（流行病与卫生统计学专业论文）oxldl与食管癌的关联及机理探讨.pdf

原创性声明 f f 删川i f f f l i f l 丫u1 。l l 8 , , , 8 1 , ij 1 3 | u 1 6 | l lr l | 6 1 1 1 1 i r5r i 1 | 。 本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下， 独立进行研究所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本 论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。 对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方 式标明。本人完全意识到本声明的法律责任由本人承担。 论文作者签名：坦互奎 日 期：2 型：篁 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解济南大学有关保留、使用学位论文的规定，同 意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子 版，允许论文被杏阅和借鉴；本人授权济南大学可以将学位论文 的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩 印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。 囱公开 口保密( 年，解密后应遵守此规定) 论文作者签名：整至童 导师签名：虹墅幺u 日期：世 目录 中文摘要i i 英文摘要 主要符号表 论文正文 第一章o x l d l 与食管癌衍变阶段的关联性研究 前言1 日舌l 材料与方法3 结果6 讨论一1 6 结论l 9 第二章o x l d l 对人食管癌细胞株e c a l 0 9 增殖的影响及机理探讨 前言2 0 刖 舌z u 材料与方法2 l 结果3 2 讨论5 8 结论6 3 研究的创新、不足和建议6 4 参考文献 6 5 附录一7 3 综 述7 7 攻读学位期间发表的学术论文 8 7 致谢8 8 o x l d l 与食管癌的关联及机理探讨 专业：流行病与卫生统计学 研究生：崔佳 导师：甄天民研究员 李会庆研究员 摘要 研究目的 以食管鳞癌不同衍变阶段的患者为研究对象，观察氧化低密度脂蛋白 ( o x l d l ) 与食管鳞癌是否存在关联；如果存在关联，利用体外细胞培养实验探 讨其可能的作用机理。 研究内容和方法 一o x l d l 与食管癌衍变阶段的关联性研究 1 研究对象肥城市食管病变碘染色内镜筛检及病理活检确诊的食管鳞状上皮 细胞正常3 3 例，食管基底细胞增生3 7 例，食管鳞状细胞不典型增生4 7 例，食 管鳞状细胞癌( e s c c ) 4 3 例。 2 血脂指标测定血清总胆固醇( t c ) 、甘油三脂( t g ) 、高密度脂蛋f d ( h d l ) 、低 密度脂蛋白( l d l ) 水平采用酶比色法测定；血清白蛋白以溴甲酚绿( b c g ) 法测 定；o x l d l 、o x l d l 抗体( o x l d l a b ) 、o x l d l 抗体l g g 亚型( o x l d l l g g ) 和 l g m 亚型( o x l d l l g m ) 水平采用酶联免疫吸附( e l i s a ) 方法测定。 3 统计方法应用s p s s l 5 0 统计软件进行单因素分析或多项式l o g i s t i c 回归分 析，p 0 0 5 认为差异有统计学意义。 n 二o x l d l 对人食管癌细胞株e c a l0 9 增殖的影响及机理探讨 1 甲基四唑蓝( m t t ) 比色法检测o x l d l 及抗体成分对e c a l 0 9 细胞株的增殖抑制 率，o x l d l 对阿霉素( a d m ) 所致e c a l 0 9 细胞增殖抑制的影响。 2 细胞凋亡指标的测定：吉姆萨染色光镜下观察细胞凋亡的形态学改变；流式 细胞术检测细胞凋亡率和细胞周期改变。 3 r t - p c r 和w e s t e r nb l o t 检测o x l d l 及其与a d m 联合对细胞凋亡相关基因及 蛋白b c l 2 、b a x 和c a s p a s e 3 表达水平的影响。 结果 一o x l d l 与食管癌衍变阶段的关联性研究 1 单因素分析显示：食管癌衍变阶段四组中，年龄、血清白蛋白、t c 、h d l 、 l d l 、o x l d l 、o x l d l a b 、o x l d l 1 9 g 和o x l d l - l g m 水平差异有显著性，而其 它因素差异没有统计学意义。 2 随着食管组织病变加重，血清o x l d l 、o x l d l a b 、o x l d l l g g 水平趋向降低， 而o x l d l 1 9 m 水平趋向上升。调整年龄、t c 、l d l 、h d l 和血清白蛋白等混杂 因素后，四组间o x l d l 和o x l d l l g m 水平仍有显著性差异；而血清o x l d l a b 和o x l d l 1 9 g 水平无显著性差异。 3 食管癌衍变阶段与血清o x l d l 、o x l d l a b 、o x l d l 1 9 g 水平呈显著负相关， 而与o x l d l 1 9 m 水平呈显著正相关。 4 调整年龄、t c 、l d l 、h d l 和血清白蛋白等混杂因素后，o x l d l 值增加对食 管癌有保护作用( o r = o 9 4 ，9 5 c i ：0 8 9 0 9 9 ) ；而o x l d l - l g m 增加不典型增 生和食管癌的危险性，o r 分别为1 1 1 ( 9 5 c 1 - 1 0 1 1 2 3 ) 和1 1 8 ( 9 5 a ： 】0 6 1 3 1 ) 。 