（食品科学专业论文）不饱和脂肪酸海藻糖单酯酶法合成及水相氧化研究.pdf

摘要 摘要 脂肪酸糖酯是一类具有莺要生理活性的、绿色、安全、可生物降解的非离子表面活 性剂，因其具有良好的乳化能力和杀菌性能以及对皮肤刺激性低等诸多优点而广泛应用 于食品、医药、化妆品和农业。目前商业上使用的脂肪酸糖酯大多来自饱和脂肪酸和糖 的合成，不饱和脂肪酸糖酯的文献及商品相对较少，然而不饱和脂肪酸具有许多特殊的 保健功能以及较低的凝固点等优点，因此，不饱和脂肪酸糖酯已经成为近年来糖酯类表 面活性剂研究的新焦点。不饱和脂肪酸及其酯很容易氧化，关于其在油相和水溶液中氧 化行为的报道彳 s d s ，而存p t l = 6 5 时其氧化稳 定性的j i l ! j ：i r f 为：d t a b b r i j 3 5 s d s 。m a n c u s o 等9 l 研究发现，d ：p l q = 3 o 时乳状液氧化稳 定性的顺序为：d f a b 丝t w e e n 2 0 s d s ，而在p h = 7 0 时其氧化稳定性的顺序为 d l a b t w e e n 2 0 丝s d s 。k a s a i k i n a 等【l 列j 研究发现，s d s 可以抑制乳状液中油脂的氧化， 而c r a b 则可以促进乳状液中油脂的氧化。这个结果与m e i 等不n m a n c u s o 等人的研究差距 甚远。c h o 等【1 2 1 】 l l f a r a j i 等i n 2 1 研究发现，随着乳化剂添加鼍增加，乳状液氰化稳定性 提高。而h u 等【1 2 2 i 研究结果与上述c h 0 等年l l f a r a i 等的研究不同。h u 等的结果发现乳化剂 对乳状液的氧化稳定性无明显影响。s i l v e s t r e 等【1 2 3 】发现，当亲油基团大小相等时，亲水 基团卅同的乳化剂对体系的氧化稳定性没有显著影响。c h a i y a s i t 旨；i 幢4 l 研究了亲油幕部分 脂肪酸链的长短对于o w 型鲱鱼油乳状液的氰化稳定性的影响，结果表明亲油基团的大 小对体系氧化稳定性的影, 晦j i t 4 4 , 。这个结果与f o m u s o 等【1 2 5 j 的研究筹别比较大。在食品 乳状液中，当表面活性剂超过其临界浓度( c m c ) 时，未被吸附的表面活性剂形成胶束。 表面活性剂形成的胶束能与非极性分子在其疏水核内结合，与极性或两，陆分予存其头皋 所彤成的栅状层内结合，改变脂类、氧化强化剂、抗氧化剂、脂类氯过氧化物在分散相、 连续相和两相界呱区域的分配【1 2 5 】，从而改变体系的氰化稳定性。y o u n g 等【1 2 1 4 v l j m e i 等1 2 6 研究表明，表血f 活性剂胶束会降低油滴表面的脂质氢过氧化物( r o o h ) 和水才h 中的过渡 金属离子的相互作用，从而降低脂类氧化速率。由此看出乳化剂在乳状液体系中抑制或 促进油脂氧化的作用是十分复杂的，故需进一步研究。 添加抗氧化剂是抑制脂质氰化的常用措施之一，但是抗氰化剂在均相体系中和存乳 状液中抑制脂质氧化的效果是不同的。抗氧化剂抑制脂质氧化的效果取决丁：多种凶素， 如抗氧化剂的极性、脂质底物、p h 、温度、抗氧化剂的浓度和食品的物理性质【1 27 | 。因 此，在不同的食品体系中抗氧化剂的抗氧化活性有很大不l 司。许多研究者提m 了抗氧化 剂有“极性矛盾( a n t i o x i d a n tp o l a rp a r a d o x ) 现象，即亲水性的极性抗氧化剂在均相体 系( 如油脂) 中比亲油。陀的抗氖化剂效果好，而存乳状液中亲油性抗氧化剂则比亲水性的 效果更好。抗氧化剂的极性矛盾现象已经被一些采用生育酚和维生素c 及其酯等作为研 究对象的报告所证实 1 2 8 1 3 0 1 。但是采用阿魏酸、咖啡酸和其它苯乙基酸及其酯的研究结 果提出了相反的结论【1 3 1 1 。这也说明了乳状液体系的复杂性，o l p h 等都会影响抗氧化剂 的作用特性【1 3 2 1 ，使得乳状液中不饱和脂质的氧化不同于体相油脂。此外，油脂中本身 含有一定鼍的抗氧化剂，称为内源性抗氧化剂。内源性抗氧化剂的种类主要有维生素e 、 磷脂、不皂化物等，其含量随植物油脂的不同而不同。它们对油脂本身起到一定的抗氧 化作用1 3 3 1 。 尽管以乳状液作为模犁体系的文献较多，但是乳状液体系还是相对比较复杂，从前 人研究结果看，乳化剂结构、用鼍，油脂的特征，体系中其他组分的特征，包括乳状液 的制备方法都对体系有极大影响，以至于迄今为止，关于乳状液体系中不饱和脂肪酸的 氧化还有很多不一致的观点。 本研究考虑采用胶束作为模型体系，该体系相对简单，受影响因素比较容易控制， 同时具有与乳状液类似的结构，可比性比较强。为了研究不饱和脂质在水溶液体系中的 氧化情况，我们合成了不饱和脂肪酸的海藻糖单酯，并且以这种可以起表面活性剂作用 的不饱和酯形成的水溶性胶束作为本研究的模型体系，在不添加引发剂的情况下，通过 检测未氧化的单酰基海藻糖的浓度来评价氧化过程，研究不饱和度、链k 、浓度等因素 对侧链上不饱和脂肪酸氧化的影向。以期更好的理解氧化一结构关系。 