（光学专业论文）hene激光、led及氯胺酮对成纤维细胞影响的初步研究.pdf

申文摘要 抵暇度激光照射直在治疗伤口愈合中发挥作用，成纤维细胞在伤口 敷台过 程中起? 重要终廷。零论文嚣绕藏终维耋嚣嶷、低强度激竞照瓣黩荡墨愈合秀震了 k 初步豹研究。y 本文第l 章综述了低强度激光照射对离体细胞效应的研究进展。主要讨论了 羝强爱激光照袈怼逡黉缨缝，或绥缍缨藤，黉黢觏缨魔，遭纛臻慈夔效应秘糕强 度激光嫩物刺激作掰的机制。低强度激光疗法( 姗l t ) 为外科伤口的愈合掇供新 的手段，具有疗效可靠，使用方便，价格低廉的优点。第2 黛综述了近年来，国 内务蠢美l i l t 浚疗爨瑶塞合豹磷究送震。残纾鬃绸庭参与了携曩愈合戆全过程， 其数量和功能变化影响伤口愈合。第3 章综述了体外培养成纤维细施伤口愈合过 程研究。第4 章综述了氯胺酮的般药理和氯胺酮对细胞的作用。为了开展研究， 蓁5 章遴霉了人皮歉戏野维缨戆戆臻莠。 ，、 1 低强度激光照射和l e d 骶射对成纤维细胞的影响 二 发光二极管( l e d ) 照射能代蛰低强度激光照射在治疗伤口愈合中发挥作用。 本文蔫6 搴探讨疆蛩巍照隽| 对涪莽久疫获戎纾缀绥憝增蓬懿黪臻。鞋不嚣戆藿密 度l e d 照射培养人皮肤成纤维细胞，4 8 d , 时后绷胞计数检测增殖。结果发现培养 人皮肤成纤维细胞的增殖在8 9 r e i e r a 2 、2 1 3 9 m j c m 2 照射后无变化，4 2 7 8 m j c m 2 照麓爱，与对照经掇逡专显著毪憨器。 成纤维细胞胶原合成是伤口愈合中的另一嫩要过程。本文第8 章探讨h e - n e 激光照射对培养人皮肤成纤维细胞胶原合成的撵用。以不同功率密度h e - n e 激光 照射港葬入皮获威绎维细藏3 0 0 s ，在照辩嚣獭黼翔羟骚羹羧含量试裁鑫捻溪威 纤维细胞胶原合成。7 1 4 7 m j c m 2 h e ，n 馓光照射有轻度促进胶原合成的作用，但 与对照组比无显著麓晃。9 2 6 7 m j c m 2 h e n e 照射齄促进胶原合成的弦用。 1 5 3 7 7 m j c m 2 和1 7 2 7 8 m j c m 2 h e - n e 耀骞于链辍嚣溪程逶荻疆合成的作雳。 本文的实验结果点持b i m p 模型。本文在实验过程中使用红色光照射，正如 l 。2 节掰攒出的，键遴胶愿合成壤量途径l ，援逐增殖属于途径2 。8 9 m j c m 2 霹 2 1 3 9 m j c m 2 两个剂嫩满足b i m p i ，无增殖效墩。4 2 7 8 1 1 畦c m 2 和4 6 8 7m j c m 2 满足b i m p 2 促进增殖。9 2 6 7 m j c m 2 、1 5 3 7 7 m j t c m 2 和1 7 ”8 m j c m 2 满足b i m p 3 ， 促进胶原合成。 2 氯胺酮对h e - n e 激光照射促人正常皮肤成纤维细胞增殖作用的影响 低强度激光照射治疗伤口愈合疗效显著，但是，动物实验结果的不一致一 直是阻碍其发展的严重障碍。我们在总结大量低强度激光照射治疗动物皮肤伤口 模型的实验中发现：动物活体实验中用于麻醉的药物对实验结果有影响。当麻醉 药物为氯胺酮等时，低强度激光照射往往不能促进动物皮肤伤口的愈合。本文第 7 章探讨了氯胺酮对h e n e 激光照射促人正常皮肤成纤维细胞增殖作用的影响， 以初步探讨低强度激光疗法对实验动物模型实验结果不。致的原因。用四甲基偶 氮唑盐 t h e3 - ( 4 ，5 - d i m e t h y l t h i a z o l 2 y t ) - 2 , 5 - d i p h e n y l t e t r a z o l i t t m b r o m i d e ( m t r ) a s s a y 比色分析法测定了氯胺酮对h e - n e 激光照射促人正常皮肤成纤维细胞增殖 作用的影响。氯胺酮( 0 6 ， 1 2 ， 2 0 1 a g m l ) 单独作用对成纤维细胞增殖设影t 氯胺酮( o 6 ，1 2 ，2 0 扯g m l ) 能抑制h e - n e 激光( 4 6 8 7m j c m 2 ) 照射促人正常 皮肤成纤维细胞增殖作用 ； 关键词：低强度激光成纤维细胞氯胺酮 胶原合成l e d h e - n e 激光 m i t细胞计数 a b s t r a c t r e c e n ta d v a n c eo fe f f e c t so fl o wi n t e n s i t yl a s e ri r r a d i a t i o no i lc e l l sw e r e s u m m a r i z e di nt h i sr e v i e w t h ee f f e c t so fl o w i n t e n s i t y l a s e ri r r a d i a t i o no n o s t e o b l a s t i cc e u s ，f i b r o b l a s t s ，s k e l e t a lm u s c l ec e l l sa n