es o li dm e d i u ma n dt h er h i z o m o r p ha r et h es a m e m a t e r i a lw h i c ho r i g i n e df r o mas i n g l es t r a i n m e a n w h i l e ，t h e 工t s s e q u e n c es i m i1 a r i t yb e t w e e nm y c e li u m a n ds c l e r o t i a、 彤a 4 j a e 幽力a plio y d( xia n g yin ，h u n a n ) 、冀夕- a ，j a 夕p p 爿y - d ，7 ( l ) g r e w ( g u i y a n g ，c h i n a )w e r e8 7 9 1 、 7 7 9 0 、7 1 1 8 r e s p e c t i v e l y 。 5 t h e e x t r a c t i o n o p t i m i n a t i o n o f w a t e r s o l u b l e p 0 1 y s a c c h a r i d ef r o mm y c e li u mw a sd e t e r m i n e db y o r t h o g o n a l e x p e r i m e n ti nf o u rf a c t o r sa n dt h r e el e v e l s ， t h et e m d e r a t u r e w a s9 5 ，m a r i n a t e di n3m u l t i p l ev o l u m es o l u t i o nf o r5h o u r s 。 am a x i m u me x t r a c t i o no f2 0 4 5m g gh a sb e e no b t a i n e d 。 6 c r u d ep o l y s a c c h a r i d ew a se x t r a c t e df r o mt h ec u l t u r e d m y c e li u mo f 只y a ，j a 力g r z p p sb ym e a n so fe x t r a c t i o nw i t hh o t w a t e ra n dp r e c i p i t a t i o nw i t ha l c o h 0 1 ， t h ep r o t e i n si ni tw a s r e m o v e db y s e v a g em e t h o d ， c o n s tit u e n tx n 一1a n dx n 一2w e r e i s o l a t e da n d p u r i f i e db yd e a e 一5 2 c h r o m a t o g r a p h y t h e i r h o m o g e n e i t yw e r ev e r i f i e db yu vs c a na n ds e d h a d e xg 一1 0 0 c h r o m a t o g r a p h y ， t l cs h o w st h a tx n 一1w a sp a r tly c o n 】p o s e db y 1叩1，、1 ， g 上u c o s e 。 l n er e a c t l o no 士p e r l o d l ca c l ds u g g e s t e dt h a tt h es u g a r 一 一 囊 - - 卜、 1 - - 耷 - r e s i d u ep a r t l yb ei n t e r li n k e db y 1 6b o n d s 。 7 t h e r ew a sp l e n t yo fm a n n i t 0 1 i nt h e 杪a ，- z a 门_ z g r - z p p s ， t h es u mo fm a n n i t 0 1w a s5 7 5m g g ， 5 3 5 m g g ，6 5 m g g i nt h e m y c e l i u m ， r h i z o m o r p ha n ds c l e r o t i ar e s p e c t l v e j - y 。 