二o x l d l 对人食管癌细胞株e c a l 0 9 增殖的影响及机理探讨 1 对细胞增殖的影响 1 1 随着o x l d l 浓度的增加和作用时间的延长，e c a l 0 9 细胞的存活率降低，且 呈剂量时间效应依赖关系。 i i i 1 2o x l d l a b 及o x l d l r - a b 对e c a l 0 9 细胞的活性基本无影响；o x l d l a b 对 o x l d l 所致的细胞活性抑制无显著作用；而o x l d l r a b 可明显减少o x l d l 所 致的细胞活性抑制作用( 抑制率从2 7 7 3 降到7 3 1 ，p 0 0 5 ) 。 1 3 随着a d m 浓度的增加和作用时间的延长，e c a l 0 9 细胞的存活率降低，且呈 剂量时间效应依赖关系。 1 4o x l d l 可明显增强a d m 所致的细胞活性抑制( 抑制率由a d m 组的2 8 3 5 增至4 3 9 7 ，p 0 0 5 ) ，两因素存在协同作用。 2 对细胞凋亡的影响 2 1o x l d l 及a d m 使e c a l 0 9 细胞出现凋亡形态改变，可见凋亡小体甚至核崩解。 2 2 随着o x l d l 浓度的增加和作用时间的延长，e c a l 0 9 细胞的凋亡率升高，有 明显的量效和时效依赖关系。 2 3o x l d l a b 对o x l d l 所致的细胞凋亡率无显著作用；o x l d l r a b 可减低 o x l d l 所致的细胞凋亡( 凋亡率从1 5 1 1 降到1 2 5 8 ，p 0 0 5 ) 。 2 4o x l d l 可使a d m 诱导e c a l 0 9 细胞的凋亡率由1 1 2 7 增至1 9 7 9 ，p 0 0 5 ， 主效应及其交互作用都显著，两因素存在协同作用。 3 对细胞周期的影响 3 1 随着o x l d l 浓度的增加，e c a l 0 9 细胞周期的s 期和g 2 m 期比例逐渐增加， g 0 g 1 期比例逐渐减少，出现s 期阻滞。 3 2o x l d l a b 和o x l d l r - a b 基本不能改变细胞周期分布，o x l d l a b 对o x l d l 引起的细胞周期改变无影响；而o x l d l r - a b 使o x l d l 对细胞的s 期阻滞作用 降低( 由2 9 8 6 降至2 4 9 7 ，p 0 0 5 ) 。 3 3o x l d l 和a d m 单独作用使细胞的s 期比例升高( 由对照组的2 2 0 3 分别上 升至2 9 8 6 和6 2 5 9 ，p 0 0 5 ) ，出现s 期阻滞；o x l d l 与a d m 联合使细胞 的g j m 期比例增至7 5 6 6 ，p 0 0 5 ，细胞周期阻滞于g z m 期。 4 对细胞凋亡相关基因和蛋白表达的影响 o x l d l 显著降低e c a l 0 9 细胞b c l 2m r n a 和蛋白表达水平，升高b a x 、 c a s p a s e 3m r n a 和蛋白表达水平，并使b c l 2 b a x 比值降低。o x l d l 和a d m 联 合使b c l 2m r n a 和蛋白表达水平较单独作用组明显降低，而b a x 、c a s p a s e 3 m r n a 和蛋白表达水平显著升高。 i v 结论 1 随着食管黏膜上皮细胞由正常到基底细胞增生到不典型增生再到食管鳞状细 胞癌病变的加重，o x l d l 及o x l d l a b 水平呈下降趋势，与食管癌的发生呈负 相关；而o x l d l 1 9 m 亚型抗体水平呈上升趋势，与食管癌的发生呈正相关。 2 o x l d l 具有明显的细胞毒性作用，能抑制食管癌细胞的增殖，出现细胞凋亡 的特征改变。o x l d l 能显著降低细胞凋亡相关的b c l 2 基因和蛋白表达水平，升 高b a x 和c a s p a s e 3 基因和蛋白表达水平。 3 o x l d l a b 及o x l d l r a b 单独应用对食管癌细胞增殖基本无影响；而 o x l d l r a b 能部分减低o x l d l 的细胞毒性作用。 4 o x l d l 与a d m 对食管癌细胞毒性有协同作用。 关键词 食管癌；氧化低密度脂蛋白；氧化低密度脂蛋白抗体；氧化低密度脂蛋白受体抗 体 v a s s o c i a t i o nb e t w e e no x l d la n d e s o p h a g e a l c a n c e ra n dt h e p o s s i b l em e c h a n i s m m a j o r ：e p i d e m i o l o g ya n dh e a l t hs t a t i s t i c s p o s t g r a d u a t e ：c u i j i a i n s t r u c t o r ：z h e nt i a n m i np r o f e s s o r l i h u i q i n gp r o f e s s o r a b s t r a c t o b j e c t i v e s t h ep u r p o s eo ft h es t u d yi st op r o v ew h e t h e ro x i d a t i o nl o wd e n s i t yl i p o p r o t e i n ( o x l d l ) h