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文档简介
实验内容:补体的溶血作用(操作)大小吞噬细胞的吞噬作用(示教),实验一非特异性免疫,1,人体免疫系统,屏障结构(如皮肤、粘膜血脑屏障、胎盘屏障)吞噬细胞体液因素(如补体、溶菌酶、乙型溶素等),2,一、固有免疫的组成(一)组织屏障及其作用,1、皮肤黏膜及其附属成分的屏障作用物理屏障化学屏障微生物屏障2、血脑屏障3、血胎屏障,3,(二)固有免疫细胞吞噬细胞、NK细胞、NK1.1+T细胞T细胞、B-1细胞(详见p89第九章)(三)固有免疫效应分子补体、细胞因子、防御素、溶菌酶、乙型溶素,4,补体的溶血作用,概念(complement)存在于正常人或动物血清及组织液中一组与免疫相具有酶活性和自我调解作用的球蛋白质。因它们能协助和补充特异性抗体介导的免疫溶菌、溶血作用,故称为补体。它是由30种成分组成的复杂系统,部分成分遇热不稳定(56加热30分钟即可灭活)。三条激活途径的比较:(page55),5,补体三条激活途径及共同末端效应全过程,6,本次实验涉及的原理,绵羊红细胞(SRBC)+SRBC溶血素Ag-Ab(IC)识别:与免疫复合物抗体(Ig)中补体结合位点结合后其分子构象发生改变,致C1r及C1s被激活活化:C4、C2在激活C1的作用下分解产生C4b及C2b,两者组成C42b,它为C3转化酶C3分解产生C3b,与C42b结合形成C423(C5转化酶)C5分解产生C5b膜攻击复合物形成:C5b进一步与C6、C7、C8、C9作用后,最终产生C5b6789(即膜攻击复合物),使SRBC穿孔,发生溶血反应。,7,膜攻击复合物(mebraneattackcomplex,MAC)结构示意图,8,膜攻击复合物电镜观测示意图,9,SRBC(Ag)+溶血素(Ab)Ag-Ab(IC)识别:C1q补体结合位点活化:膜攻击复合体(MAC)形成效应:溶血,原理,实验一补体的溶血作用,10,实验材料:,2%SRBC1瓶(30ml)/列SRBC溶血素1支(2.5ml)/2组补体1支(2.5ml)/2组盐水1瓶(30ml)/列试管3根/组(做好标记)吸管*试管及吸管的拿捏方法,11,豚鼠图,12,实验步骤,(如下图)加样,37水浴15-30分钟,观察结果,1号管中SRBC溶解,液体由混浊变为澄清透明*实验结束后吸管置废液缸,试管置铁蓝框,13,大小吞噬细胞的比较,14,单核细胞,巨噬细胞,15,巨噬细胞伪足包裹异物示意图,16,中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞,17,中性粒细胞形态,单核
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