1 3 本课题主要研究内容 本课题以不饱和脂肪酸( 乙酯) 和海藻糖为原料，在非水相体系中n f i l l 肪酶催化 反应合成不饱和脂肪酸的海藻糖酯，并对这些产物进行分离纯化及结构鉴定。然后研究 这些两亲化合物在水溶液中的界面性质，最后以这些不饱和脂肪酸海藻糖酯在水溶液中 形成的胶束作为模型体系对其氧化性为进行研究，本论文研究的主要内窬如下： 1 以有机溶剂为反应体系，在间歇式反应器中利用固定化脂肪酶催化合成结构明确的 不饱和脂肪酸海藻糖酯，通过单因素和u 向应【酊优化合成的二i 二艺条件。 2 建立酶法合成不饱和脂肪酸海藻糖酯的分离提纯方法，并进行结构鉴定。 3 对不饱和脂肪酸海藻糖酯在水溶液中的界面性质进行研究，探讨化学结构对其亲水 亲油甲衡值( h l b 值) 、临界胶束浓度( c m c ) 、表面过剩吸附量( 厂) 、译分了吸附截 面积( 1 ) 、胶束化白山能( a g 。) 等表面参数的影i l 向。 4 对油酸海藻糖译酯、亚油峻海藻糖单酯、亚麻酸海藻糖巾酯、e p a 海藻糖币酯和d h a 海藻糖啦酯在水溶液中的氧化行为进行研究，并分别以它们形成的水溶。 ，e 胶束为模 型体系，研究胶束对氧化的影响以及这些具有表面活性的不饱和酯的结构、浓度等 与其氧化行为的关系。 5 通过对油酸海藻糖单酯、业油酸海藻糖单酯、亚麻酸海藻糖单酯、e p a 海藻糖单酯和 d i i a 海藻糖单酯在胶束中的氧化行为，探讨海藻糖不饱和脂肪酸酯结构巾彳i 同疏水基 团( 油酸、亚油酸、亚麻酸、d h a 、e p a ) 对于氧化动力学的影响，以及刚一利，海藻 糖多不饱和脂肪酸酯结构巾，4 、= 同的表而过剩、膜分子平均占有面积等胶束尺寸对 9 汕：l 妇人学博1 ：学位论义 于氧化的影响。 参考文献 1 k l i b a n o vam e n z y m e st h a tw o r ki no r g a n i cs o l v e n t s c h e m f e c h ，19 8 6 6 ：3 5 4 - 3 5 9 2 s h i n o d ak ，c a r l s s o na ，l i n d m a nb o nt h ei m p o r t a n c eo fh y d r o x y lg r o u p si nt h ep o l a rh e a d g r o u po f n o n i o n i cs u r f a c t a n t sa n dm e m b r a n el i p i d s 1 9 9 6 ，6 4 ：2 5 3 2 7 1 3 s a c h i k oo k a b emsyt d i s a c c h a r i d ee s t e r ss c r e e n e df o ri n h i b i t i o no ft u m o rn e c r o s i sf a c t o r s q r e l e a s ea r en e wa n t i c a n c e ra g e n t s c a n c e rs c i e n c e ，19 9 9 ，9 0 ( 6 ) ：6 6 9 6 7 6 4 f e r r e rm ，s o l i v e r ij ，p l o ufj ，e ta 1 s y n t h e s i so fs u g a re s t e r si ns o l v e n tm i x t u r e sb yl i p a s e sf r o m t h e r m o m y c e sl a n u g i n o s u sa n dc a n d i d aa n t a r c t i c ab ，a n dt h e i ra n t i m i c r o b i a lp r o p e r t i e s 2 0 0 5 ，3 6 ( 4 ) ： 3 9 i 一3 9 8 5 s o l aa ，r o d r i g u e zs ，g a r c i ag a n c e d oa ，e ta 1 i n a c t i v a t i o na n di n h i b i t i o no fa f r i c a ns w i n ef e v e r v i r u sb ym o n o o l e i n ，m o n o l i n o l e i n ，a n d y l i n o l e n y la l c o h 0 1 a r c hv i r o l ，1 9 8 6 ，8 8 ( 3 ) ：2 8 5 2 9 2 6 s a l e n t i n i gs ，y a g h m u ra ，g u i l l o ts ，e ta 1 p r e p a r a t i o no fh i g h l yc o n c e n t r a t e dn a n o s t r u c t u r e d d i s p e r s i o n so f c o n t r o l l e ds i z e jc o l l o i di n t