a v ea s s o c i a t i o nw i t ht h er i s ko ft h ec a r c i n o g e n i cp r o c e s so fe s o p h a g e a l s q u a m o u sc e l lc a r c i n o m a ( e s c c ) a n dt od i s c u s st h ep o t e n t i a lm e c h a n i s mi nc a s et h e r e i sa na s s o c i a t i o n c o n t e n ta n dm e t h o d s i as t u d yo ft h er e l a t i o n s h i pb e t w e e no x l d la n dt h er i s ko ft h e c a r c i n o g e n i cp r o c e s so fe s c c 1 t h es u b j e c t sc o n s i s to f3 3c o n t r o l s 、撕t hn o r m a le s o p h a g e a ls q u a m o u se p i t h e l i a l c e l l s ，37c a s e sw i t he s o p h a g e a lb a s a lc e l l h y p e r p l a s i a ( b c h ) ，4 7c a s e s 谢t h e s o p h a g e a ls q u a m o u sc e l ld y s p l a s i a ( e s c d ) ，a n d4 3c a s e sw i t he s c c ；a l la r e d i a g n o s e db ye n d o s c o p i cb i o p s yv i ap a t h o l o g yi nt h es c r e e n i n gp r o g r a mi nf e i c h e n g c o u n t y 2 t e s tt h el e v e lo f c o m p o n e n t so fs e r u ml i p i d s e r u mt o t a lc h o l e s t e r o l ( t c ) ，t r i g l y c e r i d e s ( t g ) ，h i g h - d e n s i t yl i p o p r o t e i n ( h d l ) ， l o w - d e n s i t yl i p o p r o t e i n ( l d l ) l e v e l sw e r ed e t e r m i n e db ye n z y m a t i ct e c h n i q u e s ； s e r u ma l b u m i nw a sd e t e r m i n a t i o nb yb r o m o c r e s o lg r e e n ( b c g ) ；o x l d l ，o x l d l a n t i b o d y ( o x l d l - a b ) ，i m m u n o g l o b u l i ng ，a n dms u b t y p e sa u t o a n t i b o d yt oo x l d l ( o x l d l l g ga n do x l d l - l g m ) w e r em e a s u r e db ye n z y m el i n k e di m m u n o s o r b e n t a s s a y ( e l i s a ) 3 s t a t i s t i c a la n a l y s i s ：t h eu n i v a r i a t ea n dm u l t i n o m i a ll o g i s t i cr e g r e s s i o nm e t h o dw e r e c a r r i e do u tb ys p s s15 0 ，p 0 0 5t h i n kd i f f e r e n c eh a v es t a t i s t i c a ls i g n i f i c a n c e i i t h ei n f l u e n c e o fo x l d lo np e r s o ne s o p h a g e a lc a n c e rc e l ll i n e e c a l 0 9 a n dp o s s i b l em e c h a n i s m 1 t od e t e c tt h ei n f l u e n c eo fo x l d la n da n t i b o d i e so ne c a10 9c e l lp r o l i f e r a t i o n ； t h ei n t e r a c t i o ne f f e c to fo x l d lc o m b i n e da d mt os u p p r e s se c a l0 9c e l lr o l i f e r a t i o n 2 t h ea p o p t o s i si n d e xo fe c a l0 9i n d u c e db yo x l d l ：t oo b s e r v et h em o r p h o l o g y c h a n g e so fa p o p t o s i sc e l l su n d