猪流行性感冒的流行趋势与防制措施.doc

猪流行性感冒的流行趋势及防制措施崔尚金（中国农业科学院哈尔滨兽医研究所，哈尔滨 150001）摘要：猪流感是由正黏病毒科A 型流感病毒引起的猪的一种急性、传染性呼吸道疾病。其特征为疾病突发, 高热, 精神沉郁, 食欲废绝, 呼吸困难, 阵发性咳嗽。猪流感病的病死率不高, 病猪可迅速康复。猪流感由甲型流感病毒(A 型流感病毒)引发，通常爆发于猪之间，传染性很高但通常不会引发死亡。秋冬季属高发期，但全年可传播。该病毒可在猪群中造成流感暴发。通常情况下人类很少感染猪流感病毒。近年来,随着集约化养猪规模的不断扩大, 猪流感对养猪构成了较大的威胁。更多的时候，猪流感是带毒感染，主要表现如下作用：携带者、免疫抑制、猪呼吸道综合征的主因或者辅助因子、重大的公共卫生意义。本文对猪流感的病原、危害、历史、流行病学、临床表现疾病俩变化、诊断、公共卫生意义、流行趋势及防制措施等方面作了简单概述。关键词：猪流感;病原;流行病学;防制;公共卫生 1病原猪流感( Swineinfluenza,SI)的病原为猪流感病毒(Swine influenzavirus,SIV),属于正黏病毒科流感病毒属,一般呈多形态,直径约100 nm,有囊膜,囊膜上有突出的糖蛋白,通常称为纤突。纤突有2 种,一种是血凝素( H 或HA),另一种是神经氨酸酶(N 或NA)HA 与NA 可作为确定流感病毒亚型与毒株的主要依据。HA 在适宜条件下能凝集某些动物的红细胞,在感染的过程中与识别吸附靶细胞有关。NA 能使吸附在红细胞上的病毒脱离红细胞,也能使病毒从感染的细胞中释放出来。同种病毒的血凝素抗体可以防止病毒吸附细胞,在防止流感病毒的感染中起重要作用,而神经氨酸酶的抗体能限制病毒感染细胞。除了HA 与NA 这2 种病毒蛋白以外, 病毒蛋白质中还有基质蛋白(M),核蛋白(NP),多聚酶(PA、PB1、PB2)以及非结构蛋白(NS)。SIV 的基因组是由8 个分节段的单股负链RNA 组成,由于RNA 聚合酶缺乏有效的校正阅读机制,故SIV 易发生变异,变异方式主要有2 种,即抗原漂移与抗原转变。由于SIV 的RNA 是分节段的,因此在几种不同亚型的SIV或者SIV 与其他种类的流感病毒混合感染时有可能发生基因的交换与重排,产生含有来自不同亲本基因的新毒株。Lipkind M 等1984 年从以色列几个发生呼吸道病及严重降蛋症状的火鸡饲养场中分离到一株H1N2 流感病毒, 经研究分析可能是H1N1 与H3N2 的重组病毒。1998 年从美国北卡罗来纳州分离到的一株H3N2 亚型SIV,其HA,NA 与PB1 基因为人型流感病毒基因, M,NP 与NS 基因为猪型流感病毒基因,PA、PB2 基因为禽型流感病毒基因。因为不同毒株之间的交叉保护性较差,所以SIV 的主要毒力基因HA、NA 基因发生的抗原漂移、转变以及重组病毒的频繁产生的直接后果之一,就是使用流行毒株病毒制备的疫苗的保护性降低甚至完全失效。SIV 可在鸡胚中增殖,故可用鸡胚作尿囊腔或羊膜腔接种来分离病毒。除了鸡胚之外,也可用各种细胞培养系统,如鸡胚成纤维细胞、猪睾丸细胞、胎牛肾细胞、犬肾细胞等来增殖的分离病毒。研究发现部分SIV 毒株不能在鸡胚中增值,因此只能利用细胞来增殖病毒。 2猪流感的危害猪流感是阴性或者带毒感染，主要表现如下作用：携带者、免疫抑制、猪呼吸道综合征的主因或者辅助因子、公共卫生意义。2.1携带者一般意义上的猪流感，一般来说，会引起或者不引起临床症状，但体内带毒。是下面3 条的基础。