8 c o m d o s i t i o n o fn u c l e o s i d e s i nf e r m e n t a j - m y c e 上l a 、 r h i z o m o r p ha n ds c l e r o t i aw e r e d e t e r m i n e db ym e a n so 士 h l g h d e r f o r m a n c e1i q u i dc h r o m a t o g r a p h y ( h p l c ) ， t h er e s u l t ss h o w e d t h a tt h ec o n t e n to fu r i d i n ei nt h ef e r m e n t s lm y c e l i a 、s c 上e r o t l a a n dr h i z o m o r p hw a s8 7 9 m g g 、2 2 0 m g g 、0 2 9 m g gr e s p e c t l v e j - y ： t h ea d e n o s i n ew a s0 3 2 m g g 、2 0 7 m g g 、o 2 4 m g gr e s p e c t l v e 上y b e s i d e s ，o t h e rt h r e en u c l e o s i d e s w h o s ec o n t e n tw e r ec o m p a r a t i v e l yh i g hw e r ed i s c o v e r e db u td on o tk n o ww h a tt h e ya r e ， a n d n e e df u r t h e rr e s e a r c h 。 k e yw o r d s ： c o m p o u n d s ， 如a ，j a ，7 j 劫e sb i 0 1 0 9 i c a lc h a r a c t e r s ， b i o a c ti v e p 0 1 y s a c c h a r i d e ，n u c l e o s i d e v 黑柄次角菌生物。特陀艾活性物质的初步f f = 究 引言 黑柄炭角茵 删a 订a 力j 印e s ( k i ) s a c c 属于子囊菌亚门 ( a s c o m y c o t i n a ) 、炭角菌目x y l a r i a l e s ，炭角菌科删a ，扬c e a e ， 炭角菌属明a “a 。，黑柄炭角菌是温：惜：、i 虻热；特及热带地区的菌类， 生长于温暖山丘坡地或河堤土坡一l - 的土栖白蚁死亡或搬迁后的蚁巢 中( 图j 扳i 1 ) 。在浙江、江西、福建等地均有分布，特别是在浙北山 区生长大片竹林的地方分布较广。形成的菌核是一一种名贵的中药，我 囤民间称乌灵参，鸡枞蛋。具有除泓、镇静安神、造血以及提高机体 免疫功能等功效，对于治疗脾虚食少，产后及手术后失血过多，产后 乳少，胃下垂，疝气，心悸失眠及小儿惊风，跌打损伤等症都有明显 的作用，幼嫩时又是可口的食刚凶心1 。黑柄炭角菌是著名的滋补药 川真菌，由于其菌核生长在白蚁废弃的蚁巢，f _ ，生态条件特殊，资源 稀少。因此开展对黑柄炭角菌的生物学特性以及生物活性成分的研究 对于进一步了解其生长特性和研究开发利刚该菌具有重要意义。 1 黑柄炭角菌的生物学特性研究 1 1 子实体的形态特征 子实体( 子座) ( 图版i 一2 ，3 ) 通常单牛，偶尔由柄的基部分枝， 敞生或群生于地上，连柄高3 5 1 8 c m 。头部圆柱形顶端圆钝，外表 早期灰白色，后变黑色。柄长l 7 c m ，粗l 5 m m ，基部有向土中延伸 的长( 假) 楸，其末端有h 寸连接茵核。子裳壳长方椭圆形，7 0 0 8 0 0 um 3 0 0 4 0 0um ，孔口疣状，黑色，子囊圆筒形，子囊孢子类球形， 1 5um 2 3um ，成熟时黑褐色。 1 2 茵丝、菌核形态与生活史 白蚁废弃的蚁巢菌圃上，密斫一舆枘炭角菌菌丝体，：卣径8 1 0u m 。在其生长后期部分菌丝密集成菌索向上生长，穿过地面形成子实 体；而部分菌丝密集成菌丝组织体菌核( 乌灵参) ，逐渐与菌丝 体脱离联系，悬着于白蚁巢腔壁上或凶圃h 菌核呈球性、椭圆形或 卵形，故有鸡枞蛋之称，直径约2 1 0 c m ，重约3 5 0 9 ，菌核与菌丝 连接处，有圆形凹陷，当菌核成熟后就与菌丝脱落联系，菌核外表黑 色，内部白色，肉质绵软，有类似鸡枞菌的香ze ，味甘甜。到第二年 6 1 0 月，当菌圃周围温在2 0 以：时。凶核i 身发菌丝，在地表形成 子座，呈棍棒状俗称地炭棍，出土后在地表呈散生或群生分布。 在斜面培养基上，黑柄炭角菌菌丝首先在斜面上长满一层基生菌 丝，然后在上面长出一层气生菌丝，然后有气生菌丝形成菌索，然后 凶索变成黑褐色，在实验室，在一定的培养条件下，也能够形成菌核 或子实体。 摇瓶培养时，菌丝体的形态，随培养条件彳i 同而有所变化，有时 呈菌球，有的呈棉絮状一团。 1 3 黑柄炭角茵的生活条件的研究 1 3 1 生态因子 陈宛如。经实验得知：黑柄炭角凶是一种中温性真菌，在2 2 一3 0 。c 下均能够生长，高于3 5 和低于1 3 时菌丝体不能够萌发，而且 发现黑柄炭角菌菌丝只能耐受一天左右的4 0 高温。