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高二生物知识点集锦(65)新人教版选修1若某种限制性核酸内切酶的识别序列是cctagg,它在a和g之间切断dna。下图表示用该酶处理某基因后产生的片段。下列有关叙述正确的是()a该正常基因中有4个cctagg序列b产生的dna片段可用核糖核酸连接酶连接起来c用该酶处理得到图示基因片段要水解3个磷酸二酯键d若该基因某处有一个cctagc突变为cctagg,用该酶处理后将产生5个片段解析:选d。该正常基因被切为4个片段,有3个切点,应有3个cctagg序列;产生的dna片段不能用核糖核酸连接酶连接,只能用dna连接酶连接;用该酶处理得到图示基因片段要水解6个磷酸二酯键;若该基因某处有一个cctagc突变为cctagg,则有4个切点,用该酶处理后将产生5个片段。2下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述,正确的是(多选)()adna连接酶可把目的基因与载体的黏性末端的碱基黏合,形成重组dnab限制性核酸内切酶将一个dna分子片段切成两个片段需消耗两个水分子ctaq酶是用pcr仪对dna分子扩增过程中常用的一种耐高温的dna聚合酶d用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体,便于植物杂交育种解析:选bc。dna连接酶连接的是磷酸二酯键,形成重组dna。限制性核酸内切酶将一个dna分子片段切成两个片段,切断两个磷酸二酯键,需消耗两个水分子。用纤维素酶和果胶酶处理植物细胞获得原生质体,便于植物体细胞杂交。3(2011浙江理综)将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pet28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是()a每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒b每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点c每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个adad每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子解析:选c。大肠杆菌成功表达出腺苷酸脱氨酶,说明这些大肠杆菌都至少含有一个重组质粒,a项正确;作为载体的条件为至少含有一个或多个酶切位点,所以作为载体的质粒至少含有一个限制性核酸内切酶识别位点,b项正确;作为基因表达载体应包括目的基因、启动子、终止子、标记基因四部分,但并不是每个酶切位点都至少插入一个ada,c项错误;由于这些目的基因成功表达,所以每个ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子,d项正确。4(2012江苏百校联考一)下图表示细胞膜上乙酰胆碱(一种神经递质)受体基因的克隆技术操作过程,下列相关分析中错误的是(多选)()a获得该mrna的最佳材料是受精卵b构建基因表达载体最可能使用的载体是大肠杆菌c完成过程必不可少的酶分别是逆转录酶、dna聚合酶d探针筛选的目的是淘汰被感染的细菌,获得未被感染的细菌解析:选abd。该受体基因在神经细胞中表达,获得该mrna的最佳材料是神经细胞。构建基因表达载体最可能使用的载体是质粒。探针筛选的目的是检测是否存在cdna。5(2011四川理综)北极比目鱼中有抗冻基因,其编码的抗冻蛋白具有11个氨基酸的重复序列,该序列重复次数越多,抗冻能力越强。下图是获取转基因抗冻番茄植株的过程示意图,有关叙述正确的是()a过程获取的目的基因,可用于基因工程和比目鱼基因组测序b将多个抗冻基因编码区依次相连成能表达的新基因,不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白c过程构成的重组质粒缺乏标记基因,需要转入农杆菌才能进行筛选d应用dna探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达解析:选b。因为一种氨基酸可能对应多种密码子、真核生物体内的基因含有内含子等因素,导致逆转录合成的目的基因与原基因有较大的差异,所以人工合成的目的基因不能用于比目鱼基因组测序,a选项错误;抗冻蛋白的11个氨基酸的重复序列重复次数越多,抗冻能力越强,并不是抗冻基因的编码区重复次数越多抗冻能力越强,抗冻基因编码区依次相连形成的新基因已不是原来的抗冻基因,因此不能得到抗冻性增强的抗冻蛋白,b选项正确;农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞的最常用方法,不是为了筛选含有标记基因的质粒,c选项错误;应用dna探针技术,可以检测转基因植物中目的基因的存在,但不能完成对目的基因表达的检测,d选项错误。6利用外源基因在受体细胞中表达,可生产人类所需的产品。