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第33讲微生物的利用 第九单元生物技术实践 1 大肠杆菌的培养和分离 加试 2 分离以尿素为氮源的微生物 加试 考纲要求 内容索引 考点一微生物的培养和分离 考点二分离以尿素为氮源的微生物 做模拟练预测 课时训练 考点一微生物的培养和分离 知识梳理 答案 1 大肠杆菌 1 特性 大肠杆菌是革兰氏性 代谢类型 的肠道杆菌 在肠道中一般对人无害 但若进入人的系统 就会对人体产生危害 2 用途 是技术中被广泛采用的工具 阴 兼性厌氧 泌尿 基因工程 2 细菌的培养和分离 1 细菌的繁殖 以的方式繁殖 分裂速度很快 约20min分裂一次 2 培养的方法 需要将已有细菌的培养物转移到新的培养基中 一般用 工具 转移带菌的培养物 3 细菌分离的方法与特点 答案 分裂 接种环 划线分离 涂布分离 3 消毒和灭菌的区别 化学 物体表面 煮沸 高压蒸汽 答案 4 大肠杆菌的培养和分离实验 1 实验内容 将大肠杆菌扩大培养和划线分离 即用培养基扩大培养大肠杆菌 培养后再在培养基上划线进行分离 随后培养基上就会形成一个个单独的菌落 答案 lb液体 lb固体平面 2 实验步骤 答案 倒平板 接种 高压蒸汽 三角瓶 连续划线 单个菌落 3 大肠杆菌分离的用途 单菌落的分离是的通用方法 也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一 答案 消除污染杂菌 答案 5 微生物接种的两种常用方法比较 接种环 一系列 思考诊断 答案 1 连线无菌技术的方法 类型及对象 2 观察甲 乙 丙 丁四幅图 熟悉倒平板的操作流程 请填空 答案 1 请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程 2 甲 乙 丙中的灭菌方法是 3 丁中的操作需要等待才能进行 丙 乙 甲 丁 灼烧灭菌 平板冷却凝固 3 下图中甲为划线分离法中最重要的环节 乙为操作的结果 答案 1 每一次划线后都要将接种环灼烧 2 除第一次划线外 每一次划线的起点都是第一次划线的末端 提示平板划线时除第一次划线外 每一次划线的起点都是上一次划线的末端 而不是第一次 4 如图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图 请思考 答案 1 获得图a效果和b效果的接种方法分别是什么 提示获得效果a的接种方法为涂布分离法 获得效果b的接种方法为划线分离法 答案 2 某同学在纯化土壤中的细菌时 发现培养基上的菌落连成了一片 最可能的原因是什么 应当怎样操作才可避免此种现象 提示最可能的原因是菌液浓度过高或划线时在划下一区域前未将接种环灼烧灭菌 采取的措施是增大稀释倍数或每次划新区域前先将接种环灼烧灭菌 1 下图为 大肠杆菌的培养和分离 实验的基本流程 请回答下列问题 解析lb液体培养基是通用的细菌培养基 lb固体平面培养基则用于划线分离形成单菌落 氯化钠的作用是维持培养基的渗透压 调节好酸碱度后才能进行灭菌 若灭菌后再进行酸碱度调节 又会产生新的污染 解题探究 1 a过程配制的是通用细菌培养基 称为 培养基 配制时除了加入特定的营养物质以外 还要加入一定量的氯化钠 以维持 对培养基酸碱度的调节 应该在b过程的 填 前面 或 后面 lb液体 渗透压 前面 解析答案 1 2 3 3 d过程后 一个菌体便会形成一个 这种分离方法是 的通用方法 也是筛选特定菌株的最简便方法之一 消除污染杂菌 或纯化菌种 2 d过程与c过程相比 培养基中增加的物质是 e过程所需的温度是 琼脂 4 单 菌落 解析在液体培养基的基础上加入一定量的琼脂可形成固体培养基 菌种应置于4 c冰箱中保存 解析通过划线分离后 一个菌体就会繁殖出一个菌落 解析答案 1 2 3 4 植物组织培养时 先配制ms培养基 再加入一定比例的植物激素 当生长素相对较多时 可促进 生根 解析答案 解析植物组织培养中生长素相对较多时 有利于生根 而细胞分裂素相对较多时 则有利于生芽 1 2 3 5 植物组织培养和微生物培养都需要无菌操作 下列不适宜用高压蒸汽灭菌的是 a 接种环和镊子b 三角瓶和广口瓶c 发芽培养基和生根培养基d 用于培养的幼茎和幼芽 解析 解析高压蒸汽灭菌常用于培养基 培养器材等的灭菌 而用于培养的幼茎和幼芽则不能进行任何灭菌操作 否则会导致细胞死亡 1 2 3 2 检验饮用水的细菌含量是有效监控疾病发生的必要措施 请回答下列与检验饮用水有关的问题 1 