（植物学专业论文）轮藻科（characeae）三个属无丝分裂的研究.pdf

四川大学硕士学位论文 声明 本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的 研究成果。除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经 发表过的研究成果，也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使 用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明 确的说明并表示谢意。 本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师的指导下取得的，论文成 果归四川大学所有，特此声明。 学位论文作者( 签名) 论文导师( 签名) 四 l f 大学硬士学位论文 轮藻科( c h a r a c e a e ) 三个属无丝分裂的研究 专业：植物学 研究生：周旭丹指导老师：兰利琼a , j , t t f t 轮藻门分1 纲、3 目( 直立轮藻目、右旋轮藻目、左旋轮藻目) ，现存仅左旋 轮藻目的轮藻科，含6 属，约4 0 0 种，中国已报道的有1 5 0 多种。本文选取轮藻 秋c h a r a c e a e ) 3 个属的轮藻植物：丽藻属的乳突丽藻( n i t e l l a p a p i l l a t a ) 、拟丽藻属 的钝节拟丽藻( n i t e l l o p s i so b t u s a ) 和轮藻属的弧枝轮藻( c h a r ac o n n i v e n s ) j 娃行细胞 核无丝分裂的观察。 取自然光室温条件下用自来水培养的三种藻的节部、小枝细胞、节问细胞和 假根，刷洗干净后用卡诺固定液室温下固定至藻体叶绿素褪去，分别用g i e m s a 常规染色法和d a p i ( 4 ，6 - d i a m i d i n o - 2 p h e n y l i n d o l e ) 荧光染色法进行实验。三种 藻由于构造上有所不同，乳突丽藻表面有胶质，钝节拟丽藻表面钙质多，而弧枝 轮藻具皮层且多钙，所以用g i e m s a 常规染色法对它们进行研究的步骤有所不同， 经过多次试验，找到了合适的方法。另外，弧枝轮藻节间细胞由于包裹有皮层细 胞，用此法研究较难。三种藻用d a p i 荧光染色法进行实验，步骤相同，观察很 方便，弧枝轮藻节间细胞可把表面皮层细胞剥离后观察。d a p i 荧光染色法进行 观察时可统计细胞核分裂情况，并作相应的分析。塞墅缝墨星丕：三壁篷至回垒 篓堕塑! 至旦笙篓叠堡盟蔓堡塑堕墓筮型左式塑煎玉兰坌型：查垄堡查丝坌型： 藻体细胞多为多核，也有节间细胞为单核或双核，细胞核形态各异，大小不同。 假根类似高等植物的须根，除靠近茎的假根细胞和节部细胞核形态较规则外，其 他地方细胞核形态大小不规则a 壅塑望鳖歪丝坌型堇猩电- 染色质丕蕴燮绝：、 i 塑不解体二鳖塑坌型塑焦至回重：主生盟王丝太生还笠! 垄查窆壁! 与之前本 课题组对钝节拟丽藻的初步研究结果一致。三种藻无丝分裂情况的观察及统计显 1 璺丝奎兰曼主兰堡笙茎 示，同种藻各部位及不同中藻相同部位无丝分裂情况有所差别，特别是钝节拟丽 藻节部细胞发现有单核和双核存在，并且有缢裂和劈裂发生，而其他两种藻节细 胞均为单核，也未观察到无丝分裂现象；三种藻假根节部细胞均为单核，也只有 钝节拟丽藻假根节部有不规则劈裂现象：所以，钝节拟丽藻节部细胞和假根节部 细胞与其他两种藻有明显不同。有关三种藻无丝分裂情况有所差异的原因可能与 细胞内的某些因素有关。另外两个特异之处是：一，与茎靠近的假根中的核圆形 并且规则，而在其他地方的假根中的核则完全不规则，与茎靠近的假根可能由埋 入黄泥中的茎转变而来，其细胞核基本维持了原有的形态，而新生的假根中则产 生了不规则的核，有关原因及机制有待深入研究；二，在大小相当的节问细胞和 皮层细胞中，正在分裂的细胞核的数量与细胞核总数几乎呈负相关，推测一定长 度的藻体细胞有保持细胞内核的总数量的能力，表明轮藻细胞具有特定的生理现 象。 关键词：无丝分裂；乳突丽藻；钝节拟丽藻；弧枝轮藻；荧光染色；细胞核 2 四川大学硬士学位论文 c o m p a r a t i v es t u d y o na m i t o s i si nt h r e eg e n u so f c h a r a c e a e s p e e i a u t yb o t a n y c h a m p h y t ah a so 粥o u t l i n ea n dt h r e ei t e m s ( s y c i d i a l e s 、t r o c h i l i s c a l e s 、c h a r a l e s ) n o wt h e r e s o n l y c h a r a c e a eo fc h a r a l e s ，w h i c hh a s6g e n u sa n da b o u t4 0 0 s p e c i e s t