挥发性盐基氮的测定.ppt

2020 1 14 饲料中挥发性盐基氮的测定 适用班级 动物科学系任课教师 兰云贤邰秀林电子信箱 lyunxian 电话2020 1 14 一 目的意义 挥发性盐基氮 TVBN 指动物性食品由于酶和细菌的作用 在腐败过程中 使蛋白质分解而产生氨及胺类等碱性含氮物质 挥发性盐基氮 VBN 能准确反应动物产品的新鲜度 VBN含量越低 其新鲜度就越高 评价动物性饲料的新鲜度 鱼粉 乳清粉 奶粉 肉骨粉 肉粉 血浆蛋白粉 血球蛋白粉 血粉 羽毛粉 水解羽毛粉 肠膜蛋白粉等测定 2020 1 14 二 原理 蛋白质分解后产生的碱性含氮物质 如伯胺 仲胺及叔胺等具有挥发性 在氧化镁碱性条件下蒸馏以氨的形式释效 再用酸滴定以定量 所得结果为挥发性盐基氮 2020 1 14 三 仪器与试剂 1 微量凯氏定氮器 微量滴定管 2 1 氧化镁混悬液称取1 0g氧化镁 加100ml水 振摇成混悬液 3 2 硼酸液称取20g硼酸溶解在少量蒸馏水中 再稀释至1000ml 4 混合指示液0 2 甲基红乙醇溶液与0 1 次甲基蓝溶液 临用时等量混合 5 0 01mol L盐酸标准溶液 2020 1 14 四 操作步骤 浸提 称取样品10g 置于锥形瓶中 加100ml水 不时振摇 浸渍30min后过滤 滤液备用 蒸馏 将盛有10ml吸收液并加有5 6滴混合指示液的锥形瓶置于冷凝管下端 并使其下端插人锥形瓶内吸收液的液面下 吸取10ml上述样品滤液于蒸馏器反应室内 加5mll 氧化镁混悬液 迅速盖塞 并加水以防漏气 通入蒸气 待蒸气充满蒸馏器内时即关闭蒸气出口管 由冷凝管出现第一滴冷凝水开始计时 蒸馏5min即停止 滴定 吸收液用0 01mol L盐酸标准溶液滴定 终点至蓝紫色 同时做试剂空白试验 2020 1 14 五 结果计算 x v1 v2 M 14 100 10 m式中 X 样品中挥发性盐基氮的含量 mg 100gVl 测定用样液消耗盐酸标准溶液体积 mlV2 试剂空白消耗盐酸标准溶液体积 mlM 盐酸标准溶液的摩尔浓度 mol L14 1mol L盐酸标准溶液1毫升相当氮的毫克数M 样品质量 g 2020 1 14 重复性 在重复条件下获得的两次独立测定结果的相对相差不超过10 2020 1 14 为什么不用氢氧化钠来蒸馏 氧化镁是弱碱 在它的作用下 只有铵类物质才会生成氨被游离出来 从而被蒸汽带出被硼酸吸收 氢氧化钠是强碱 会使蛋白质发生水解 释放出胺类物质 使得测定结果大大高于实际值 2020 1 14 总挥发性盐基氮 TVBN 通常用来衡量富含蛋白质食品的新鲜度 国际上水产 肉 蛋等食品使用较为普遍的鲜度指标 我国国家标准中挥发性盐基氮的测定方法是以肉类为标准制定的 影响测定准确性因素 浸提方法 水浸 三氯醋酸浸出 高氯酸浸出 氧化镁混悬液 pH 10 51 水溶性蛋白在碱性环境中水解结果偏大 加磷酸缓冲液近中性 pH 7 58 不易引起水解更精确 2020 1 14 饲料中TVBN的控制值 鱼粉 120mg g肠膜蛋白粉 33 7 血浆蛋白粉 小于25 mg 100g 超过35则有明显的腐败气味 血浆蛋白粉生产过程产生变异 一级肉粉 120mg 100g二级肉粉 130三级肉粉 150羽毛粉 90mg 100g牛肉 不超过20mg