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生物选修3 核心知识必背、基因工程的工具是：限制酶、DNA连接酶、运载体，工具酶是：限制酶、DNA连接酶、运载体有质粒、动植物病毒、入噬菌体的衍生物。最常用的是质粒。、基因工程的步骤是：目的基因的获取、基因表达载体的构建（核心步骤）、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。、获取目的基因的方法：从生物体内直接提取，人工合成，从基因文库中提取、PCR中文名称是多聚酶链式反应。利用的原理是DNA双链复制原理。利用的酶是热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。、基因表达载体最基本的四个结构是目的基因、标记基因、启动子、终止子、标记基因的作用是鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的受体细胞筛选出来。、将目的基因导入植物用农杆菌转化法、基因枪法；动物细胞用显微注射法、微生物细胞用感受态细胞法、检测目的基因是否插入染色体DNA用DNA分子杂交技术、检测目的基因是否转录出mRNA用分子杂交技术、检测目的基因是否翻译成蛋白质用抗原-抗体杂交法、除了分子检测外，有时还需要时行个体性状的检测鉴定，例如抗虫接种实验、目的基因的受体细胞通常用微生物的原因是，繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少等。、蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程，操作对象是基因、植物体细胞杂交的结果是：获得杂种植株。、制备原生质体的方法是用到纤维素酶和果胶酶去除细胞壁、植物体细胞杂交的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。、植物体细胞杂交育种的优点是克服远缘杂交不亲和障碍、促进原生质体融合的方法，物理法：离心、振动、电激。化学法：用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。、融合完成的标志是新细胞壁的形成、大量生产细胞产物（紫草素、人参皂苷、紫杉醇）培养到愈伤组织，人工种子培养到胚状体或者是幼芽阶段。、用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理（消化）动物组织成为单细胞。动物细胞培养的条件无菌无毒的环境 营养 温度和PH 气体环境、动物细胞培养的培养基中需加入血清、血浆等天然成分。、动物细胞培养中的CO2的主要作用是维持培养液的PH。、核移植的受体细胞为减数第二次分裂中期的次级卵母细胞， 、动物细胞融合最主要的用途是生产单克隆抗体、动物细胞融合中促进融合可以用物理法（离心、振动、电激）和化学法（聚乙二醇），特有的是还可以用灭活的病毒。、单克隆抗体制备流程中，两次筛选的方法和目的分别是：第一次筛选是用选择性培养基筛选，目的是筛选出杂交瘤细胞；第二次筛选是用专一抗体检测（抗原抗体杂交法），目的是筛选出能够产生所需专一抗体的杂交瘤细胞。、杂交瘤细胞的特点是既能迅速大量繁殖，又能产生专一的抗体、单克隆抗体最主要的优点是：特异性强、灵明度高，并可大量制备精子的变形：细胞核变成精子头的主要部分；高尔基体发育成头部的顶体；中心体演变成精子的尾；线粒体集中在尾的基部形成线粒体鞘；细胞内的其他物质浓缩为球状，叫做原生质滴，最后脱落。精子和卵子在发生上的重要区别：卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在出生前完成的。过程：（1）受精前的准备阶段1：精子获能：场所:雌性动物的生殖道（子宫和输卵管）（2）受精前的准备阶段2：卵子的准备：发育到减数第二次分裂中期（3）受精阶段：a.精子穿越放射冠：顶体反应（顶体酶）b.精子穿越透明带：透明带反应（阻止多精入卵的第一道屏障）c.进入卵黄膜：卵黄膜封闭作用（阻止多精入卵的第二道屏障）d. 雌、雄原核形成（雄原核的体积略大于雌原核）e. 雌雄原核融合 受精的标志：在卵黄膜和透明带的间隙可以观察到两个极体时 二、哺乳动物胚胎发育过程动物胚胎发育的基本过程：受精卵卵裂期桑椹胚囊胚原肠胚卵裂期：进行有丝分裂，细胞数量增加，胚胎总体积不增加，每个细胞体积减小，有机物总量减少。桑椹胚：每一个细胞都具有全能性囊胚：细胞开始分化的时期，分化出滋养层、内细胞团原肠胚：继续分化3、 胚胎移植技术生理学基础：供体和受体具有相同的生理环境早期胚胎处于游离状态，为胚胎的收集提供了可能受体对移入子宫的胚胎基本上不发生免疫排斥供体胚胎与受体子宫建立正常的生理和组织联系，且移入受体的胚胎的遗传物质不会改变注：冲卵指从子宫中冲出早期胚胎超数排卵、同期发情常用激素：促性腺