h e r e sm o r et h a n1 5 0s p e c i e sh a v eb e e nr e p o r t e di nc h i n a t h i st e x tc h o o s e s t h r e eg e n u sc h a l o p h y t e so fc h a r a c e a e ：n i t e l l ap a p i l l a t a , n i t e l l o p s i so b t u s aa n dc h a r a c o n n i v e n st o 咖d yt h e i ra m i t o s i s t a k et h en o d ec e l l s ，b r a n c h l e tc e l l s ，i n t e m o d ec e l l sa n dr h i z o i dc e l l so ft h et h r e e g e n u sc h a r o p h y t ew h i c ha l ec u l t u r e dw i t ht a pw a t e ri nn a t u r a ll i g h ta n dr o o m t e m p e r a t u r e ，t ob es c r u b e dd e a r l y , f a s t e di nc a m o y sf i x a t i o ni nr o o mt e m p e r a t u r e w h e nt h ec h l o r o p h y ll e a v e ，a n dt h es t i n e db yg i e m s a4 , 6 - d i a m i d i n o - 2 - p h e n y l i n d o l e ( d a p i ) t oo b s e r v et h e i rn u c l e u s a st h e r ea l es o m ed i f f e r e n c eo nt h es u r f a c ei nt h r e e g e n u sc h a r o p h y t et e x t u r a l ：n i t e l l ap a p i l l a t ah a sp e c t i no nt h es u r f a c e , n i t e l l o p s i s o b t u s ah a sl o t so fc a l c i u ma n dc h a r ac o n n i v e n sh a sc o r t e xa l l ec a l c i u m s 0t h e r ea l e d i f f e r e n tw a y st os t u d yt h e mb ys t a i n i n gi ng i e m s aa n dw eh a v ef o u n dr i g h tw a y sa f t e r m a n ye x p e r i m e n t a t i o n s o t h e r w i s e a st h e r ea i ec o r t e xc e l l so nt h es u r f a c eo fc h a r a c o n n i v e n s ，i t sh a r dt os t u d yt h e mb ys t a i n i n gi ng i e m s a t h ee x p e r i m e n t a t i o nb y s t a i n i n gi nd a p i t os t u & t h et h r e eg e n u sc h a l o p h y t ei st h es a m ea n dc o n v e n i e n c e t h e i n t e r n o d ec e i l so fc h a r ac o n n i v e n sc a l lb cs t u d i e da f t e rp e e l i n go f f t h ec o r t e xc e l l s w e c a nh a v es t a t i s t i co ft h ea m i t o s i sb yt h ew a yo fs t a i n i n gi nd a p i t h er e s u l ts h o w st h a t t h ed i v i s i o no ft h ec e l ln u c l e u si nd i f f e r e n tq r o w i n gp e r i o d sa n dd i f f e r e n tg r o w i n gp a r t s a r ea m i t o s i s n om i t o s i sh a sb e e nf o u n d t h ec e l l sm o s ta l em u l t i n u c l e a t e , a