2.2免疫抑制能够引起猪体的免疫抑制，容易造成混合感染或者免疫力低下，进而发生呼吸道综合征等。2.3猪呼吸道综合征的主因或者辅助因子猪呼吸道疾病综合征（PRDC）以生长速度降低、饲料利用率降低、食欲减退、咳嗽、呼吸困难为特征的疾病，虽然总体死亡率不高，但可严重影响猪场的经济效益。目前，呼吸道疾病综合征出现了一些新的特点，一是表现为混合感染的病原体较前几年有所变化，病原体为猪流感、肺炎支原体、繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、2 型圆环病毒（PCV-2）等的感染为主，再结合其它的细菌继发或混合感染。二是发病时间的改变，表现为断奶后各个阶段的猪均可发病，即从断奶后2 周开始，一直到育肥期都可以发生呼吸道疾病综合征。其中部分是由猪流感作为主因引起。2.4公共卫生意义后面讲述，猪体作为混合器的作用。 3历史猪流感初次于一九一八年大爆发期间被认定为与人流感有关的疾病，当时猪与人同时发病。十年后于一九叁零年，才第一次确认它是引发猪疫的一种流感病毒。接下来的六十年，猪流感毒株几乎都是H1N1。然后，于一九九七至二零零二年间，叁种不同亚型与五种不同原型的新型毒株冒了出来，成为北美不同猪流感的引因。一九九七至一九九八年，出现了几种H3N2 毒株。这些毒株，包括由人类、猪只、及禽鸟的病毒基因重组而演变出来的新型毒株，成为引发北美猪流感的主因。H1N1 与H3N2的基因重组产生了H1N2。一九九九年在加拿大，一种H4N6 毒株在禽类与猪只之间交叉重组而成，但被控制在一个农场内。H1N1 型猪流感是导致一九一八至一九一九年爆发的西班牙流感的后代之一。一九一八年病毒的后代除了在猪群中不断循环之外，亦在整个二十世纪中在人类间循环，造成常见的季节性流感。不过，直接从猪传人并不常见，从二零零二年起在美国只有十二宗。虽然如此，这些毒株在人类间消失之后，留在猪只体内的流感病毒能使猪只成为它们的储存库，并于将来人类免疫能力减弱时再度感染人类。猪流感多次被报导为人类间的人畜传染病，通常有限地分布，很少大面积扩散；在猪群中爆发较为常见，且在工业上导致重大的経济损失，主要是阻碍与拖延了上市时间。比如，该疾病造成英国肉业每年大约损失六千五百万英镑。流感病毒不断变异，从而得以避开目标群（猪、禽、或人）由于之前接触流感或疫苗反应而可能发展出来的防身抗体。一般说来，每隔两叁年病毒都会发生小变异。但在大约十年里，当世上目标群的整体己在某程度上发展了抗御这些小变化的能力之后，病毒则进一步大演变使到它可以軽而易举地感染世上的目标群体，経常感染不拥有能扺抗它的抗体之数亿人。流感病毒也被确认可以在短得多的时间内产生变异。如1918 年西班牙流感第一波爆发时相对地比较轻微，但一年后第二波爆发，致命力却很高。一九一八年在人类间爆发的流感一九一八年流行于人类间的流感与H1N1 及猪群流感有关，因而可能为一种从猪传人或人传猪的人畜传染病。虽然不能确定病毒从那个方向传染，可得的证据建议是猪从人得病。例如，一九一八年流感爆发于人类之后，猪流感才第一次被确认为一种新猪病。虽然，按照种系发生学对近来流行于人、禽、及猪之间的新流感毒株进行分析的结论，一九一八年爆发于人类间的大流感是在病毒基因在哺乳动物体内重组后发生的，但该病毒的准确的起源还不清楚。一九七六年在美国发生的人类流感一九七六年二月五日，在美国FortDix入伍的一位新兵说他感到疲倦与无力。第二天他就死了。稍后他的四位同伴士兵入了院。他死后两个星期，卫生官宣布其死因为一种新型流感毒株。该毒株是禽种H1N1 的变异，称为A/NewJersey/1976（H1N1）。