df i l eb i o s t i m d a t i o ne f f e c t so f l o w i n t e n s i t yl a s e ri r r a d i a t i o nw e r e i n c l u d e di nt h ef i r s tp a no f t h i st h e s i s t h es e c o n d p a r to ft h i st h e s i ss u m m a r i e dt h ee f f e c t so fl o wi n t e n s i t yl a s e rt h e r a p yo nw o u n d h e a l i n g t h ee f f e c 括o ff i b r o b l n s t s o l lw o u n d h e a l i n gw e r os u m m a r i e d i nt h et h i r d p a r t 。 t h ef o u r t hp a r to ft h i s 哇猕s i si n t r o d u c e dt h ep h a r m a c e d yo fk e t a m i n e t h ef i f t hp a r t s u m m a r i e dh o w t oc u t t i v a t eh u m a ns k i nf i b r o b l a s t si nv i t r o 1 。e f f e c t so fl o wi n t e n s i t yh i 艟l - i r r a d i a t i o na n dl e di r r a d i a t i o no at h e f i b r o b l n s t s t h es i xp a r t so ft h i st h e s i se x p l o r e dt h ee f f e c t so fl i g h te m i s s i o nd i o d e ( l e d ) i r r a d i a t i o no nt h ep r o l i f e r a t i o no f h u m a ns k i nf i b r o b l a s t s h u m a ns k i nf i b n ) b l a s t sw e r e ： i r r a d i a t e da tv a r i o u sd e n s i t i e s a f t e r4 s kc e l l sw e r ec o u n t e d a f t e r8 9 m j a m 2a n d 2 1 3 9 m j t c r a 2i r r a d i a t i o n ，t h ep r o l i f e r a t i o no f t h ec e l l ss h o w e dn od i f f e r e n c ec o m p a r e d w i t ht h ec o n t r o l g r o u p t h e c e l l s p r o l i f e r a t i o n w a se 稚b 8 a e 藤b y4 2 7 。8 m j c m z i r r a d i a t i o n t h ee i g h t hp a r te x p l o r e dt h ee f f e c to fh e - n el a s e rr e p e a t e di r r a d i a t i o no nt h e e o f l a g e ns y n t h e s i so fc u l t u r e df i b r o b l a s t 。c u l t u r e df i b r o b l a s t sw e r ei r r a d a i a t e dw i t h h e n el a s e rf o r3 0 0 sa tv a r i o u s p o w e r d e n s i t i e s h e - n el a s e ri r r a d i a t i o n s ( 9 2 6 7 m j c n l 2 ，1 5 3 7 9 m j c m 2a n d1 7 2 7 8 r n j c m 2 ) c a l le n h a n c ec o l l a g e ns y n t h e s i so f c u l t u r e df i b r o b l a s l t h e e x p e r i m e n t a lr e s u l t ss u p p o r t e db i m p t h et i g h t su s e d i nt h ee x p e r i m e n ta r e r e d t i g h t s a s 1 2h a dp o i n t e do u t , e n h a n c i n gc o l l a g e np r o d u c i t i o nb e l o n g st o p a t h w a y l ，a n de n h a n i n gp r o h f e r a f i o nb e l o n g s t o p a t h w a y 2 2 8 9 m j c m 2 a n d 2 1 3 9 m j c m 2s a t i s f i t i e db i m p , w h i c hs h o w e d n o p r o f i f e r a f i o np h e n o m e n a 4 2 7 。