要测定饮用水中大肠杆菌的数量 常采用 法 通常将水样进行一系列的梯度 然后将上述的水样用玻璃刮刀分别涂布到 的表面进行培养 记录菌落数量 用该方法统计样本菌落数时 填 是 或 否 需要对照组 原因是 涂布分离 稀释 lb固体培养基 是 需要判断培养基使用之前是否被杂菌污染 培养基灭菌是否合格 答案 1 2 3 2 下面所示的四种菌落分布图中 不可能由上述方法得到的是 3 大肠杆菌的培养条件是无菌 培养基配制时需加入氯化钠 以维持 配制培养基时先 后 a 调节phb 灭菌c 消毒d 调节温度 渗透压 a b 答案 1 2 3 3 请回答微生物培养和分离的有关问题 1 欲从土壤中分离出能利用尿素的细菌 以 为唯一氮源且加入了 指示剂的培养基 用 法分离细菌 若培养基平板上有菌落存活且颜色变 则说明分离成功 解析分离能利用尿素的细菌 只需以尿素为唯一氮源 加酚红指示剂 采用涂布分离法分离细菌 只要培养基中的指示剂变红 标志着存在脲酶水解尿素的反应 证明菌株可以以尿素为氮源 尿素 酚红 涂布分离 或涂布 红 解析答案 1 2 3 2 分离以尿素为氮源的细菌和分离大肠杆菌都使用了lb培养基 其成分 a 前者含琼脂 后者不含琼脂和琼脂糖b 两者都含有琼脂c 前者含有琼脂糖 后者不含琼脂糖但含琼脂d 两者都不含琼脂和琼脂糖 解析分离以尿素为氮源的细菌所用培养基应含有琼脂糖 而分离大肠杆菌所用培养基则不含琼脂糖而含琼脂 解析 返回 1 2 3 考点二分离以尿素为氮源的微生物 知识梳理 答案 1 菌种特点含有酶 可以通过降解尿素作为其生长的氮源 2 培养基用以为唯一氮源的培养基培养 以培养基为对照 3 实验原理 1 筛选以尿素为氮源的微生物 可使用以尿素为唯一氮源的选择培养基进行培养选择 2 细菌合成的脲酶能将尿素分解成 致使ph升高 使酚红指示剂 脲 尿素 lb全营养 nh3 变红 4 实验步骤制备培养基 将已灭菌的lb固体培养基和尿素固体培养基分别倒入两个培养皿中 摇匀 平放至凝固 制备细菌悬液 用1g土样配制不同浓度的细菌悬液 用分离细菌 将不同浓度的土壤稀释液分别加到有lb培养基和尿素培养基的培养皿中 并用玻璃刮刀涂布到整个平面上 答案 涂布分离法 培养 将培养皿倒置 在37 恒温箱中培养24 48h 观察 培养基中菌落数量 答案 5 反应的鉴定在配制培养基时 加入指示剂酚红 培养时细菌将尿素分解并产生碱性的氨 使培养基上菌落周围出现 红色的环带 只有能分解尿素的微生物才能生长 思考诊断 答案 1 分析下表所示培养基的配方 回答下列问题 1 在该培养基的配方中 为微生物提供碳源的物质是 提供氮源的物质是 2 该培养基 填 是 或 否 具有选择作用 因为 葡萄糖 尿素 是 2 如图为分离以尿素为氮源的微生物的实验 思考回答问题 答案 1 实验目的是使用含有的培养基分离能产生酶的细菌 使用作为指示剂 由颜色变化检测知酶所催化的反应 相关的反应式为 2 制备尿素固体培养基过程中采用的灭菌方法有 g6玻璃漏斗过滤法 3 从上图所示实验过程中可判断出细菌悬液c的稀释度为 用涂布分离法分离细菌 尿素 脲 酚红 nh2 2c o h2o2nh3 co2 高压蒸汽灭菌法 10 4 3 判断下列叙述的正误 1 土样应从有哺乳动物排泄物的地方取 2 取10 4 10 5的土壤稀释液各0 1ml 分别涂布于全营养lb固体培养基 尿素固体培养基上 3 将实验组和对照组平板倒置 37 c恒温培养24 48h 4 在尿素固体培养基上生长的细菌都是以尿素为氮源的细菌 答案 提示有哺乳动物排泄物的地方含脲酶的细菌较多 4 2013年11月22日凌晨3点 青岛黄岛区发生石油泄漏事件 一些微生物可以有效地分解石油 如何配制选择培养基将这类微生物选择出来 答案 提示配制的选择培养基中 石油作为唯一的碳源 然后用这种培养基培养多种微生物 凡是能在该种培养基上生存的就是能分解石油的微生物 1 现从土壤中分离以尿素为氮源的细菌 实验过程如下图所示 解题探究 请回答 1 欲从土壤中分离出能分解尿素的细菌 将土壤用 进行一系列的梯度稀释 同一浓度的土壤稀释液应至少涂布 个平板 通常以每个培养皿中有 个以内的单菌落的那一组稀释倍数为最合适 无菌水 3 20 答案 1 2 2 接种后的培养皿 于37 的恒温箱中培养 若培养基中存在含脲酶的细菌 其菌落周围会出现 这是由于尿素被分解产生氨气 遇培养基中的 产生的颜色变化 从而证明这一菌株能以尿素为氮源 3 分离能利用尿素的细菌时所用的培养基成分上最主要的特点是 倒置 红色环带 酚红指示剂 以尿素作为唯一氮源的 固体 培养基 