e ro p t i c a lm i c r o s c o p ea f t e rag i e m s a ss t a i n i n go ft h e c e l l s ；t h ef l o wc y t o m e t e ri su s e dt od e t e c tc e l la p o p t o s i sr a t e sa n dc e l lc y c l ec h a n g e s f o re a c hg r o u p 3 t h ee x p r e s s i o nl e v e l so fb a x ，b c l 2 ，c a s p a s e 一3m r n a g e n e sa n dp r o t e i n so f e c al0 9c e l l sa p o p t o s i si n d u c e db yo x l d la l o n eo rc o m b i n e dw i t ha d ma lea s s a y e d b yr t - p c ra n dw e s t e m b l o t t i n g r e s u l t s i as t u d yo nt h e a s s o c i a t i o no fo x l d lw i t hd i f f e r e n ts t a g e so f c a r c i n o g e n i cp r o c e s so fe s c c 1 u n v a r i a t ea n a l y s i ss h o w e dt h a ta g e ，t h el e v e l so fs e r u n la l b u m i n ，t c ，h d l ，l d l ， o x l d l ，o x l d l - a b ，o x l d l - l g ga n do x l d l i g mw e r es i g n i f i c a n t l yd i f f e r e n ta m o n g t h ef o u rg r o u p sw i t ht h ed e v e l o p m e n to fe c h o w e v e r , n os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e sw e r e o b s e r v e df o rt h eo t h e rf a c t o r s 2 w i t ht h ed e v e l o p m e n tp r o g r e s s i o no fe s o p h a g e a lc a n c e r , t h es e r u mo x l d l ， o x l d l - a b ，o x l d l - l g gl e v e l st e n d st od e c r e a s e d ，h o w e v e rt h es e r u mo x l d l l g m v i i l e v e li n c r e a s e dg r a d u a l l y a m o n gt h ef o u rg r o u p st h es e r u ml e v e l so fo x l d la n d o x l d l - l e g 4s t i l lh a v es t a t i s t i cs i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s ；b u tn os i g n i f i c a n td i f f e r e n c e s w e r eo b s e r v e df o ro x l d l a ba n do x l d l l g ga f t e ra d j u s t m e n tf o rt h ec o n f o u n d i n g v a r i a b l e sa g e ，t c ，l d l ，h d la n ds c r a ma l b u m i n 3 t h es e r u ml e v e l so fo x l d l ，o x l d l a b ，o x l d l l g gw e r eo b v i o u s l yn e g m i v e a s s o c i a t e dv v i t l lt h ed e v e l o p m e n tp r o g r e s s i o no fe s c c ，h o w e v e rp o s i t i v e l yc o r r e l a t i o n 埘t i lo x l d l - l g m 伊 0 o 1 ) 4 a f t e ra d j u s t m e n tf o ra g e ，t c ，l d la n dh d la n ds e r u ma l b u m i n ，t h e r ew a sa p r o t e c t i v ee f f e c tt oe s c c 诵t l lt h ei n c r e a s eo fo x l d l ( o r = o 9 4 ，9 5 c i ：0 8 9 0 9 9 ) ； w h i l eo x l d l l g ms h o w e di n c r e a s i n gi nt h er i s ko fe s c da n de s c c o rw e r e1 1 1 ( 9 5 c ，1 0 1 1 2 3 ) a n d1 1 8 ( 9 5 c i 