8 m j e r a 2a n d4 6 8 7i r l j c m 2 s a t i s f i t i e db i m p , w h i c hs h o w e d p r o l i f e x a t i o n 3 p h e n o m e n o 9 2 6 7 m j e m 2 ，1 5 3 7 7 m v c m 2a n d1 7 2 7 。8 u d c m 2s a t i s f i t i e db i m p 3 袖i c h s h o w e d 找l 窘鹚蠹p r o d u 娃i o np h e n o m e n a 。 2 e f f e c t s 棘k e t a m i n ei nc o m b i n a t i o nw i t hh e - n el a s e ri r r a d i a t i o no n p r o l i f e r a t i o no f l t u m ns k i nf i b r o b l a s t s l o w i m e n s i t yl a $ e r ( l t l ) i s 糖i 藕彗u s e dc l i n i c a l l yt oe n h a n c ew o u n dh e a l i n g u n f o r t u n a t e l y , t h ea n i m a le x p e r i m e n t a l r e s u l t sw e r ec o n t r o v e r s i a l 。f r o mt h e r e p o r t e d e x p e r i m e n t s ，w e ：f o u n d $ o i t 地i a t c r c s d a g f a c t s ：i nt h ee x p e r i m e n t sw i t hn ol 也e f f e c t s , s o m ea n e s t h e t i c sf k e t a m i n e ，e l t a e re r e ) 糕痰弧a d d e d 囊魄l e a t m e n t s e l 删e , w h e r e a st h e yw c r es e l d o mu s e di nt h ee x p e r i m e n t sw i t hl 也e f f e c t s i nt h es e v e n t h p a r t , w eu s e di n v i t r oh u m a ns k i nf i b r o b l a s t s 糯m o d e l st o i n v e s t i g a t ew h e t h e r k e t a m i n ea f f e c t e dl a s e r - t r e a t e dw o u n dh e a l i n g t h ee x p e r i m e n t s i n v e s t i g a t e dt h e e f f e c t so fk e t a m i n ei no o m b i n a t i o uw i t h4 6 8 。7 m j c m 2h e - n el a s e ri r r a d i a t i o no n p r o l i f e r a t i o no f i nv i t r oh u m a ns k i nf i b r o b l a s t s ，c e l lp r o l i f e r a t i o n 鞭髂m e a s u r e d l l s i 娃g t h e3 - ( 4 , 5 m i m e t h y l t 蠢_ i a z o l - 2 - y 1 ) - 2 , 5 - d i p h e n y t t e t r a z o l i u mb r o m i d e ( m t t ) a s s a y o a r r e s u l t sd e m o n s t r a t et h a tf i b r o b t a s t sr e s p o n d e d d i f f e r e n t l yt oh e - n el a s e ri r r a d i a t i o n ( 4 6 8 7m j e m z ) i nt h ep p d e n e eo ra b s e n c eo fk c t a m i n e 。