答案 1 2 4 下列操作需要在酒精灯火焰旁进行的是 多选 a 称取葡萄糖 琼脂糖等培养基成分b 倒平板c 涂布平板d 微生物的培养 5 与lb全营养培养基上的菌落数相比 尿素培养基上只有少数菌落的原因是 土壤中能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少数 答案 1 2 2 如图是从土壤中筛选产脲酶细菌的过程 解析脲酶能够催化尿素分解为氨 故图中选择培养基应以尿素作为唯一氮源 由于尿素被分解成了氨 氨会使培养基的碱性增强 ph升高 使酚红指示剂变红色 1 图中选择培养基应以 为唯一氮源 鉴别培养基还需添加 作为指示剂 产脲酶细菌在该培养基上生长一段时间后 其菌落周围的指示剂将变成 色 尿素 酚红 红 解析答案 1 2 2 在5个细菌培养基平板上 均接种稀释倍数为105的土壤样品溶液0 1ml 培养一段时间后 平板上长出的细菌菌落数分别为13 156 462 178和191 该过程采取的接种方法是 每克土壤样品中的细菌数量为 108个 与血细胞计数板计数法相比 此计数方法测得的细菌数较 解析 涂布分离法 1 75 少 答案 1 2 解析用于计数细菌菌落数的接种方法是涂布分离法 统计的菌落数应介于30 300之间 故选择细菌菌落数为156 178和191的平板计数 每克土壤样品中的细菌数量为 156 178 191 3 0 1 105 1 75 108个 由于两个或多个细菌连接在一起时 往往统计的是一个菌落 故用此方法测得的细菌数偏少 1 2 1 培养基中观测指标的分析 1 培养基中的酚红指示剂产生颜色变化 变红 标志着存在脲酶水解尿素的作用 从而证明这一菌株能以尿素为氮源 红色环状区域的大小代表脲酶活性的强弱和含量的多少 红色区域越大 表明菌株利用尿素的能力越强 2 与全营养培养基上的菌落数比较 尿素培养基上只有少数菌落 这一现象表明能利用尿素的细菌在土壤菌群中只占极少部分 归纳整合 1 2 2 微生物筛选过程中必要的两种对照培养基及其作用 1 2 返回 做模拟练预测 1 2016 温州中学期末测试 下图是微生物平板划线示意图 划线的顺序为1 2 3 4 5 下列操作方法正确的是 解析 a 操作前要将接种环放在火焰旁灭菌b 划线操作须在火焰上进行c 在5区域中才有可能得到所需菌落d 在1 2 3 4 5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 1 2 3 4 解析操作前要将接种环放在火焰上灼烧灭菌 a项错误 划线操作须在火焰旁进行 b项错误 在5区域中最有可能得到所需菌落 c项错误 在1 2 3 4 5区域中划线前后都要对接种环进行灭菌 d项正确 1 2 3 4 2 在细菌培养过程中 下列有关操作正确的是 a 涂布器用火焰灼烧进行灭菌b 培养基分装到培养皿后进行灭菌c 倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行d 分离得到的菌落应先接种在平板上 培养24h后 置于4 冰箱中保存 解析涂布器应该用高压蒸汽灭菌 a项错误 培养基应该先灭菌后分装 b项错误 倒平板和取菌液都必须要在酒精灯火焰旁进行 以防止杂菌污染 c项正确 分离得到的菌落应先接种在斜面上 置于37 的恒温箱培养24h后 再置于4 冰箱中保存 d项错误 解析 1 2 3 4 3 下图是 分离以尿素为氮源的微生物 实验的基本流程 请回答下列问题 解析分离以尿素为氮源的微生物 应该以尿素为唯一氮源 所以不应有琼脂 解析 1 该实验培养基不能含有 a 尿素b 氯化钠c 葡萄糖d 琼脂 1 2 3 4 2 尿素溶液可用 使之无菌 若要检查b过程灭菌是否彻底 可以采用的方法是 3 图中步骤c为 相对于划线分离法 过程d涂布分离法的优点是 g6玻璃漏斗过滤 将空白培养基放在适宜温度下培养一段时间 观察有无菌落出现 倒平板 单菌落更易分开 1 2 3 4 解析尿素用g6玻璃漏斗过滤除去其中细菌等微生物 解析答案 4 如果菌落周围出现 色环带 说明该菌落能分泌脲酶 红 1 2 3 4 解析若菌落能分泌脲酶 则菌落周围会出现红色环带 解析答案 4 2014 浙江自选 17节选 1 现有一份污水样品 某兴趣小组欲检测其中的细菌数 进行以下实验 将一定量的污水样品进行浓度梯度稀释 取适量不同稀释度的稀释液 用 法分别接种于固体平面培养基上 经培养后进行计数 该实验应注意 接种前 从盛有 的容器中将玻璃刮刀取出 放在酒精灯火焰上灼烧 冷却后待用 分组时 需用 作为对照 涂布分离 