它仅从一月十九日至二月九日被查觉，而没有散播出FortDix 之外。这一新毒株看似与一九一八年的流感紧密相关。此外，随着增强监视，又查觉另一毒株A/Victoria/75（H3N2）同时在美国传播，也引起了疾病，而且坚持至当年叁月。警觉的公众卫生官决定需要采取行动对抗另一次大爆发，敦促福特总统要求全美国公民注射疫苗。注射疫苗计划被拖延及公关问题所阻碍。一九七六年十月一日，免疫注射行动开始。至十月十一日，大约四千万人，或大约24%的人口，接受了猪流感疫苗。同一天，叁位长者在接受流感疫苗注射后不久就去世；一家媒体宣告他们的死亡与疫苗注射有关，虽然没有确定的证据。然而，根据科普作家PatrickDiJusto 的说法，当人们得知死亡并没有证实与疫苗有关之后已经太迟了。并说：“政府长期以来害怕大众对流感产生恐慌，现在他们害怕公众对注射猪流感疫苗产生恐慌”。这造成防疫计划被阻碍。与此同时，又有一些关于格林-巴利综合征（Guillain-Barre，GBS）症状的报导。那是一种瘫痪肌肉神经的疾病，影响了一些接受流感免疫注射的人们。这种症状是对现代流感疫苗的一种罕见反应，每百万宗疫苗注射中只有一宗。DiJusto 写道：“公众拒绝相信政府实行的一种宰杀长者及残害年轻人健康的计划。”结果，至一九七六年底，总共只有百分之叁十叁的人口接受了疫苗注射。到十二月六日，全民流感防疫计划就基本停顿了下来。总的来说，出现了五百宗GBS病例。其中死于肺并发症者二十五人。根据P.Haber 医生的说法，这可能是因为人体对一九七六年疫苗产生的强烈免疫反应所引起的。其他流感疫苗没有与GBS关连，虽然对于一些人，特别是有GBS 病史者，医生们被告诫要谨慎处理。尽管如此，根据一位免疫计划参与者的观察，这种疫苗比流感杀死了更多美国人。一九八八年的人畜互传流感一九八八年九月，一种猪流感病毒在Wisconsin 造成一名妇女死亡，并且感染了至少几百人。怀孕八个月的32 岁的BarbaraAnnWieners 与丈夫Ed 造访了Wisconsin 州Walworth 县的农牧产品展览会的猪圈之后发病，后来感染了肺炎，八天后即逝世。唯一检验出来的病原是一种猪流感的H1N1 病毒。医生在她去世前成功地帮她催生产下了一名健康女婴。她丈夫则成功地克服了病征痊愈。据报导，类似流感病在他们造访的猪圈猪群中扩散；且76%年龄在9 至19 岁之间的参加生猪展览工作人员被查出有SIV 抗体，但这群人没有被诊出严重的病情。另外的研究提议：一至叁位接触过病人的医护人员出现轻微的类似流感病状，并被证实带有感染了猪流感之后所产生的抗体。然而，这次事件在社区没有引起流感爆发。一九九八年美国猪群间爆发的流感一九九八年，猪流感在美国四个省的猪群中流行。一年内，它传遍全美国猪群。科学家发现，这种病毒原发于猪只体内禽与人体内两种流感毒株的基因重组。这一爆发证实：猪能够为一个组合锅，在那里不同毒株的基因可以重组而形成新型流感病毒。菲律宾猪流感2007 年7 月27 日，当猪霍乱传播至菲律宾布拉干省及邦板牙省后院猪场后，尽管验测结果没发现猪流感病毒，菲律宾国家肉类检督局在马尼拉与吕宋五个地区发布了猪霍乱“红色警讯”。8 月20日，农业部的官员着手调查在黎萨尔省（NueveEcija）与吕宋中心区发生的猪流感。如没有并发猪霍乱，猪流感死亡率少于10%。二零零九年人类间爆发的流感二零零九年流感爆发的起因是一种之前还没在猪群中发现过的H1N1 新型流感毒株。四月下旬，当第一起H1N1 病毒在美国发现之后，世卫组织总裁根据该机构的国际卫生新条例宣布了“国际性公众健康威胁的紧急警讯”。