w 弧黼f i b r o b l a s t sw p r e i n c t r 融a t e d w i t hd i f f e r e n t e o n c e n a a t i o n s k e t a m i n e 辩魏l 2 , 2 0 9 9 m l ) ， p f 曲翩蠛糯c a u s e db yh e - n el a s e ri r r a d i a t i o nw a si n h i b i t e d 。t h e s er e s u l t ss u g g e s t t h a ta n e s t h e t i cm i g h ti n h i b i tt h eb i o s t i m u l a t i o ne f f e c t so fl 】艮i n a d i a f i o no rw o u n d h e a l i n g o f a n i m a lm o d e l s 。 k e yw o r d s ：l o w 蜘s i t y 融；k e t a m i n e ；c o l l a g e ns y n t h e s i s ； f i b b l a s t s 邸s ；l i g h te m i s s i o nd i o d e ( 疆露舞h e - n el a s e r ；, m t t ； c e l lc o u n t i n g 4 第l 章低强度激光对离体纲胞效应的研究进展 1 9 6 0 年，梅曼( t h e o d o r em a i m a n ) 成功士【氛研制出第一台红宝石激光器 ( 6 9 4 3 n m ) 。从此宣奄人类应用第一台医用激光器的诞生。蘩此以后，激光在医 学领域褥至g 广泛应蠲。激免其有巅巍度，离单魏穗，疆方淘瞧麓辆干牲好豹特点。 因此，发射出的激光柬具有热、光化、压强与电磁场作用。不同波长与功率的激 光对人体缀织可以产生不同蛇治疗效果。用于激光医学的激光分为强激光、中等 强度激巍和低强度激光。强激光潮于激毙舞科，中等强度激汽臻于走动力疗法， 低强度激光用于促进伤口愈合和激光内科等低强度激光疗法。在这里，主攒综述 低强度激光对离体缁胞作用的研究避展，并运髑刘承宜等人盼低强度激光傣惑生 豹模篓( b 氆但) 【l i u t c y e t a l1 9 9 9 2 0 0 3 ；朝琢宜等1 9 9 7 ，1 9 9 9 2 0 0 0 】瓣这些 研究进行分类总结。 低强度激光疗法( l o wi n t e n s i t yl a s e rt h e r a p y ) ，也称为低功搴激光疗法( l o w l e v e l l a i r t h e r a p y ) 【b a s f o r d1 9 8 9 & 1 9 9 5 ，陈藏仁等1 9 9 5 ，k a r u 1 9 9 8 ，t u n e re t a l1 9 9 9 ，阎孝诚等1 9 9 9 】。低强度激光的输出功率是毫瓦级的激光。照射缀织不 仅湿发黑瞬显改变，对缀织无病理损害两且还衾产生治疗疾瘸鲍生拐襄激传露。 低强度激光照射在躺梗塞、褥疮、类风湿关节嶷、窿补密性精神障碍、澈心病、 预防冠脉成形术后辫狭窄等多种缀病的临床治疗中取得了显藩的疗效。由于藏疗 效曼簧，学者们很早就开始探究低强度激光对擞体俸用的梳瑷，舞震了一系列低 强度激光对离体细臌幸管用酶研究。众多鹩实验络祭表明，低强度激光照射艉产生 一系列的细胞效应。 1 1 低强度激光对离体细胞的效盛 1 1 1 逢詈缨熬 c o o m b e 等人研究了连续波长的二极管激光照射对得自闯叶细胞的遗骨细胞 的作用。其中一个试验组在培养的第3 ，5 ，7 泛用波长为6 9 0n m 的脉冲软激光 照毒| 逡费爨魏国秒。嚣一缝舞对照。在8 ， 2 秘1 6 天嚣，溺荧毙嚣嚣素狻溅鲴 s 胞的骨生长情况。实验发现：1 6 天后，受激光照射后的细胞比没受过激光照射 的细胞产生更多的荧光骨沉淀。因此，作者认为脉冲软激光对造骨细胞有生物刺 激作用【c o o m b e e ta l2 0 0 1 】。i j e d a 等人利用从胎鼠颅中分离出来的造骨细胞用低 强度的g a a i a s 激光( 8 3 0i l r l l ，5 0 0m w ) 照射分两种照射方式：一种是连续照射 ( c i ) ，一种是用lh z 的脉冲照射( p i ) 。他们观察了细胞增殖、骨节结形成、碱性 磷酸酶( a l k a l i n ep h o s p h a t a s ea l p ) 的活性和基因表达。与不照射组比较，激光 能极大地增强细胞增殖、骨节结的形成、a l p 活动和a l p 基因表达。特别的是， 与c i 对比，p i 能显著地刺激这些因素。因为1h z 脉冲激光照射能极大地增强骨 形成，所以认为脉冲频率应该是低强度激光刺激骨形成地重要因素 u e d ae t a l 2 0 0 1 1 。y a m a d a 等人用培养的造骨细胞通过激光照射研究它们的增殖率、分化和 钙化。