1 0 6 1 3 1 ) f o r t h e m r e s p e c t i v e l y 1 i t h ei n f l u e n c eo fo x l d lo np e r s o ne s o p h a g e a lc a n c e rc e l ll i n e e c a l0 9a n dp o s s i b l em e c h a n i s m 1 i n f l u e n c eo nc e l lp r o l i f e r a t i o n 1 1a l o n g 、 ，i t ht h ei n c r e a s i n go fo x l d lc o n c e n t r a t i o no rr e a c t i v et i m e t h ec e l l v i a b i l i t yr e d u c e di nad o s e r e s p o n s ea n dt i m e - e f f e c tm o d e l 1 2n e i t h o ro x l d l a bn o ro x l d r - a bh a di n f l u e n c eo ne c a l 0 9c e l la c t i v i t y t h e r e h a v en oi n f l u e n c eo fo x l d l a bo nt h ev i a b i l i t yi n h i b i t i o ns t i m u l a t e db yo x l d l ， h o w e v e r ，o x l d l - r - a bc a l lr e d u c e dt h ev i a b i l i t yi n h i b i t i o nr a t ec a u s e db yo x l d l ( f r o m2 7 7 3 t o7 3 1 ，p o 0 5 ) 1 3w i t ht h ei n c r e a s i n go fa d mc o n c e n t r a t i o no rr e a c t i v et i m e ，t h ec e l lv i a b i l i t ya n d r e d u c e di nad o s e r e s p o n s ea n dt i m e - e f f e c tm o d e l 1 4o x l d lc a l le n l a r g et h ec e l lv i a b i l i t yi n h i b i t i o nc a u s e db ya d m ( i n h i b i t i o nr a t e s f r o m2 8 3 5 t o4 3 9 7 ，p 0 0 5 ) ，w h i c hi m p l i e st h a tt h et w of a c t o r sm a yh a v ea s y n e r g i s t i ce f f e c t 2 i n f l u e n c eo nc e l la p o p t o s i s 1 1o x l d la n da d mm a k ee c a l 0 9c e l lt oa p p e a rm o r p h o l o gc h a n g e s ，a p p e a r i n gt h e a p o p t o t i cb o d ye v e nn u c l e a rd e s t r u c t i o n 1 2c e l la p o p t o s i sr a t ei n c r e a s e dw i t ht h eo x l d lc o n c e n t r a t i o no rr e a c t i o nt i m e v i i i c a u s e db yo x l d l ( a p o p t o s i sr a t ef r o m1 5 11 r e d u c e dt o1 2 5 8 ，p o 0 5 ) 1 4o x l d lc a l ls t r e n g t h e nt h er o l eo fa d mi n d u c i n gc e l la p o p t o s i s ，f r o m11 2 7 o f a d mg r o u pt 0 1 9 7 9 ，尸 0 0 5 ；t h el o r de f f e c ta n dt h e i ri n t e r a c t i o n ss i g n i f i c a n t l y ， t w of a c t o r se x i s t i n gs y n e r g i s t i ce f f e c t 3 t h ec h a n g eo fc e l lc y c l e 3 1a l o n g 研t l lt h ei n c r e a s eo fo x l d lc o n c e n t r a t i o n ，t h esp h a s ei n c r e a s eg r a d u a l l y ， b u tg 0 g1a n dg 2 mp e r i o dp r o p o r t i o na l eg r a d u a ld e c l i n e 3 2o x l d l - a ba n do x l d l r - a ba l m o s tc a n n o tc h a n gt h ec e l lc y c l ed i s t r i b u t i o n ， o x l d l a bw i t h o u ti n f l u e n c eo nt h ec h a n g eo ft h ec e l lc y c l el e a db yo x l d l 。