e r f s c i ，2 0 0 8 ，3 2 6 ( 1 ) ：2 11 2 2 0 7 r y a nm ，m c i n e r n e yd ，o w e n sd ，e ta 1 d i a b e t e sa n dt h em e d i t e r r a n e a nd i e t ：ab e n e f i c i a le f f e c to f o l e i ca c i do ni n s u l i n s e n s i t i v i t y ，a d i p o c y t eg l u c o s et r a n s p o r t a n d e n d o t h e l i u m d e p e n d e n t v a s o r e a c t i v i t y qjm e d ，2 0 0 0 ，9 3 ：8 5 9 1 8 m a r t i n e z - g o n z a l e zma ，b e s r a s t r o l l om t h ec a r d i o p r o t e c t i v eb e n e f i t so fm o n o u n s a t u r a t e df a t t y a c i d a l t e mt h e rh e a l t hm e d ，2 0 0 6 ，12 ( 1 ) ：2 4 3 0 9 柳红芳，陆菊明，母义明，等增j 3 l l n 一6 脂肪酸对高脂诱导的人鼠胰岛素抵抗和血清游离脂肪酸 谱的影l l l f i j 基础医学与临床，2 0 0 5 ，1 2 ：l1 2 4 一l1 2 9 10 a b a d i ejm ，m a l c o mg t ，p o r t e rjr ，e ta 1 d e h y d r o e p i a n d r o s t e r o n ea l t e r sp h o s p h o l i p i d sp r o f i l e si n z u c k e rr a tm u s c l et i s s u e l i p i d s ，2 0 0 l ，3 6 ( 1 2 ) ：1 3 8 3 1 3 8 6 11 m u r a s et ，a o k im ，t o k i m i t s ui s u p p l e m e n t a t i o nw i t h a l p h a 一l i n o l e n i ca c i d - r i c hd i a c y l g l y c e r o l s u p p r e s s e sf a t t yl i v e rf o r m a t i o na c c o m p a n i e db ya nu p r e g u l a t i o no f b e t a o x i d a t i o ni nz u c k e rf a t t y r a t s b b a m 0 1 c e l lb i 0 1 l ，2 0 0 5 ，l7 3 3 ( 2 3 ) ：2 2 4 2 3l 12 h o o p e rl ，t h o m p s o nrl ，h a r r i s o nra ，e ta 1 o m e g a3f a t t ya c i d sf o rp r e v e n t i o na n dt r e a t m e n to f c a r d i o v a s c u l a rd i s e a s e c o c h r a n ed a t a b a s es y s tr e v ，2 0 0 5 ( 4 ) ：d 31 7 7 13 p o u l s e nr ，f i r t h e ，r o g e r sc ，e ta 1 s p e c i f i ce f f e c t s o fy l i n o l e n i c ，e i c o s a p e n t a e n o i c ，a n d d o c o s a h e x a e n o i ce t h y le s t e r so n b o n ep o s t o v a r i e c t o m yi nr a t s c a l c i f i e dt i s s u ei n t ，2 0 0 7 ，8i ( 6 ) ： 4 5 9 4 7 1 14 p a r d i n irs n u t r i t i o n a li n t e r v e n t i o nw i t h o m e g a 一3f a t t y a c i d se n h a n c e st u m o rr e s p o n s et o a n t i n e o p l a s t i ca g e n t s c h e m b i o li n t e r a c t ，2 0 0 6 ，16 2 ( 2 ) ：8 9 10 5 15 z h a og ，e t h e r t o ntd ，m a r t i