使用的激光为h e - n e 激光。无性繁殖系的造骨细胞( m c 3 t 3 - e i ) 被不同强 度的激光照射。在长期培养中，c a 的积累可以被i j c m 2 的4 次激光照射所增强， 比对照强4 6 。但是激光的照射不能提高碱性磷酸酶的活性。电子显微镜显示高 尔基体在激光照射后有增大的趋势。这些结果显示激光照射对造骨细胞有光刺激 作用，能促进造骨细胞的生长和钙化，从而增强骨的再生 y a m a d a1 9 9 1 】。 1 1 2 成纤维细胞 创伤愈合是以成纤维细胞的增殖、迁移、肉芽组织形成、胶原分泌、创口胶 原化瘢痕形成及改建为特点的过程，成纤维细胞参与了创伤愈合的全过程，其数 量及功能变化影响刨伤愈合。在低强度激光治疗伤口的研究中，许多学者用培养 的成纤维细胞为模型，研究低强度激光对创伤愈合影响的机理。 低强度激光信号能促进成纤维细胞增殖己被实验证实 w e b b e ta l1 9 9 8 1 。v a n b r e u g e l 用不同能量密度和照射时间的h e - n e 激光照射人单层成纤维细胞，发现 小于2 9 1 m w 时可促进成纤维细胞的增殖，而大于5 9 8 m w 时则无效果 b 衅u g e l e ta l1 9 9 2 1 。a l m e i d a 等用强度为2j c r l l 2 的6 7 0n n l ，7 8 0 n i n ，6 9 2n m ，和7 8 6 n i l l 四种波长低强度激光照射牙龈成纤维细胞，同样发现低强度激光能引起牙龈 成纤维细胞的增殖 a t m e i d a e ta l2 0 0 1 1 。a r n j a k 等发现单次照射，剂量为0 5 、1 、 1 5 、z i c m 2 均有显著的刺激作用 h r n j a k e ta l1 9 9 5 1 。k i p s h i d z e 等人用h e - n e 激 光从o 1 到6 3 j c m 2 的照射强度照射成纤维细胞时发现在成纤维细胞中血管内皮 6 艇长因子( v e g f ) 的分泌量髭非照射组的1 6 倍，并艇效应都是壁剂量依赖关系 的。成纤维细胞用2 1j l c m 2 激光照射时效应最为明显 k i p s h i d z ee t a l2 0 0 1 。但某 整实验也煮耱爱瓣结果，h a u m a n 等发瑗h e - n e 激光对培莠不羁健数鹣减纾缝缨 胞的增殖均无促进作用 h a l l m a n e ta l1 9 9 8 】。g u t l m e c h t 薄用n d ：y a g 激光( 脉冲能 量3 0 1 2 0 m j ，脉冲速率2 0 1 0 0 h z ，能爨输出1 5 3 o m w ，照射时间1 0 6 0 s ) 黻瓣l - 9 2 9 裁终维缨庭，终祭显示激毙戆爨瓣毙捷缨瓣辣a 台藏鞠缨瑰分裂受 到抑匍 g u t k n e c h t e ta l1 9 9 8 。g t a s s b e r g 等人用5 7 7 n m 闪光泵蒲可调染料激光照 射成纤维细胞，5 1 2 j c m 2 的照射剂量能抑制成纤维细胞的增殖，大于1 2 j c 群 秘照瓣裁量缝蘩裁袋纾绦缀瓣鹣蚤鑫震念藏。5 8 s j e m 2 载爨瓣裁囊黠绥魏嚣 力无影响 g l a s s b e r ge ta lt 9 8 8 。j o y c e 等人早先的试骏已发现了低强度激光照射 能诱导细胞对致电离辐射的适应性、保护性反应。接赘他们又研究了低强度激光 照瓣薅i n d i a n m u n t j a c 或终维缨庭薅致惫囊辐嚣酸辐掺建夔适应经、镶护茬反痘。 1 1 5 和2 3 0j c m 2 的6 6 0n m 低强度激光照射能诱导明显的适应性反应，表现为 降低了辐射弓j 起的染色体警卺常。但细胞存活量并没有增加。进一步的分析表明： 染色俸夫豢鼙豹凌交是童予激毙萼l 莛了g 2 蘩延迟戆繇长。舞疆逶嶷毪爱盔是密 干低强度激光对细胞周期的调节，在这波长的激光不会由d n a 损伤而引起细 胞周期进程的改变 j o y c c c ta l1 9 9 9 】。 1 1 3 骨髂肌细胞 s c h w a r t z 用h e - n e 激光照射骨骼肌熔养物，发现照射后，肌管中有瞬间的胞 逡c a 2 + 离子浓震熬上秀。藤警强筹毙敏麓5 - a l a 或蠢纛l 秣羽瞄嚣，鼹懿3 挽 的h e - n e 激光，检测到胞液的钙上升。另外，h e - n e 激光照射能提高n g f m r n a 的含量5 倍。因而，作者认为光诱导的c a 2 + 的瞬间变化能使n g f 从肌管中释放 遗寒。n g f 霹筢是低强度激光麓超佟藕钓琢蠢 s c h w a r t z 懿a 1 2 0 0 2 。s h e f e r 戆耢 究发现低强魔激光能增强成肌细胞的增魑，刺激进入绷胞周期。低强度激光也能 增强肌纤维和成肌细胞的稃活。在实骏中发现抗衰老骚自b c l - 2 的裘达大大的增 强了，毽蛋巍b a x 夔表达降低。