SOP-TBA(循环酶法).doc

SOP-SH-030(版本)义乌市廿三里医院检验科临检室程序管理文件文件编号：SOP-SH-030版 本：1.0页 码：共 4 页TBA（循环酶法）标准操作程序目录目录1第1章 目的和范围21.1目的21.2适用范围2第2章 操作规程22.1测定原理22.2试剂贮存与稳定性22.3试剂与样本准备22.4测定参数22.5操作步骤32.6校准和质控3第3章 结果计算33.1吸光度变化率的计算33.2活性的计算3第4章 方法学特性34.1正常参考范围34.2线性范围3第5章 临床意义4第6章 安全防护4第1章 目的和范围1.1 目的为用户使用迈瑞公司TBA试剂时，提供正确的操作流程和操作规范。1.2 适用范围适用于各级医疗机构的用户。第2章 操作规程2.1 测定原理-GT催化胆汁酸会被3a-羟甾醇脱氢（3a-HSD）以及b-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）特异性地氧化，生成3-酮类固醇以及b-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）。此外生成的3-酮类固醇在3a-羟甾醇脱氢（3a-HSD）及b-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）存在下，生成胆汁酸及b-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸氧化型（Thio-NAD）。如上所述，依据循环酶而放大微量的胆汁酸量，测定单位时间内生成的b-硫代烟酰胺脲嘌呤二核苷酸还原型（Thio-NADH）在405nm处的吸光度变化，以求得胆汁酸的浓度。2.2 试剂贮存与稳定性试剂贮存在28环境时，在试剂盒上规定的有效期前可以保持稳定。注意：试剂不可冰冻。2.3 试剂与样本准备本试剂为液体双试剂，取出后可以直接使用。样本可以为血清、肝素或EDTA抗凝的血浆。尽量使用新鲜标本。注意：（1）测定前应仔细检查试剂液面，并去掉其面上的气泡；（2）测定前应仔细检查样本，并去掉其中飘浮的纤维蛋白。2.4 测定参数测定波长：405nm；分析类型：连续监测法，扣除试剂空白；孵育时间：3分钟；延迟时间：1分钟；读数时间：3分钟；第一试剂/样本/第二试剂比例：270/4/90。注意：迈瑞公司有各型生化分析仪的详细测定参数备索。孵育时间3 min延迟时间 1 min读数时间3 min2.5 操作步骤 记录吸光度变化A/min 加R2：90 mlS、蒸馏水或样品：4 ml R1： 270 ml2.6 校准和质控请使用迈瑞公司推荐的校准品和质控品。第3章 结果计算3.1 吸光度变化率的计算A/min=A/min校准品管或样本管A/min空白管3.2 活性的计算C样本=（A样本A校准）C校准C样本：为测定的样本活性C标准：为校准品的活性第4章 方法学特性4.1 正常参考范围0mmol/L10mmol/L注意：各实验室应建立自己的正常参考范围。4.2 线性范围本法线性范围上限为150mmol/L，当样品测定值超过上限时，应将样品用生理盐水作1+ 1稀释后重测，结果乘以2。第5章 临床意义当患有肝脏疾病和胆酸吸收障碍时，进入血中的胆酸增加。在急性肝炎、慢性肝炎、肝硬化、肝癌等疾病时，总胆汁酸都有不同程度的升高。另外，总胆汁酸的升高还见于胆汁淤积，胆管阻塞、胆囊炎等慢性疾病。第6章 安全防护所有样本，包括病人样本、校准品和质控品等，可能含有致病性微生物，有被感染的危险性,操作时应采取防范措施；使用试剂时