nkr ，e ta 1 d i e t a r y1 2 1 一l i n o l e n i ca c i dr e d u c e si n f l a m m a t o r ya n dl i p i d c a r d i o v a s c u l a rr i s kf a c t o r si nh y p e r c h o l e s t e r o l e m i cm e na n dw o m e n j n u t r ，2 0 0 4 ，l3 4 ：2 9 9l - 2 9 9 7 16 p e r s a u dr i n h i b i t i o no f p r o l i f e r a t i o nt oo m e g a 一3f a t t ya c i d si nc h e m o r e s i s t a n tp a n c r e a t i cc a n c e rc e l l s ： 1 0 第一章绪论 m e c h a n i s mo fa c t i o nm a yb em o r ec o m p l e x a n ns u r go n c o l ，2 0 0 8 ，15 ( 7 ) ：2 0 5 7 17 m i y a s h i t ak ，t a t e d a n ，o t at o x i a t i v es t a b i l i t yo fp o l y u n s a t u r a t e df a t t ya c i d si na na q u e o u ss o l u t i o n f i s h e r i e ss c i e n c e ( j a p a n ) ，1 9 9 3 ，5 7 ( 1 0 ) ：1 6 3 8 1 6 4 0 l8 a r a s e k im ，y a m a m o t ok ，m i y a s h i t ak o x i d a t i v es t a b i l i t yo fp o l y u n s a t u r a t e df a t t ya c i di n p h o s p h a t i d y l c h o l i n el i p o s o m e s b i o s c i e n c e sb i o t e c h n o i o g y a n db i o c h e m i s t r y ，2 0 0 2 ，6 6 ( 12 ) ： 2 5 7 3 2 5 7 7 19 n a g l e rlg ，l a n k i nvz ，k o z a c h e n k oai ，e ta 1 r a t eo ff r e e r a d i c a lo x i d a t i o no fc18d i e n ea n dt r i e n e f a t t ya c i d si na q u e o u sm i c e l l a rs o l u t i o n sa n de f f e c t i v e n e s so fb c a r o t e n ea sa ni n h i b i t o ro ft h e i r o x i d a t i o n b i o c h e m i s t r y ( m o s c o w ) ，2 0 0 3 ，6 8 ( 2 ) ：2 0 3 2 0 8 2 0 t i m m h e i n r i c hm ，s k a l lnn ，x ux ，e ta 1 o x i d a t i v es t a b i l i t yo fs t r u c t u r e dl i p i d sc o n t a i n i n gc18 ：0 ， c 1 8 ：1 ，c 1 8 ：2 ，c 1 8 ：3o rc l ai ns n 2 一p o s i t i o n a sb u l kl i p i d sa n di nm i l kd r i n k s i n n o v a t i v ef o o d s c i e n c e & e m e r g i n gt e c h n o l o g i e s ，2 0 0 4 ，5 ( 2 ) ：2 4 9 2 6 1 21 k o h y ah ，i s h i if ，t a k a n os ，e ta 1 a n t i t u m o re f f e c to fa s y n t h e t i c c o r df a c t o r ， 6 , 6 一d i o d e c a n o y l a l p h a ，a l p h a - t r e h a l o s e ( s s5 5 4 ) i nm i c e j p njc a n c e rr e s ，19 8 6 ，7 7 ：6 0 2 6 0 9 2 2 o k a b es ，s u g a n u m am ，t a d ay ，e ta i d i s a c c h a r i d ee s t e r