70 酒精 未接种的培养基 解析 答案 1 2 3 4 解析细菌的分离与计数常用涂布分离法 即用玻璃刮刀将一定体积的稀释液涂布到固体平面培养基上 玻璃刮刀在使用前需进行灭菌处理 即将其浸入体积分数为70 的酒精中 随后取出放在酒精灯火焰上灼烧 冷却后待用 为排除其他因素的影响 提高实验的可信度 实验中要设置空白对照 1 2 3 4 2 在上述细菌培养实验中进行计数时 应计数的是接种了 a 各个稀释度样品的培养基上的细菌数b 合理稀释度样品的培养基上的细菌数c 各个稀释度样品的培养基上的菌落数d 合理稀释度样品的培养基上的菌落数 解析将菌液涂布到固体平面培养基上后 倒置放在恒温箱中培养 培养一段时间后 统计菌落数 当样品的稀释度足够高时 培养基表面生长的一个菌落 来源于样品稀释液中的一个活菌 这样通过统计菌落数就可估算出待测样品的细菌数目 所以要选择合理稀释度样品的培养基上的菌落数 解析 返回 1 2 3 4 课时训练 一 选择题1 下图为实验室培养和纯化大肠杆菌过程中的部分操作步骤 下列说法错误的是 解析 a 步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行b 步骤 中 待倒入的培养基冷却后盖上培养皿的皿盖c 步骤 中 每次划线前后都需对接种环进行灼烧处理d 划线接种结束后 将图 平板倒置后放入培养箱中培养 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 解析由图可知 步骤 是倒平板 步骤 是用接种环蘸取菌液 步骤 是进行平板划线 步骤 是培养 步骤操作时需要在酒精灯火焰旁进行 防止被杂菌污染 a项正确 倒完平板后应立即盖上培养皿盖 冷却后将平板倒过来放置 b项错误 每次划线前后灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 使下一次划线时 接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端 从而通过划线次数的增加 使每次划线时菌种的数目逐渐减少 以便得到单菌落 c项正确 划线接种结束后 将平板倒置放入培养箱中培养 有利于培养基表面的水分更好地挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染 d项正确 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 2016 舟山中学期末测试 下列有关微生物培养的叙述中 不正确的是 解析 a 获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染b 单菌落的分离是消除污染的杂菌的通用方法c 培养基都必须使用高压蒸汽灭菌法灭菌d 倒置平板防止培养皿盖上的冷凝水滴落 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 解析微生物培养中获得纯净培养物的关键是防止杂菌污染 a项正确 通常可以采用涂布分离法或划线分离法进行单菌落的分离 以消除污染的杂菌 b项正确 培养基通常可以进行高压蒸汽灭菌 但对于培养基中有高温易分解的成分 就不能用此方法 如培养基中的尿素等物质 c项错误 划线接种结束后需要将培养皿倒置 以防止培养基蒸发冷凝成的水滴入培养基而造成污染 d项正确 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3 2015 普陀中学期末测试 在分解尿素的细菌的分离和鉴定中 对先后用到的两种培养基的叙述正确的是 a 加入酚红指示剂作为鉴别培养基 再加入唯一碳源作为选择培养基b 加入唯一氮源作为鉴别培养基 再加入酚红指示剂作为选择培养基c 加入唯一氮源作为选择培养基 再加入酚红指示剂作为鉴别培养基d 加入酚红指示剂作为选择培养基 再加入唯一碳源作为鉴别培养基 解析能合成脲酶的细菌才能分解尿素 配制以尿素为唯一氮源的培养基 能够生长的细菌就是能分解尿素的细菌 细菌合成的脲酶将尿素分解成氨 氨会使培养基的碱性增强 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌 若指示剂变红 可确定该种细菌能够分解尿素 解析 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 4 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是 