在实验串，p 5 3 帮c d k ( c y c l i n - d e p e n d e m k i n a s e ， 周期依赖性激酶) 的抑制予p 2 1 的表达降低。这一实验表明低强度激光在一定程 度上能抗衰老，同时对损伤后的肌肉露修复有重要朗意义 s h e f e r 毗a l2 0 0 2 。 s h c f c r 的另一研究还发现低强度激光携激活m a p k e r k 途径。所以遴过激活 m a p k e r k 而不激活j n k 和p 3 8m a p k 酶，低强度激光能刺激骨骼肌卫星细 邃嚣增皴窝延避努耽 s h e f e r e ta l2 0 0 t 。 1 1 蠢逢纛鳐蕤 o k a n e 研究了低强度激光( 6 6 0n m ，1 2 r ，5k h z ) 在两种造血细胞h l - 6 0 帮u 9 3 7 中的作用。照掰强度为1 0 垂1 1 5 j 惩o 。瑾，6 0 缅胞程大于或等于5 , 8 肌m 2 时，被照射豹细胞的3 h - t d r 降低。在u 9 3 7 细胞巾，5 8 ，7 2 ，和1 1 5 l c m 2 的照射也使3 h - t d r 降低t o k a n e c ta l1 9 9 4 】。l o g a n 研究了低强度激光 ( 6 6 0 琳，1 2m w ，5k h z ) 对噫巍动魏绷腱憨缨戆毒性联遗黄毒性影噻。绩栗发 现低强庶激光对细胞没有细胞毒性和遗传毒性的损伤，这一实验表明低强度激光 瓣绍稳没有蘩害律矮 l o g a n e ta l1 9 9 5 1 。敬阳淹等秘疆究结票表鞠，不瓣波长对 造血细胞的作用效率不同，他们用激光照射人胎肝造瓶细胞，造血细胞在波长 5 4 0r li t i 楚有翻艇的吸收蜂，两桎4 8 8 帮6 3 2 ，8 n m 娃程枝不鞠簸 o ue ta l 1 9 9 3 。 孙酬经等以铜蒸汽激光为光源，输出礤种激光波长分别为5 1 0 。6 和5 7 8 2 r i m ， 平均输出功率为i m w ，照射人胎及亲嫩小鼠骨髓细胞，结果照示，两种波长 对人骀、小疑骨髓造血细胞g m c 飘j c 均有明显豹促增戆偿用。不同能爨对遥血 细胞作用效率也不同 s u n e ta lt 9 9 3 。脬位阳【ue ta li 辨9 】报道了5 1 0 6 r i m 激光 鼗逵盘缎瑰蕤蒯激终鼹，蓑瑷激光麓髓使鬏粒巨噬缨魏集落影残单饿 ( g m c f u c ) 增多。 1 2 低强度激光生物刺激作用的机制 低强度激光具有确定的细胞效应 k a r u1 9 9 8 1 ，但是遮种效应的产生机制并不 赘了。剃承宣等撵密了低强度激兜静信忿生裙穰鍪( b 琢糟) l i u t c y1 9 9 9 2 0 0 3 ， 刘承宜等1 9 9 7 ，1 9 9 9 & 2 0 0 0 ，从协同光信号转导( c o l l e c t i v ep h o t o t r a n s d u c t i o n ) 的角度成功解释了低强度激光的信息功能。 与缨胞发生作用的w 见光波段的激悲银多。这里先对可见必给出一个分类。 爵觅光对予串医并不黼生，它将可觅先分为两类，辩疆像( 级笆、橙色、黄色) 蘩l 冷色( 青色、绿色、蓝惫、紫色) 。b i m p 将疆色扩袋弱毽括红舞先，将冷色 扩展到包撼长波紫终u v a 。 书网细胞螅生理过程，有誉屈的分类。对予盘缎腿、血管内皮细腿、乎潺舰 细胞和巨噬细胞擦介蹲细臌功熊的信号通路比较清楚的细胞。可以按照馈号转导 途径来分类： 途径l ：g s 蛋白介导的信号通路：c a m pf ： 途径2 ：c 岣蛋白，g i 蛋白或受体藩联酶介辱的信号通路：c a m p l 。 对于成纤维细胞，细胞信号通路比较复杂，可以按照细胞的功能来分类： 途径1 ：胶原合成；途径2 ：细胞分裂 按照b i m p ， 疆色兴奋信号途径l 冷色蜓奁傣号途径2 茭了讨论鲍方蠖，壤上述模型称走b i m l l 。 根据b i m p 可知，b i m p i 的成立煮一定的剂量范围。强激悲的刹量趣过 b i m l i 成立的阕值时，可以得到b m 职2 ： 冷色兴奋途径i 暖色兴奋途径2 这个剂量范围是研究得最多的。b i m p 2 得到了3 0 0 j m 2 低强度h e - n e 激光诱导牛 中性粒细胞产生呼吸爆发实验【1 ) i i 粗桃缸2 0 0 l 】豹直接验证。用化学发光法测豢激 笼诱导中往粒细施在体舞砰瑷璨发，糟g e t , s t e i n 等旅内信号转导分子活往撺籁帮 研究产生这一效瘫静信号转寻途径。实验发璜，酪氮酸蛋自激酶( p t k s ) 静利 赛jg c n i s t e i n ( 1 0 0 m ) 黝籍了这一效瘦，臻l 鏊薅c ( p l - ) 撺测裁u 一7 3 1 2 2 ( i m ) 秘蛋白激酶c ( p k c ) 接制裁c a l p h o s f i nc ( 5 挞) 部分挪到了这一效应。实验缝 鬃表明，f t k s 在诱导呼吸爆发过程中起羹要体用；【嗽- p c p k c n a d p h 氧 化酶】这一信号转导途径可能参岛了激光诱导呼吸爆发产生的过程。3 0 0 j i m 2 属于 第二个剂量段。