ss c r e e n e df o ri n h i b i t i o no ft u m o rn e c r o s i s f a c t o r s qr e l e a s ea r en e wa n t i c a n c e ra g e n t s c a n c e rs c i e n c e ，19 9 9 ，9 0 ( 6 ) ：6 6 9 - 6 7 6 2 3 g a r t in ，a s e r i na ，s l a v i ny c o m p e t i t i v ea d s o r p t i o ni no we m u l s i o n ss t a b i l i z e db yt h en e w p o r t u l a c ao l e r a c e ah y d r o c o l l o i da n dn o n i o n i ce m u l s i f i e r s f o o dh y d r o c o l l o i d ，1 9 9 9 ，1 3 ( 2 ) ：13 9 1 4 4 2 4 彭立凤，杨国营脂肪酶催化合成生物表面活性剂 j 】日用化学上业，2 0 0 0 ，( 0 2 ) ：3 5 3 8 2 5 f a n u nm ，l e s e rm ，a s e r i na ，e ta 1 s u c r o s ee s t e rm i c r o e m u l s i o n sa sm i c r o r e a c t o r sf o rm o d e l m a i l l a r dr e a c t i o n c o l l o i d sa n ds u r f a c e sa ：p h y s i c o c h e m i c a ia n de n g i n e e r i n ga s p e c t s ，2 0 0 1 ， 1 9 4 ( 1 - 3 ) ：1 7 5 - 1 8 7 2 6 k e l k a rds ，k u m a rar ，z i n j a r d ess h y d r o c a r b o ne m u l s i f i c a t i o na n de n h a n c e dc r u d eo i l d e g r a d a t i o nb yl a u r o y lg l u c o s ee s t e r b i o r e s o u r c et e c h n o l ，2 0 0 7 ，9 8 ( 7 ) ：15 0 5 一l5 0 8 2 7 d a v i d s o nig ，l a n g n e rej ，p l o w m a nsv ，e ta 1 r e l e a s em e c h a n i s mo fi n s u l i ne n c a p s u l a t e di n t r e h a l o s ee s t e rd e r i v a t i v em i c r o p a r t i c l e sd e l i v e r e dv i ai n h a l a t i o n i n tjp h a r m ，2 0 0 3 ，2 5 4 ( 2 ) ：211 - 2 2 2 2 8 r i c o l a r e si ，l a r e sa s y n t h e s i so fn e ws u g a r - b a s e ds u r f a c t a n t sh a v i n gb i o l o g i c a la p p l i c a t i o n s ：k e y r o l eo fl h e i rs e l f - a s s o c i a t i o n c o l l o i d sa n ds u r f i a c e sa ：p h y s i c o c h e m i c a la n de n g i n e e r i n ga s p e c t s ， 1 9 9 7 ，1 2 3 1 2 4 ：3 7 4 8 2 9 g a l l a r a t em ，c a r l o t t im e ，t r o t t am ，e ta 1 o nt h es t a b i l i t yo fa s c o r b i ca c i di ne m u l s i f i e ds y s t e m sf o r t o p i c a la n dc o s m e t i cu s e i n tjp h a r m ，l9 9 9 ，l8 8 ( 2 ) ：2 3 3 2 41 30 h u s b a n dfa ，s a m e ydb ，b a m a r dm j ，e ta 1 c o m p a r i s o no ff o a m i n ga n di n t e r r a c i a lp r o p e r t i e so f p u r es u c r o s em o n o l a u r a t e s ，d i l a u r a t ea n dc o m m e r c i a lp r e p a r a t i o n s f o o dh y d r o c o l l o i d ，19 9 8 ，12 ( 2 ) ： 2 3 7 2 4 4 3 1 刘少友，甄卫军，闭犁劂，等红花油脂肪酸单甘酯的合成及其宏观动力! 