清洁验证培训.ppt

,清洁验证,编译自Aventis培训资料及施雄杰培训资料,内容,简介范围验证过程概述监控物质取样方法可接受标准分析方法学文件监控、变更和再验证,简介-清洁验证目的,避免污染：Avoidcontamination；避免交叉污染：Avoidcross-contamination；消除细菌污染：Eliminatebacteriacontamination；,简介-清洁的定义,目测清洁设备表面无异物首要条件！分析清洁分析数据支持设备是清洁的微生物清洁微生物数据支持设备是清洁的,简介清洁验证要素,指南：ICHQ7FDA清洁验证检查指南1993批准/受控的清洗程序验证方案经过验证的化学/微生物检测方法批准的验证报告(结论：清洁程序有效，达到可接受标准）有效的培训/变更控制,清洁验证范围,生产和包装原料药和制剂的相关区域和设备必须做清洁验证。对于生产临床试验批的多功能车间不完全适用允许通过每次检验来确认设备清洁。,清洁验证程序概述-1,检查设备的确认状态（IQ/OQ/PQ)列出该设备生产的全部产品清单（多功能）验证主计划-明确需做清洁验证的产品或中间体-矩阵法判断（多功能设备）列出可能的清洁剂选择清洁剂找出设备难清洗部位设计和发展清洁方法,清洁验证程序概述-2,建立可接受标准，选取两种认可的方式之一：定量限度或目测清洁-分析清洁（VCAC)检测方法的建立和验证撰写清洁验证方案方案实施撰写/批准验证报告确立清洗方法培训计划,清洁方法重要信息-1,设备拆卸要求所用清洁剂的浓度和体积；或者仅用热水浸泡/搅拌时间冲洗时间和体积清洗剂或者水与产品的兼容性,清洁方法重要信息-2,清洗剂/水的温度或设备的清洗温度是否加压或者使用机械手段建立并控制时间节点：在设备使用后到开始清洗的时间间隔在各个清洗步骤之间的时间间隔设备干燥的方法洗液处置,监控物质,3个基本类型:化学的*,微生物的*和颗粒物(particulates)化学的对于制剂:活性物质*,辅料,清洁剂*对于原料药:活性物质*,原料,中间体,副产物和清洁剂*.*为首要关注,仅在目测清洁合格后才可进行取样直接取样“首选的技术”擦拭取样接触取样：为检测微生物负载（Bioburden)优选的方法间接取样终洗液取样不易接触部位拆卸易造成设备损坏的情况，常用于原料药与“脏锅”的类比清洗时效性终洗水的检测不能以常规的水的标准(如USP纯化水)潜在误差,取样要点-取样技术-1,终洗液（淋洗液）样品已知体积的溶剂淋洗一定的区域，所得到的溶液用于进行分析擦拭取样用蘸了溶剂的介质擦拭一定的区域,然后再将残余物质从介质中提取出来如可行，是“首选的取样技术”,取样要点-取样技术-2,均一性-对验证计划成功很关键-高效,可重现,有文件记录定向擦拭法（Squeegee）与随机擦拭法明确的责任-擦拭人确认合格-QA部门,擦拭技术,定向擦拭（Squeegee）技术,或者,第一次,第二次,仅对清洁的并且干燥的设备取样清洁后应及时进行取样清洁验证过程中应评估时间间隔效应设备表面残留物经放置后可使清洁方法有效性下降“结块效应“,取样时机,取样记录内容取样时期和时间取样人取样方法号取样点描述样品送到实验室签收/日期/时间特殊储存要求备注偏差,取样文件记录,设备制造商建议/其他用户经验过去/现在的经验图示和照片有效说明取样点选择GMP区域潜在的污染机会减少,取样点和环境,设备与产品接触部分充分的代表性，以增强可信度每个主要设备至少取3点(最好5点)额外考虑因素：难清洗部位设备材质接触表面的质地(光滑/粗糙/等）资源限制,取样点数目,容器类型：保护样品的完整性容器的标识方案编号设备编号产品名称批号样品编号取样点样品描述取样日期和时间取样人签字样品有效日期/时间,样品的储存和标识,微生物检测取样结束，去除残余的取样琼脂（agar)保证设备安全，并按照SOP适当关闭好设备待检保持对设备的”控制“若已清洗的设备在使用前不经过检验，须进行风险分析。