n da l s ot h e i n t e m o d ec e l l sa l em o n o n u d e a t eo rd o u b l e n u c l e a t e 1 1 l en u c l e u sa l ed i f f e r e n ti n 3 西j 1 大学硬士学位论文 s h a p 龉锄ds i 粥t h ed l j z o i di s r e s e m b l ea sf i b r ei nh i g hp l a n t s t h es h a p e so ft h e r h i z o i dn u c l e u sn e a rt h es t e ma n di nr h i z o i dn o d e sa r er e g u l a rw h i l ei no t h e rp l a c e sa r e a n o m a l i s t i c w h e ni na m i t o s i s , t h ec h o m a t i nd o n tc o n c e n t r a t e ，t h ek a r y o t h e c ad o n t d i s a g g r e g a t e ，a n dt h ed i v i d i n gp l a c e sa r en o tf i x e d t h ed a u g h t e rn u c l e u sa r ed i f f e r e n t i ns i z e sa n ds h a p e s ，i nc o n s i s t e n tw i t ht h er e s u l t sw eg r o u ph a v es t u d i e di nn i t e l l o p s i s o b t u m t h eo b s e r v ea n ds t a t i s t i co ft h ea m i t i si nt h r e eg e n u sc h a r o p h ) r t es h o wt h a t t h ea m i t o s i si nd i f f e r e n tp a r t so ft h es 副粥c h a r o p h y t ea n di nt h es 锄ep a r t so fd i f f e r e n t a l g a ea r ed i f f e r e n t i np a r t i c u l a r , w ed i s c o v e rt h en o d ec e l l so fn i t e l l o p s i so b t u s aa r e m o n o n u c l e a t eo rd o u b l e - n u c l e a t ew i t hd i v i s i o no fc o n s t r i c t i o nt y p ea n dd i s s e c t i o nt y p e w h i l et h en o d ec e i l si no t h e rt w oc h a r o p h 咖a r em o n o n u c l e a t ew i t hn oa m i t o s i s ；t h e n o d ec e l l si nr h i z o i d so ft h et h r e eg e n u sc h a r o p h y t ea r em o n o n u c l e a t ew h i l eo n l yi n n i t e l l o p s i so b t u s at h e r e sa n o m a l i s t i cd i s s e c t i o nt y p ei nt h er h i z o i dn o d ec e l l s s o ，t h e n o d ec e l l sa n dr h i z o i dn o d ec e l l so f n i t e l l o p s i so b t u s aa r eo b v i o u s l yd i t t e r e n tw i t ht h e o t h e rt w oc h a r o p h y t e t h er e a s o nw h yt h ea m i t o s i so ft h et h r e eg e n u sc h a r o p h y t ea r e d i f f e r e n tm a y b er e l a t e dw i t ht h ef h d o r si nc e l l s t h eo t h e rt w os p e c i a l i t i e sa r e f i r s t , t h e n u c l c u si nr h i z o i d sn e a rt h es t e m sa r er o u n da n dr e g u l