黑柄炭角菌的 子实体发育要求高湿度，并测得菌圃的；| ! l 度是相对稳定和适度的( 含 水量变化于4 6 5 8 之间) 。根据其观察，黑柄炭角菌在黑暗和室内通 常光照条件下，菌丝均能够生长，但是在全黑暗的条件下菌丝体生长 密而粗壮，直到三个月后才产生菌索，而在明亮的条件的斜面上，菌 丝一剧后就形成菌索，半个月后丌始衰老。熙柄炭角菌菌丝在p h 4 5 伞7 0 之间均能生长，但最适合的p h 值为5 o 一6 3 ，当p h 低于4 时， 凶丝体j e 长缓慢，甚至死亡，掣，ip h 在7 0 以、j ，前期生长缓慢， 后期停止q j 长。并且在黑柄炭角菌! 卜k 过程小培养基的p h 有所提高， 这说明e 在代谢过程中可能分泌某些碱性物质。 1 3 2 营养因子 陈宛如h 1 在实验条件下研究得知：在黑柄炭角菌的深层培养中， 碳源以葡萄糖、淀粉最好，花生、黄豆、蛋白胨是适宜菌丝体生长的 氮源，并且对有机氮的浓度要求较高，m g 如，z n 弘是生长的必需元素， 柠檬酸对i 生长有促进作h j ，蚁酸有抑制- e 啦k 的作用。 - 0 - 黑柄炭们凶生物。学特性及j 性物质的仞步研究 2 炭角菌属化学成分的研究 ae s p a d a ( 1 9 9 7 ) m 3 等从抄a ，j a 力即。砂- p ，7 的发酵液中分离得 到6 种新的细胞松弛素( 卜6 ) ( 图卜1 ) 和化合物1 9 ，2 0 一e p e x y q 和r ， c y t o c h a l a s i n s q ，这类物质具有许多的蔓卜物学特性包括在哺乳动物的 纰织培养时明显的抑制细胞生长效j 煦、抑制h 工v 一1 的蛋白激酶活性作 刚和抗菌以及抗肿瘤活性。 d a w i ta b a t e 。等从纠a ，如。幻阳招的代谢产物中分离得到 1 9 ，2 0 一e p o x y c y t o c h a l a s i nc ( 5 ) ，d e a c e t y l 1 9 ，2 0 一e p o x y c y t o c h a l a s i n c ( 6 ) ( 一利j 细胞松弛素) ，x y l o b o v id e ，4 ，6 ，1 0 ，1 2 t r id e c a t e t r a e n e 一2 ，8 一d i o l ，c l o n o s t a c h y d i o l ( 8 ) ( 图1 2 ) ，p h a s e o l i n o n ， 并证明细胞松弛素是一种细胞毒素，c l o n o s t a c h y d i 0 1 可以作为一种 驱虫剂，而x y l o b o v i d e 和p h a s e o l i n o n 可以抑制植物的生长，并且发 现在该菌的发酵后期形成更多的被氧化的细胞松弛素。 m a l c 0 1 ms b u c h a n a n m 等在仍- 出，7 j as p ( x y l a r i a c e a e 的一 种) 中分离得到1 5 利，同类的细胞松弛素( c y t o c h a l a s i n ) 和一类新的 c y t o c h a l a s a n s ，前一类属于1 0 一苯基一( 1 1 ) 一细胞松弛素，而后者属 于1 0 一苯基一2 2 一乙二酸一( 1 2 ) 一细胞松弛素。c y t o c h a l a s a n s 有着广泛 的生物活性。1 ，他们随后又成功分i 噶出一利，萘的衍生物( 2 ) 和一种 6 一l a c t o n e 圳( 3 ) ( 图卜3 ) 。这类物质具有使细胞拉伸的作丹从而能够 让细胞核游离出来形成无核细胞，在低浓度的情况下阻止细胞质分离 干扰细胞分裂从而形成无核或双核细胞，乡j 外方面也可以抑制细胞 运动“。 r o h a na d a v i s 旧1 等从州甜，a 印菌丝发酵液中分离得到两种 新的天然产物3 一c h l o r o 一4 - h y d r o x y p h e n y l a c e t a m i d e3 一氯一4 一羟基苯 乙酰胺( 1 ) 不l 3 一c h l o r o 一4 一h y d r o x y p h e n y l a c e ti ca c i d3 氯一4 一苯乙 醇酸( 2 ) ( 图卜4 ) 以及一种新的产物( 一) 一x y l a r i a m id ea ( 1 ) ( 图 卜5 ) 。并且证明后者含3 一c h l o r o d t y r o s i n e ( 3 一氯一酪氨酸) 的结 构，且该化合物有毒性。 p a t t a m ap it t a y a k h a j o n w u t “1 等从 夕- a ，j a 历臼，s j j ( b c c1 0 0 5 ) 小分离得到结构特殊的多聚乙酰：m e l l i s o l ( 1 ) 和1 ，8 一d i h y d r o x y f ( f ；! f j 他论义 一n a p h t h o l l o a 9 1 u c o p y r a n o s i d e( 3 ) ( 图卜6 ) ，他们有着抗单性 疱症病毒一l 的生物活性，同时证f 月对“维洛 细胞( 非洲绿猴肾异倍 体细胞) 有着细胞毒性作用。 