学研究 j 】口j 十j 化学 工业，2 0 0 4 ，( 0 4 ) ：2 1 7 - 2 1 9 3 2 闵犁同红花油衍生多元醇的合成食，铺科学，2 0 0 5 ( 0 8 ) ：2 0 0 2 0 2 江南大学博i j 学化论义 3 3 s h a hs ，g u p t amn l i p a s ec a t a l y z e dp r e p a r a t i o no fb i o d i e s e lf r o mj a t r o p h ao i li nas o l v e n tf r e e s y s t e m p r o c e s sb i o c h e m ，2 0 0 7 ，4 2 ( 3 ) ：4 0 9 41 4 3 4 a d a c h is ，k o b a y a s h it s y n t h e s i so fe s t e r sb yi m m o b i l i z e d l i p a s e c a t a l y z e dc o n d e n s a t i o nr e a c t i o no f s u g a r sa n df a t t ya c i d si nw a t e r - m i s c i b l eo r g a n i cs o l v e n t jb i o s c ib i o e n g ，2 0 0 5 ，9 9 ( 2 ) ：8 7 9 4 3 5 l i ux ，g o n gl ，x i nm ，e ta 1 t h es y n t h e s i so fs u c r o s ee s t e ra n ds e l e c t i o no fi t sc a t a l y s t j o u r n a lo f m o l e c u l a rc a t a l y s i sa ：c h e m i c a l ，1 9 9 9 ，1 4 7 ( ! 一2 ) ：3 7 - 4 0 3 6 方云，吕栓锁，夏咏梅酶法合成生物表面活性剂 j 食u 1 与乍物技术，2 0 0 4 ，( 0 1 ) ：9 9 1 0 5 3 7 o o s t e r o mm w ，r a n t w i j kfv ，s h e l d o mra r e g i o s e l e c t i v ea c y l a t i o no fd i s a c c h a r i d e si nt e r t b u t y l a l c o h o lc a t a l y z e db yc a n d i d aa n t a r c t i c al i p a s e b i o t e c h n o lb i o e n g ，1 9 9 6 ，4 9 ：3 2 8 - 3 3 3 3 8 罗贵民酶1 ：程- i d f ：化l ：业i j j 版社，2 0 0 2 ：3 8 8 3 9 z h a n gx ，k o b a y a s h it ，a d a c h is ，e ta 1 l i p a s e c a t a l y z e ds y n t h e s i so f6 一o v i n y l a c e t y lg l u c o s ei n a c e t o n i t r i l e b i o t e c h n o ll e t t ，2 0 0 2 ，2 4 ( 13 ) ：】0 9 7 一l l0 0 4 0 s a b e d e rs ，h a b u li nm ，k n e zz l i p a s e c a t a l y z e ds y n t h e s i so ff a t t ya c i df r u c t o s ee s t e r s jf o o de n g ， 2 0 0 6 ，7 7 ( 4 ) ：8 8 0 8 8 6 41 z h o uj ，t a og ，l i uq ，e ta 1 e q u i l i b r i u my i e l d so fm o n o a n dd i l a u r o y im a n n o s e st h r o u g h l i p a s e c a t a l y z e dc o n d e n s a t i o ni na c e t o n ei nt h ep r e s e n c eo fm o l e c u l a rs i e v e s b i o t e c h n o ll e t t ，2 0 0 6 ， 2 8 ( 6 ) ：3 9 5 4 0 0 4 2 c h e nj ，k i m u r ay ，a d a c h is c o n t i n u o u ss y n t h e s i so f6 一o - l i n o l e o y lh e x o s eu s i n ga p a c k e d b e d r e a c t o rs y s t e mw i t hi m m o b i l i z e dl i p a s e b i o c h e me n gj ，2 0 0 5 ，2 2 ( 2 ) ：1 4 5 1 4 9 4 3 z h a n gx ，k o b a y a s h it ，w a t a n a b ey ，e ta 1 l i p a s e c a t a l y z e ds y n t h e s i so fm o n o l a u r o y lm a l t o s e t h r o u g hc o n d e n s a t i o no f m a l t o s ea n dl a u r i ca c i d f o o ds c it e c h n o lr e s ，2 0 0 3 ，9 ( 1 ) ：1 1 0 一1 1 3 4 4 p l o ufj ，c r u c e sma ，f e r r e rm ，e ta 1 e n z y m a t i ca c y l a t i o no fd i a n dt r i s a c c h a r i d e sw i t hf a t t ya c i d s ： c h o o s i n gt h ea p p r o p r i a t ee n z y m e ，s u p p o r ta n ds o l v e n t jb i o t e c h n o l ，2 0 0 2 ，9 6 ( 1 ) ：5 5 6 6 4 5 m ng e n z y m ei no r g a n i cs o l v e n t s e u r j bi o c h e m 。19 91 ( 2 0 3 ) ：2 5 3 2 4 6 冯雷刚非水相脂肪酶催化合成糖酯的研究天津科技人，2 0 0 4 4 7 c h a m o u l e a uf ，c o u l o nd ，g i r a r d i nm ，e ta 1 i n f l u e n c eo fw a t e ra c t i v i t ya n dw a t e rc o n t e n to ns u g a r e s t e r sl i p a s e c a t a l y z e ds y n t h e s i si no r g a n i cm e d i a jm o lc a t a lb e n z y m ，2 0 01 ，11 ( 4 6 ) ：9 4 9 9 5 4 4 8 t o r r e sc o t e r oc d i r e c te n z y m a t i ce s t e r i f i c a t i o no fl a c t i ca c i dw i t hf a t t ya c i d s e n z y m em i c r o b t e c h ，2 0 0 1 ，2 9 ：3 - 1 2 4 9 c a s t i l l oep ，fnala l i p a s e c a t a l y z e ds y n t h e s i so fx y l i t o lm o n o e s t e r s ：s o l v e n te n g i n e e r i n g a p p r o a c h jb i o t e c h n o l ，2 0 0 3 ，l0 2 ：2 5 卜2 5 9 5 0 g a n s k ef ，b o r n s c h e u e rut o p t i m i z a t i o no fl i p a s e c a t a l y z e dg l u c o s ef a t t ya c i de s t e rs y n t h e s i si na t w o p h a s es y s t e mc o n t a i n i n gi o n i cl i q u i d sa n dt - b u o h jm o lc a t a lb e n z y m ，2 0 0 5 ，3 6 ( 1 6 ) ：4 0 4 2 51 p l o ufj ，c r u c e sma ，f e r r e rm ，e ta 1 e n z y m a t i ca c y l a t i o no fd i a n dt r i s a c c h a r i d e sw i t hf a t t ya c i d s ： c h o o s i n gt h ea p p r o p r i a t ee n z y m e ，s u p p o r ta n ds o l v e n t jb i o t e c h n o l ，2 0 0 2 ，9 