高三生物一轮复习 第34讲 微生物的培养与应用课件 新人教版选修1.ppt

生物技术实践 第34讲 微生物的培养与应用 选修1 1 微生物的分离和培养 2 培养基对微生物的选择作用 1 2009 安徽 下列是关于 检测土壤中细菌总数 实验操作的叙述 其中错误的是 a 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基 经高温 高压灭菌后倒平板b 取104 105 106倍的土壤稀释液和无菌水各0 1ml 分别涂布于各组平板上c 将实验组和对照组平板倒置 37 恒温培养24 48小时d 确定对照组无菌后 选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数 d 检测土壤中细菌总数 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白胨培养基 经高温 高压灭菌后倒平板 取104 105 106倍的土壤稀释液和无菌水各0 1ml 分别涂布于各组平板上 将实验组和对照组平板倒置 37 恒温培养24 48小时 在确定对照组无菌后 选择菌落数在30 300的一组平板为代表进行计数 所以d不对 2 2009 辽宁 宁夏 1 在大肠杆菌培养过程中 除考虑营养条件外 还要考虑 和渗透压等条件 由于该细菌具有体积小 结构简单 变异类型容易选择 等优点 因此常作为遗传学研究的实验材料 2 在微生物培养操作过程中 为防止杂菌污染 需对培养基和培养皿进行 消毒 灭菌 操作者的双手需要进行清洗和 静止空气中的细菌可用紫外线杀灭 其原因是紫外线能使蛋白质变性 还能 温度 酸碱度 易培养 生活周期短 灭菌 消毒 损伤dna的结构 3 若用稀释涂布平板法计数大肠杆菌活菌的个数 要想使所得估计值更接近实际值 除应严格操作 多次重复外 还应保证待测样品稀释的 4 通常 对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状 大小等菌落特征对细菌进行初步的 比例合适 鉴定 或分类 5 培养大肠杆菌时 在接种前需要检测培养基是否被污染 对于固体培养基应采用的检测方法是 6 若用大肠杆菌进行实验 使用过的培养基及其培养物必须经过处理后才能丢弃 以防止培养物的扩散 将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间 观察培养基上是否有菌落产生 灭菌 1 大肠杆菌具有易培养 生活周期短等优点 培养过程中 除考虑营养条件外 还要考虑温度 酸碱度和渗透压等条件 2 对培养基和培养皿应进行灭菌 对操作者的双手需要进行清洗和消毒 紫外线能使蛋白质变性 还能损伤dna的结构 3 稀释涂布平板法是将菌液进行一系列的梯度稀释 然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面 进行培养 应保证样品稀释的比例适合 4 对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状 大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定 5 培养大肠杆菌时 在接种前需要检测培养基是否被污染 对于固体培养基应采用的检测方法是将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的时间 观察培养基上是否有菌落产生 6 因为有的大肠杆菌会释放一些强烈的毒素 并可能导致肠道出现严重症状 使用过的培养基及其培养物必须经过灭菌处理后才能丢弃 以防止培养物的扩散 一 微生物的实验室培养1 培养基培养基是指人们按照微生物对营养物质的不同需求 配制出的供其生长繁殖的营养基质 按物理性质可分为液体培养基 固体培养基 一般加入琼脂 等 培养基的成分一般包括水 碳源 氮源和无机盐等 除基本营养物质外 还需要满足微生物生长对ph 特殊营养物质以及氧气的要求 如 培养乳酸菌需向培养基中添加维生素 培养霉菌时培养基的ph应调至酸性 培养细菌时需将ph调至中性或微碱性 2 消毒和灭菌 3 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 4 纯化大肠杆菌 二 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1 原理 2 流程 三 分解纤维素的微生物的分离1 刚果红染色法 纤维素 纤维素酶 2 流程 1 不同微生物的营养类型是否相同 1 根据能否将co2合成有机物可将微生物的同化类型划分为自养型与异养型 自养型 能利用co2等简单的无机物合成贮存能量的有机物 异养型 不能利用co2等简单无机物合成有机物 只能以其他生物制造的有机物为食 2 根据细胞呼吸时是否需要氧气 可将微生物的异化类型划分为需氧型和厌氧型 需氧型 必须不断从外界环境中摄取氧气来氧化分解自身的组成物质 并释放能量 排出代谢产物 厌氧型 在无氧条件下 依靠酶的作用分解有机物 获取所需的能量 注 酵母菌既能进行有氧呼吸 也能进行无氧呼吸 属于兼性厌氧型 2 配制培养基时应注意哪些问题 1 全程要求无菌操作 2 培养基灭菌后 需要冷却到50 左右时 才能用来倒平板 可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶 感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时 就可以进行倒平板了 操作时使锥形瓶的瓶口通过火焰 通过灼烧灭菌 防止瓶口的微生物污染培养基 3 平板冷凝后皿盖上会凝结水珠 凝固后的培养基表面的湿度也比较高 将平板倒置 既可以使培养基表面的水分更好地挥发 又可以防止皿盖上的水珠落入培养基 造成污染 4 在倒平板的过程中 不能将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位 因为空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生 3 为什么分离不同的微生物要采用不同的稀释度 测定土壤中细菌的总量和测定土壤中能分解尿素的细菌的数量 选用的稀释范围相同吗 这是因为土壤中各类微生物的数量 单位 株 kg 是不同的 例如在干旱土壤中的上层样本中 好氧及兼性厌氧型细菌数约为2185万 放线菌数约为477万 霉菌数约为23 1万 因此 为获得不同类型的微生物 就需要按不同的稀释度进行分离 同时还应当有针对性地提供选择培养的条件 由于土壤中细胞的总量多于土壤中能分解尿素的细胞的数量 故测定土壤中细菌的总量时稀释倍数要高些 4 在分离纤维素分解菌的选择培养基上 长出的菌落大小 形态及透明圈的大小是否相同 在形成的菌落中数量最多的应该是哪种生物的菌落 能够分解纤维素的微生物种类很多 不仅有细菌 还有霉菌 放线菌等 这些微生物的菌落特征各不相同 分解纤维素的能力也不相同 所以长的菌落大小 形态以及透明圈的大小并不相同 在形成的菌落中数量最多的应当是细菌的菌落 因为土壤中细菌的数量远远多于真菌和放线菌 5 分离分解纤维素的微生物的实验流程与稀释液的取样培养流程图有何异同 它们的区别是 稀释液的取样流程图是将土样制成的菌悬液直接涂布在以尿素为惟一氮源的选择性培养基上 直接分离得到菌落 分离分解纤维素的微生物的实验流程通过选择培养 使纤维素分解菌得到增殖后 再将菌液涂布在选择培养基上 其他步骤基本相同 微生物的实验室培养有关培养基配制原则叙述正确的是 a 任何培养基都必须含有水 碳源 氮源 无机盐及生长因子b 碳源和氮源必需具有一定的比例 且碳源比氮源要多c 微生物的生长除受营养因素影响外 还受到ph 氧 渗透压的影响d 营养物质的浓度越高越好 c a错误 各种培养基一般都需要含有的是水 碳源 氮源和无机盐 不一定要有生长因子 b错误 不一定要碳源与氮源的比值一定 与培养的目的有关 d错误 营养物质浓度过高 微生物易失水 反而会抑制微生物的生长 消毒和灭菌是两个不同的概念 灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力 消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害 下列哪些事物适用于消毒处理 皮肤 饮用水 牛奶 注射器 培养皿 接种环 培养基 果汁 酱油 手术刀a b c d 以上全部 a 选a 对于皮肤 饮用水 牛奶 果汁和酱油 如用强烈的理化因素则对其结构和成分起破坏作用 所以应用温和的物理和化学方法进行消毒 三种常用灭菌方法的比较 土壤中分解尿素细菌的分离与计数用稀释涂布平板法来统计样品中尿素分解菌的数目 为了提高实验结果的可信度 往往要设置对照实验 对于对照组的要求不包括以下哪项 a 对照组培养基也严格灭菌 且不接种任何微生物b 对照组和实验组培养基放在相同条件下培养c 所用培养基成分及ph大小完全与实验组一致d 培养基的量的大小与实验组必须绝对相同 d 一方面 实验室条件下 培养空间资源都相对来说是无限的 另一方面 对于培养基来说 接触细菌的都是最表面那层 所以培养基的量对实验结果的影响不大 用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目 其结果与实际值比 a 比实际值要高b 比实际值要低c 和实际值一样d 比实际值可能高也可能低 b 当两个或多个细胞连在一起时 培养后观察到的只是一个菌落 为了保证结果准确 一般设置3 5个平板 选择菌落数在30 300的平板进行计数 并取平均值 稀释涂布平板法统计样品中菌落的数目往往比实际数目低 这是因为当两个或多个细胞连在一起时 平板上观察到的只是一个菌落 分解纤维素的微生物的分离分离纤维素分解菌的实验过程中操作有误的是 a 经选择培养后将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上b 富集培养这一步可省略 但培养纤维素分解菌少c 经稀释培养后 用刚果红染色d 对照组可用同样量的培养液涂布到不含纤维素的培养基上 a 经选择培养后培养基上纤维素分解菌的浓度增加 所以需要将样品进行梯度稀释后才能涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 选择培养可省略 但选择培养可增加纤维素分解菌浓度 此步若省略 所得到的微生物可能较少 经稀释培养长出菌落后 再加刚果红染色 设置对照能证明经富集培养的确得到了欲分离的微生物 分解纤维素的微生物的分离实验的具体操作步骤是 土壤取样 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈的菌落 选择培养 梯度稀释a b c d a 本题考查分解纤维素的微生物的分离实验流程 为了增加分解纤维素的微生物的浓度