随着该流感的爆发，2009 年5 月2 日，在加拿大Alberta 一个农场的猪群发现了与墨西哥大爆发有联系的该病毒。那些猪被怀疑由一位刚从墨西哥回来的工作人员身上感染了这种新病毒之后出现了类似流感的症状。情况很可能就是这样，不过还得进一步由实验室化验结果来证实。按照最初的说法，该新毒株看来是一种由至少四类H1N1 之甲型流感病毒组合的毒株，包括一类人群中流行的毒株，一类禽鸟中流行的毒株，及两类猪只中流行的毒株。尔后的分析结果建议，它仅仅是由猪只中的两种毒株的基因重组而成。虽然初期报告认定新毒株为猪流感毒株（即一种起源于猪只的人畜互传毒株），后来发现它的遗传基因的绝大部分来源于1998 年美国工业化农场首次出现的由三株基因重组而成的病毒。一些国家采取了预防措施，以减少疾病在全球散播的机会。 4流行病学猪群中暴发SI 多是由于感染猪被引入易感猪群中引起的。猪流感的主要传播途径是猪只之间鼻对鼻的直接接触,因为在感染的高峰期鼻腔的分泌物大量带毒。实验室条件下用病毒滴鼻或含病毒的小颗粒气溶胶喷雾很容易使猪感染。空气也是主要的传播途径。有关SI 的发病季节问题,不同的学者有不同的观点,殷震等认为猪流感的流行有较明显的季节性,大多发生在天气骤变的深秋与早春以及寒冷的冬季,而N akamura(1972)与Pirtle(1975)认为SI 一年四季都可以流行。大多数学者都认同的观点是一年四季都可在猪群流行,但SI 的暴发多出现在气温变化较大的时候,如天气骤变的晚秋、早春及寒冷的冬季。20 世纪70 年代以前SI 主要流行于美国,其他地方很少有报道发病。直到1976 年,可能是由于从美国将猪运输到意大利,使得H1N1 亚型SI 在欧洲大陆开始广泛流行。70 年代后期以来,亚洲的许多国家也有发生SI 的报道。目前,世界各地流行的SIV 主要有3 种血清型,即经典H1N1,类禽H1N1 与类人H3N2 亚型。自1918年美国第一次报道猪流感以来,H1N1亚型的SIV 一直在这个国家流行。直到1998 年在美国北卡州、明尼苏达州、德州暴发SI 的猪群中分离到了H3N2 亚型的SIV。随后进行的血清学调查表明,送检的4382 份样品中20.5%的样品为H3N2 阳性,说明在这之前美国的猪群中已有H3N2 亚型病毒的存在。在加拿大1991 年就有分离到H3N2 亚型SIV 的报告。欧洲的H1N1 病毒多为类禽源H1N1 病毒。此外,也有分离到H1N2,H3N6 与H1N7 亚型SIV 的报道。血清学调查可了解猪群中SI 的感染强度。1988年-1989 年对美国猪群进行的血清学调查表明,美国中北部51%的猪有H1N1 的抗体存在。在欧洲的比利时, 集约化饲养的猪群有99.5%的猪对H1N1 与H3N2 病毒的血清学呈阳性。与欧美的集约化饲养不同,亚洲地区的集约化饲养是近十几年才发展起来的,猪流感方面的文献还不多。大多数亚洲国家猪流感血清学监测进行得很少,不过在日本与泰国曾有分离到古典型H1N1SIV的报道。倪汉忠等对广东省猪群中血清学调查的结果显示,H1N1 与H3N2 的阳性率分别为30.68%与53.70%。流行病学研究中不能忽视的一个方面是种间传播问题。流感病毒种间传播取决于HA 序列上受体结合位点(主要是226 位氨基酸)与宿主细胞表面病毒受体结合能力。已经确认的流感病毒受体有两种,即唾液酸A2,6 半乳糖苷(SAA2,6Gal) 与唾液酸A2,3 半乳糖苷(SAA2,3Gal),当SIVHA 蛋白的226 位氨基酸残基为蛋氨酸(Met)时,对SAA2,6Gal 与SAA2,3Gal 有相同的结合能力;并且猪的呼吸道上皮细胞表面同时具有人与禽流感病毒受体SAA2,6Gal,SAA2 与3Gal, 这些结构特征决定了SIV 既可感染人与禽,猪又可被人流感病毒与禽流感病毒感染。