a r , w h i l ei no t h e rr h i z o i d sa l e a n o m a l o u s t h er h i z i o d sn e 3 is t e m sm a y b et r a n s f o r m e df r o mt h es t e m se m b e d c di nt h e m u da n dt h en u c l e u si n g e n e r a lk e e pi n t r i n s i cs h a p e sw h i l ei n t h en e wr h i z o i d s a n o m a l o u sn u c l e u sp r o d u c e t h er e a s o na n dm e c h a n i s ms h o u l db es t u d i e dl a t e r s e c o n d , i ns i m i l a rs i z ei n t e m o d ec e l l sa n do o r t e xc e l l s ，t h ep r o p o r t i o no fd i v i d i n g n u c l e u st ot h et o t a la m o u n to fn u c l e u sw a sa l m o s ti nn e g a t i v ec o r r e l a t i o n i tc o n f e 璐 c e r t a i ns i z ec h a r o p h y t ec e l l sc a l lm a i n t a i nt h ea m o u n to fn u c l e u s i ti n d i c a t e st h a t c h a r o p h y t ec e l l sh a v es p e c i a lp h y s i o l o g i c a lp h e n o m e n o n - k e yw o r d s ：a m i t o s i s ；n i t e l l ap a p i l l a t a ；n i t e l l o p s i s o b t u s e ；c h a r ac o n n i v e n s ； f l u o r e s c e n ts t a i n i n g ；n u c l e u s 4 四朋大学硬士学位论文 引言 轮藻是所有藻类植物中进化程度较高、最接近高等植物的类群。其生境单一、 形态特殊、结构复杂，早期的植物学家曾将其看作高等植物。形态学、生物化学、 发育学和分子生物学的多方面资料都证实，m a t i d x 和s t e w a r t ( 1 9 8 4 ) 系统 中的轮藻纲( c h a r o p h y c e a c c ) 是绿藻植物的姊妹类群，它们与陆生植物有着共同 的祖先【“。因此，轮藻被国内外学者普遍认为是研究植物分类学、细胞学、遗传 学和生物化学方面的一种理想实验材料f 2 】。 轮藻植物的节间细胞为多核细胞，其细胞核多存在着无丝分裂( a m i t o s i s ) 现 象。无丝分裂是发现最早的一种细胞分裂方式，它是一种简单的分裂方式，是雷 马克( r r e m a k ) 于1 8 4 1 年在鸡胚血细胞中首次发现的，当时称为直接分裂1 3 】o 到了1 8 8 2 年，弗来明( f l e m m n g ) 发现无丝分裂过程中无纺锤丝和染色体的出 现，所以称之为无丝分裂。无丝分裂过程较简单，但类型很多，最常见的有横缢、 劈裂、芽裂、碎裂等几种。现有文献中对于植物细胞中无丝分裂现象的报道大多 集中于一些高等植物，且是处于离体培养或特殊条件下的细胞中，如陈明霞等的 研究表明薯蓣属植物怀山药叶片组织细胞脱分化启动后的细胞分裂方式全部为 无丝分裂无丝分裂是形成怀山药愈伤组织的唯一分裂方式f 4 j 。植物细胞脱分化启 动后依靠屋司分裂形成愈伤组织或愈伤组织形成后细胞进行无丝分裂的现象也 已经在多种植物中发现，如，胡萝h 【习，番茄 6 1 。烟草、枸杞等用。另外，无丝分 裂还发现于各类动物以及人类组织细胞中，如动物的围心腔上皮细胞、乳腺上皮 细胞、肾小管上皮细胞、肾上腺皮质细胞、肝细胞、神经细胞、青蛙的红细胞、 昆虫节间细胞、豚鼠的腱细胞，狗、猫、人的膀胱上皮细胞，以及高等动物胚的 胎膜、填充组织和肌肉组织等1 3 l 。但是对无丝分裂的机制及其生物学意义还没有 明确的认识，有待进一步研究。 轮藻植物中的无丝分裂现象最早由p i c k e t t - h e a p s 于1 9 6 6 年在轮藻属( c h a r a ) 发现，但是并未得到作者的详述【8 l 。现有文献中对于植物细胞中无丝分裂现象的 报道大多集中于一些高等植物，且是处于离体培养或特殊条件下的细胞中。