2 ” l 2 3 2 2 c h 3 o r = 0 h r ；h i 购o d 鼬b o 利：r = 0 h 6 4rmo h 5r = h l 铷掬d 幽姗：r 一0 h 图1 1 抄j a ，a 钆伊d 。y y d ，7 j 山：尘：f l 勺i - l - 化合物结卡f j 隆i c h 3 0 f ? i g u r e l 一1 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d sl 一6p r o d u c c db y ，侈a ，爿伽d 崔y o ，7 5r-h o 笱 3 ) i 到1 3 a 夕，a ，矗5 矿：! l n 勺化含物2 一：；n ，j 2 十勾l 冬i f i g u r e l 一3 s t r u c t u r eo fc o m ) o u n 【j s2 一：3 i ) l o 【l u c c d ) y 夕j ，f ，s p 4 ， - 、 - - 膏 1 - 黑柄炭细菌生物。特性及 ，l 。陀物质的卡j 步研究 o ，少r 隅 5 够c l o h 1r 互n h 2 2 r 。0 h o c h 3 图卜4 抄_ ，a ，妇5 仞止生的2 种化合物的结构图 l 到卜5 ，抄，订厂妇印产生的化合物1 的结构图 f j g u r e l 4 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d sl 一2f i g u r c l 一5 s l r u c t u r co fc o m p o u n dl p r o d u c e db y ，陟，a j ，矗印 0 hr ) r o d u c e db y 抄，a ，a 5 ：i 口 ， ， 3r ：“哪i i 站e i 到卜6 i 夕_ a ，妇，p ，s j ( b c c1 0 0 5 ) l 1 1f i ，j 2 种化合物的结构图 f i g u r e l 6 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d s1a n d3 is o l a l e df r o mt h e ，沙_ ，a ，矗，p ，s j j ( 1 3 c c1 0 0 5 ) l i n ，y 1 7 1 等从圳a ，j a 印中分离得到一种次级代谢产物木酮糖 x y l o k e t a la ( 1 ) ，该物质因为被认为是种潜在的乙酰胆碱脂酶 的抑制剂而备受关注。同时，k a r s t e nk r o h n 州等成功地人工合成 x y l o k e t a la ( 1 ) 的另一种构? 馑x y l o k e t a ld ( 2 ) 。s h e ob s i n g h 圳 等从一种炒a r j a 印中发现一种新的e r e m o p h i 卜a n es e s q u it e r p e n o i d ( 1 ) ( 图卜7 ) ，属于一种饱和酸，它能够抑制d n a 复制过程中3 端的加工、核酸链的转变以及h 工v l 整合酶催化的反应，半抑制量为 3 1 0 u m 。 x i o n g y uw u 心0 1 等从抄a ，j a 印嬲一| 1 分离得到一种新的代谢物 x y l o k e t a lg ( 图1 8 ) ，( 1 一( 7 一h y d r o x y 一3 ，9 a d i m e t h y l 2 ，3 ，3 a ，9 a t e t r a h y d r o 一4 h 一1 ，9 一d i o x a c y c l o p e n t a b n a p h t h a l e n 一6 一y 1 ) 一e t h a n o n e ( 1 ) ，c l j h ，。0 并证实木酮糖这类物质是红树群真菌州刎a 印 2 5 0 8 的组代谢产物。y o n g c h e n gl i n 陀刨等从该菌的培养基中分离 得到三种代谢产物( 图1 9 ) ：x y l o a l l e n o l i d ea ( c n 0 j ) ( 1 ) ， b u t 一2 ，3 一d i e n y le t h e ro f 鼻卜- h y d r o x y c i n n a m i ca c i d( 2 ) 不口m e t h y l e s t e r ( 3 ) ，他们都属于a r o m a t i ca 1 1 e n i c 这一类具有生物学活性的 代谢产物。并且从发酵液p 分离得剑5 种特殊的代谢产物，木酮糖 ) ：y 。 