w h i l e o x l d l - r - a bl e a dt osp h a s eb l o c kf u n c t i o nc a u s e db yo x l d lr e d u c e ( f o r m2 9 8 6 d r o pt o2 4 9 7 ，尸 0 0 5 ) 3 3t h ep e r c e n t a g e so ft h esp h a s eo fc e l lc y c l ef o rt h eo x l d lg r o u pa n da d mg r o u p ， c o m p a r i n g 谢t ht h ec o n t r o lg r o u p ( 2 2 0 3 ) ，r o s et o2 9 8 6 a n d6 2 5 9 ，r e s p e c t i v e l y t h ec e l lp r o l i f e l a t i o nw a sb l o c k e da tt h esp h a s e f o r e t h e r m o r e ，o x l d la n da d m c o m b i n e dm a k eg e mp h a s ep r o p o r t i o ni n c r e a s e dt 0 7 5 6 6 a n dt h ec e l lp r o l i f e l a t i o n w a sb l o c k e da tt h eg e mp h a s e 4 t h ee x p r e s s i o no fc e l la p o p t o s i s - r e l a t e dg e n e sa n dp r o t e i n s o x l d lc o u l ds i g n i f i c a n t l yr e d u c et h ee x p r e s s i o nl e v e lo fb c l 一2m r n aa n dp r o t e i n , w h i l ei n c r e a s e dt h ee x p r e s s i o nl e v e lo fb a x ，c a s p a s e 3m r n aa n dp r o t e i n ，a to n e t i m ew h i t had e c r e a s i n gb c l - 2 b a xr a t i o o x l d lc o m b i n e da d mg r o u pb c l 一2m r n a a n dp r o t e i ne x p r e s s i o nl e v e ls i g n i f i c a n t l yl o w e rc o m p a r e 谢t i ls e p a r a t eg r o u p ，b a x ， c a s p a s e 一3m r n a a n dp r o t e i n sa l s oi n c r e a s e ds i g n i f i c a n t l y c o n c l u s i o n 1 w i t ht h ed e v e l o p m e n tp r o g e s s i o no fe s c cr a n g ef r o mn o r m a lt ot h eb c h ，e s c d ， a n di n v a s i v ee s c c ，o x l d la n do x l d l a bl e v e ld e c l i n e d ，a n dn e g a t i v e l yr e l a t e d i x 晰t ht h ed e v e l o p m e n tp r o c e s so fe s c c ；w h i l eo x l d l l g ms h o wu p w a r dt r e n d ，w i l t s p o s i t i v e l ya s s o c i a t e dw i t ht h ed e v e l o p m e n tp r o c e s so fe s c c 2 o x l d lh a so b v i o u sc y t o t o x i c i t y ，w h i t hc a ni n h i b i tt h ep r o l i f e r a t i o no fe s o p h a g e a l c a n c e rc e l l ，i n d u c ea p o p t o s i s ，m a k i n gt h ec e l lc y c l ea p p e a rsp e r i o db l o c k o x l d lc a n s i g n i f i c a n t l yr e d u c eb c l 2w h i l ei n c r e a s e db a xa n dc a s p a s e 3g e n e sa n dp r o t e i n s e x p r e s s i o nl e v e l 3 o x l d la n t i b o d yc o m p o s i t i o no fo x l d l a ba n do x l d l r a bs e p a r a t e l yw i t h o u t i n f l u e n c eo ne s