本课 题组曾对钝节拟丽藻藻体细胞的无丝分裂现象进行过初步研究，观察不同生长时 期、不同生长部位取材的钝节拟丽藻藻体细胞，发现其节间细胞、小枝细胞、苞 片细胞及假根细胞细胞核的分裂方式均为无丝分裂，未发现有丝分裂，假根中的 5 塑型盔差堡圭丝笙茎 细胞核数量和正在发生无丝分裂的细胞核的数量明显少于其他部位，在细胞核无 丝分裂过程中，染色质不发生浓缩，随机分布在细胞内，且分布不均匀，无染色 体的形成，核膜不解体，核的分裂部位不定，产生的子核大小、形态各异1 9 j 。本 研究以正常生长的乳突丽藻、钝节拟丽藻及弧枝轮藻为材料，用g i e m s a 染色法 和d a p i 荧光染色法，对其细胞核无丝分裂的情况进行一个详细的观察和比较。 l材料 1 1材料 乳突丽藻、钝节拟丽藻及弧枝轮藻均取自本实验室培养材料。 1 2 试剂的配制 本论文所用试剂除特殊说明外均为国产分析纯。 i nh c l ，9 5 乙醇，浓盐酸； 2 5 混合酶液纤维素酶和果胶酶各0 5 9 ，加入2 0 m l 蒸馏水既可，冰箱内 冷冻保存； c a m o y s 固定液将无水乙醇与冰醋酸按体积比3 ：1 混合即可，现用现配： g i e m s a 染色液1 0 0 m l 磷酸缓冲液中加入3 - 5 m lg i e m s a 原液即可，现甩现 配： p b s 缓冲液( 7 0 ) 去离子水配制a 液0 2 m o l l n a 2 i - i p 0 4 ，1 2 h 2 0 ，b 液0 2 m o l l n a h 2 p 0 4 2 i - 1 2 0 ，使用时将6 1 m l a 液与3 9 m lb 液混合，然后定容到2 0 0 m l 即可； d a p i 染色液用双蒸水配置l m g m l 的d a p i 母液( 购于s i g m a 公司) ，避 光保存于- 2 0 冰箱中，取用时，用双蒸水稀释至5 u g m l 。 2 方法 2 1材料的培养 乳突丽藻、钝节拟丽藻及弧枝轮藻均采自贵州省威宁草海。室温，自然光条 件下培养于充满清洁自来水的十升玻璃缸中，培养基质为厚度5 c m 的经过灭菌的 黄泥。 2 2 材料的清洗与固定 取处于不同生长时期的乳突丽藻、钝节拟丽藻及弧枝轮藻于蒸馏水中，用毛 6 四粥大学硬士学位论文 笔刷轻刷藻体，以清除藻体细胞上的泥沙等杂质。每屙0 完一次后用蒸馏水冲洗一 次，如此反复数次直到藻体清洁为止。然后取其节部、小枝细胞、节间细胞和假 根用卡诺固定液室温下固定至藻体叶绿素褪去。 2 3 材料的染色 2 3 1g i e m s a 染色法 乳突丽藻：固定好的材料用蒸馏水冲洗3 次，用1 nh c i 在2 5 恒温箱中解 离1 5 分钟，弃去h c l 用蒸馏水冲洗3 次，用2 5 混合酶液( 2 5 纤维素酶+ 2 5 果胶酶) 在2 5 恒温箱中酶解1 5 分钟，弃去酶液，蒸馏水冲洗3 次，用g i e m s a ( 2 0 ：1 ) 染色液染色1 2 _ - 2 4 小时，制成装片，于o l y m p u s 显微镜下观察、拍照。 钝节拟丽藻：固定好的材料用蒸馏水冲洗3 次，用9 5 乙醇：浓盐酸= 1 ：1 处理4 m i n ，蒸馏水冲洗3 次后用g i e m s a 染色、观察同上。 弧枝轮藻：固定好的材料用蒸馏水冲洗3 次。用1 nh a 水浴( 6 0 c ) 1 5 r a i n ， 或用1 nh c l 在2 5 恒温箱中解离3 0 分钟，蒸馏水冲洗3 次后用2 5 混合酶液 2 4 条件下酶解3 0 m i n ，蒸馏水冲洗后用g i e m s a 染色、观察如前。 2 3 ，2d a i i 荧光法 取3 种藻固定好的材料，用p b s 缓冲液( 磷酸缓冲液p h o s p h a t eb u f f e r s o l u t i o n p b s ) ( p h 7 o ) 冲洗3 次，把材料放于玻片，滴加适量5 u g m l 的d a p i 荧光染色液，盖上盖玻片，于n i k o ne c l i p s et e 2 0 0 0 u 荧光显微镜下观察并拍 照。 3 结果和分析 3 1结果 经对不同生长时期、不同生长部位的以上3 种藻体细胞进行观察，发现 其分裂方式均为无丝分裂，未发现有丝分裂。藻体细胞多为多核，也有节问细胞 为单核或双核，细胞核形态各异，大小不同。假根类似高等植物的须根，除靠近 茎的假根细胞和节部细胞核形态较规则外，其他地方细胞核形态大小不规则。在 细胞核无丝分裂过程中，染色质不发生浓缩，核膜不解体，核的分裂部位不固定， 产生的子核大小不等，形态多样。下面分别对以上3 种藻的无丝分裂情况加以描 述和比较。 7 四川大学硕士学位论文 3 2 分析 3 2 1乳突丽藻 节部：几乎近等径的多面体型细胞排列成2 3 层，单核，未观察到无丝分裂 现象( 图9 - ，图1 0 4 ) 、) 。 图9 - ，图1 0 - 、：节部，多细胞，单核； f i g9 - 匿) ，f i gl o - o 、：n o d e c e l l sw e r em o n o n u c l e a t ec e l l s ： 小枝细胞长约6 5 u m - l o0 0 0 u m ，除末端细胞只含一核外。