h e - n e 激光属于暖光。p t k s 介导的信号通路属于途径2 。显然， b i m p 2 成立。 当激光的剂量越过b i m p ( 2 n - i ) 成 的阈值时，根据b i m p ，可以得到 9 b i m p 2 n = b i m p 2 ；当激煮靛剂薰超过b i m p 2 n 成立的蠲俊酵，授据b i m p ，可以 褥到b 瓣 2 n + 1 ) = b i m p l 。 鑫骇主魏理论攘羹，我髓霹蔽穗不蠲冒冤凳对动懿凌蕤戆渡鳃影虢翘终受裘 1 。飙袭t 爵默溪窭，不瓣绷腿瓣裁嚣段是不疑鲍。k i p s h i d z e 等入 1 9 9 6 1 逶避臌 用不同裁爨的h e - n e 激光照射裹体蟥箨的兔秘人约啦警内皮细臌( v e c ) 期警 爆辍鬃瑰( v s m c ) 臻窕发瑷，裁量必0 5 4 x 1 0 4 j m 2 辩，v e c ( 祷会b i m p 2 ) 冬 周围组织的粘贴力增加、嫩长和繁殖滤魔加快、活校增疆，而v s m c ( 符合b 琢糟3 ) 无明显增殖；剂量为1 6 x 1 0 4 j m 2 时，v e c ( 符合b i m p 3 ) 的增贿速度已低乎对 照缓，瑟v s m c 秘燹臻爨增夔；热鼹为5 4 x 1 0 4 j m 2 孵，v e c 秘v s m c 麓生长 遮度、潘髋等均被畴臻撺制。k i p s h i o z e 等人0 9 9 6 1 的实验表嘲，辩h e - n e 激淹， v e c 豹搁激芙系与v s m c 的剂量关系怒不同瓣，遮煮可以需求对不阊的绷施 进孬蚕霜懿黧凌溪萤终蘧。 t a b 1 1 a c t i o n o f v a r i o u s b a n d s o f l i g h t o n m a n a m l i a n c e l l u l a r c u l t u r e s w a v e l e n g t h c i l l 瓣 a c t i v i t y s t i m u l a t i o ni n h i b i t i o n 攥螃d o s e 。l | 意d o s e 。j m s b i 劓肇r e f e r e n c e s * c o l dc o l o rh 区詹p r o f i f e r a f i o n1 0 l f i g s 1 1 2 & 3 1 6 3 2 8鞭托9 c e l t sp m t i f e r a t i o nl l ol p 。2 0 5 6 3 3h e l ac a 卅1 0l f i g + 7 1 0 h m n a n d i p l a i dc o l l a g e nt y p e 6 3 2 。83l p 。2 0 6 s k i nf i b r o b t a s t sip r o d u c t i o n h u m a n 稻2 零 l y m p h o c y t e s + p r o l i f e r a t i o n5 62t a b s 。5 。期嗒3 p 姒 h o t c o l o rh e l ap r 娟毳瞌m露2 f i g s 1 。1 2 & 3 t a 斑* h a m s t e r 6 3 社3 3p r o l i f e r m i o nl 矿2犯出7 1 f i b r o b l a s t s h m r e m b r y o n i c 6 3 2 。8p r o l i f e r a t i o n1 0 22t 曲7 1 f o s k i nf i b r o b l a s t s 6 3 2 gr e d 确o o dc e l l s d e f o r m 癍f l i 塔 l 护2y o v a o t a l1 9 9 4 8 6 3 2 8h e l ap r o l i f e r a t i o nt 妒2弧7 1 6 3 2 ，8h c l a c l o n o g e n c i c i t y i 0 l l 护) 1 0 42 f 嚏4 。5 a c e t t 群k t r d t e s 蠛破 积2 i sm o o s em a s te d s2 。4 x l 2 r e l e a s e1 9 8 8 2 1 6 6 03 , i 3f i b r o b l a s t sp r o l i f e r a t i o nt 旷2，托e t 斌1 9 9 3 0 h a m a n s h i e l d se ta l 6 6 0m o n o n u g l e a rp r o l l f e t m i o n1 0 42 1 9 9 妒3 l e a t c o e y m i o c d 4t - c e l l sm c g o w a ne ta l 6 6 0i l 2r e l e a s e1 0 42 + p h al _ 9 9 6 “ 珏弹嘲赶。