三维测定吐温80在肠外制剂高效液相色谱法和蒸发光散射检测.doc

高效液相色谱法和蒸发光散射检测器测定肠外制剂中的吐温80摘要不易溶于溶剂的药物常用表面活性剂如聚山梨酯80增溶。为评价赋形剂如吐温80在药剂中的稳定性，快速色谱方法是理想的；然而，吸收光谱监测聚山梨醇酯80没有一个强有力的生色团。一个对药剂中吐温80简单而快速分析法是已开发利用的高效液相色谱法-蒸发光散射检测器检测。分离聚山梨醇酯80作为一个单一的高峰实现对柱用甲醇/水为流动相，梯度水平检测。该方法是具体的吐温80的配方有无干扰药物或其他辅料。精密，恢复，线性，定量限/检测实验了可以接受的结果在评价的方法。1. 简介 表面活性剂广泛用于制药业对不溶性药物作为增溶剂。当表面活性剂添加到水溶液中超过胶束浓度，疏水性化合物药物的溶解度大大增加。一个常用于这一目的典型的表面活性剂是聚山梨酯80（商业上称为吐温80）或聚氧乙烯（20）失水山梨醇油酸（图）。 1）吐温80是一种非离子表面活性剂具有高表面活性和低毒性，对药学应用是一个很好的候选药物。一个监测药物制剂中吐温80稳定性的方法在是必要的对于药物溶解度取决于吐温80浓度。这在对药物工业对不同级别的药物制剂每个组成部分定量中也是常见的。由于这些原因，发展一种对制剂中吐温80定量测定的方法是必要的。山梨酯具有异构分子结构，因此，给它们的分析测定带来了许多挑战。一些尝试对吐温80定量测定的方法被报道在文献中。一些方法的使用基于比色法，薄层色谱法，和高效液相色谱法。所有这些出版的色谱分析方法不具有理想的分离度和分辨率。在另一篇论文中，聚型乳化剂进行了分析利用基质辅助激光解吸/电离时间飞行质谱。这种方法受质量光谱差和缺乏确定所有峰的影响。高效液相色谱法-紫外检测器是最常见的用于分析表面活性剂的分析技术，但吐温80缺乏足够的生色团很难用这种传统的高效液相色谱分析方法。用碱或酸加热时水解聚山梨醇酯80释放油酸，然后测定油酸也已经被报道。这种方法费时费力，因此不适合对大样本的定量测定。在本文中我们报告一个简单而快速的方法用于测定聚山梨酯80，反相高效液相色谱法-蒸发光散射检测器检测。蒸发光散射检测器是质量检测器，近年来被熟知为通用型检测器。含量的措施光散射液滴或颗粒的易失性分析物的化合物后，挥发性化合物移动阶段已消失。因此，本检测的特点是不依赖于光学特性的分析。浓度组分是成正比散射光。蒸发光散射检测器测定中的应用表面活性剂，聚合物，碳水化合物和三甘油酯被广泛报道811。在药房药品行业，蒸发光散射检测器用于检测国家药物，杂质，原材料与无机化学有机反离子 1215 。蒸发光散射检测器适用于吐温80测定，因为它有一个弱紫外生色但非易失性特征。高效液相色谱法聚山梨醇酯80 16测定的报道，但是，该样品被分为多个部分峰。这样一个多峰色谱不理想定量，所以一个梯度系统的开发本文生产单一的色谱分析峰。此方法已成功地用于德更换吐温80浓度在制剂稳定性的研究。2。实验2.1色谱系统高效液相色谱系统包括一个水型2695高效液相色谱系统（Waters, Milfred, MA, USA）耦合Alltech ELSD 2000检测器（(Alltech Associates, Deerfield, IL, USA).一个N2发生器(Alltech Associates)被用作氮气来源。高效液相色谱柱 (2504.6 mm)用alltima C18装满，5m (Alltech Associates)用于分离聚山梨醇酯80与其他峰。蒸发光散射检测器模式置在ON键上,漂移管温度设定在40。氮流量维持在1.5L/min.2.2试剂甲醇（色谱纯级），蒸馏水，氮气（极纯，99%）。聚山梨酯80。2.3。