其余均多核，一般 几个到几十个不等：核有小有大，近圆形、长圆形，分裂方式为缢裂和劈裂( 图 9 、，图1 0 ) ； 图9 、图9 - 、图1 0 - ：小枝尖端和小枝，核较少； f i g9 - ( d 、9 - 、图1 ：a p e xc e l l so f b r a n c h l c ta n db r a n c h l e tw i t h af e wn u c l c u s 节间细胞长约1 0 0 u r n 2 00 0 0 u m ，多核，几个到几百个不等；核近圆形、长 圆形或哑铃形，有时候常聚集成堆；分裂方式为缢裂和劈裂，均等或不均等分裂： 四川大学硕士学位论文 缢裂常一分为二或一分为几，表1 的统计显示缢裂为主要分裂方式( 图9 ，图 1 0 - 、，表1 ) ，平均占7 7 3 ，其余为劈裂方式。在大小相当的节| 日j 细胞中， 正在分裂的细胞核的数量与细胞核总数几呈负相关( 图1 、图2 ) 。 图9 - 。图1 m 、：节问细胞核，示劈裂和缢裂 f i g9 - ，图1 0 4 ) 、：c o n s t r i c t i o nt y p ea n dd i s s e c t i o nt y p ed i v i d i n gi ni n l e m o d e c e l l s ： 假根，有的有极多透明小颗粒，核较少，圆形或者不规则型，假根节部细胞 单核，分裂方式为缢裂和劈裂，不规则核常很不规则地劈裂成大小形态各异的很 多部分( 图9 - 、，图1 0 - - o 匀) 。 图9 j 、9 - ：假根 f i g9 - 逼) 、9 ：r h i z o i d s 四j f f 大学硕士学位论文 图1 m 、：假根； f i g1 0 - ( 固、：r h i z o i d s ； 图1 0 、0 1 ) ：假根节部 f i gl o - 、q d ：r h i z o i d n o d e s 1 0 四j l 大学硕士学位论文 表1 乳突丽藻第一节问细胞核无丝分裂情况统计 t a b l e l s t a t i s t i c o f a m i t o s i s i n f i r s t i n t e m o d e c e l l o f n i t e l l a p a p i l l a t a 0 98 5 33 2 33 7 92 7 28 4 2 5 1 1 5 8 0 83 7 2 3 7 9 9 3 18 3 861 6 2 1 1 四j j 大学磋士学位论文 9 0 0 8 0 0 7 0 0 6 0 0 s 5 0 0 删4 0 0 凝3 0 0 2 0 0 1 0 0 0 l 234567 序号 + 细胞核总数 图1 乳突丽藻大小均等的节间细胞中核的总数( 序号为细胞核总数从小到大的 顺序) f i g 1 g e n e r a l n u c l e u s n u m b e r i ns i m i l a r s i z e i n t e m o d e c e l l s o f n i t e l l a p a p i l l a t a 茇 v 丑 求 1234567 序号 + 分裂核的比 例 图2 与图1 相对应的乳突丽藻大小均等的节间细胞中处于分裂状态的核的比例 ( 序号为细胞核总数从小到大的顺序) f i g 2 t h ed i v i d i n gp r o p o r t i o ni ns i m i l a rs i z ei n t e m o d ec e l l so fn i t e u ap a p i l l a t a 1 2 加如；加硒0 四川大学硕士学位论文 r e l a t i n gt of i g 1 3 2 2钝节拟丽藻 节部，细胞少，节细胞单核或者双核，核较大，见缢裂和劈裂( 图1 1 - ， 图1 2 - 、) 。 图1 1 - 0 ) ，图1 2 - 、：节部 f i g1 1 - ，图1 2 - 、：n o d e s 小枝，多核，长圆形，分裂方式有缢裂和劈裂，缢裂为主。 节间细胞，多核，长圆形，分裂方式有缢裂和劈裂，表2 统计显示缢裂为主 要分裂方式，平均占总细胞核分裂数的9 6 2 ，可一分为二或一分为几，和小枝 情况相似( 图n - ，图1 2 ，表2 ) 。在大小相当的节问细胞中，正在分裂的 细胞核的数量与细胞核总数几呈负相关( 图3 、图4 ) 。 四川大学硕士学位论文 图1 1 ，图1 2 - ：节间细胞，核多 f i g1 1 - q ，图1 2 - ：i n t e m o d e s w i t hm a n yn u c l e u s 假根，核较少，有圆形和不规则形，分裂方式主要为劈裂，偶见缢裂，圆形 核常劈裂成两半，不规则核则很不规则地劈裂成大小形态各异的很多部分( 图1 1 ，图1 2 一) 。 