a 筛选出能分解尿素的细菌b 对分离的菌种作进一步鉴定c 作细菌的营养成分d 若指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素 解析筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可 不需要加指示剂 加入指示剂的培养基 目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定 解析 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 二 非选择题5 幽门螺杆菌 hp 感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素 在患者体内采集样本并制成菌液后 进行分离培养 实验基本步骤如下 解析幽门螺杆菌 hp 含有脲酶 能以尿素为氮源 在加入尿素和酚红指示剂的培养基中培养hp 由于尿素经脲酶的降解可产生碱性的nh3 nh3能使培养基中的酚红由红黄色变成红色 故菌落周围会出现红色环带 请回答 1 在配制培养基时 要加入尿素和酚红指示剂 这是因为hp含有 它能以尿素作为氮源 若有hp 则菌落周围会出现 色环带 脲酶 红 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是 灭菌 a 高压蒸汽b 紫外灯照射c 70 酒精浸泡d 过滤 解析由于尿素加热会分解 对尿素溶液进行灭菌最好用g6玻璃砂漏斗过滤 解析 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3 步骤x表示 在无菌条件下操作时 先将菌液稀释 然后将菌液 到培养基平面上 菌液稀释的目的是为了获得 菌落 解析微生物培养时需将培养皿倒置并放在恒温培养箱中 若不倒置培养 则无法形成单菌落 4 在培养时 需将培养皿倒置并放在 中 若不倒置培养 将导致 接种 涂布 单 恒温培养箱 无法形成单菌落 解析微生物的分离和培养步骤 配制培养基 灭菌 倒平板 接种 培养 为获得单菌落 接种操作前应先将菌液稀释 然后将菌液涂布到培养基平面上即可 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 5 临床上用14c呼气试验检测人体是否感染hp 其基本原理是hp能将14c标记的 分解为nh3和14co2 解析幽门螺杆菌能将14c标记的尿素分解为nh3和14co2 故临床上常用14c呼气试验检测人体内幽门螺杆菌的存在 尿素 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 6 从土壤中分离以尿素为氮源的细菌 实验过程如图所示 请回答 1 图中物质a为 若要统计每克土壤样品中以尿素为氮源的细菌的活菌数目 宜采用 法接种到尿素培养基上 对照组配制的培养基为 培养基 若用同浓度的土壤稀释液接种 实验组培养皿中菌落数 大于 等于或小于 对照组 在能利用尿素的细菌菌落周围 有红色环带出现的原因是 无菌水 涂布分离 lb全营养 小于 因为能利用尿素的细菌产生的脲酶 将培养基中的尿素分解 产生的氨使指示剂呈红色 答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 下列培养基中 能分离出分解尿素的细菌的是 a 葡萄糖 nacl k2hpo4 酚红 琼脂糖 水b 葡萄糖 nacl k2hpo4 酚红 琼脂糖 水 尿素c nacl 琼脂糖 水 蛋白胨 酵母提取物 尿素d 葡萄糖 nacl k2hpo4 酚红 琼脂糖 水 蛋白胨 酵母提取物 3 欲将分离得到的以尿素为氮源的细菌进行扩大培养 应使用 培养基 lb液体 答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 7 原创 有些细菌可分解原油 从而消除由原油泄漏造成的土壤污染 某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株 请回答问题 1 在筛选过程中 应将土壤样品稀释液接种于以 为唯一碳源的培养基上 从功能上讲 该培养基属于 a 固体b 液体c 纯化d 选择 培养基 原油 d 解析可以将所需要的微生物从混杂的微生物群中分离出来的培养基为选择培养基 欲筛选出能降解原油的菌株 培养基中应只含有原油而无其他碳源 这样不能降解原油的细菌在此培养基上不能生存 