鲻e w e b b 班越 6 胡s c a r - d e r i v e dp r o l i f e r a t i o n2 4 4 x l o 2 1 9 9 9 b f i b r o b l a s t s b a c 谢a2 4 。 6 6 0 h u m a n 瞻u n o l 煅i i s 2y u e ta l1 9 9 7 “ k i l l i 鸭 4 ，8 x l 扩 拜b 柏5 1 y m p h o b l a s t o i d p r o l i f e r a t i o n1 护3t 抽7 1 o e u s z h e n g e t 矗3 2 8r a t m a c r o p h a g e s c a m p * -l 妒4 a 1 1 9 9 1 ” h t m m n m e l a n o m af 2 年2 + 8 ) 6 9 4 3p r o l i f e r a t i o n41 铀7 1 c u l t u r e1 0 6 m o u s tf i b r o b l a s t s 6 9 4 3p r o l i f e r a t i o nl 旷 41 j 幽，7 。t l 9 捞 o k a m1 9 9 8 l l 第2 章低强度激光爨射疗法与伤疆愈合 最早应用低强度激光照射治疗伤口的是m e s t e r m e s t e re ta l1 9 7 1 1 在1 9 7 1 年 强薤宝羲激竞( 0 。5 1 0 j c m 2 ) , , 照, 粪雩夺鬣鸷嫠烧穆翅覆( 壹径4 5 m m ) ，发鬟i j e r n 2 照射剂辫的激光能脊效地促进伤妇愈合。至此以后，低强度激光照射因其熙著的 疗效而猩临床上被用于促进多种原因造成的伤口的愈合。很多学者从不同角度对 晓透露了大量豹繇究，毽由手影豌爨疆塞舍戆藤索较多，磷变缝莱不一羧，戮至 于这问题至今仍处于母论中 k a t e1 9 9 9 1 。 2 1 动辘实验模壅靛舔竟疆寨 1 9 7 1 年，m e s t e r v l e s t e r e ta l1 9 7 1 1 等报道筑寰石激光照射髓促进小氯觜部的 枫辘毪损伤伤面霸浇伤伤面豹愈含。 1 9 8 1 年k a n a k a n ae t a l 1 9 8 1 1 用打孔器谯大鼠背部两恻器制造一个赢径为 1 5 m m 的园形全屡皮腚伤口，左懊l 伤日照射治疗，右侵作为对照。分别采用h e - n e 激先、波长为6 3 0 r i m 的菲相干荭溅、氩激光爨及波长为5 4 0 r i m 的菲耜千缘光， 能量密庹为4 、1 0 、2 0 j e r a 2 。致伤后1 6 1 8 小时开始照射，每天1 次共1 7 次。 分别程致伤后l 、3 、7 、1 2 、1 7 天溅定伤口大小，殴及在繁1 8 天测定侥霸瘸皮 组织弪腑氨酸的含爨。结果显示，4 j c m 2 的h e - n e 激光及波长为6 3 0 r i m 的非相 干红光具有促进伤口愈合的作用，熊疗效出现农伤后3 1 2 必，对侧未照射伤口 无明显效果。氩激光及波长为5 4 0 r i m 戆菲耜予绿光无姥效应。毖量密度受4 j c m 2 豹h e - n e 激光及渡长为6 3 0 a m 静j # 相干荭必牒射均明显攥麓癞皮组织羟黼氯酸 的含量，但对侧伤口羟脯氨酸来蹙影响。能量密度为1 0 j e 拼的氩激光及波长为 5 4 0 r i m 瓣菲相干绿懋照射，显著媲舞毫冠侧及鞑壹l | | 侥日癫皮缀织羟骧氨羧的含 量。 b a s f o r dj r b a s f o r de t a l1 9 8 6 镩用连续输出的 i e n e 激光，光源通过光纤输 窭，握铰必缍敕头( 躐臻日2 e 噩) 使激蠢在巍日表嚣亲嚣扫援，每天一次、每次秘 秒，每周6 次；紫外线照射，通过对伤口愈合时间、伤口组织的张力及伤翻菌落 计数的测定，未发现上述三种处理方法间有显糟箍异。 h u n t e r h u n t e r 院a l1 9 8 4 鞋0 。9 6 j c m 2 懿h e - n e 激竞照射猪皮伤口，米发理 箕其霄稳定魏刺激效藏。 l y o n sr f l y o n s e la lt 9 s t j 等用h e - n e 激光，能量密度为1 2 z l l c m 2 - 照射小 鬟身主缝合瑟痿日，隔晨爨辫一次，薅个胃肄发蠛激蠢照射维携露缝缳鹣驳撮含 量显著离予对照组；两伤口组缀强力刘在第一髑耩第二周嵩予对照组。该文捧者 认为激光促进伤口愈含还可能通过加强胶原分予的交链或使原有胶原分子的功 夔熟强嚣爽魂。 通过广泛查蠲鞠燕文献，我嚣j 对低强度激光在不同承平( 动耪活俸，细胞， 免疫，m 液) 对伤e l 撒的影响和众察学者对其机理的研究结果进行分析和撼理。 我爨发现：动携活彝锈窭愈合熬蕊黎牵，多数露卷靛研变缝巢诞实低强蹙激鬼其 有促避伤口愈合的 譬用( 表2 1 ) ，但也有相当数爨的结果未发蕊激光有键谶伤口 愈合的怍用( 表2 2 ) 。 表2 。1 低强度激光澈宠照射治疗韵镌伤口愈合有效的文献 表2 2 蠛强度激光激趣骶射治疗动物岱霜愈合无效的文靛 l 王 第3 章成纤维细胞与伤口愈合 缨飕墙器( c e l t - - c u l t u r