图1 1 ，图1 2 、：示假根不规则细胞核，分裂方式为不规则劈裂 f i g1 1 固，f i g1 2 堰) 、：a n o m a l o u sr h i z o i dn u c l e u sd i v i d i n gi r r e g u l a r l y 1 4 四川大学硬士学位论文 图1 2 、0 1 ) ：假根节部细胞，单核，不规则劈裂 f i g1 2 - 、o d ：m o n o n u c l e a t e r h i z o i dn o d ec e l l sw i t ha n o m a l o u sd i v i s i o n 图1 2 o 匀：示假根较规则长圆形核 f i g1 2 0 d ：l o n gn u m m u l a rn u c l e u si nr h i z o i d 西j l j 大学磺士学位论文 表2 钝节拟丽藻第一节问细胞核无丝分裂情况统计 t a b l e2s t a t i s t i c o f a m i t o s i s i n f a s t i n t e m o d e c e l l o f n i t e l l o p s i s o b t u s e 1 6 四川大学硬士学位论文 6 0 0 5 0 0 4 0 0 牛 。3 0 0 删 籁2 0 0 1 0 0 o 12345678 9 序号 + 细胞核总数 图3 钝节拟丽藻大小均等的节问细胞中核的总数( 序号为细胞核总数从大到小 的顺序) f i g 3g e n e r a ln u d e 惦n u m b e f hs i m i l a rs i z ei n t e m o d ec e l l so f n i t e l l o p s i so b t u s e l2 3 45678 9 序号 + 分裂核的比 例 图4 与图3 相对应的钝节拟丽藻大小均等的节间细胞中处于分裂状态的核的比 例( 序号为细胞核总数从大到小的顺序) f i g 4 t h ed i v i d i n gp r o p o r t i o ni ns i m i l a rs i z ei n t c m o d ec e l l so fn i t e l l o p s i so b t u s e 1 7 加的加m 0 x v 基焱缸 四川大学硕士学位论文 r e l a t i n gt of i g 3 3 2 3 弧枝轮藻 节部细胞，小枝中单层，茎中多层，均单核( 图1 3 一、，图1 禾、 、o d ) 。 图1 争、，图1 4 - o 、：小枝节部单核细胞和节部两侧较整齐排列的皮 层细胞核 f i g1 3 、，f i g1 4 - 9 、：m o n o n u c l e a t e c e l l si nb r a n c h l e tn o d e sa n dc o r t i c a l c e l l sa r r a y e dt i d i l yb e s i d et h en o d e s 1 8 四川大学硕士学位论文 图1 4 - ( i d ：茎的节部，细胞多，单核 f i g1 4 - ( 1 d ：n o d ei ns t e mw i t hm a n ym o n o n u c l e a t ec e l l s 小枝细胞，从顶节到基节细胞核数量逐渐增多，一般从一个增加到二十几或 三十几个，节细胞两侧，从三列式皮层细胞开始，排列有长条状皮层细胞核，排 列较整齐，越老的小枝细胞中的核越长，有的正在缢裂或刚完成缢裂；小枝节问 细胞的核数量少、体积较大，分裂方式为劈裂( 图1 3 、，图1 4 _ ) 。 婴业奎兰堡圭兰竺堡塞 图1 4 - 、：小枝节间，核少，较大，劈裂 f i g1 舢、：b i gn u c l e u sd i v i d i n gi nd i s s e c t i o nt y p ei ni n t e m o d ec e l l so f b r a n c m e t 图1 4 一：小枝尖端一到二节，从三列式皮层开始，节端排列有长条状细胞核 f i g1 4 ：t h ea p e xo n eo rt w oc e l l so fb r a n c h l e t , a n dt h el o n gs t r i pn u c l e u sa r r a y b e s i d et h en o d ew h e nt h e r e st r i p l o s t i c h o u sc o r t e x 节间皮层细胞，核多，幼嫩时皮层细胞和节细胞均呈圆形，小，单核( 图1 4 ) ；后皮层细胞逐渐拉长，核分裂形成长条状和短小状两大类型。表3 统计显 示第一节间短小状核为主，占7 1 1 ，分裂方式为劈裂和缢裂，主要为劈裂， 占7 6 8 ，缢裂极少，只占4 3 ：长条状核占2 8 2 ，分裂方式为缢裂，占1 7 4 ( 图1 3 、，图1 4 一、，表3 ) 。在大小相当的节间皮 层细胞中，正在分裂的细胞核的数量与细胞核总数几呈负相关( 图5 、图6 ：图7 、 图8 ) 。 