可筛选出能分解原油的菌种 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 纯化菌种时 为了得到单菌落 常采用的接种方法有两种 即 划线分离法和涂布分离法 解析分离纯化菌种时 接种的方法有划线分离法和涂布分离法 其目的都是使聚集在一起的微生物分散成单个细胞 从而能在培养基表面形成单菌落 以便于纯化菌种 3 为了筛选出高效菌株 可比较单菌落周围透明圈的大小 透明圈大说明该菌株的降解能力 强 解析降解原油能力越强的菌株 在菌落周围形成的透明圈越大 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 4 通常情况下 在微生物培养过程中 实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 和高压蒸汽灭菌 无菌技术要求实验操作应在酒精灯 附近进行 以避免周围环境中微生物的污染 干热灭菌 火焰 解析实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌 如接种环 干热灭菌 如培养皿 和高压蒸汽灭菌 如培养基 等 无菌技术要求整个实验操作都要在酒精灯火焰附近进行 以避免周围微生物的污染 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 8 2016 金丽衢十校联考 下表是3组生物实验培养基 请回答下列问题 1 分离以尿素为氮源的细菌应选用培养基 在含有脲酶的细菌菌落周围会出现 这是由于尿素被分解产生的 使ph升高 酚红指示剂产生颜色变化 从而证明这一菌株可以尿素为氮源 变色区域越大 表明该菌株利用尿素的能力 b 红色环带 氨 越强 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 解析分离以尿素为氮源的细菌应选用以尿素为唯一氮源并添加酚红指示剂的培养基 分解尿素的微生物可产生脲酶 脲酶可催化尿素分解产生氨 氨使酚红指示剂变红 从而在菌落周围形成红色环带 形成的红色环带越大 表明该菌株利用尿素的能力越强 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 用培养基a进行植物组织培养 则培养基中还需加入 一般先用 填 发芽 或 生根 培养基进行培养 使之长出较多的丛状苗 然后将丛状苗分株培养 植物激素 植物生长调节剂 发芽 解析植物组织培养所需的ms培养基需加入植物激素 培养过程中一般先用发芽培养基进行培养 使之长出较多的丛状苗 然后将丛状苗分株培养 诱导生根 解析答案 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 3 生产上利用黑曲霉或苹果青霉来提取果胶酶 在用果胶酶水解果胶的实验中 下列说法正确的是 a 实验后滴加酒精的目的是增加果胶酶的活性b 沸水浴加热后果胶酶的活性随着温度的下降逐渐恢复c 间歇搅拌20 30min的目的是让果胶酶与果胶充分接触d 选用黑曲霉提取液是因为果胶酶只能在生物细胞内起催化作用 解析 解析在用果胶酶水解果胶的实验中 实验操作后滴加酒精的目的是检验实验过程中果胶是否被水解 沸水浴加热后果胶酶会失去活性 只要条件适宜 果胶酶在细胞内外均可发挥催化作用 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 9 2015 宁波鄞州中学练习 有机农药苯磺隆是一种除草剂 长期使用会污染环境 研究发现 苯磺隆能被土壤中某些微生物降解 分离能降解苯磺隆菌株的实验过程如下图所示 请回答问题 解析 1 微生物生长繁殖所需的主要营养物质有碳源 水 四类 该实验所用的选择培养基只能以苯磺隆作为唯一碳源 其原因是 氮源 无机盐 只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 解析微生物生长所需要的主要营养物质包括碳源 氮源 水和无机盐 使用选择培养基是因为选择培养基上只有能利用苯磺隆的微生物能正常生长和繁殖 同时又能抑制或阻止其他微生物的生长 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 2 纯化菌株时 通常使用的划线工具是 在第二次及以后划线时 总是从上一次的末端开始划线 这样

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