设备在使用前一定要保证进行了合适的清洗,取样完成,培训及记录，对于微生物：包括消毒方法成功应用擦拭法及微生物（如适用）接触法取样的文件记录,取样人和清洗人不应为同一人，避免利益冲突,取样人资格确认,微小偏差样品洒掉但可以重新得到报告中记录重大偏差用不合适的清洁剂对已清洁表面取样报告中记录或加附录取样失败要求全面调查可能直至或包括重新验证与相应的现场负责人讨论,取样偏差与失败,原料药目测清洁“分析”清洁两种认可的方式-可定量限度-目测清洁分析清洁(VCAC),清洁的可接受标准-1,连续三次实施清洁方案均达到以上要求，方可认为清洁方法验证完成,适用于所有已清洁且干燥的设备设备表面需要尽可能程度地检查,确认是清洁的,目测清洁,经典方式需要考虑:设备总表面积产品批次大小剂量：单一剂量/日剂量安全因子100-100,000毒性考虑-LDs基质效应（Matrixeffects）最差情况,分析清洁-可定量限度方式-1,可定量限度方式-2,典型的可接受标准:最小日剂量的1/1000LD50基于毒性最小治疗剂量的百分比对信息的保存和变更控制监控要求高,保证在下一个产品最大日剂量中含有的待检目标物质最高不超过其自身最小日剂量的0.1%；同时限定该目标物质在下一个产品中的最高含量水平（比如10ppm)。,可定量限度方式-3,可定量限度方式-4,例如,A代表上一种产品，B代表待生产的品种，限度L1计算方法:(0.001)(产品A中活性物质最小日剂量)(产品B最大日剂量)L1可以设定为以上计算值或者人为指定的更小值,L1=,可定量限度方式-5,一旦确定了L1,可通过计算确定单位表面允许的目标物质残留限度L2:(L1)(下一种产品的最小批量)(设备接触表面积)L2的单位是重量/表面积.不能够直接进行分析测量,L2=,可定量限度方式-6,对于一定的设备表面区域进行擦拭取样，然后将目标物质从擦拭签上解吸附到已知体积的溶剂中。对得到的溶液进行分析，限定目标物质残留限度L3.(L2)(擦拭的表面积)(提取用溶剂体积)分析方法测量的是L3,L3=,潜在局限性同一场地，多重标准不同的标准要求再验证，占用资源多变更控制不同产品线-设备变化表面积不同允许用计算出的代表设备目测不清洁的沾染量作为判定标准。,可定量限度方式-7,VCAC方式（目测清洁-分析清洁）,分析清洁：药物活性物质分为两个类别低治疗剂量药物活性物（高活性）:大鼠口服LD50小于100mg/Kg以及剂量小于1mg标准治疗剂量药物活性物:在以上1类以外的都算,分析清洁要求适用于任何已清洁、干燥设备的所有表面每个主要设备至少需要3个取样点(储罐,压片机,制粒机,自清洁系统),每个主要设备的活性药物残留所有检测结果的平均值必须达到以下标准：且每一个药物活性物质残留检测结果均不得超过以下标准：,分析清洁标准,标准治疗剂量药物活性物质不超过100微克/100cm2,低治疗剂量药物活性物质不超过10微克/100cm2,标准治疗剂量药物活性物质不超过200微克/100cm2,低治疗剂量药物活性物质不超过20微克/100cm2,清洁剂目测清洁(通常是最难达到的标准)分析清洁连续三次实施清洁方案均达到以上要求，方可认为清洁方法验证完成如果清洁剂不留残余可以不要求分析检测(例如水，异丙醇)(限度/计算略),清洁的可接受标准-2,微生物可接受标准,微生物清洁目测清洁、干燥根据历史数据建立警戒限和行动限未建立专属(specific)的可接受标准,分析方法-1,清洁验证使用的分析方法是整个验证的关键因素!方法应对检测低含量足够灵敏考虑稀释体积与可接受标准相关联技术上分为两类:专属性方法非专属性方法,分析方法-2,专属性方法HPLC(优选)TLC,非专属性方法UV/VIS电导率,GC专属离子电极,pHTOC（总有机碳）,分析方法-3,非专属性方法UV稀释样品使之与已验证的浓度范围一致；样品应以空白签对照溶液读数！