猪对许多A 型流感病毒敏感,人流感病毒与禽流感病毒都可以感染猪。台湾省在1968 年人群发生流感后不久,从猪体内分离到人H3N2 病毒。以后的研究普遍认为,猪群中的H3N2 病毒是由人传给猪的。Shortridege 从猪体内分离到禽H9N2 病毒,Karasin AI 等从加拿大某集约化猪场分离到一株禽H4N6流感病毒。亚洲部分国家有用禽粪喂猪的习惯, 这就使禽流感病毒通过粪便与污染的饲料向猪群传播成为可能,因此部分亚洲H3N2 SIV 完全是禽源的。 5临床症状及病理变化猪感染病毒感染后1d3d后发病,通常在第1 头病猪出现后的24h,猪群中大部分猪同时都被感染而出现症状。病猪表现厌食,精神沉郁,衰竭,拥挤在一起,驱赶病猪时不愿走动。有明显的呼吸道症状,呼吸急促,出现张口呼吸与腹式呼吸,咳嗽音似犬叫,鼻腔中流出浆液性或浆液脓性的鼻液,眼结膜潮红。怀孕母猪在后期可因发热而导致流产。此病发病率高(可达100%),病死率低(小于1%),多数死亡是由于并发细菌感染而引发的支气管肺炎。由于SI 极少直接引起死亡,因此单纯的病理资料不多,主要的肉眼变化是病毒性肺炎,病变多集中在肺的尖叶与心叶,病变组织与正常肺组织之间有明显的界线,病变区为紫色硬结,一些肺叶间质明显水肿。气管与支气管有白色或乳白色泡沫状黏性分泌物。肺门淋巴结、纵隔淋巴结肿大、充血。当并发细菌感染时,病变更为复杂。猪流感的病理变化主要在呼吸器官。鼻、咽、喉、气管与支气管的粘膜充血、肿胀，表面覆有粘稠的液体，小支气管与细支气管内充满泡沫样渗出液。胸腔、心包腔蓄积大量混有纤维素的浆液。肺脏的病变常发生于尖叶、心叶、叶间叶、膈叶的背部与基底部，与周围组织有明显的界限，颜色由红至紫，塌陷、坚实，韧度似皮革，脾脏肿大，颈部淋巴结、纵膈淋巴结、支气管淋巴结肿大多汁。类症鉴别由于猪的流行性感冒不一定总是以典型的形式出现，并且与其它呼吸道疾病又很相似，所以，临床诊断只能是假定性的。在秋季或初冬，猪群中发生呼吸道疾病就可怀疑为猪流行性感冒。暴发性地出现上呼吸道综合征，包括结膜炎、喷嚏与咳嗽以及低死亡率，可以将猪流行性感冒与猪的其它上呼吸道疾病区别开，在鉴别诊断时，应注意猪气喘病与本病的区别，二者最易混淆。防治措施本病无有效疫苗与特效疗法，重要的是良好的护理及保持猪舍清洁、干燥、温暖、无贼风袭击。供给充足的清洁饮水，康复的头几天，饲料要限制供给。在发病中不得骚扰或移动病猪，以减少应激死亡。猪流行性感冒特征为突然发病，迅速蔓延全群，主要症状为上呼吸道感染，一般多在冬春季节以及气候骤变时发生，该病也常继发猪副嗜血杆菌病。 6诊断根据流行病学资料与临床症状初步诊断为SI 后,要进行特异性诊断,以便与猪的其他呼吸道病进行鉴别。特异性诊断的方法有病毒分离与特异性抗体的检测。从活体内分离病毒可采用鼻黏膜拭子法。采集的拭子放在适当的运输培养基如生理盐水、PBS、MEM 中尽快送往实验室。病死猪则采集病变的上呼吸道与肺组织。样品经常规无菌处理后接种鸡胚或敏感细胞,于孵育48h72h 后,收集尿囊液或细胞培养液进行HA 试验以证明是否有流感病毒的存在。若初代分离物无HA 活性,则再盲传两代。用HI 试验与NI(神经氨基酸酶抑制)试验可确定分离到的流感病毒的血凝素及神经氨酸酶亚型。特异性抗体的检查方法是采取双份血清样品,一份在急性发病期,另一份在康复后3 周4 周,用HI试验若后一份血清效价高于前一份血清效价4 倍以上,则可诊断为阳性。