膨 节八 f 吹l j 学化论义 x y l o k e t a l sa ( 1 ) ，b ( 2 ) ，c ( 3 ) ，d ( 1 ) ，和e ( 5 ) ，以及化合物( 6 ) ( 图 卜1 0 ) ，这些物质有缩酮特有的生物活性，如x y l o k e t a l sa ( 1 ) 在初 级的活体实验中，当浓度为1 5 1 0 “m 0 1 1 时能够抑制乙酰胆碱脂酶 的活性。 p e t e rc h e a l y 圳等从一种矽j a 订a 中分离得到2 种天然产物，属 于央氧杂葸酮：2 一h y d r o x y 一6 一m e t h y l 一8 m e t h o x y 一9 一o x o 一9 h x a n t h e n e 一 1 一c a r b o x y li ca c i d ( 1 ) a n d2 一h y d r o x y 一6 一h y d r o x y m e t h y l 8 一m e t h o x y 一9 一o x o 一9 h x a n t h e n e 一1 c a r b o x y li ca c i d ( 2 ) ( 图l 一11 ) 。 o l a ：致嚣h ，薹n t e 鼯证l d d j 划卜7 抄- ，a ，扬印中化合物l 的结构图 i ? i g u r e l 7 s t r u c t u r eo fc o m p o u n dl is 0 1 a t e df r o m 彳y j a ，j a 印 警享答 m筠鼍，、 h 婚= c 气l 卜 j 翘 2 5 2 h 口 l 蚓卜8 x y l o k e l a lg 的结构图 i ? j g u r e l 一8 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d s x y l o k e l a lg 15 h 2 c = c 3 嶝、一9 x y k r i as p2 6 0 8 产，生的化合物、一3 溺结执强 f ig u r el 一9 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d si 一3 p r o d u c e db y 夕，a ，as p 三嬲 6 t - r 3 心r _ ) - 黑柄炭角菌生物一特性及i 一性物质的初步研究 4 + 图卜1 0 a 夕- a ，妇印2 5 0 8j 二生的化合物卜6 结构图 6 f i g u r e l l o s t r u c t u r co fc o m p o u n d sl 一6p r o d u c e db y ，l ，y a ，f f5 p2 5 0 8 r r 2 0 1r 产h 2敬= h r 2 。h r ，h r 3 2 c h 3r 4 。g h 3 r 3 ；c h 3r 4 2 c h 2 0 h 图卜1 1 抄，丑，拍膨化合物l 、2 的结构图 f i g u r e l 一11 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d s l 一2is o l a l c 【lf r o ma 夕，a ，a d a n gn g o cq u a n g 纠1 等从勺乡p p 。y y d ，7 而s e ，脚( 肛- a r j a c e a 0 中分 离得到两种a z a p h i l o n e 的衍生物d a l d i n i n se ( 1 ) 和d a l d i n i n sf ( 2 ) 及d a l d i n i nc ( 3 ) 署口4 ，5 ，4 ，5 一t e t r a h y d r o x y 一1 ：l 一b i n a p h t h y l ( 4 ) ( 图卜1 2 ) ，实验证明这四种化合物具有抗氧化的生物活性心础 1 ：j 王 2 ：r = 3 ：r = l i o j；l o 嶝、一、2 f l y p o x y i o nm s c l | 化合物、一a 纸辆悭 f 7 i g u r e l 1 2 s t r u c l u r eo fc o m p o u n d si 一以 i s o l t i l c df r o m仰d ，x y _ ，d ，7 ，0 s c “册 i i l l 吴根福乜川对黑柄炭角菌深层发酵制品中的d p p h 自由基捕捉成分 的研究中，获得了相对纯度较高的自由基捕捉物质2 0 个，对其中的 b 广1 6 进行结构研究得知其分子式为c 0 。，并推断其分子结构式为 f ! ；! j j 学位沦义 5 ，8 二羟基3 一甲基一3 ，4 二氢异香豆素。其在2 0um oj l 时，它的 d p p h 自由基捕捉活性为维生素c 的1 6 7 倍，维生素e 的2 1 倍。 吴根福，杨志坚心7 1 对黑柄炭角菌深层发酵制品中的抗氧化物质进 行分离筛选得到1 2 个纯度较高的抗氧化性物质。证明黑柄炭角菌深层 发酵菌粉中含有较多的抗氧化成分，有较高的抗氧化能力。 