TOC(TotalOrganicCarbon，总有机碳)高活性物质与无活性物质没有区分须谨慎应小心选择擦拭法作为常规监测,分析方法-4,专属性方法HPLC:首选方法使用空白样品没有重大的干扰,研究和产品接触的设备表面相同的表面类型金属表面非金属表面如有可能，设备最好“专用”特氟龙垫片，丁腈橡胶隔膜-潜在可被提取物质,分析方法验证-1,限度检查法：专属性回收率检测限（LOD）样品溶液的稳定性系统适应性,定量检查法专属性精密度线性/范围回收率定量限（LOQ）样品溶液的稳定性系统适应性,分析方法验证-2,方法必须经过验证通常需要验证的参数：,清洗溶剂的选择润湿擦拭物溶解目标化合物擦拭物材质的选择与溶剂兼容?萃取溶剂的选择体积很重要注意空白样的使用!,不能对待验物质产生干扰！,专属性,回收率=从已加样表面的回收率+从擦拭签上的回收率淋洗液取样回收率也作要求加样/回收率研究参考要求：加样范围:平均限度的50-250%(VCAC个例：2倍平均值)每个加样水平至少做三块板不同天的检测回收率须可重现回收率:加样板结果的中间值(75%).计算时必须考虑回收率！,准确度,加样擦拭签的回收率表明溶剂用于擦拭的有效性加样板的回收率准确预测通常的回收率情况回收率矫正因子对低于100%的回收率给予补偿,回收率,表面延迟时间在设备清洁后到擦拭取样之间的时间段擦拭签延迟时间在擦拭签取样后到溶剂提取前的时间段溶液稳定性标准品稳定性和擦拭签提取溶液的稳定性,清洗检验方法的稳定性,单位面积的残留量允许对工艺流程中所有设备或某一指定的设备做补偿BelowLOQ如果结果小于LOQ,则结果表达为“小于定量限（LOQ）”应尽量避免用“未检出”或结果为“0”表达。,结果报告,微生物方法验证-1,方法的可接受标准:定量回收微生物计数定性回收微生物鉴别方法验证：回收率须符合加样浓度和回收方法的预期考虑正常取样和接种的误差范围建议加样范围：可回收菌落10-100CFU/取样区域建议取样区域：25cm2金属和非金属表面方法相同,稀释剂的选择用于湿润擦拭签，以从待检测表面获取微生物方法选择擦拭到标准培养皿vs.与琼脂接触培养皿直接接触（RODAC=ReplicateOrganismDetectionandCounting）培养基选择适合的专属培养基可中和残余清洁剂和消毒剂的基质生长支持；消毒条件；储存条件和失效期,微生物方法验证-2,培养条件温度时间氧气需求稳定性问题基于清洁干燥的设备不支持微生物繁殖的前提，表面的取样延迟不是关键的问题样品待检-最好在取样两小时内检测,微生物方法验证-3,结果报告以单位面积CFU(菌落数)表示建议限度产品接触的设备表面：5cfu/25cm2洁净室墙壁、天花板：10cfu/25cm2洁净室地面：20cfu/25cm2,微生物方法验证-4,基本要求责任明确:负责人和部门验证方案:清洁之前起草和批准验证报告:对结论的支持,文件,产品信息方案目的范围职责分配设备或系统描述(流程图)取样(和原理)可接受标准原理取样点原理,方案内容,清洗方法检测方法数据报告及评估失败预案附件图片/图谱/SOP等.批准,方案内容,其他文件,清洗方法/程序清洁剂的准备和储存擦拭物的准备，流程和储存样品标签和容器的准备清洗液取样目测检测程序清洗后分析控制方法/程序分析方法验证,在方案基础上表达，并关注：取样记录检测方法偏差,验证报告,失败调查OOS调查增加的实验结论批准质保部,培训记录应包括:培训内容培训者；资质日期/时间/时长批准关键人员清洗人员取样人员分析人员,培训信息,“再验证”程序设备变更/改进人员变更产品剂型改变工艺变更清洁剂变更程序的周期性回顾,变更控制,监控和再验证,监控周期性评估，找出微小变化：流程有效性是否比原来验证时差一些了？实际反映出缺乏有效的变更控制程序日常检查(目测/非专属及专属方法）支持变更控制和再验证的需求,再验证,如果变更影响到先前的验证，则可能需要再验证。生产部门和QA必须周期性评估再验证需求，与验证主计划或国际认可标准一体化。,再验证变更控制,清洁验证是一项系统性