此外,还有人建立了免疫荧光染色法、酶联免疫吸附试验、一步法免疫捕捉试验、时间分辨荧光免疫分析技术、PCR 等技术用于病毒、病毒蛋白与特异性抗体的检测。诊断时应注意与猪支原体肺炎、猪繁殖与呼吸综合征、猪传染性胸膜肺炎、猪呼吸道病综合征等进行鉴别诊断。随着流感病毒研究的不断深入与分子生物学技术的应用,各国兽医界与医学界在不断研究流感的灵敏、快速、特异的诊断方法。 7流行趋势目前天气骤变剧烈，空气干燥，温度反常，又随着禽流感与人流感在全世界爆发与流行，今后猪流行性感冒在不同区域可能会呈流行趋势，发病率较高。 8防制结合实际情况与猪流感的发病特点，有以下防治措施：8.1加强饲养管理平时应保持栏舍干燥、清洁、卫生、通风，密切注意天气变化，注意防寒保暖，定期对猪舍、用具用卫康消毒，并将粪便进行堆积发酵，供应充足清洁的饮水，严格隔离病猪，猪场不能养鸡，以防止本病的传入与扩散，人若患流感最好不要与猪接触。8.2药物治疗根据猪场的用药情况及易反复发作的特点，对有病的猪用红奇（0.2ml/kg）+毅力健（0.2ml/kg）或附特（0.2ml/kg）+板蓝根注射液（0.2ml/kg）肌肉注射，每天一次，连用三天；以防并发与继发感染，大群每吨饲料用加奇（1kg）+赛福康（1kg）或加奇（1kg）+赛利高（1kg）拌料5-7 天，以上方案对防治猪流感效果有一定效果。8.3疫苗除了治疗外，还建议猪场应加强免疫接种，制定合理的免疫程序与免疫途径。但由于此病毒有多种多样的毒株, 且各毒株之间交叉保护力极小；灭活苗产生的保护力只有很短的持续期，常造成免疫失败，故在临床中免疫接种极少得到应用。接种免疫时应活苗、死苗相结合才能取得较好的效果。要预防猪群中SI 的发生,最好的方法是给易感猪接种疫苗。在美国已有一种Maxivac-FLU 疫苗获准上市,该疫苗为一种水包油剂型的灭活疫苗,能在猪体内诱发高水平的保护性抗体,能有效地保护断奶仔猪与种猪抵抗SI,由于是水包油剂型,在注射局部的刺激较小。除了常规疫苗之外,研究人员对基因工程疫苗进行了探索,已经取得了一定的成果。利用杆状病毒系统表达HA 与NA 蛋白免疫小鼠后,用同种亚型与亲缘关系较近的不同亚型的流感病毒攻击,免疫接种小鼠受到保护,未出现严重的临床症状与死亡。流感核酸疫苗是近年来出现的一种新型疫苗,它的原理是将可表达保护性抗原基因的重组DNA质粒导入机体细胞,通过机体内源性表达并提呈给免疫系统,诱导宿主的体液免疫与细胞免疫,从而起到保护作用。核酸疫苗的使用受到成本、免疫途径的限制,要在生产中大规模应用, 还需要进行深入的研究。8.4综合防治目前尚无治疗SI 的特效药物,关键是要加强饲养管理与预防。如避免猪舍的贼风,提供充足的洁净饮水,注意控制并发或继发感染,可添加抗生素或其他药物。肌肉注射解热镇痛药如安乃近或复方安基比林,可以减轻猪只的发热。对发病的猪舍可用挥发性消毒剂如环氧乙酸进行消毒,以杀灭环境中的病毒。据称金刚烷胺可对流感病毒有一定的预防与治疗作用。此外,还有人对病毒唑、茶多酚、唾液酸等物质的体外抗流感病毒的效果做过研究。日本科学家从一种真菌分离到的称为FR191512 的物质可以抑制流感病毒在MDCK 细胞上的感染性,体外实验以小鼠为模型也取得良好结果,但应用于临床仍有待时日。 9 公共卫生意义尽管SI 所致的死亡率不高,与其他病毒性猪传染病相比,造成的经济损失也小得多,但长期以来,它一直是各国兽医学家与流感专家研究的热点。上面已经述及SIV 可以直接感染人而使人发病。猪场的饲养人员,与猪有密切接触的人