d a n gn g o cq u a n 引等用甲醇分级分离的方法从协矽d 州伽 ，芒j - 姗( 肜a ，j a e e a e ，a s c o m y c e t e s ) 的子座中分离得到两种未报道 过的a z a p h i l o n e s 二聚物：r u t i l i n sa ( 1 ) 和b ( 2 ) ，另外还得到 e n t o n a e m i na ( 3 ) 矛【1 r u b i g i n o s i n sa ( 4 ) 不1 1 b ( 5 )( 图1 1 3 ) 。 q 啪 i h l ： h o 0 3 ：r h 4r = a c o 7 h g h o h s 鹄、一、3 j j y p o x y j o nl u t j m l l l 1 化台物、一5 铺料忪 i ? i g u r e l 1 3 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d s卜5i s o l a l e df r o m 伽d 爿y d 疗川芒，_ ，姗 r a y m o n dl e d w a r d s 拦”1 等从真菌只y - a ，j ag r a 四彻j c a ( m o n t ) f r 的代谢产物中分离得到g r a m m i c i n ( 1 ) ( 4 咄y d r o x y 一4 萨f u r o 2 ，3 一明p y r a n 一2 ( 7 a 励一o n e ) 一种二环的f u r a n o p y r a n o l( 分子式 c 7 h n 0 1 ) 不口4 0 x o 一4 局l p y r a n 一3 一a c e tica cid ( y p y r o n e 一3 一a c e tica cid ) ( 2 ) ，并研究了2 者之间的相互转化。从杪a ，j a - d ，7 9 ，a 月a ( r e h m ) 的代谢产物中分离得到l o n g i a n o n e ( 3 )( 分子式c 。h 。0 。)( 结构 8 - t 燃柄炭角凶生物学特性发活陛物质的仞步研究 1 ，7 一d i o x a s p i r o 4 ，4 n o n 一2 一e n e 一4 ，8 一d i o n e )( 图1 1 4 ) 。 ho r 7h r = h o 0 2r = h c 0 0 r 3 图卜1 4 以，_ ，a ，妇j ，d ，w ，a 优2 ( i e h m ) ； 1 七合物1 3 的结构图 f i g u r e l 一1 4 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d s1 3i s 0 1 a t c df r o m ，陟j ，a ，j a _ ，d ， 9 ，a ，7 a ( r e h m ) s u r a tb 0 0 n p h o n g 。1 等从杪- a ，妇删- 芒印- e zb c cl ll l 的发酵提 取液中分离得到两个新的物质：m u l t i p l o l i d e sa ( 1 ) 和b ( 2 ) ( 图 卜1 5 ) ，它们属于内脂，且具有抗国门以幽a - 6 j c a 力s 真菌的活性。 从长柄炭角菌抄a ，j a p ，7 占助已s ( n its ) d e n n is 的发酵t y r o s ol 和2 ，5 一二羟甲基呋喃。从同属中还发现白细胞介液体中分离得到 x y l a r a m i d e ，该化合物具有很强的抗真菌活性，此外还分离得到白细 胞介索一1 ，b 转化酶的抑制剂l 7 4 l ，1 9 2 。 o 2 。彰穴 o i 驾l 1 5 炒a ，j a 肘“fz 印p 71 3 c cl1 11j “二! l 三f i ，j 化彳 物1 2 的绡十勾图 i ? ig u r c 卜1 5 s t r u c t u r eo fc o m p o u n d sl 2p r o d u c c db y 抄，a ，j a ，7 f ，f ，卢，p 爿b c c11 11 c a m e r o nj s m i th = l 纠等从抄- a ，j ap e 粥j c a ，j a 菌的发酵产物中分 i 岛得到两种新的e r e m o p h 订a n es e s q u i t e r p e n o i d s ：x y l a r e n a l sa ( 1 ) a n db ( 2 ) ( 图卜1 6 ) 。属于类半倍萜烯， ：且证明是n p yy 5 受体的 选择性配体，有着重要的生物学活性。d a n gn g o cq u a n g 3 等从沈- 出，7 一j ac 鲫c 印打j c a ( 州a “a e 吕o “sa s c o m y c e t e ) 的子实体的乙酸乙 酯的提取物中得到三种鲨烯类三萜化合物：c o n c e n