o p h a g e a lc a n c e rc e l lp r o l i f e r a t i o n ；h o w e v e ro x l d l r - a bc a nr e d u c e p a r t l yc y t o t o x i c i t yo fo x l d l 4 o x l d la n da d mc o m b i n e de x i s t i n gs y n e r g i s t i ce f f e c to nc e l lt o x i c i t y k e y w o r d s e s o p h a g e a lc a n c e r ；o x i d i z e dl o wd e n s i t yl i p o p r o t e i n ；a n t i b o d i e sa g a i n s tl o wd e n s i t y l i p o p r o t e i n ；o x i d i z e dl o wd e n s i t yl i p o p r o t e i nr e c e p t o ra n t i b o d y x 主要符号表 x i x i i 济南j 、学硕卜学! ! 论上 量曼曼笪曼量量量曼曼量曼曼曼曼曼皇皇曼量曼量量皇曼曼曼量曼量曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼曼皇皇曼曼量量量量曼曼曼曼曼曼量量璺曼曼曼曼曼量曼皇皇 第一章o x l d l 与食管癌衍变阶段的关联性研究 j _ 。 刖吾 低密度脂蛋i 刍( l d l ) 是携带胆固醇的主要血脂成分，其主要功能是运输细胞 外的胆固醇至细胞内，满足细胞的生理需要。l d l 与细胞表面l d l 受体结合， 在细胞内降解成蛋白质与胆固醇。多年来对人体内低密度脂蛋e d ( l d l ) 在心血管 疾病发生发展的关系进行了大量详细的研究，并发现了氧化低密度脂蛋白 ( o x l d l ) 导致血管损伤，具有致动脉粥样硬化的作用【l l 。 血浆中的l d l 对氧化应激非常敏感，在体内可通过细胞介导和化学、物理 等形式1 2 1 氧化修饰最终形成o x l d l 。体内l d l 的氧化修饰主要发生在动脉壁内 膜下，一定数量的o x l d l 被释放到血液循环【3 】。当l d l 发生过氧化反应时，其 磷脂、胆固醇以及蛋白质等成分发生免疫学结构改变，形成新的氧化表位，具有 很强的免疫原性【4 1 。o x l d l 抗原决定簇可以刺激机体免疫系统产生特异性自身抗 体( o x l d l a b ) ，且o x l d l a b 具有各种不同的类型和亚型【5 1 ，其中以l g g 和l g m 型最为常见。血清o x l d l 以及其自身抗体足反映体内氧化应激的重要指标，被 视为脂质过氧化作用的生物标志物1 6 j 。 血脂和及其代谢产物在恶性肿瘤细胞分化和生长过程中发挥重要作用。但 是，血脂和脂蛋白与癌症风险的相关性研究t 要集中在与脂肪代谢密切相关的肿 瘤，包括乳腺癌、卵巢癌、结直肠癌和前列腺癌【7 圳。针对它们的研究结果也是 不一致的。例如d e l i m a r i s 7 1 等发现o x l d l 及抗体在乳腺癌患者中显着增加，但 卵巢癌患者与对照组之间的差异不显著，且乳腺癌或卵巢癌患者血清o x l d l 水 平与其抗体o x l d l a b 水平没有任何关联。s u z u k i l 9 l 没有发现o x l d l a b 与结直 肠癌有任何关联。产生这些分歧的机制目前尚不明确，且这些相互矛盾的结果反 映了脂类和脂蛋白与癌症关系的复杂性。理论上讲，自由基和脂质过氧化物呵能 参与了各种细胞癌变的过程，然而，脂质过氧化与食管癌等其它实体瘤的关联性 研究报道甚少。 食管癌( e s o p h a g e a lc a n c e r , e c ) ，在我国毛要为食管鳞状细胞癌( e s o p h a g e a l s q u a m o u sc e l lc a r c i n o m a ，e s c c ) 是严重威胁人群健康的常见疾病。2 0 0 4 2 0 0 5 年第三次全国死因调查资料显示食管癌死亡率虽然有所下降，但仍居恶性肿瘤的 o x l d l j 食霄焊的乒孵砭珂l 理探讨 第4 位【1 们，高发区其发病率和死亡率居世界首位，是我国薰大防治疾病之一。 2 0 世纪7 0 年代至今，山东省4 次恶性肿瘤回顾调查资料分析显示，食管 癌的高发区局限在肥城市和宁阳县一带，其周围县市为偏高发区i l 。肥城市 1 9 7 0 - 1 9 7 4 、1 9 8 5 - 1 9 8 9 、1 9 9 0 1 9 9 2 、1 9 9 7 - 1 9 9 9 、2 0 0 0 - 2 0 0 4 年食管癌死 亡率分别为6 3 1 9 1 0 万( 以下略去1 0 万) 、7 1 6 8 、6 6 8 7 、8 2 3 3 和7 1 0 7 ，1 9 6 4 年中国人口标化死亡率分别为4 5 3 7 、4 6 6 7 、5 1 2 l 、4 6 3 2 和3 4 6 4 ，从死亡率看 没有变化，但标化死亡率呈下降趋势，给当地居民的生命健康和生活质量带来 严重危害n 2 1 。该地区食管癌死亡率男女比例为2 ：1 0 ，明显与河南林县的1 3 ： 1 o 不同；危险因素研究对比两地存在明显的差异，因此对该地区食管癌的病因 学研究具有非常鼋要的现实意义【13 1 。 病理和流行病学研究表明，食管黏膜的恶变是一个渐进的过程【1 4 1 ：由正常上 皮细胞受刺激产生炎症，开始基底增生或单纯增生，到轻度不典型增生、中度不 典型增生、重度不典型增生或原位癌，最后发展成侵润性的食管癌。