梯度条件 流动相：甲醇：水。计划是在12分钟梯度从30%增加到90%,流速为1毫升/分钟。完全梯度条件如下：2.4。实验仪器测试样本在本研究中制备商用的原材料和制药ceutical产品。一个典型的配方样本载药，吐温80，葡萄糖，水注射，盐酸或氢氧化钠酸碱调节。库存解决方案的葡萄糖，聚山梨酯80，和药物/吐温80进行预们和他们进一步稀释准备测试文章（助教），控制和矩阵解。三不同的解决方案，PH值3.1，3.5和2.5准备在100%水平（4毫克/毫升吐温80）。最大限度的潜在干扰的水平，药物和葡萄糖准备在110%左右名义配方浓度。此外，热强调样本准备和分析可能的热降解经营范围和干扰聚山梨酯80。这些样本包括三个不同的解决方案：一个50毫克/毫升葡萄糖溶液在PH值3.1，一4毫克/毫升的吐温80的溶液在PH值3.1，并提出制定含有葡萄糖，聚山梨酯80，与药物在PH值3.1。这些解决方案被装入塑料和玻璃集装箱系统，并强调在热室708c48小时3。结果与讨论3.1。分离的聚80as单峰这项研究的范围是制定一个方法分离的吐温80作为一个单一的高峰为定量聚山梨醇酯80多制定样品。一个高度极性反相柱乌曼（2534.6毫米）被选为分离吐温80由于其亲水性的特点。几个梯度成分进行了评价获得一个单一的吐温80峰。优化梯度条件中所描述的实验部分的。梯度开始与水/甲醇比70 : 30和4分钟的变化水甲醇（10 : 90）。这一突然增加的强度的流动相是必要的减少的多个山峰和获得一个单一的峰。一个例子色谱聚山梨酯80（4毫克/毫升）标准溶液在水图2所示。高斯峰没有得到因为单一的峰值是由压缩多分布造成峰异质催化分子种聚山梨酯80。峰值形状是对于我们的目的我们目的是解决不了或定量个别聚合物的物种，但定量总聚山梨醇酯80在制定样品。3.2。分析聚山梨酯80in肠外配方拟议的分析方法评价测定吐温80之一百特注射制剂。参数评价特异性，准确性，精度和线性，定量限和检测限。3.2.1。特异性特异性评估注射样品水，矩阵和提出的制定，以及溶液中聚山梨醇酯80（在玻璃和塑料容器），受到足够的热应力（708c最少为48小时）评价可能的干扰，由于容器提出物。所有热强调解决方案准备在塑料容器相比，相同的解决方案玻璃相同的条件下方便确定潜在的集装箱相关峰。没有干扰药物或葡萄糖中指出任何特异性样品。热应激样品还没有提交的证据的干扰由于容器提出物。3.2.2。准确度和精密度准确度，精度和线性度进行了评价通过分析测试解决方案，准备在大约80%，100%和120%级聚山梨酯80浓度的制剂。结果准确赛扬，精度和线性度报告表1和2。样品回收率为97.52102.11%，相对标准偏差值与%0.21.3%。例：样品色谱图泰宁约4毫克/毫升聚山梨酯80图3所示。结转是一个重大问题的处理过程本法的发展。甲醇注射液柱（100%甲醇冲洗60分钟）是定期进行过程中的高效液相色谱运行，减少材料的堆积在列。这种清理程序有助于维护整个系统精度的高效液相色谱分析。本整个系统的精度计算为1.9%相对标准偏差。3.2.3。线性的标准线性度是评价一式三份注射标准溶液制备聚山梨酸80溶液的浓度为26毫克/毫升，导致相关系数0.997。样本线性数据来自精度研究。相关系数样本的计算是0.996。表2显示的结果，从标准和样品线性度研究。英语的缺点，非线性反应和一个必须使用校准曲线解决这一问题， 8。三点校准曲线用（2，4，6毫克/毫升）的定量吐温80在制定样品。2.43。定量限（下限）和检测限该定量限为吐温80的配方估计约40毫克/毫升的基础在信噪比为10。检测限为聚80，此方法被确定为约15毫克/毫升（信噪|3）。这两个限与系统确定了连续稀释样品中含有的最低水平聚山梨酯80。4。结