下列选项中能说明目的基因完成表达的是()a棉花细胞中检测到载体上的标记基因b山羊乳腺细胞中检测到人生长激素的基因c大肠杆菌中检测到人胰岛素基因的mrnad酵母菌细胞中提取到人的干扰素解析:选d。目的基因完成表达指的是合成出蛋白质。7(2010江苏理综)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题:(1)一个图1所示的质粒分子经sma切割前后,分别含有_个游离的磷酸基团。(2)若对图中质粒进行改造,插入的sma酶切位点越多,质粒的热稳定性越_。(3)用图中的质粒和外源dna构建重组质粒,不能使用sma 切割,原因是_。(4)与只使用ecor相比较,使用bamh和hind 两种限制酶同时处理质粒、外源dna的优点在于可以防止_。(5)为了获取重组质粒,将切割后的质粒与目的基因片段混合,并加入_酶。(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了_。(7)为了从cdna文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因,将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在_的培养基中培养,以完成目的基因表达的初步检测。解析:环状dna分子中磷酸全部参与形成磷酸二酯键,被sma 限制酶切开后相当于一个正常的dna分子,每个dna分子单链各含有一个游离的磷酸基团;at碱基对有两个氢键,而gc碱基对有三个氢键,gc碱基对含量越多,热稳定性越高;从图中读出:sma i限制酶破坏目的基因和标记基因;用bamh 和hind 两种不同的限制酶处理,形成不同的黏性末端,能有效防止只用一种限制酶形成的相同的黏性末端的质粒或目的基因相互连接、环状化;将质粒与目的基因“缝合”应用dna连接酶进行处理;标记基因的作用在于鉴别和筛选含有目的基因的细胞;大肠杆菌突变体丧失吸收蔗糖的能力,不能在只有蔗糖为碳源的选择培养基上存活,所以可以用该种选择培养基对导入的蔗糖转运蛋白基因是否表达进行初步检测。答案:(1)0、2(2)高(3)sma会破坏质粒的抗性基因、外源dna中的目的基因(4)质粒和含目的基因的外源dna片段自身环化(5)dna连接(6)鉴别和筛选含有目的基因的细胞(7)蔗糖为唯一含碳营养物质8质粒能成功转入植物细胞,并将质粒上的一部分外源dna整合到植物的dna中。下图表示利用质粒进行转化获得抗除草剂大豆的过程。请据图分析回答问题。(1)过程将目的基因导入质粒后,需要通过_使质粒与目的基因切口黏合。(2)整合了目的基因的重组质粒,在组成上还含有启动子、终止子和_。(3)过程可以采用的方法是_。(4)过程运用了细胞工程中的_技术,该技术的理论依据是_;在该技术应用的过程中,关键步骤是利用含有一定营养和激素的培养基诱导植物细胞进行_和_。(5)为了检测通过过程获得的幼苗是否具有抗除草剂的特性,可采用的方法是_。答案:(1)dna连接酶(2)标记基因(3)花粉管通道法(或农杆菌转化法,或基因枪法)(4)植物组织培养植物细胞具有全能性脱分化再分化(5)对幼苗喷施除草剂,观察其生长情况9转基因生物作为生物反应器,用于生产人们所需要的药用蛋白,如激素、抗体、疫苗、酶等。下图是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。请据图回答:(1) 构建表达载体的a过程中,需要用到的工具酶有(2) _和_。(2)b过程中,常用_处理使细菌转化为感受态细胞,从而利于重组质粒的导入。d过程采用的方法是_。若把重组质粒导入动物细胞,常采用的方法是_。(3)e过程采用的技术主要包括_和_两个阶段。(4)如果利用dna分子杂交原理对再生植株进行检测,f过程应该用_作为探针。解析:构建表达载体的a过程中,需要用到的工具酶有限制酶和dna连接酶。不同生物的受体细胞进行转基因时处理的方法不同,微生物常用ca2处理,植物细胞常用农杆菌转化法,动物细胞常用显微注射法。组织培养技术的核心是脱分化和再分化。如果利用dna分子杂交原理对再生植株进行检测,f过程应该用放射性同位素标记的胰岛素基因作为探针,因为目的基因是胰岛素基因。答案:(1)限制酶dna连接酶(2)ca2(cacl2溶液)农杆菌转化法显微注射法(3)脱分化再分化(4)放射性同位素标记的胰岛素基因10如图为获得抗虫棉的技术流程。在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(karr)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。请据图回答:(1)a过程所用的载体是_。(2)c过程的培养基除含有必需的营养物质、琼脂和激素外,还需加入_。(3)由图中离体棉花叶片组织获得转基因抗虫植株可采用_技术,该技术所依据的原理是_。(4)如果利用dna分子杂交原理对再生植株进行检测,d过程应该用放射性同位素(或荧光分子)标记的_作为探针。(5)如果从个体生物水平来鉴定,d过程可用的最简单检测方法是_。解析:(1)图中作为载体的是含kanr质粒。(2)c过程的培养基为选择培养基,为了筛选出含有目
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