图1 4 ：幼嫩第一节间，长约0 2 c m 四川大学硕士学位论文 f i g1 4 _ ：y o u n g f i r s ti n t c m o d ec e l la b o u t0 2 c ml o n g 图1 4 、：第一节间，长约0 a c m f i g1 4 - ( 、：f i r s ti n t c m o d ec e l la b o u t0 a c ml o n g 图1 3 - 、，图1 4 - 0 2 ) 、0 4 ) ：示节间皮层两类细胞核及其分裂方式 f i g1 3 - 、，f i g1 4 - ( 1 2 ) 、0 3 ) 、g 4 ) ：t w ot y p e so fn u c l e u s ，s h o r to n e a n dl o n go n e ，a n d t l i c i rd i v i d i n gi ni n t c m o d cc o r t i c a lc e l l s 四j 大学硕士学位论文 节间细胞，剥离皮层后可见节| 日j 细胞核，核多，多数拳曲状，分裂方式有缢 裂和劈裂( 图1 4 ( 2 3 ) 、( 2 4 ) 、( 2 5 ) ) 。由于剥离后细胞不冉完整，对其细胞核 分裂情况暂不作统计。 图1 4 _ ( 2 3 ) 、( 2 4 ) 、( 2 5 ) ：节问细胞内的核 f i g1 4 - ( 2 3 ) 、( 2 4 ) 、( 2 5 ) ：n u c l e u si ni n t c r n o d c s 假根，核较少，有极长的长条状，也有形态极不规则的核，分裂方式为缢裂 和劈裂，分裂不均等( 图1 3 、，图1 4 ( 1 5 ) ( 2 2 ) ) 。 四j l 大学硕士学位论文 图1 3 - 、，图1 4 一( 1 5 ) ( 2 2 ) ：假根和假根节部 f i g1 3 - 、，f i g1 4 - ( 1 5 ) 一( 2 2 ) ：r h i z o i da n d r h i z o i dn o d e s 四川大学硕士学位论文 苫甍 蚤銎譬蚤 毫簧墨n譬鲁詈 善羁矗暑oj t q窝量簧嚣。善窝 苫 蠡：合量j萎量星 国蚕n篇篁是 苫遏 2蚕=萎里罨 譬誉 寸荨g萎 苔謇墨蟊=嚣 蔫是导墨n荨路墨 四川大学硕士学位论文 苫 量 镑嚣 翟 委 妄蚕 暑彗寸磊 导窝 譬蓦 导弱 譬昌曼翟 寻冒 一 ：暑 蹿警 七 v 咖 籁 1234 序号 + 细胞核总数 图5 弧枝轮藻0 6 c m 长的节间皮层细胞中核的总数( 序号为细胞核总数从大到 小的顺序) 2 5 o o o o o 0 o o o 0 蛎拈筋垢m 0 四川大学硕士学位论文 f i g _ 5g e n e r a ln u c l e u sn u m b e ri no 6 c ml o n gi n t e m o d ec o r t i c a lc e l l so fc h a r a c o n n i v e r l $ 桨 v 筮 焱 l 1 234 序号 - 0 - - 分裂核的比 例 图6 与图5 相对应的弧枝轮藻0 6 c m 长的节间皮层细胞中处于分裂状态的核的 比例( 序号为细胞核总数从大到小的顺序) f i g 6 t h e d i v i d i n gp m p o a i o ni no 6 c ml o n gi n t e m o d ec o r t i c a l c e l l s o fc h a r a c o n n i v e n s r e l a t i n gt of i g 5 诣孙龉加璩m 0 0 四川大学硕士学位论文 l2345 序号 + 细胞核总数 图7 弧枝轮藻0 5 c m 长的节间皮层细胞中核的总数( 序号为细胞核总数从大到 小的顺序) f i g 7g e n e r a ln u c l e u s n u m b e ri n0 5 c r a l o n gi n t e r n o d ec o r t i c a l c e l l so fc h a r a c o n n i v e n 8 x v 丑 求 i 3 5 3 0 5 o 12345 序号 + 分裂核的比 例 图8 与图7 相对应的弧枝轮藻0 5 c m 长的节间皮层细胞中处于分裂状态的核的 比例( 序号为细胞核总数从大n d , 的顺序) o o o o o o o 0 o 如：乌；弱坫m 0 v 咖籁 四川大学硬士学位论文 f i g 8 t h ed i v i d i n gp r o p o r t i o ni n0 5 c ml o n gi n t e m o d ec o r t i c a lc e l l so fc h a r a c o n n i v e n sr e l a t i n gt of i g 7 4 讨论 4 1 三个属三种藻的对照讨论 4 1 1 节问细胞核分裂情况讨论 表4 - - _ g 藻相关数据 平均长细胞核总单位长度总分裂核缢裂核总数劈裂核总数 度( )数( 个)细胞核总 ( 个) 占总( 个) ，占总( 个) 店总 数( 仰厘细胞核比例分裂核比例分裂核比例 米)( )( )( ) 乳突丽藻节o 8 25 0 86 2 0复5 ，5 2 8蠲6 m 3 6 1 2 2 7 问细胞 钝节拟丽藻 0 4 93 5 97 3 3鹎，69 6 9 7 04 3 o 节间细胞 弧枝轮藻皮 o - 5 32 7 75 2 3 6 9 2 4 9 1 5 仍85 3 ，7 6 2 层细胞 由表1 、表2 、表3 及表4 可看出： ( 1 )相似生长状态乳突