6 ( 1 ) ：5 5 6 6 5 2 k a n gij ，p f r o m l nph ，r e z a cme r e a lt i m em e a s u r e m e n ta n dc o n t r o lo ft h e r m o d y n a m i cw a t e r a c t i v i t i e sf o re n z y m a t i cc a t a l y s i si nh e x a n e jbi o t e c h n o l ，2 0 0 5 ，l l9 ( 2 ) ：l4 7 一l5 4 1 2 至二里竺笙 - _ _ - - - _ _ - - _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ - _ - - _ _ _ - _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ - _ _ _ _ _ - - _ _ _ - _ _ _ _ - _ _ _ _ _ - _ _ _ - _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ 一 一 5 3 s a k a k ik ，a o y a m aa ，n a k a n et ，e ta 1 e n z y m a t i cs y n t h e s i so fs u g a re s t e r si no r g a n i cs o l v e n tc o u p l e d w i t hp e r v a p o r a t i o n d e s a l i n a t i o n ，2 0 0 6 ，19 3 ( 1 3 ) ：2 6 0 - 2 6 6 5 4 n a o ek ，o h s at ，k a w a g o em ，e ta 1 e s t e r i f i c a t i o nb yr h i z o p u sd e l e m a rl i p a s ei no r g a n i cs o l v e n t u s i n gs u g a re s t e rr e v e r s em i c e l l e s b i o c h e me n gj ，2 0 01 ，9 ( i ) ：6 7 7 2 55 s o n w a l k a rrd ，c h e ncc ，j ul r o l e so fs i l i c ag e li np o l y c o n d e n s a t i o no fl a c t i ca c i di no r g a n i c s o l v e n t b i o r e s o u r c et e c h n o l ，2 0 0 3 ，8 7 ( 6 9 7 3 ) 5 6 x i a oywqcy u l t r a s o u n d a c c e l e r a t e de n z y m a t i cs y n t h e s i so fs u g a re s t e r si nn o n a q u e o u ss o l v e n t s c a r b o h y dr e s ，2 0 0 5 ，3 4 0 ：2 0 9 7 210 3 5 7 f e r r e rm ，s o l i v e r ij ，p l o ufj ，e ta 1 s y n t h e s i so fs u g a re s t e r si ns o l v e n tm i x t u r e sb yl i p a s e sf r o m t h e r m o m y c e sl a n u g i n o s u sa n dc a n d i d aa n t a r c t i c ab ，a n dt h e i ra n t i m i c r o b i a lp r o p e r t i e s e n z y m e m i c r o bt e c h ，2 0 0 5 ，3 6 ( 4 ) ：3 9l - 3 9 8 58 z h a n gdh ，b a is ，s u ny l i p a s e c a t a l y z e dr e g i o s e l e c t i v es y n t h e s i so fm o n o e s t e ro fp y r i d o x i n e ( v i t a m i nb 6 ) i na c e t o n i t r i l e f o o dc h e m ，2 0 0 7 ，10 2 ( 4 ) ：10 12 1019 5 9 冯光炷，李喜宏，卢垒微乳化法合成松香酸蔗糖酯及其应用性能研究郑州工程学院学报， 2 0 0 4 ( 0 2 ) ：2 9 - 3 3 6 0 l iy ，r e t h w i s c hdg s c a l e u po fp s e u d os o l i d p h a s ee n z